Тирозин спектр поглощения

Заметим, что именно аминокислоты фенилаланин, тирозин и триптофан обусловливают спектры поглощения белков в ультрафиолетовой области спектра. Обычно считают, что максимум поглощения белков соответствует 280 нм. [c.30]

СМ ) колебательная структура спектра фенилаланина четко проявляется в спектрах многих белков (см., например, рис. 13-14). Аналогичный вид имеет и спектр поглощения тирозина (рис. 13-7), но при этом линия, отвечающая О—0-переходу, сдвинута в сторону более низких энергий (-- 35 300 СМ в воде). Четко видны последовательности линий с интервалами 1200 и 800 СМ [23]. [c.16]

ПОЛОСЫ с достаточной степенью точности определяется формой полос поглощения указанных ароматических аминокислот с учетом содержания последних в белке. Спектры поглощения простых амидных производных фенилаланина, тирозина и триптофана в этой области представлены на рис. 13-7 и 13-9. Низкоэнергетическая полоса триптофана соответствует двум перекрывающимся переходам Ьа и [26]. Полоса, соответствующая Ьь-переходу, имеет четко выраженную колебательную структуру, тогда как полоса Ьа носит более диффузный характер. Максимум О—О-полос для обоих указанных переходов у производных трип- [c.21]

В качестве примера рассмотрим спектр КД медьсодержащего белка (рис. 13-8). КД в области d—d-полос спектра поглощения меди отчасти обусловлен асимметрией окружения иона меди в структуре белка. Такова же причина и нередко наблюдаемого кругового дихроизма ароматических аминокислот белков. Для тирозина знак КД может быть как Положительным, так и отрицательным, но при этом он остается постоянным для всей полосы поглощения. Вследствие этого полосы КД по форме сходны с полосами поглощения [19, 46]. Фенилаланин ведет себя сложнее. Колебательные полосы, следующие за О—0-полосой с [c.25]

Нередко электронное возбуждение одного хромофора вызывает флуоресценцию другого хромофора, расположенного поблизости. Так, например, возбуждение молекул красителя, образующих монослой, приводит к флуоресценции слоя другого красителя, находящегося от первого на расстоянии 5 нм. Возбуждение остатков тирозина в белках может вызвать флуоресценцию триптофана, а возбуждение триптофана— флуоресценцию красителя, связанного с поверхностью молекулы белка, или флуоресценцию связанного кофермента [57]. Такого рода резонансный перенос энергии характерен для тех случаев, когда спектр флуоресценции одной молекулы перекрывается со спектром поглощения другой. При этом реального испускания и поглощения света не происходит, а имеет место безызлучательный перенос энергии. Резонансный перенос энергии имеет большое биологическое значение для фотосинтеза. Поскольку молекула с е = 3-10 при воздействии прямого солнечного света поглощает около 12 квантов света в секунду, моно-молекулярный слой хлорофилла будет поглощать всего 1 % общего числа квантов, падающих на поверхность листа [63]. По этой причине молекулы хлорофилла располагаются в виде многочисленных тонких слоев внутри хлоропластов. Однако непосредственно в реакционных центрах, где идут фотохимические процессы, находится лишь небольшое число специализированных молекул хлорофилла. Остальные молекулы поглощают свет и передают энергию в реакционный центр небольшими порциями. [c.31]

Ультрафиолетовые спектры поглощения определяются возбуждением электронных уровней атомов и молекул и обладают максимумами, положение которых характерно для определенных атомных группировок, сопряженных двойных связей и др, В белках ультрафиолетовые спектры поглощения в основном определяются ароматическими аминокислотами — фенилаланином /--макс— 260 м х), тирозином и триптофаном 280 жр-), причем спектры поглощения могут быть даже использованы для аналитического определения этих аминокислот. Нуклеиновые кислоты и нуклеопротеиды обладают настолько резким максимумом поглощения при 260—265 лр., что при помощи фотографирования в ультрафиолетовом микроскопе легко определить их содержание в отдельных клетках (Брумберг). Зависимость ультрафиолетовых спектров поглощения от pH, сос- тава среды, от образования комплексов с другими соединениями позволяет исследовать изменения состояния растворенных веществ так, по смещению максимума поглощения с 280 до 260—265 м а было обнаружено образование комплекса между белками и полисахаридами (Розенфельд). Линейные полимеры обычно не имеют интенсивных полос поглощения в видимой и ближней ультрафиолетовой областях спектра. [c.61]

При действии ЦФ на инсулин (pH 9,0) оказалось [20, 21], что из 4 остатков тирозина Туг А19 и Туг В16 реакционноспособны, а Туг А14 и Туг В26 инертны (см. рис. 2). Присутствие щелочи довольно быстро активирует Туг В26, тогда как активация Туг А14 длится несколько часов. По-видимому, именно эти остатки обнаруживаются по спектральным смещениям при триптическом гидролизе инсулина или подкислении триптического гидролизата [22—25]. Присутствие двух аномальных остатков тирозина установлено также по оценке влияния растворителя на спектр поглощения [26]. [c.351]

Фиг. 10. Спектры поглощения триптофана (I), тирозина II) и фенилаланина III) в ультрафиолетовой области.

Разностные ультрафиолетовые спектры. Поглощение света белками в области 250—300 ммк обусловлено в основном наличием в их молекулах ароматических аминокислот трех типов. К ним относятся триптофан и тирозин (последний в ионизованной форме), максимум поглощения которых лежит при 280 ммк, и фенилаланин, для которого наблюдается более слабое поглощение при 260 ммк. Более сильное поглощение белка при 270 ммк, чем при 280 ммк, свидетельствует обычно о том, что большую часть ароматических остатков в белке составляют остатки фенилаланина. [c.298]

Исследование диссоциации фенольных гидроксилов тирозина и сульфгидрильных групп цистеина в белках производится также спектроскопическим путем — методом спектрофотометрического титрования. При этом используется зависимость ультрафиолетового спектра поглощения этих остатков от состояния их ионизации. Степень ионизации при заданном значении pH определяется из соотношения [c.28]

Ароматические аминокислоты при облучении в водном растворе проявляют свойства, которые типичны как для ароматических соединений, так и для аминокислот. Например, тирозин и диоксифенилаланин, подобно некоторым другим фенольным соединениям (стр. 173), после облучения в водных растворах, содержащих кислород, подвергаются характерным изменениям в спектре поглощения. Изменения сходны с изменениями, производимыми окислительными энзимами ЬбО, Г61, N16]. При нагревании облученных растворов ароматических аминокислот образуются неидентифицируемые вещества большего молекулярного веса. Из алифатических аминокислот такие вещества не возникают [Ь65]. [c.246]

Ультрафиолетовые спектры поглощения определяются возбуждением электронных уровней атомов и молекул и обладают максимумами, положение которых характерно для определенных атомных группировок, сопряженных двойных связей и др. В белках ультрафиолетовые спектры поглощения в основном определяются ароматическими аминокислотами — фенилаланином (А зх=260 ммк), тирозином и триптофаном (А зх=280 ммк), причем спектры поглощения [c.55]

Фиг. 90. Спектр поглощения в ультрафиолете тирозина при pH 12 (/) и pH 2 (//) [30].

Так, например, получение высокой аналитической точности затрудняется тем, что при колориметрическом определении триптофана [159] цветные реакции, результаты титрования и спектры поглощения, зависящие от остатков тирозина, часто отклоняются для различных белков от значений, которых следовало ожидать, если бы все фенольные группы тирозина были свободны [160, 161, 162]. Нейрат [79] приводит ряд работ о предполагаемых связях между боковыми цепями аминокислот. Однако мы считаем преждевременным вывод, что полярные группы боковых цепей чистого нативного белка являются, в общем, сверх ожиданий, чрезвычайно инертными по отношению к специфическим реагентам для этих групп . [c.59]

Рис. 4J2. Спектры поглощения триптофана, тирозина и фенилаланина в водном растворе прн pH 6 [905],

Ультрафиолетовые спектры белков отличаются сильным поглощением, характеристическим для ароматических фрагментов аминокислот, входящих в их состав фенилаланин, тирозин, триптофан. Эти спектры поглощения используют для аналитического определения остатков указанных аминокислот. Резкий максимум поглощения, характерный для нуклеиновых кислот и нуклеопро-теидов, позволяет определить их содержание в отдельных клетках. [c.361]

РИС. 13-7. Спектры поглощения N-ацпльных производных этиловых эфиров триптофана (/), тирозина (II), фенилаланина (III) и ди-метилового эфира цистина (/1 ) в метаноле при 25 °С, соответствующие переходам указанных соединений в первое электронно-возбужденное состояние. Спектры производных тирозина, фенилаланина и цистина умножены на коэффициенты 2, 20 и 4 соответственно [41]. [c.16]

Белковые АК - твердые вещества, выделяемые в виде белого порошка, обычно хорошо растворимые в воде и в полярных растворителях. Многие аминокислоты поглощают в ультрафиолетовой (УФ) области, но особенно специфическое поглощение при 280 нм имеют ароматические АК (фенилаланин, тирозин и триптофан) и поэтому содержание белка часто определяют именно по характеру спектра поглощения в УФ-об-ласти. [c.8]

Многочисленные белки связывают ионы металлов. Некоторые из них действуют как биологические хранилища металлов, в то время как другие служат для их транспорта. Ферритин запасает железо, главным образом в печени и селезенке, в виде оксигидро-ксифосфата Fe(HI) с приблизительным составом Fe(OOH)s, FeO, РО4Н2. Это соединение образует ядро диаметром 7 нм, окруженное 24 белковыми субъединицами, давая в результате сферическую молекулу общим диаметром около 12 нм. Трансферин, с другой стороны, является белком плазмы, переносящим ионы Fe + и Си +. Имеются данные, что в состав центра связывания металла входят тирозин и гистидин. Так, в спектре поглощения белка и-меется пик при 465 нм, соответствующий переносу заряда между фенолят- и Ре +-ионами. [c.561]

При облучении водных растворов тирозина образуются аммиак и 3,4-дноксифенилаланин 2,4-диоксифеннлал.анин (тира-мин) образуется в незначительных количествах или совсем не образуется. Известно [48], что аналогичная реакция вызывается реактивом Фентона (стр. 205), и почти не остается сомнений в том, что эти реакции обусловлены реакциями гидроксила с ароматическим кольцом. Это открытие особенно важно в связи с изменениями спектра поглощения в ультрафиолетовом свете при облучении белков. Данный вопрос мы рассмотрим ниже. [c.221]

Давно известно, что облучение водных растворов белков изменяет спектры поглощения в ультрафиолетовом свете. На рис. 39 приведены данные Гузман Баррона [62], полученные при облучении сывороточного альбумина быка рентгеновскими лучами, Максимум поглощения при 2800 А в значительной мере обусловлен тирозином и частично триптофаном максимум [c.225]

Относительную чувствительность аминокислотных остатков в инсулине к "[-излучению исследовали Дрейк и его сотрудники [69]. Как указывалось ранее, интенсивное исследование инсулина особенно желательно, поскольку он является единственным белком, строение которого полностью известно. На основании результатов определений концевых групп, изучения спектров поглощения и хроматографии аминокислот на бумаге в образцах, подвергнутых облучению дозами до 40 мегафэр, были сделаны выводы 1) что цистин, тирозин, фенилаланин, пролин и гистидин обладают высокой радиочувствительностью 2) что лейцин, изолейцин, валин, лизин и аргинин заметно разрушаются при наиболее высоких дозах и 3) глицин и фенилаланин, Н-концевые аминокислоты (т. е. имеющие свободные а-аминогруппы) дезаминируются. [c.227]

Вторую группу составляют методы, не требующие предварительного синтеза конкретных модельных соединений. Однако обязательным условием применения этих методов является наличие такой области в спектре, где бы изменение происходило только вследствие ионизации одной из групп. Для этого кислотно-основные центры не должны входить в единую сопряженную систему и должны быть достаточно удалены друг от друга. Это условие часто выполняется для алифатических соединений. Например, в области около 300 нм спектр поглощения тирозина HO 6H4GH2 H( OO )NH+з зависит только от того, ионизирована или не ионизирована оксигруппа, и совершенно не зависит от ионизации аммониевой группы [115]. (В исследуемой области pH карбоксильная группа полностью ионизирована.) Фактически это означает, что за модель одной промежуточной формы можно принять НАН, а за модель другой промежуточной формы — А. [c.181]

Полезен способ определения тирозина и триптофана, основанный на измерении поглощения ими ультрафиолетовых лучей [160]. У тирозина максимум поглощения расположен при 275 M , у триптофана — при 280 лг,и. Фотометрию в з льтрафио-лете используют также для определения содерл ания этих аминокислот в белках [160]. По интенсивности поглощения в ультрафиолетовой части спектра можно измерять концентрацию белка в растворе [161—165] (поглощение обусловлено в основном присутствием в белке остатков тирозина, триптофана и, в меньщей степени, фенилаланина). При этом обычно требуется поправка на поглощение в ультрафиолете за счет нуклеиновых кислот (их учитывают по величине оптической плотности при 260 ,i) [165]. [c.44]

Спектры поглощения короткоживущих продуктов наблюдались также в облученных дезаэрированных растворах цистеина, триптофана и тирозина [26]. Однако детально эти спектры не описаны, Водные растворы этилена. Согласно [26], в водных растворах этилена, содержащих кислород, при действии электронного им--пульса возникает короткоживущее поглощение в области 230 — 300 ммк. Оно изчезает по закону второго порядка. [c.191]

Спектрофотометрический метод особенно ценен в тех случаях, когда необходимо различить присутствующие в растворе группы с очень близкими значениями константы диссоциации, причем только диссоциация групп одного определенного типа приводит к изменению спектра поглощения. Этим методом удалось различить диссоциацию аммонийной и сульфгидрильной групп (в цистеине) обе они диссоциируют при одинаковых значениях pH, но только диссоциация SH-rpynn влечет за собой изменение поглощения. Аналогичным образом можно отличить диссоциацию аммонийной группы от диссоциации в фенольной группе тирозина и найти каждую из констант, используя тот факт, что к заметному изменению поглощения приводит только диссоциация в фенольной группе. Позднее мы увидим, как с помощью этого метода удается проследить за ионизацией определенных групп в белках, несмотря на то что при тех же значениях pH ионизируются также и другие группы. [c.81]

Ультрафиолетовые спектры поглощения белков в области между 2500 и 3000 А еще более просты . Поглощение в этой области почти полностью обусловлено индольными боковыми цепями триптофана и фенольными боковыми группами тирозина. Фенильные боковые группы фенилаланина тоже поглощают излучение в этой области, но их молярное поглощение намного меньше. Спектры белков гораздо ближе к спектрам, полученным при суммировании спектров боковых цепей, входящих в состав белка, чем в случае нуклеиновых кислот. Спектр белка обычно слегка смещен (приблизительно на 30 А) в сторону больших длин волн, но отдельные различия так малы, что поглощение в области соответствующих длин волн может быть использовано при анализе числа боковых цепей триптофана и тирозина . Относительно малая разница между спектрами белков и спектрами входящих в них боковых цепей, вероятно, означает, что боковые цепи неупорядочены. Это согласуется с выводами, сделанными ранее на основании рентгенографических данных. Небольшие различия в спектрах, которые нередко наблюдаются, могут просто отражать различие в окружении [c.112]

Высказано предположение, что в реакцию вступают ароматические части белков, так как оптическая плотность растворов белков обычно проявляет общее возрастание при облучении. Это увеличение было известно почти 30 лет назад [S88—S90] и подтверждалось несколько раз [В28, С16, Р7]. В интерпретации спектров поглощения следует быть осторожным, поскольку образование агрегатов денатурированного белка увеличивает способность раствора рассеивать свет [А18, D75, Р12, Р14], давая тем самым повод к кажущемуся увеличению поглощения в области 240—340 ммк. Однако, по-видимому, светорассеянием нельзя объяснить все спектроскопические изменения. Определенно установлено действие на тирозиновую составляющую белка [В28], напоминающее действие, оказываемое на сам тирозин (стр. 246). В некоторых случаях найдено, что оптическая плотность белков убывает при облучении, особенно вблизи 280 ммк возможно, что это вызвано действием на триптофап-ную составляющую. Для самого триптофана при облучении показано уменьшение оптической плотности в спектре поглощения в этой области [В25]. По-видимому, триптофанная составляющая в присутствии дезоксирибонуклеазы вступает в реакцию даже в том случае, если отношение триптофана к присутствующему тирозину составляет только 0,21 [05]. [c.256]

Все белки обнаруживают ясный спектр поглощения в ультрафиолетовом свете. Максимум поглощения, 1ежит около 270 ту. [111, 112]. Этот максимум соответствует максимуму поглощения триптофана, фенилаланина и тирозина. По интенсивности спектра поглощения в ультрафиолетовом свете можно поэтому судить о содержании указанных аминокислот в различных белках. Гидролиз белков протеолитическими ферментами заметно не отражается на характере их спектра поглощения (фиг. 27) [113]. На этом основании можно сделать вывод, что в нативных белках нет таких специфических, поглощающих свет структур, которых ие было бы в гидролизате. Тем самым опровергается и предположение некоторых авторов о наличии в нативных белках значительного числа гетероциклических колец. [c.140]

Прекрасный пример определения структуры металлопротеина в основном с помощью спектроскопических и магнитных исследований представляет система кислород-транспортного гемэритрина. Клотц и сотр. (гл. И) [35] провели обширное исследование белка из сипункулид Golfingia gouldii. Этот белок имеет молекулярную массу около 108 000 и состоит из восьми соединенных субъединиц, каждая из которых содержит два атома железа, способных обратимо присоединять одну молекулу кислорода. Магнитные измерения [35] показали, что деоксигенированная форма белка содержит высокоспиновое Fe(II). Электронный спектр поглощения этой формы относительно понятен до 300 нм в УФ-области появляется пик около 280 нм, характерный для тирозина. [c.145]

НЫХ значениях pH обнаружены полосы поглощения при 295 нм, которые очень похожи на полосы в спектре п-ацетил-ь-тирозина при pH 10,8 по сравнению с его спектром при pH 7, т. е. на полосы ионизированной фенольной ОН-группы в сравнении с неионизиро-ванной [64]. Таким образом, различия в спектрах белков объясняются ионизацией тирозина. Молярный коэффициент поглощения дифференциальной полосы можно получить из спектра поглощения полностью денатурированного щелочью белка по сравнению со спектром нативного белка, приняв во внимание число тирозильных остатков в молекуле или из измерений, выполненных на модельных соединениях. Существуют некоторые расхождения между значениями, полученными дифференциальным методом, и значениями, сообщенными для различных белков, и эти расхождения трудно объяснить [64, 76]. Кроме того, значение молярного коэффициента поглощения, сообщенное для случая щелочной денатурации, возможно, нельзя прямо применять к измерениям на нативном белке [76]. По-видимому, изменения, наблюдаемые при связывании металла с сидерофилинами, действительно, связаны с изменениями в тирозильных остатках, несмотря на то, что не существует зависимости от числа этих остатков в молекуле белка. Тан и Вудворт [c.347]

Другим -примером -ферментативного окисления белков является инактивирование анти-Rh агглютининов пероксидазой в присутствии Н2О2 [65д]. Пероксидазное инактивирование сопровождалось снижением отношения максимума к минимуму в ультрафиолетовых спектрах поглощения и уменьшением числа тирози-новых остатков, доступных для микробиологического определения. Манометрические измерения показали, что при этом происходит окисление. Полученные результаты позволили предположить, что для проявления активности агглютинина необходимы неизмененные остатки тирозина. В одном из предварительных сообщений [65е] указывается на то, что пероксидаза окисляет и другие белки, изменяя их биологическую активность. [c.290]

А. А. Фсрхмин, Ультрафиолетовые спектры пог.чощения смесей нуклеотидов и аминокислот. Спектры поглощения мышечной аде-ниловой кислоты и /-тирозина, ДАН, 59, 945 (1948). [c.356]

На минимум иоглощения белков, наблюдаемый приблизительно ири 248 нм, оказывает большое влияние примесь нуклеиновой кислоты, а минимум спектра поглощения нуклеиновых кислот, лежащий вблизи 228 нм, служит еще более чувствительным индикатором примеси белков (все белки сильно поглощают в этой области) [141]. Особенности кривой поглощения белков при нейтральном значении рИ и те изменения в характере этой кривой, которые происходят под влиянием щелочи, добавленной до концентрации 0,1 М, можно использовать для идентификации и количественного определения в них тирозина и триптофана [131]. По характеру спектра поглощения белков и нуклеиновых кис.лот можно судить таки<е и об их конформации. Так, денатурация белков обычно сопровождается заметными изменениями их спектра поглощения (главным образом незначительный сдвиг максимума поглощения в сторону более коротких длин волн). По спектру поглощеиия можно судить и о состоянии нуклеиновых кислот (гипер- и гинохром-ный эффекты). При этом в зависимости от температуры и ионной силы различия в поглощении между ними соста-в.ляют 20—40%. И наконец, определение характерных спектров поглощения компонентов нуклеиновых кислот используется в большинстве методов идентификации и количественной оценки этих комионентов (см. разд. А гл. VI). [c.59]

Ароматические аминокислоты — тирозин, фенилаланин и триптофан — обусловливают наличие максимумов в электронных спектрах поглощения белков в УФ-области (Я ах 260 - 280 нм), на чем основан спектрофотометрический метод определения белка в растворах и биологических жидкостях. Цистин — диаминодикарбоновая кислота, образующаяся при окислении цистеина [c.48]

Генерируемые при импульсном радиолизе анион-рад и калы, такие, как Вг ", (S N) и S0 ", окисляют тирозин и некоторые фенолы с образованием феноксильного радикала тирозина с константой скорости к = 10 да (моль-с) [761. Реакция гидроксильного радикала ОН с тирозином и фенолом протекает намного быстрее [к 10 дм /(моль- с) при нейтральном pH] возникающий при этом короткожи в ущн n спектр поглощения имеет максимумы прн 300 и 330 нм [511, 567, 6411. Соответствующий ему интермедиат распадается далее, давая феноксильный радикал, поглощающий при 400 и 290 нм. Генерируемый феноксилЕэный радикал был [c.190]

Образование аддуктов ОН с триптофаном наблюдалось в случае трипсина 123, 5781, химотрипсина 181. карбоксипептидазы А [7361, папаина I2I81 и субтилизина Novo и arlsberg [1351. Коротко живущие спектры поглощения радикалов тирозина наблюдались для рибонуклеазы [29, 5401 и папаина [2181. [c.202]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология