Размывание хроматограммы

Если длина слоя, занимаемого пробой в начальный момент, ма ла и равна о= Упр/(5Го), то размывание в колонке определяется уравнением (1.10). На выходе вещества из колонки вследствие его десорбции зона расширяется в Го раз, а максимальная концентрация уменьшается в это же число раз. Таким образом, после вымывания распределение концентрации вещества не отличается от его распределения в слое по форме и отличается только масштабом. Поэтому распределение вещества на выходе из колонки, а следовательно, и получаемая при этом хроматограмма описываются уравнением (1.10). [c.31]

Одна из главных задач теории неравновесной хроматографии — изучить размывание хроматографических полос. Это явление может быть обусловлено различными факторами процессами, протекающими в колонке, медленностью сорбции и десорбции при наличии потока газа-носителя и др, Предполагается, что в линейной области изотермы сорбции эти факторы действуют независимо друг от друга. В совокупности же они приводят к расширению хроматографических полос и перекрыванию пиков разделяемых веществ на хроматограмме. [c.46]

Ширина пика AV на выходной кривой характеризует размывание хроматографической полосы. Измерение ее позволяет вычислить число теоретических тарелок N и их высоту Н, количественно определяющих процесс размывания. У равнение (111.12) после некоторых преобразований дает возможность количественно связать А У с. N wH, причем AV можно измерить на любой высоте выходной кривой (пика на хроматограмме). Согласно рис. 24 (р — Л/) соответствует полуширине пика (величина безразмерная) ее можно вычислить на любой высоте пика, логарифмируя (III. 12) [c.50]

Ширина пика на выходной кривой характеризует размывание хроматографической полосы. Измерение ширины пика позволяет вычислить число теоретических тарелок Л/ и их высоту Н— величины, количественно определяющие процесс размывания. Уравнение (IV. 12) после некоторых преобразований дзет возможность количественно связать ДУ с N к Н, причем ДУ можно измерить на любой высоте выходной кривой (пика на хроматограмме). Согласно рис. IV.2 (р—Л ) соответствует полуширине пика (величина безразмерна) ее можно вычислить на любой высоте пика. [c.92]

Критерии размывания хроматографической полосы определяются по хроматограмме одного из компонентов разделяемой смеси по формулам, приведенным ранее в гл. IV. [c.130]

Разделение компонентов при хроматографическом проявлении определяется различием скоростей движения полос и лимитируется их размыванием (расширением). Скорость движения полосы легко определяется для случая линейной изотермы, который, как мы увидим, наиболее вая ен для хроматограмм. [c.309]

Теория хроматографии должна также объяснять такие явления, как расширение и несимметричность пиков на хроматограммах. На несимметричных пиках наблюдается размывание края зоны (образование хвоста , ср. с пиком вещества на рис. 7.7). Это явление можно объяснить, исходя из изотерм адсорбции. При нелинейном ходе изотермы адсорбции процесс элюирования наименее полно проходит для веществ, содержащихся в небольших концентрациях в твердой фазе. Для получения симметричных пиков необходимо работать при невысоких концентрациях веществ в линейной области изотермы адсорбции. Кроме того, необходимо ограничить отставание отдельных молекул. Такое статистически не обусловленное отставание молекул можно объяснить следующими причинами [c.346]

Ионообменная хроматограмма образуется при условии различий в сорбируемости ионов. Эти различия количественно определяются различиями в константах ионного обмена. Собственно говоря, это и позволяет использовать фронтальную ионообменную хроматографию для определения констант ионного обмена. Авторы данного метода поставили перед собой задачу рассмотреть случай образования фронтальной хроматограммы трех ионов, пренебрегая факторами размывания границ хроматографических зон. [c.131]

При введении пробы необходимо обеспечить идентичность ее состава с анализируемой смесью. При кинетических исследованиях, где приходится проводить многократный анализ близких по со ставу смесей, особенно важна воспроизводимость величины пробы. Объем или масса вводимой пробы должны изменяться в пределах 1—3%. Для уменьшения размывания пиков на хроматограмме из-за перегрузки колонки необходимо работать с минимально возможными пробами и обеспечивать их наименьшее время ввода. Вводимая проба не должна также нарушать установленный режим хроматографа. [c.297]

Чем длиннее путь луча в световоде, тем выше чувствительность прибора с другой стороны, для предотвращения размывания хроматографической полосы желательно, чтобы мертвый объем световода был минимальным и не превышал объема газа-носителя, отвечающего полуширине самого узкого пика на хроматограмме, Vo,Б i68]. Если объем кюветы-световода оказывается большим, необходимо продувать через нее вспомогательный инертный газ, что приводит к повышению предела обнаружения ИК-детектора. Напротив, если объем световода оказывается меньше Уо,в. в кювету поступает только доля хроматографической зоны и предел обнаружения также повышается. Поэтому экспериментально подбирают такие условия работы хроматографической колонки (включая и режим программирования температуры), чтобы Уо,Б каждого пика были равны или слегка превышали объем кюветы-световода, колеблющийся в пределах от 50 до 300 мкл. [c.209]

В условиях, обеспечивающих линейную изотерму сорбции (распределения) размывание хроматографической зоны вещества в колонке подчиняется нормальному (гауссову) распределению независимых величин. При этом на хроматограмме регистрируются симметричные (относительно точки с максимальной концентрацией) пики колоколообразной формы (типа представленных на рис. П1.16), называемые часто гауссовыми. [c.213]

Эффективность разделения определяется размыванием пика за время анализа. Чтобы исследовать изменение эффективности разделения веществ, зафиксированных на одной хроматограмме, прежде всего следует определить, какая существует связь между шириной ников веществ одного класса — хотя бы углеводородов — и приведенным временем удерживания t,.. Как можно заключить из рис. 11, в первом приближении имеет место линейная зависимость а от приведенного времени удерживания [c.45]

Число максимально разделяемых компонентов в пределах одной хроматограммы определяется функцией (78), продолжительностью анализа и величиной размывания последнего хроматографического пика. [c.70]

Эффективность разделения определяется относит, размыванием хроматографич. зон в колонке. Ее характеризуют числом теор. тарелок N и высотой Я, эквивалентной теор. тарелке (ВЭТТ) N = 16(основания пика па хроматограмме, Е — длина хроматографич. колонки. Степень разделения компонептов 1 и 2 ( 1 < (2) характеризуется критерием разделения 2,1 = 2 , [c.668]

Однако наряду с размыванием полосы хроматографической зоны в процессе разделения в колонке может происходить также и размывание ее в устройстве для ввода пробы, в соединительных капиллярах инжектор — колонка и колонка — детектор, в ячейке детектора и в некоторых вспомогательных устройствах (микрофильтры для улавливания механических частиц из пробы, устанавливаемые после инжектора, пред-колонки, реакторы-змеевики и др.). Размывание при этом тем больше, чем больше внеколоночный объем по сравнению с удерживаемым объемом пика. Имеет также значение и то, в каком месте находится мертвый объем чем уже хроматографическая зона, тем большее размывание даст мертвый объем. Поэтому особое внимание следует уделять конструированию той части хроматографа, где хроматографическая зона наиболее узкая (инжектор и устройства от инжектора до колонки) — здесь внеколоночное размывание наиболее опасно и сказывается наиболее сильно. Хотя считается, что в хорошо сконструированных хроматографах источники дополнительного внеколоночного размывания должны быть сведены до минимума, тем не менее каждый новый прибор, каждая переделка хроматографа должны обязательно заканчиваться тестированием на колонке и сравнением полученной хроматограммы с паспортной. Если наблюдается искажение пика, резкое снижение эффективности, следует тщательно проинспектировать вновь введенные в систему капилляры и другие устройства. [c.12]

В процессе эксклюзионного разделения полимера за счет фракционирования молекул по размеру образуется зона определенной ширины. Размывание вещества в колонке и в других элементах жидкостного тракта хроматографа (внеколоночное размывание) приводит к дополнительному расширению этой зоны. Зарегистрированная хроматограмма полимера представляет собой кривую, в которой суммированы указанные эффекты. Общую дисперсию хроматограммы можно представить выражением [c.52]

Размывание во времени обусловлено малой скоростью переноса зоны из камеры испарения в колонку. Этот процесс занимает несколько десятых секунды. Попадая в колонку, анализируемые вещества распространяются по части длины колонки. В результате происходит размывание зоны в пространстве. Коренное различие размывания во времени и пространстве состоит в том, что в первом случае анализируемые вещества равномерно распределяются в соответствии с временами удерживания, а во втором случае они равномерно распределяются по длине колонки. Если перед началом хроматографирования не проводить фокусирования пробы, то описанные выше явления приведут к появлению на хроматограмме пиков неправильной формы. [c.43]

При исиользовании обычных капиллярных колонок длиной 25-30 м и внутренним диаметром 0,32 мм и объеме пробы 1 мкл размывание зоны визуально не наблюдается, поскольку форма пика в таких условиях не ухудшается. Только тщательный анализ хроматограммы позволит выявить размывание зоны. В работе К. Гроба-младшего [24] приведен типичный пример размывания зоны в пространстве. К. Гроб анализировал метиловые эфиры Жирных кислот Се — С1з (в виде растворов в различных растворителях). Псиользовали ввод пробы без деления потока. Для сравнения проводили ввод пробы с делением потока. Па рис. 3-21,а приведена хроматограмма, полученная при вводе пробы с делением, потока — при этом размывания зон не происходит. Хроматограмма на рис. 3-21,6 (раствор анализируемой смеси в н-гексане) получена при вводе пробы без деления потока и температуре 25°С. Растворитель конденсируется в начале колонки, а анализируемые вещества распределяются на смоченной растворителем зоне. Размывание ников составляет примерно 30%, за исключением эфира С , который полностью концентрируется в том месте, где происходит исиарение последней порции растворителя (эффект растворителя). При 60° эффект растворителя минимален и размывания ника в пространстве не происходит (рис. 3-21, в). Размывание зон С и С обусловлено размыванием во времени и отсутствием эффекта растворителя. Как указывалось выше, размывание пробы в пространстве часто нельзя наблюдать визуально, поскольку форма Пиков не искажена. С другой стороны, если растворитель недостаточно хорошо смачивает неподвижную фазу, что имеет место нри исиользовании полярных растворителей (метанола) на неполярных фазах, форма пиков на хроматограмме искажена. Это объясняется тем, что длина зоны, смоченной растворителем, слишком велика [c.44]

При правильном проведении непосредственного ввода пробы в колонку получают наиболее точные и воспроизводимые результаты. Полностью устраняется дискриминация компонентов пробы, обусловленная использованием шприца. Как известно, дискриминация компонентов пробы за счет шприца является основным источником погрешностей при проведении количественного анализа проб, содержащих вещества с сильно различающимися молекулярными массами. Более того, поскольку проба вводится в колонку в виде жидкости, устраняется дискриминация компонентов за счет различного испарения в камере испарителя. На рис. 3-31 приведена хроматограмма смеси углеводородов С — С40 в гексапе. Пробы вводили при температуре 60 С, т. е. ниже точки кипения растворителя. За счет эффекта растворителя происходит концентрирование углеводорода, а размывание зоны углеводородов Сп — С40 пренебрежимо мало. В табл. 3-1 приведены данные. Характеризующие воспроизводимость полученных результатов для двух смесей углеводородов различной концентрации. [c.53]

S[c.276]

Предположение о симметричном (гауссообразном) размывании хроматографической зоны является принципиальной неточностью, сознательно допускаемой иа втором уровне интерпретации данных ГПХ. Коррекция хроматограмм с помощью уравнения ( .51) с ядром вида ( .57) приводит их к симметричному сужению, не изменяющему положения максимумов. На самом же деле размывание хроматограмм асимметрично из-за некоторой неравновесности ГПХ-процесса и из-за концевого эффекта на выходе из хроматографических колонок. Асимметрия может быть также вызвана перегрул енностью колонки, если опыт ставится при больших концентрациях раствора (т. е. таких, при которых наблюдается зависимость удерживаемых объемов от концентрации). [c.219]

Определяя это смещение, можно с помощью калибровочной зависихмости оценить и погрешность, допускаемую при расчете молекулярных масс без учета асимметричного размывания хроматограмм. Для этого удобно воспользоваться мерой асимметрии Пирсона 8к, показывающей степень скошенности унимодальных распределений в зависимости от их дисперсии и ]эасстояния между математическим ожиданием (первым моментом и максимумом (модой) [c.220]

Практическим следствием этого вывода явилось предложение использовать в качестве элюентов для препаративной эксклюзионной хроматографии полимеров их 0-растворители [417]. Однако (см. гл. III) в последних иногда возникают адсорбционные явления, приводящие к значительному размыванию хроматограмм [154, с. 95]. Поэтому 0-растворитель должен быть еще либо хорошим растворителем для полимерной матрицы геля, либо адсорбционно-активным. [c.211]

При рассмйтрении причин размывания хроматографических зон на адсорбентах следует иметь в виду, что изотерма адсорбции часто бывает нелинейна, что приводит к асимметричному размыванию тыльной части зоны и образованию хвостов на хроматограммах. [c.55]

Адсорбция из растворов подчиняется уравнению мономолеку-лярной адсорбции Лэнгмюра. Следовательно, функциональная связь адсорбции с равновесной концентрацией адсорбата в растворе описывается криволинейной выпуклой изотермой адсорбции. В результате при повышенных концентрациях тыльная часть хроматографической зоны размыкается и на хроматограммах образуются так называемые хвосты . Поэтому только при очень разбавленных растворах можно избежать дополнительного размывания и принимать коэффициент Генри не зависящим от концентрации. [c.69]

В процессе хроматографирования в ГАХ анализируемое вещество распределяется между подвижной газообразной фазой (газ-носитель) и неподвижной твердой фазой (адсорбентом). Между количествами анализируемого вещества, находящимися в газе-иоси-теле и адсорбенте, устанавливается равновесие. Значение этого равновесия определяется изотермой адсорбции. Изотерма адсорбции часто бывает нелинейна, что приводит к асимметричному размыванию зоны компонента на адсорбенте и образованию несимметричных пиков на хроматограмме. Размывание хроматографических полос в газо-адсорбционной хроматографии происходит также и за счет замедленной внешнедиффузионной массопередачи. [c.163]

Большое значение имеет зернение носителя. Чем меньше величина зерна носителя, тем полнее происходит его взаимодействие с компонентами хроматографируемого раствора, тем меньше размывание зон в хроматограмме. Поэтому при хроматографических опытах желательно работать с возможно более высокодисперсными веществами. Ограничение с этой стороны заключается в медленности лротекания раствора через высокодисперсный носитель. Экспериментально установлено, что лучшие результаты по разделению неорганических ионов получаются на носителях с величиной зерна 0,1—0,02 мм. [c.259]

Термодинамическое размывание связано с нелинейностью изотермы сорбции, т. е. и отклонением от закона Генри. Из уравнения (7.8) видно, что скорость перемещения газа вдоль колонки зависит от формы изотермы распределения. Если изотерма линейна, то d jd постоянна и пики на хроматограмме симметричны (рис. 7.10а). При отклонении от закона Генри величина de ide изменяется с изменением с. Если изотерма обращена выпуклостью к оси ординат (рис. 7.106), d jd уменьшается при увеличении с, В этом случае большие концентрации [c.357]

О составе смеси судят по хроматограммам, используя высоты или площади пиков. Ширина пика с характеризует размывание полосы. Это размывание определяется разными причинами. К ним относится продольная диффузия. Эта диффузия для движущейся полосы такая же, как и для покоящейся. Одпако наличие сорбции уменьщает коэффициент диффузии в Г раз, так как емкость единицы объема возрастает соответственно. Согласно уравнепию (XI.18), распределение концентрации в полосе с учетом уменьптения О описывается уравнением [c.404]

Хроматограмма, которую рисует перо самописца хроматографа для ГПХ, не отражает истинное МВР образца, поскольку она из-за уширения пика является более широкой, чем это есть на самом деле (рис. 25.8). Приборная ошибка, обусловленная размыванием полосы, особенно существенна при узком МВР образца полимера. Меньшую роль эта ошибка играет при Мш1Мп > 2. [c.63]

Часто величины Rf разделяемых веществ имеют слишком низкие значения в определенном растворителе, но последний отвечает в то же время всем остальным требованиям, предъявляемым к системам (например, к моменту, когда фронт растворителя подходит к самому краю бумаги, наиболее подвижное пятно успевает переместиться лишь на расстояние, равное 10% пути растворителя, т. е. Rf = 0,1). В таких случаях эффективность разделения можно повысить, используя принцип проточного хроматографирования. Для обеспечения равномерного и быстрого стока растворителя к нижнему краю бумаги для хроматографирования пришивают полоску фильтровального картона, ваты или сложенной в несколько слоев фильтровальной бумаги. Растворителю дают возможность перетекать до тех пор, пока вещества, имевшие первоначально низкие значения Rf, разделятся по всей длине хроматограммы. Проточное хроматографирование может быть проведено в течение нескольких недель без заметного размывания пятен вследствие диффузии. Вычислить непосредственно значения Rf в этом случае, естественно, невозможно, так как неизвестен путь, пройденный фронтом растворителя. Значения Rf определяют косвенно, сравнивая перемещения пятен определяемых веществ с перемещением пятна вещества с известным значением Rf, хроматографируемого в тех же условиях. Аналогичного повышения эффективности разделения можно добиться многократным высушиванием и проявлением хроматограммы тем же растворителем. [c.456]

Необработанные специальным образом носители или капиллярные колонки представляют проблему для пользователя, поскольку все еще содержат на поверхности силикагеля остаточные силанольнью группы ис. 5.2-6), что приводит к физической адсорбции полярных соединений, таких, ках спирты или ароматические углеводорода. Это затрудняет десорбцию и приводит к размыванию пиков на хроматограмме и появлению пикое с размытым задним фронтам. [c.255]

Скорость движения фронта растворителя Heno rruMHtta, Ее можно изменять, лишь меняя размер частиц материала слоя или тип используемого растворителя. Снижение скорости движения растворителя во время получения хроматограммы приводит к размыванию пятен. Позтому ограннчень длина пройденного расстолния и, следовательно, достигаемое число теоретических тарелок. [c.297]

При 100°С эффект растворителя не проявляется ни для метиленхлорида, ни для диэтилового эфира. Углеводороды С , ie и Сп (температуры кипения соответственно 270, 286 и 302°С) эффективно улавливаются в начальной части (на нескольких первых сантиметрах) колонки. Пики этих соединений имеют правильную форму. Пе удается полностью избежать размывания ника углеводорода i4 (температура кипения 254°С), однако форма пика практически не искажена. Толщина слоя неподвижной фазы также играет определенную роль нри термическом фокусировании. Па рис. 3-18 приведена хроматограмма парофазного анализа сополимера стирола, метилметакрилата и бутилакрилата. 1 мл равновесной паровой фазы вводили без деления потока в капиллярную колонку (50м х 0,25мм) с неподвижной фазой OV-101 (толщина нленки фазы 1 мкм). Продолжительность продувки составляла 60 с. Температура колонки во время ввода пробы составляла 20°С, затем по истечении 1 мин температуру колонки сразу повышали до 60°С и программировали температуру до 120°С со скоростью в град/мин. Па рис. 3-18,а показана хроматограмма равновесной паровой фазы над сополимером, в который ввели но 1 10" % метилметакрилата и стирола и 1 10 % бутилакрилата. Эти соединения прекрасно концентрируются, в то время как ники, элюируемые раньше, имеют искаженную форму за счет размывания зоны во времени. Па рис. 3-18, показана хроматограмма смеси без добавки. [c.44]

Более того, проба распределяется вдоль зоны, смоченной растворителем, отнюдь не однородно. Наибольшая концентрация определяемых веществ имеет место в начале и конце зоны, смоченной растворителем [49]. Если длина смоченной зоны невелика (например, при вводе 1 мкл пробы и хорошей смачиваемости неподвижной фазы растворителем), то в ходе хроматографирования происходит реконцентрирование определяемых веществ. Однако размывание зоны при этом составит 5-8% [48]. Если длина смоченной зоны велика, что наблюдается при большом объеме проб и плохой смачиваемости, то реконцентрирование становится невозможным и на хроматограмме появляются искаженные или расщепленные пики. Фокусирование или концентрирование может быть достигнуто в зоне пустого капилляра. Так, зоны растворенных веществ на рис. 3-30 сужены за счет фокусирования неподвижной фазой. [c.53]

На рис. 3-34 [51] приведена хроматограмма смеси свободных жирных кислот, от зтссусной до каприновой. Пробу автоматически вводили непосредственно в колонку. Относительное стандартное отклонение абсолютных площадей пиков меньше 1%, а относительных площадей пиков — менее 0,4% (число вводов пробы п = 20). Температура устройства ввода пробы была на 20°С выше точки кипения растворителя (дихлорметана). Размывания пиков и искажения их формы удавалось избежать, применяя вторичное охлаждение. Дополнительное охлаждение может оказаться весьма благоприятным при проведении рутинных анализов. Однако снижение температуры термостата до уровня, не превышающего температуру кипения растворителя, занимает много времени. [c.55]

Поскольку ширина гауссовой кривой определяется стаццартньш отклонением а, ширина пика w у основания треугольника равна 4а (в интервале 2а от максимума площадь треугольника составляет 96% от площади, лежащей под кривой). Следовательно, полученная по хроматограмме величина а служит количественной мерой размывания зоны. Величину а можно оценить, гфоведя касательные к тылу и фронту хроматограммы до пересечения с нулевой (базовой) линией (см. рис. 8.3). Ширину пика можно измерять на любой высоте, так как соотношение между шириной и высотой пика для гауссовой кривой известно. Так, ширина пика на половине высоты равна [c.276]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология