Михаэлиса функции

Однако механизмы (5 1) и (5.112) можно различить, исследуя кинетику реакции в предстационарном режиме. Кинетические закономерности схемы Михаэлиса описывают функции (5.100) и (5.107). Для схемы Анри следует решить [при условии (5.90)] систему уравнений [c.189]

Каждый член AF относится к обратимой побочной реакции с участием катализатора. Он выражается произведением концентраций и констант равновесия и является безразмерной величиной. Если интермедиат Боденштейна сам вовлечен в дополнительное равновесие, то соответствующи< член узнают по наличию константы Михаэлиса (или функции Михаэлиса). Существенной особенностью знаменателя в уравнении скорости, представляющем физическую модель, является то, что все входящие в него члены должны быть безразмерными. Конечно, знаменатель можно записать по-разному, но наиболее общепринятая форма записи —- это та, что приведена в последнем уравнении, где первый член — единица. При такой форме записи выявляется функция образования комплекса между катализатором и другими компонентами реакционной смеси, т.е. функция закомплексованности. Если знаменатель равен единице, это означает, что весь катализатор находится в свободном состоянии, т.е. [С] = [ ]q. Очень важен, конечно, второй член (iTj [А]), являющийся неотъемлемой характеристикой каталитического процесса поскольку он описывает образование активного комплекса между катализатором и одним из исходных реагентов. Каждый следующий член соответствует обратимой побочной реакции катализатора, в результате чего снижается действующая концентрация катализатора. [c.131]

Равенство нулю величины lg[A2-]/[H2A] посредине между двумя значениями рКа можно доказать с помощью графического анализа рН-функций Михаэлиса. Функции Михаэлиса определяются через К и /Сг с учетом сохранения частиц трех типов НгА, НА и А . Этот закон записывается таким образом [c.231]

Гиперболическая функция аналог уравнения Михаэлиса— Ментен (модель 6, табл. УМ) и уравнение реакции 2-го порядка (модели 7 и 8, табл. VI-1) неудовлетворительно описывают конечные участки экспериментальных кривых БПК. [c.149]

Видно, что функция (5.119) существенно отличается от зависимости концентрации продукта от времени для механизма Михаэлиса [см. уравнение (5.107)] фис. 57). В случае механизма Михаэлиса скорость реакции ( [Р]/Л) растет со временем, в то время как в случае механизма Анри скорость реакции падает во времени, пока не достигнет уровня, соответствующего стационарной скорости, которая описывается уравнениями (5.113) и (5.114). Период времени, отсекаемый асимптотической прямой 2 (ее тангенс угла наклона равен стационарной скорости процесса), лежит в области отрицательных значений [c.190]

При графическом построении экспериментальных данных в координатах Иди (рис. 33) полученная прямая линия пересекает ось ординат в точке Ут и имеет тангенс угла наклона, равный — /(т(каж). Остальные четыре возможных способа трансформации уравнения Михаэлиса (5.7) в линейную функцию не имеют широкого применения [3]. [c.79]

Кинетические параметры У т — максимальная скорость и Кт(кят)— кажущаяся константа Михаэлиса ферментативной реакции— функции констант скоростей индивидуальных стадий (см. соотношения 5.10, 7.2, 7.3). Для раздельного определения этих параметров в общем случае нельзя использовать интегральные методы обычной неферментативной кинетики вследствие смешанного порядка ферментативных процессов. Например, метод Гуггенгейма (см. гл. 2) пригоден для обработки кинетики ферментативных реакций только в случае. т(каж)> [8]о или [Е]о>[8]о, т. е. только при наличии кинетики первого порядка по субстрату или продукту. [c.166]

Экспериментальная зависимость скорости реакции от начальной концентрации фермента является критерием диссоциативного механизма. Смещения равновесия в результате различного связывания субстрата димером и мономером приводит к отклонению от простого уравнения Михаэлиса вследствие того, что эффективная константа связывания К становится функцией локальных констант Михаэлиса для димера и мономера К, и начальной концентрации субстрата [c.480]

Скорости реакций являются не только функциями температуры воды, но часто зависят и от концентрации ЗВ, что приводит к нелинейным уравнениям. Среди таких уравнений наиболее широко используются соотношения типа Михаэлиса-Ментена, которые имеют вид [c.288]

Из уравнения (128) следует, что величина обратной скорости является линейной функцией обратной концентрации субстрата, так как макс и постоянны для данной реакции. Это позволяет экспериментально определять константу Михаэлиса, измеряя скорость при разных концентрациях субстрата. На рис. 55 показано нахождение константы Михаэлиса по экспериментальным данным. Константа Михаэлиса имеет размерность концентрации моль л). Зная концентрацию фермента, можно вычислить к , к% и к . Например, в реакции [c.255]

Органические производные фосфора, систематическое изучение которых начато А. Е. Арбузовым и А. Михаэлисом, в последние 15—20 лет привлекли к себе внимание многих химиков-органиков и специалистов из других областей науки и техники. Возникновение такого интереса объясняется многообразием этих веществ, перспективностью их использования при решении принципиальных теоретических вопросов и большим практическим значением. Среди органических производных фосфора имеются природные соединения, выполняющие очень ответственные биологические функции, и поэтому их изучение определяет прогресс многих разделов молекулярной биологии. [c.5]

Это уравнение можно сравнить с уравнением Михаэлиса — Мен-тен (1.5).. Таким образом, обратная величина к бл должна быть линейной функцией i/U, поскольку [c.191]

В связи с этим было предложено несколько способов трансформации уравнения Михаэлиса в линейную функцию. В табл. 2 показаны шесть возможных способов линейной трансформации основного уравнения (У.6) в линейное уравнение вида [c.41]

Как известно константа Михаэлиса, даже в простейшем виде является функцией по крайней мере трех констант скорости, т. е. [c.46]

После образования комплекса Михаэлиса (Е5) происходит его распад с выделением первого продукта реакции — спирта — и образованием ацилированного фермента Е5. Последний в результате реакции с водой образует второй продукт ферментативной реакции — кислоту — и превращается в исходный фермент. Определяемая экспериментально Кт для холинэстераз представляет собой функцию четырех констант скорости к+х, к х, к+2 и к+ . При этом стационарная скорость реакции определяется уравнением Михаэлиса [78] [c.161]

Приведенные выше данные о величинах констант Михаэлиса для реакций, катализируемых холинэстеразами, не позволяют считать, что эти константы могут однозначно характеризовать сродство субстрата к ферменту — нередко низкие значения Кт (т. е. высокое сродство ) сочетаются с относительно невысокой скоростью реакции, и наоборот. Это вполне естественно, поскольку скорость реакции при прочих равных условиях есть функция не только константы скорости распада фермент-субстратного комплекса +2, но и константы Михаэлиса. Положение осложняется еще и тем, что последняя константа определяется не только но и другими константами. Таким образом, влияние как и влияние Кт, на скорость реакции зависит от соотношения величин констант скорости отдельных стадий процесса. В связи с этим в настоящее время предпринимаются попытки раздельного определения констант скорости известных стадий реакций, катализируемых холинэстеразой. [c.163]

На этом основании было высказано предположение, что одним из факторов, определяющих взаимодействие фермента с субстратом при образовании комплекса Михаэлиса, служит ионная реакция между катионным центром ацетилхолина и анионным центром на активной поверхности фермента. Такое взаимодействие должно быть первичным в реакции фермента с субстратом, поскольку ионные силы проявляются на большем расстоянии, чем другие виды химических взаимодействий. Образованию ионной связи приписывали лишь якорную функцию, в результате реализации которой молекула субстрата ориентируется на поверхности фермента, чем значительно облегчается образование других необходимых химических связей (уже ближнего действия) с группировками активного центра фермента. В связи с этим исследованию кинетики и механизма ингибирования холинэстераз ионами тетраалкиламмония было уделено особое внимание. Задача этих исследований — изучение особенностей строения и роли анионного центра холинэстераз в каталитическом действии указанных ферментов. [c.185]

Случай з ЛГ[А1 ] = 1. Практически это довольно редкий случай, когда константа равновесия ни мала, ни велика для того, чтобы можно было упростить уравнение (3-8). Тогда полезно свести выражение к / к 4- к2[А2]) к новой псевдоконстанте. Вводя константу Михаэлиса = (к + к2)/к (величину, обратную приведенной выше), обозначим ее как функцию Михаэлиса А ,так как она не постоянна, а зависит от А2. Используя это обозначение, уравнение (3-8) можно переписать в виде [c.61]

Если мы измеряем начальную скорость реакции как функцию концентрации только одного из субстратов, например а (этот субстрат называют в таком случае вариабельным), то полученные данные описываются уравнением Михаэлиса — Ментен [(VI.13), (VI.17) и (VI.18)] при условии соблюдения ограничений, указанных на стр. 1(37 и 168, и постоянства концентрации второго субстрата, в нашем случае Ь (который называют при этом фиксированным), т. е. при условии, что > ед. Если провести подобную серию измерений при какой-либо другой концентрации то и тогда [c.176]

Скорость реакции как функция концентраций органических доноров описывается уравнением типа Михаэлиса — Ментен. [c.38]

Величины каталитической константы и константы Михаэлиса как функции концентрации второго субстрата линеаризуются в [c.59]

Превращение субстрата в продукт происходит в комплексе Михаэлиса. Часто субстрат образует ковалентные связи с функц. фуппами активного центра, в т. ч. и с группами кофермента (см. Коферменты). Большое значение в механизмах ферментативных р-ций имеет основной и кислотный катализ, реализуемый благодмя наличию имидазольных Фупп остатков гиствдина и карбоксильных фупп дикарбоновых аминокислот. [c.80]

Восстановление соединения Т-1У до лейко-Т-1У осуществляется с помощью почти любого восстановителя, такого, как фенилгидразин [411], цинковая пыль и уксусная кислота или йодистоводородная кислота. Лейкосоль так легко окисляется, что ее нужно защищать от воздуха или ацетилировать. Однако лейкооснованне можно выделить, и оно окисляется не так легко [412]. Окисление лейкосоединения катализируется ионами многих металлов, в частности ионом двухвалентной меди [413], и ингибируется цистеином или глу-татионом [414]. При энзиматической дегидрогенизации молекулярный кислород часто можно заменить соединением Т-1У в качестве акцептора водорода. Если дегидрогенизация проводится в присутствии воздуха, то вторичной функцией кислорода является, вероятно, окисление образующегося лейко-метиле-нового голубого [415]. В этих реакциях в условиях, описанных Михаэлисом [296], играет роль также свободный радикал метиленового голубого. [c.583]

Для всестороннего изучения морфолого-физиологических свойств и продуктов обмена, прежде всего, микробов все ранее предложенные способы их выращивания оказались малопригодными Более того, накопление однородной по возрасту большой массы клеток оставалось исключительно трудоемким процессом Вот почему требовался принципиально иной подход для решения многих задач в области биотехнологии В 1933 году А. Клюйвер и Л X Ц Перкин опубликовали работу "Методы изучения обмена веществ у плесневых грибов", в которой изложили основные технические приемы, а также подходы к оценке и интерпретации получаемых результатов при глубинном культивировании грибов С этого времени начинается третий период в развитии биологической технологии — биотехнический Началось внедрение в биотехнологию крупномасштабного герметизированного оборудования, обеспечившего проведение процессов в стерильных условиях Особенно мощный толчок в развитии промышленного биотехнологического оборудования был отмечен в период становления и развития производства антибиотиков (время второй мировой войны 1939 — 1945 гг, когда возникла острая необходимость в противомикробных препаратах для лечения больных с инфицированными ранами) Все прогрессивное в области биологических и технических дисциплин, достигнутое к тому времени, нашло свое отражение в биотехнологии Следует отметить, что уже в 1869 г Ф Мишер получил "нуклеин (ДНК) из гнойных телец (лейкоцитов), В Оствальд в 1893 г установил каталитическую функцию ферментов, Т Леб в 1897 г установил способность к выживанию вне организма (в пробирках с плазмой или сывороткой крови) клеток крови и соединительной ткани, Г Хаберланд в 1902 г показал возможность культивирования клеток различных тканей растений в простых питательных растворах, Ц Нейберг В 1912 г раскрыл механизм процессов брожения, Л Михаэлис и М Л Ментен в 1913 г разработали кинетику ферментативных реакций, а А Каррел усовершенствовал способ выращивания клеток тканей животных и человека и впервые применил экстракт эмбрионов для ускорения их роста, Г А Надсон и Г С Филлипов в 1925 г доказали мутагенное действие рентгеновских лучей на дрожжи, а в 1937 г Г Кребс открыл цикл трикарбоновых кислот (ЦТК), в 1960 [c.16]

Михаэлис и Граник [18] предложили эмпирический метод, позволяющий расширить шкалу pH для концентрированных растворов серной кислоты. Метод основан на измерении нормальных потенциалов двух ступеней окисления в двухэлектронной окислительновосстановительной системе. Можно различить три уровня, а именно восстановленной, полуокисленной и окисленной форм. Разность между нормальными потенциалами низшей и высшей ступени окисления некоторых красителей, например 3-окситиазина, является функцией [c.191]

Михаэлис и Граник определили значение pH в 11 М растворе H2SO4. Найдено, что pH подобно Но является линейной функцией молярности при концентрации кислоты более 1 М (см. кривые 3 и 4 на рис. Vni. 2). Величина pH хорошо согласуется с Яо в 1 М растворе и приаимает несколько меньшие значения при больших концентрациях кислотности. Различие между ними в ЮМ растворе составляет около 0,5 ед. pH. [c.191]

Эта функция является мерой относительной активности протона в исследуемом растворителе она приближается к значению pH в очень разбавленных растворах серной кислоты. Значения / о(Н), вычисленные из Ех к Е сравниваются в табл. VIII. 2 со значениями Но в тех же растворах серной кислоты . Эти же значения показаны на рис. VIII. 2 в виде точек (значения функции для 8Ai раствора кислоты интерполированы). Значения о(Н) находятся в удовлетворительном согласии с величинами pH, найденными Михаэлисом и Граником. [c.192]

Михаэлис и сотрудники [65, 66] заметили, что при равновесии между формами В, ВА, ВА2 и В2А2 (где В — хинон, А — электрон) функции, аналогичные г(lg г)в, пересекаются в точке Я=1, где П1 = П2. Из уравнений (17-25), (17-26), (17-27) и (17-28) следует, что [c.443]

В. Кинетические методы. Поскольку степень потребления ацетата в пробе воды связана с копцентрацией субстрата, существует возможность определения функциональной зависимости аналогичной функции энзиматических реакций, описываемых уравнением Михаэлиса — Ментепа [31]. Соответствующий график позволяет определить кинетические константы, отражающие время превращения субстрата и его концентрации (Кб) при половине максимальной степепи потребления. Сравнение величины показателя Кз с соответствующей константой Михаэлиса невозможно, так как она включает также неизвестные количества субстрата, уже имеющегося в воде [36]. [c.249]

Гюильбо и Монтальво [451] нашли, что время отклика уреаз-электрода не зависит от концентрации субстрата, как это должно следовать из уравнения Михаэлиса для ферментов в растворе [453]. но зависит от толщины слоя геля. Интервал времени, необходимый для того, чтобы достигнуть 98 (, стационарного состояния, составляет около 26 с для слоя геля толщиной 60 мкм и около 59 с для слоя геля толщиной 350 мкм при концентрации. мочевины 8,33- 10 моль/л и концентрации уреазы 175 мг/мл геля, В рассмотренных выше электродах I, II и III типов, в которых толщина слоя геля составляет 350 мкм и в 1 мл геля содержится 175. мг уреазы, ведут себя одинаково и имеют одну и ту же электродную функцию [c.154]

При выводе уравнения для электродного потенциала Нейджи и др. [511] предположили следующее а) скорость реакции не зависит от концентрации кислорода (экспериментально доказано, что насыщение раствора пробы кислородом не влияет на электродную функцию), т. е. концентрация кислорода в реакционном слое постоянна б) толщина слоя, в котором протекает реакция, очень мала и постоянна в) концентрация в объеме раствора постоянна, и на нее не влияют процессы, протекающие в ферментном слое г) скорость реакции (14.3) немногим меньше скорости реакции (14.1) (стационарное состояние устанавливается сравнительно быстро, это также подтверждено экспериментом) д) концентрация субстрата намного меньше, чем константа Михаэлиса е) величины активности и концентрации взаимозаменяемы. Если все эти условия выполняются, то справедливо следующее уравнение для электродного потенциала при постоянной концентрации глюкозы [c.174]

Из кинетических соображений следует, что график log V как функции pH отражает ионизацию группировок, влияющих на мономолекулярную стадию простого односубстратного механизма. Если же функцией pH является log V/Km, то, как опять-таки следует из кинетики (см. последний раздел гл. IV), график отражает влияние pH лишь на группировки, имеющие значение для комплексо-образования, т. е. на группировки либо свободного фермента, либо субстрата. Интересно, что по логарифмическим графикам изменения константь Михаэлиса можно выявить эффекты обоих типов (фиг. 23). [c.215]

Эта проблема весьма важна. Простое графическое представление зависимости констант Михаэлиса и максимальных скоростей в случае мультисубстратных систем может привести к грубым ошибкам в оценке величин рК. Это объясняется кинетической сложностью таких систем, вследствие чего константа Михаэ-ииса, например, оказы-рается сложной функцией многих констант скоростей. [c.216]