Витамины спектрофотометрическое

В инструкции по методам контроля в синтезе витамина А Пражского института биохимии и фармации описаны спектрофотометрический и полярографический [c.39]

Спектрофотометрический метод основан на свойстве витамина А поглощать часть света в ультрафиолетовой части спектра на длине волны 325—328 т х находится максимум этого поглощения (рис. 14). Сопоставляя величину экстинкции для испытуемого раствора с величиной экстинкции стандартного раствора (или пользуясь для этого заранее составленной абсорбционной кривой), рассчитывают обычным путем содержание витамина А в испытуемом растворе. [c.48]

Д р аже и таблетки с витамином А. К 1—2 г драже или таблеток добавляют около 1 г сульфата натрия, растирают, для спектрофотометрического определения витамин А экстрагируют этиловым спиртом, а для колориметрирования — хлороформом. [c.53]

Спектрофотометрический метод определения витамина Л. Витамин А определяют также физическим методом, основанным на свойстве витамина А поглощать лучи света в области спектра 328 нм. Определение в этом случае производят спектрофотометром. Для определения пользуются тщательно очищенными реактивами и свежеприготовленными препаратами. [c.121]

Количественный анализ основного вещества в препарате проводят спектрофотометрическим методом. Спектры поглощения снимают в диапазоне 240— 250 нм с максимумом поглощения при 246 нм. Химическая чистота витамина Bi должна быть не ниже 95%. [c.94]

До последнего времени для анализа витамина А и его масляных растворов применялся прямой спектрофотометрический метод. Однако для концентратов молекулярной дистилляции, рыбьих жиров и желатиновых гранул с витамином А этот метод применять нельзя, так как указанные препараты содержат примеси, искажающие спектральную характеристику витамина А. Поэтому для анализа их используется косвенный колориметрический метод, основанный на реакции витамина А с хлоридом сурьмы после омыления препарата [25, 26]. Этот метод высокочувствителен, но длителен возникающее окрашивание неустойчиво применяемые реактивы требуют тщательной очистки, а процесс омыления приводит в ряде случаев к потерям витамина. Метод, предложенный в Пражском институте биохимии и фармации для анализа желатиновых гранул, требует доработки, так как вызывает затруднения в связи с неустойчивостью образующихся в процессе анализа эмульсий витамина А. [c.180]

Спектрофотометрический анализ используется на всех стадиях деструктивного анализа. Выделенные продукты могут быть дифференцированы по их специфическому поглощению в ультрафиолетовой и видимой областях спектра. Наряду с определением температуры плавления, удельного вращения и измерением инфракрасного спектра исследование спектра поглощения в ультрафиолетовой области представляет собой необходимую часть изучения физических констант соединения. В некоторых случаях (например, каротиноиды и витамины А, К, D) интенсивность максимумов поглощения является наиболее надежным критерием [c.114]

Спектрофотометрические методы были использованы при изучении кинетики различных реакций природных соединений, например, при изучении аутоокисления жирных кислот [36] и щелочной изомеризации арахидоновой кислоты [52]. При поста-дийном спектрофотометрическом исследовании возможно контролировать фотохимические превращения и определять образование нестойких промежуточных продуктов (например, при превращении эргостерина в витамин Dg [78]). [c.148]

В качестве объекта сравнения были изучены 28 видов рыбьего жира, имевших как высокую, так и низкую витаминную активность. Наиболее близкие к биологическому испытанию результаты дает метод, основанный на измерении окраски неомыляемой части. Факторы пересчета при спектрофотометрическом определении равны 2000 и 1925. [c.218]

Поскольку ряд витаминов обладает способностью поглощать лучи света определенной длины волны, то удобным методом определения витаминов является спектрофотометрический. Например, витамин А интенсивно поглощает свет в области 328—330 нм, что используется как для качественного, так и для количественного его определения. [c.170]

При выполнении спектрофотометрического анализа витамина А следует принимать во внимание, что растворы ретинола исключительно чувствительны по отношению к свету. [c.209]

Идентификацию компонентов смеси проводят по величинам Rf. Количеств, определение в-в в зонах мож.но.осуществлять непосредственно на слое сорбента по площади хроматографич. зоны, интенсивности флуоресценции компонента или его соед. с подходящим реагентом, радиохим. методами. Использ. также автоматич. сканирующие приборы, измеряющие поглощение, пропускание, отражение света или радиоактивность хроматографич. зон. Разделенные зоны можно снять с пластин вместе со слоем, десорбировать компонент в р-ритель и анализировать р-р спектрофотометрически. С помощью ТСХ можно определить в-ва в кол-вах от Ю до 10 г ошибка определения не менее 5—10% число определяемых компонентов не более 20—30. ТСХ широко использ. для разделения и анализа как неорг.,,так и орг. в-в, в т. ч. синтетических полимеров, лек. ср-в, пестицидов, аминокислот, липидов, ПАВ, витаминов, стероидов. [c.584]

Спектрофотометрический метод определения содержания витамина Ai (ретинола) в рыбьем жире (по Госу-71,арстБенной Фармакопее СССР, изд. 10-е, 1968). Реактивы и материалы а) рыбий ж.ир тресковый (медицинский)-, б) едкое кали, 50% ный водный раствор [c.73]

При взаимодействии витаминов с рядом химических соединений наблюдаются характерные цветные реакции, интенсивность окраски которых пропорциональна концентрации витаминов в исследуемом растворе. Поэтому витамины можно определить фотоколориметрически, например витамин B - при помоши диазореактива и т.д. Эти методы позволяют судить как о наличии витаминов, так и о количественном содержании их в исследуемом пищевом продукте или органах и тканях животных и человека. Для выяснения обеспеченности организма человека каким-либо витамином часто определяют соответствующий витамин или продукт его обмена в сыворотке крови, моче или биопсийном материале. Однако эти методы могут быть применены не во всех случаях. Встречаются трудности при подборе специфического реактива для взаимодействия с определенным витамином. Некоторые витамины обладают способностью поглощать оптическое излучение только определенной части спектра. В частности, витамин А имеет специфичную полосу поглощения при 328-330 нм. Измеряя коэффициент поглощения спектрофотометрически, можно достаточно точно определить количественное содержание витаминов в исследуемом объекте. Для определения витаминов B , В, и других применяют флюорометрические методы. Используют и титриметрические методы [c.207]

Двукратная противоточная экстракция не дала положительных результатов. Очистка с помощью бумажной хроматографии проводилась по методу Смита [10]. В результате двукратного разделения было установлено наличие фракции (но-видимому, витамин Bjj) с постоянной удельной активностью, концентрация которой определялась спектрофотометрически. Доля Со во фракции витамина по отношению к общей активности составила в первом опыте 0,7%, во втором 1,9%. Полученная хроматограмма указывала на наличие сложной смеси продуктов, близких по свойствам к витамину В , что, по мнению авторов, является причиной неудовлетворительной очистки при противоточной экстракции и объясняет раэницу в результатах, полученных в работах [6] и [7]. Кроме того, было найдено, что нагревание облученных образцов (до 100 С в течение 60 ч в вакууме) не влияет на выход Со во фракции Bj2- Зависимость биоактивности от дозы облучения и от нагревания образца авторы не исследовали. [c.194]

Витамины В и превитамины В на сухих слоях силикагеля нестабильны. При выдерживании нанесенного на активный слой соединения перед хроматографированием в течение одной минуты на пластинке уже можно определить небольшие количества сильнее адсорбирующихся продуктов разложения. При разделении никаких изменений не происходит. Поэтому для надежности идентификации и определения важно, чтобы сразу же после нанесения пробы витамина пластинка была помещена в разделительную камеру и хроматографирована, а зоны витамина В или превитамина В непосредственно после локализации соскоблены с пластинки и элюированы хлороформом. Таким образом были количественно проанализированы 24 пробы витаминов (колориметрическое или спектрофотометрическое определение). [c.227]

Многие из лабораторных работ можно комбинировать для того, чтобы из одного образца последовательно определить несколько компонентов. Навеску стали, например, можно исследовать спектрографически и проанализировать на углерод по методу выделения углекислого газа, на хром и марганец—спектрофотометрически, на железо—посредством потенциометрического титрования и на серу—турбидиметрически. Продажные хлебные продукты могут служить в качестве анализируемых объектов для определения воды, жира, углеводов и некоторых витаминов. [c.430]

Применение количественного спектрофотометрического анализа в ультрафиолетовой области спектра. Разработан ряд методов определения нескольких компонентов три их оовмест- ом пр сутствии. Исследубмое вещество растворяют в растворителе, оторый сам не поглощает ультрафиолетовых лучей. Наиболее подходящим растворителем для солей является вода, для органических соединений — гексан. Хорошо разработаны методы анализа ароматических углеводородов. Методы также применимы для количественного анализа витаминов (определение витамина А) и других соединевий. [c.481]

Определению витамина А перечисленными методами, как правило, предшествует подготовительная стадия, включающая щелочной гидролиз жироподобных веществ (см. сказанное выше об определении Р-каротина) и экстракцию неомыляе-мого остатка органическим растворителем. Многие пищевые продукты содержат вещества, которые, подобно каротиноидам, совместно с витамином А переходят в неомыляемую фракцию и мешают спектрофотометрическому, флюорометрическому и колориметрическому определению. В таких случаях проводят хроматографическое отделение витамина А от сопутствующих соединений, используя окись алюминия (активированная, влажность 4%), окись магния, кизельгель и др. При наличии большого количества мешающих анализу веществ иногда бывает необходима повторная хроматографическая очистка на колонках с подбором адсорбентов, обладающих различными поглощающими свойствами [И]. [c.203]

Спектрофотометрические методы были успешно применены для изучения сольватации ионов в спирто-водных растворах [262], определения констант диссоциации органических соединений [263, 264, 277—279], изучения реакции взаимодействия гетероорганических соединений с ионами магния, стронция, бария, кальция, цинка [265—267], фотохимических превращений тионовой кислоты [276] и эргостерипа в витамин В2 [274, 275], а также для исследования реакций изомеризации, например, аниотропных перегруппировок спиртов [273] [c.68]

Спектроскопический метод был успешно применен для анализа смеси амино- и окси-производных сижл-триазина [268], определения триметилкарбинола в изобутилене [269], для анализа смесей фармацевтических препаратов и полупродуктов их синтеза [270]. Спектрофотометрический метод успешно также применялся для изучения а-и Ь-форм хлорофилла [280], для определения тирозина и триптофана в белках [281], для анализа смесей углеводородов, содержащих до шести компопентов [282[, определения стирола и полистирола в смеси [283], анализа смесей линолеповой, линолевой и элестеариновой кислот [284], для определения витамина А в сливочном масле [285] и других целей. [c.73]

Липиды, органические соединения биологд1ческого происхождения, нерастворимы в воде, но растворимы в ряде органических растворителей (хлороформ, бензол, эфир). В состав липидов кроме природных карбоновых кислот и их производных Сглицериды, воска, фосфо— и гликолипиды), высших углеводородов, спиртов и альдегидов входят также жирорастворимые витамины А, Б, Е и К и их производные, каро— тиноиды, стеролы и их сложные эфиры стериды. Поэтому и состав образующихся пероксидных соединений липидов весьма неоднороден. Определение пероксидных соединений, образующихся при свободно-радикальном окислении липидов мембран и других тканей, производят чаще всего по реакции с иодид-ионом в инерт-. ной среде. Количество выделяющегося иода определяют титрованием тиосульфатом с амперометрической регистрацией точки эквивалентности [55] или визуально с использованием крахмала как индикатора [87], или спектрофотометрически, определяя поглощение при 380 нм [88]. [c.57]

Людвиг и Фреймут [II] определяли содержание витаминов А, В и Е в лекарственных препаратах, проводя омыление жировых сред этих составов и затем разделяя экстрагированный продукт на солях силикагеля. Количественное определение они вели спектрофотометрически. Колева и др. [12] определяли витамины А, Е и Вг в лекарственных составах, хроматографируя их на силикагеле ВО смесью циклогексан—диэтиловый эфир (4 1) в камере с насыщенной атмосферой. После обнаружения витаминов В и А 22 %-ным раствором трихлорида сурьмы в хлороформе, а а-токоферола реактивом на основе сульфата церия они проводили прямую денситометрию пятен. Бачик и др. [13] разделяли витамины А, Вз и Е многократным элюированием хлороформом на силикагеле. [c.404]

Какач и др. [25] разделяли витамины А, О и Е также на незакрепленных слоях оксида алюминия, элюируя их толуолом, хлороформом или ксилолом. Для количественных определений они проводили спектрофотометрический анализ элюата в видимой или УФ-области. [c.407]

Определение каротина в растительных itKaHHX слагается из тадии выделения путем экстрагирования, фазового распределения или хроматографической абсорбции и затем из колориметрического или спектрофотометрического измерения в элюате или фильтрате Весьма важно не допустить изомеризации на стадии выделения или экстрагирования, В последнее время наблюдает-ея стремление избежать применения методов, основанных на фазовом разделении, так как они не всегда дают количественный выход витамина и не специфичны для биологически активных каротинов. Удаление хлорофилла из растительного материала достигается с помощью самых разнообразных адсорбентов, вклю--чая гидрат окиси бария, карбонат кальция, кальцинированную соду, гашеную известь, дикальцийфосфат и обезжиренную костяную муку. [c.165]

Изучение изменений, наблюдаемых для спектрофотометриче-екой кривой, в результате окисления содержащих витамин А жиров показало, что отношение 280/328 возрастает в значительно большей степени, чем отношение 300/323, и поэтому может считаться более чувствительным показателем окисления [117]. (Минимум поглощения для чистого витамина в этой области лежит при 260 тер.) Однако и посторонняя абсорбция для товарных рыбьих жиров также приходится на длины волн меньше 300 т . Одним из наиболее важных достижений за последнее время в спектрофотомет-рическом методе определения витамина А можно считать возможность математического вычисления поправки на отклонение формы кривой поглощения от истинного очертания, свойственного чистому витамину А[194—196]. Эти поправки вычисляются на основании измерений поглощения света длин волн, лежащих по обе стороны от максимума поглощения для витамина А в поправках отражаются как искажение формы кривой, так и перемещение максимума, зависящие от присутствия посторонних поглощающих свет примесей. Такой принцип внесения поправок может найти общее применение в спектрофотометрическом анализе, если только считать правильным его основное положение, что абсорбция посторонних веществ изменяется линейно и не имеет минимумов по обеим сторонам пика. Чтобы облегчить пользование этими поправками при определении витамина А, составлены соответствующие номограммы [212]. [c.166]

Спектрофотометрическим путем удалось изучить кинетику реакции витамина А с треххлористой сурьмой, причем для измерений была применена специальная проточная кювета. Были изучены как спирты, так и сложные эфиры, отвечающие витамину А, и другие каротиноидные пигменты [43, 104], причем было обнаружено, что окраска различных соединений с течением времени может усйли-ваться, ослабляться или оставаться неизмененной эти факты, а также изменение скорости реакции при освещении, могут послужить основой метода раздельного определения этих соединений при их совместном присутствии. На этом принципе основано определение витамина А в смешанных кормах [33]. Была сконструирована специальная оправа, дающая возможность поместить в спек- трофотометр Бекмана кювету, в которой происходит реакция Кар- [c.166]

Выше было уже указано, что небиологические методы определения витамина А в пищевых продуктах становятся более сложными,, если в образце присутствует одновременно и витамин А и каротиноиды. При сиектрофотометрическом определении витамина А в яичном порошке вносится соответствующая поправка на присутствие каротиноидных пигментов [254]. Эта поправка, учитывающая также изомеризацию на стадиях нагревания и экстрагирования, равна разности между 15% оптической плотности при 326 т 1 и оптической плотностью при 450 Trejj.. Спектрофотометрическое определение каротиноидов в яичном порошке обычно комбинируется с флуорометрическим определением растворимых в эфире аминоальдегидных пигментов коричневого цвета, присутствие которых вызывает ухудшение вкусовых качеств [29, 86]. Изучение спектрофотометрических и колориметрических методов определения витамина А и каротиноидов в животном масле 110, 303, 304] показало, что точная поправка на влияние каротиноидов для максимума, соответствующего витамину А, вычислена быть не может. Поправка на голубое окрашивание каротинов носит условный характер и до некоторой степени ошибочна, так как не учитывает изомеризации и разницы между их биологической активностью и активностью каротиноидов. Некоторую практическую пользу эта поправка все-таки приносит. Реакция Карра— Прайса была применена для определения витамина А и каротинов [c.167]

Чтобы измерить величину поправки на посторойнее поглощение или вообще избежать необходимости в поправках для спектрофотометрических определений, были введены добавочные стадии адсорбции и элюирования [31, 169, 201, 214, 239, 291] или удаления витамина А фотолитическим разложением. [c.168]

Простой метод, основанный на экстрагировании и перекристаллизации, предложен для выделения ликопина — главного пигмента томатов. Ликопин применяется в качестве эталона при спектрофотометрическом определении цвета различных продуктов, получаемых из томатов [332]. Разработаны условия хроматографического разделения стереоизомеров р-каротина на колонне, наполненной гидратом окиси кальция [312]. Отдельные фракции элюата анализируют колориметрически. С помощью этого метода при анализе люцерны было найдено, что около половины р-каротинов состоит из нео-р-каротинов В и 0. Эти последние имеют настолько низкую активность в качестве витаминов А но сравнению с алло-пграис-р-каротином, что, хотя и делается поправка на их присутствие, все же найденные величины активности могут оказаться выше истинных на 30% [313]. [c.169]

Для определения витамина Dg в продуктах облучения эргостерина [390] был применен метод абсорбции в инфракрасном свете метод не отличается чувствительностью. Приведены кривые абсорбции ультрафиолетового света для чистого рутина и кверцетина [436] для спектрофотометрического определения пользуются величиной при 347, 362,5 и 375 m[i. Кверцетин определен количественно. Предложено колориметрическое определение рутина, основанное на образовании окрашенного в желтый цвет комплекса хлористый алюминий — рутин (максимум 413 ту) [394]. [c.219]

Незаменимые вещества пищи, объединяемые под общим названием витамины , относятся к различным классам химических соединений, что само по себе исключает возможность использования единого метода их количественного определения. Все известные для витаминов аналитические методы основаны либо на определении специфических биологических свойств этих веществ (биологические, микробиологические, ферментативные методы), либо на использовании их физикохимических характеристик (флюорометрические, хроматографические и спектрофотометрические методы), либо на способности некоторых витаминов вступать в реакцию с некоторыми реагентами с образованием окрашенных соединений (колориметрические методы). [c.289]

Количественный спектрофотометрический анализ. Ряд важных биологических соединений можно полуколичественно изучать с помощью спектрофотометрии в видимой и ультрафиолетовой областях, например, измеряя поглощение белков при 280 нм, а нуклеиновых кислот при 260 нм — длинах волн, соответствующих максимуму поглощения этих соединений. Экстинкция белка при 280 нм зависит от содержания в нем ароматических аминокислот — тирозина и триптофана, поэтому значения молярной экстинкции при 280 нм для всех белков различны, и для определения содержания каждого из них требуется индивидуальная калибровочная кривая. Как правило, биохимики работают со смесью белков, и тогда можно пользоваться градуировочной кривой, полученной для белка или смеси белков со средним содержанием тирозина и триптофана. Это может быть, например, сывороточный альбумин или смесь сывороточных белков. Таким образом, для контрольных измерений надо выбирать соответствующий белок. Проводя измерения при длинах волн, где примесь поглощает больше исследуемого вещества, можно с помощью соответствующих формул оценить количество примеси в образце. Так, пользуясь методом Мортона и Стубса, определяют содержание витамина А в омыленных экстрактах природных масел, а по соотношению экстинкций при 260 и 280 нм (Еш/хо) находят содержание белка в препарате нуклеиновых кислот. [c.155]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология