Белки расщепление ферментами

Как было уже указано, для расщепления белков применяют большей частью кислотный гидролиз (концентрированной соляной и серной кислотами), реже щелочной гидролиз, причем в обоих случаях образуются аминокислоты. Очень действенным является ферментативное расщепление белков. Ферменты животного организма, способные гидролизовать белки, подразделяются на три группы [c.398]

Ферментативный гидролиз — расщепление белка протеолитическими ферментами, который обычно проводится при 37°. Ферментативным гидролизом обычно пользуются для получения пептидов — продуктов неполного гидролиза белков. [c.203]

ФОСФОПРОТЕИДЫ (фосфопротеины), сложные белки, содержащие остатки фосфорной к-ты, присоединенные, как правило, фосфоэфирной связью к остаткам a-aMHHO- -окси-кислоты— серина (фосфосерин) или треонина (фосфотрео-нин). Образуются в результате катализируемого ферментом протеинкиназой переноса фосфата АТФ на гидроксильную группу к-ты в уже сформированной молекуле белка. Образование Ф. и их расщепление ферментом ФП-фосфа-тазой играют большую роль в гормональной регуляции активности мн. ферментов, напр, гликоген-синтетазы и глико-ген-фосфорилазы. [c.628]

Огромная эффективность, с которой энергия высвобождается, запасается и снова выделяется, - тоже результат деятельности ферментов. Энергию организм может получать не только из глюкозы, но и при расщеплении белков, а также жирных кислот, содержащихся в жирах. Для окисления этих веществ клетки используют те же ферменты, что и для окисления глюкозы. [c.446]

Одним из ценнейших видов корма животных являются различные белковые гидролизаты. Их получают расщеплением разнообразных белков протеолитическими ферментами. Они содержат смесь осколков белковых молекул, т. е. сравнительно низкомолекулярные пептиды. Гидролизаты для кормовых целей получают глубоким ферментативным расщеплением белков мяса, рыбы, молока и растений. [c.302]

Белки выполняют поразительно много разнообразных заданий. Почти все химические реакции в организме катализируются особой группой белков, называемых ферментами. Расщепление питательных веществ для генерирования энергии и синтез новых клеточных структур включают тысячи химических реакций, возможность протекания которых обеспечивается белковым катализом. Белки также выполняют роль переносчиков, например гемоглобин переносит кислород от легких к тканям. Мышечные сокращения и внутриклеточные движения — это взаимодействие молекул белков, чье предназначение состоит в осуществлении координированных движений. Еще одна группа белковых молекул, так называемые антитела, защищает нас от чужеродных веществ, таких как вирусы, бактерии и клетки других организмов. Активность нашей нервной системы также зависит от белков, которые получают, передают и собирают информацию из внешнего мира. Белки — это также гормоны, управляющие ростом клеток и координирующие их активность. [c.116]

Гидролиз пептидов (и белков) приводит к освобождению аминокислот, участвовавших в их построении. Расщепление проводят, как правило, кипячением с соляной или серной кислотами. При этом все аминокислоты выделяются в виде солей, например хлоргидратов. Исключение составляет триптофан, который разрушается в ходе гидролиза, и поэтому для его определения требуются иные способы. Щелочи также гидролизуют пептиды (и белки), но этот процесс протекает менее гладко и приводит к значительной рацемизации аминокислот. Гидролиз полипептидов до аминокислот можно проводить и при помощи ферментов (трипсин, эрепсин). [c.383]

Антигенные свойства белков исчезают после расщепления белков протеолитическими ферментами. В результате денатурации может происходить либо изменение, либо частичная потеря первоначальных антигенных свойств нативного белка. Так, например, антитела против нативного яичного альбумина весьма слабо реагируют с денатурированным яичным альбумином [14]. Иммунизация же денатурированным яичным альбумином приводит к образованию антител, специфически реагирующих только с денатурированным белком [15]. Надо, однако, отметить, что каких-либо заметных различий в антигенной активности нативного и [c.332]

Другой нерешенной проблемой, имеющей большое значение, является вопрос о структуре промежуточных продуктов, образующихся при расщеплении белков протеолитическими ферментами. Можно себе представить два пути этого расщепления [c.365]

Солодовую муку смешивают с водой и для лучшего расщепления ферментами высокомолекулярных соединений (полисахаридов и белков) нагревают. Самый простой способ — это затирание солода водой постоянной температуры солод замачивают в течение определенного времени при температуре около 65 °С. Такое затирание происходит в одной емкости, используемой также и для фильтрования (удаления нерастворимых фракций), — его часто применяют в Великобритании при производстве сусла [c.65]

Александр Яковлевич Данилевский (1838—1923) может считаться отцом физиологической химии в нашей стране. Он принадлежал к прогрессивной профессуре того времени. Шестидесятые годы прошлого столетия характеризуются, как известно, резким оживлением общественной жизни, а также повышением интереса к естественным наукам. На общество оказывали влияние революционеры-демократы Герцен, Белинский, Чернышевский, Добролюбов. Научная деятельность Данилевского была весьма разносторонней, но основной путь его исследований был связан с изучением химической природы белка и превращением белковых тел в животном организме. Изучая ход расщепления белков пищеварительными ферментами, Данилевский обнаружил возможность превращения продукта переваривания белка, пептона, обратно в нерастворимое белковое вещество. Этими наблюдениями впервые была установлена возможность синтетического действия ферментов. [c.14]

Панкреатическая рибонуклеаза быка (мол. в. 14 ООО) представляет собой одиночную полипептидную цепь, построенную из 124 аминокислот, причем в настоящее время определена их последовательность В определенных местах полипептидная цепь сшита четырьмя дисульфидными мостиками (см. раздел Белки ). Расщепление дисульфидных мостиков приводит к потере каталитической активности фермента. [c.297]

Поскольку белок оболочки содержит более половины всех радиоактивных аминокислот, включающихся в полипептидные цепи на поздних стадиях внутриклеточного развития фага, обнаружение восьми фрагментов этого белка среди сложной смеси полипептидных фрагментов, возникающей при расщеплении ферментами общего белкового экстракта зараженных клеток, не представляет особой трудности. Результаты этого опыта схематически представлены на фиг. 225. [c.454]

Каким образом фермент способствует стабилизации тетраэдрического промежуточного продукта в процессе расщепления белка трипсином [c.343]

Какую роль играют гистидин и аспарагиновая кислота в активном центре фермента при расщеплении белка трипсином [c.343]

Специфический протеолиз — удобный процесс для образования сложных белковых структур. Во многих случаях белки модифицируются путем расщепления одной или нескольких пептидных связей. Для обозначения этого типа катализируемых ферментами реакций, которые играют доминирующую роль во многих физиологических процессах [137—139], используются термины ограниченный протеолиз или специфический протеолиз (табл. 4.2). Хорошо известными примерами специфического расщепления полипептидов являются активация предшественников пищеварительных ферментов, морфогенетические процессы в бактериальных вирусах и каскадные процессы коагуляции и комплементного действия крови [138, 140]. Недавно было показано, что механизмы посттрансля-ционного расщепления имеют место также при образовании таких разных белков, как инсулин, коллаген и специфичные белки вирусов. Кроме того, высокоспецифичное протеолитическое расщепление ферментов важно при инактивации и активации специфических внутриклеточных ферментов (табл. 4.2). [c.72]

Кислые мукогюлисахариды в соединительной ткани связаны с белка- ми (см. стр. 602), поэтому для их выделения, как правило, проводят предварительное разрушение белков протеолитическими ферментами или расщепление углевод-белковых связей щелочами, после чего полисахариды экстрагируют растворами солей . Белки, также переходящие при этом в раствор, удаляют с помощью денатурирования. Смеси мукополисахаридов можно разделить на компоненты фракционированным осаждением спиртом в виде солей с различными катионами , но лучшие результаты дает фракционированное осаждение цетавлоном или ионообменная хроматография . Особенности химического поведения мукополисахаридов сделали чрезвычайно сложной задачу установления их строения. Даже идентификация моносахаридов после полного кислотного гидролиза (обычно одна из самых простых операций) является в мукополисахаридах трудной проблемой. Наличие в одной молекуле уроновых кислот и аминосахаров приводит к тому, что полисахариды гидролизуются лишь в жестких условиях, при которых освобождающиеся уроновые кислоты подвергаются интенсивному разрушению. Поэтому в последнее время работу по установлению строения этих веществ проводят на модифицированных полисахаридах, в которых сульфатные группы удалены, а все карбоксильные группы уроновых кислот восстановлены в первичноспиртовые. Ряд других классических методов установления строения полисахаридов применим к мукополисахаридам с трудом это относится к перйодат ному окислению, вызывающему разрушение остатков уроновых кислот вследствие сверхокисления, к метилированию, в применении которого успехи достигнуты сравнительно недавно. Основными методами, позволившими выяснить строение мукополисахаридов, послужили методы частичного гидролиза и частичного ферментативного расщепления. [c.541]

Значительно упрощает последующее фракционирование целлюлаз и предварительная оптимизация условий культивирования продуцента по таким параметрам как общий уровень и удельная (на 1 мг белка) активность ферментов, отсутствие протеиназ, способных в условиях культивирования расщеплять белок, упрощается также контроль за изменением изучаемых свойств фермента и т.д. Согласно данным [3, 53], дгьже минимальной оптимизации достаточно, чтобы свести к минимуму вероятность протеолити-ческой модификации целлюлаз, преодолеть расщепление их на десятки множественных форм, свести к минимуму содержание пигментирующих веществ, сделать более однозначной трактовку полученных результатов. [c.128]

Наряду с химической модификацией для тех же целей люжно использовать ферменты, катализирующие гидролиз нуг<лсиноных кислот. Например, в экспериментах по футпринтингу комплексов ДНК с белками часто используют панкреатическую дезоксирибонуклеазу (ДНКаза I), которая выделяется в пищеварительный тракт млекопитающих поджелудочной яселезой. Этот фермент катализируе г гидролиз внутренних фосфодиэфирных связей в двунитевых и однонитевых ДНК. При кратковременной обработке ДНК этим ферментом, проведенной так, чтобы в среднем на каждую молекулу ДНК пришелся одш разрыв, расщепление приводит к образованию фрагментов самой разнообразной длины, легко регистрируемых с помощью гель-электрофореза. При такой же обработке комплекса ДНК с белком расщепления в участках, экранирован 1ых белковой молекулой, не происходит и фрагменты соответствующей длины на электрофореграмме не обнаруживаются. На рис. 94 в качестве примера приведен результат исследования с помощью футпринтинга фрагмента ДНК с ферментом РНК-полимеразой (см. [c.324]

Необходимые при новом подходе к изготовлению искусственных пищевых изделий из пищевых и съедобных полимеров физико-химические исследования приобрели несколько иной характер в соответствии с поставленными задачами и этим вносят в физико-химию полимеров свой вклад. В качестве примера можно привести влияние макроскопической структуры белка на кинетику его протеолити-ческого расщепления ферментами желудочно кишечного тракта 37, 38. [c.313]

Расщепление ферментных белков протеолитическими ферментами чаще всего ведет к потере активности. Однако не менее чем в четырех случаях удалось отщепить заметную часть белка без значительных изменений активности. Так, при автолизе пепсина были найдены низкомолекулярные (диализируемые) пептиды, сохранившие часть активности. От молекулы папаина было отщеплено 109 аминокислотных остатков из 185, причем активность сохранилась. Подобный же результат был получен при частичном гидролизе фосфопируват-гидратазы (с помощью лейцин-амино-пептидазы с N-конпа) и т. д. Подобные эксперименты, несомненно, позволят подойти к выделению и расшифровке активных участков ферментных белков. [c.76]

Протеазы выделяют из животных и растительных тканей, плесневых грибов и бактерий. Среди многих ферментов (эндопептидаз), которые расщепляют внутренние пептидные связи, только трипсин, химотрипсин и пепсин обладают достаточной специфичностью действия, чтобы при их помощи можно было регулировать расщепление белков. Другие ферменты, такие, как субтилизин, протеазы плесневых грибов и бактерий, более пригодны для последующего расщепления больших фрагментов. Лейцинаминопептидазу и кар-боксипептидазу (экзопептидазы) применяют для отщепления Ы- и соответственно С-концевых аминокислот (см. стр. 181 и 187). [c.119]

Гидролиз белка можно проводить и при помощи протеолити-ческих ферментов. Хотя ферментативный гидролиз белка протекает при очень мягких условиях, он редко применяется для препаративных целей, так как для полного гидролиза требуется очень много времени. Недочетом этого метода является и то, что гидролизаты загрязняются продуктами расщепления фермента, который также представляет собой белок. [c.24]

B более ранних работах я показал, что восстановление нитратов и красителей в тканях животного организма обусловливается одновременным действием фермента и кофермента, не оказывающих в отдельности никакого действия. В свежем молоке этот фермент существует без кофермента и вызывает совместно с коферментом, извлеченным из тканей или с альдегидами, такие же восстановительные реакции, как и в тканях. Кофермент может быть извлечен из тканей кипящей водой. Он находится также и в продажных пептонах и в белках, расщепленных до аминокислот. Последние исполняют роль кофермента только постольку, поскольку из них образуются альдегиды по реакции, аналогичной открытой в 1862 г. Штре-кером (действие аллоксана на аминокислоты) [c.513]

Генетика человека и медицинская генетика. Генетика человека - обширная наука с неопределенными границами. Развитие различных подходов и методов привело к появлению множества отдельных специальных разделов этой науки. Многие из них перекрываются и не являются единственными в своем роде. Биохимическая генетика человека включает биохимию нуклеиновых кислот, белков и ферментов у здоровых и больных людей. Здесь применяются методы исследований, используемые биохимиками и молекулярными биологами (хроматография, анализ ферментов, расщепление ДНК рестриктазами). Цитогенетика человека занимается изучением хромосом человека в норме и патологии. Иммуногенетика человека-это в значительной мере генетика групп крови и тканевых антигенов, например, типа НЕА. Формальная генетика изучает наследование менделевских признаков и исследует более сложные типы наследования у человека с помощью статистических методов. Клиническая генетика решает задачи диагности- [c.17]

Определение С-концевой аминокислоты (или последовательности аминокислот) при помощи карбоксипептидаз состоит из расщепления пептида (белка) соответствующим ферментом (смесью ферментов) и отбора аликвот анализируемого раствора [c.507]

Процесс прорастания спор также связан с деятельностью протеиназ. В спорах Вас. megaterium уже в течение первых 20 мин прорастания пятая часть всех белков деградирует до свободных аминокислот, которые используются затем для образования биосинтетических ферментов. Расщепление споровых белков осуществляется протеиназами, которые синтезируются при спорообразовании, сохраняются в покоящихся спорах и обнаруживают высокую специфичность к споровым белкам. После деградации споровых белков эти ферменты, в свою очередь, подвергаются протеолизу. [c.56]

Крайне важный аспект, выявленный при генетическом анализе данных, представленных в табл. 19, заключается в том, что изменчивость линий во всех случаях оказалась генотипической и монофакториальной. Иными словами, изменчивость каждого белка и фермента была обусловлена расщеплением аллелей в одном локусе. Этот факт — краеугольный камень метода. Он позволяет нам вычислить частоты аллелей в каждом локусе, а отсюда — гетерозиготность популяции и, что еще более важно, приравнять в первом приближении каждый неизменяющийся белок к какому-либо неизменяющемуся локусу. Если мы не сможем установить такую связь, то вся процедура становится бесполезной для оценки доли полиморфных локусов и величины существующей в популяции гетерозиготности на один локус, так как число моноглорфных локусов останется неизвестным. Поэтому необходимо проводить генетический анализ, особенно принимая во внимание тот факт, что в экспериментальных условиях незначительные вариации в некоторых случаях могут вызвать изменение электрофоретической подвижности и таким образом скрыть или имитировать генотипическую изменчивость (Джонсон, 1971). [c.119]

Для определения полной аминокислотной последовательности -белка должны быть использованы по крайней мере два различных типа частичного гидролиза с тем, чтобы установить структуру бел--ка методом перекрывающихся пептидов. В качестве иллюстрации -Ниже приведен некий гипотетический вариант расщепления полипептидной цепи места расщепления белка одним ферментом, в результате которого образуются пептиды I—VI, показаны стрел- камн [c.178]

Одним из наиболее исследованных семейств ферментов являются сери-нопротеазы. Все они предназначены для расщепления полипептидньгх цепей белков по механизму, в котором участвует боковая цепь аминокислоты серина (— Hj—ОН), находящейся в активном центре фермента. Три такие протеазы (трипсин, эластаза и химотрипсин) синтезируются в поджелудочной железе и вьщеляются ею в кишечник, где они превращают содержащиеся в пище белки в аминокислоты, способные всасываться через стенки кишечника. Благодаря возможности легко изолировать эти ферменты и их сравнительно высокой устойчивости их удалось интенсивно исследовать химическими способами еще до того, как стало возможным проведение рентгеноструктурного анализа белков. В настоящее время биохимический и рентгеноструктурный анализы позволили установить достаточно ясную картину функции этих ферментов, иллюстрирующую два аспекта действия любых ферментов каталитический механизм и специфичность к субстрату. [c.318]

Активность различных ферментов, а также специфика происходящих в тканях биохимических процессов тесно связаны с определенными довольно узкими интервалами pH. Например, пепсин желудочного сока активен при pH = 1,5—2,0 содержащийся в слюне птиалин, ускоряющий процесс осахаривания крахмала, наиболее активен при pH = 6,7, т. е. почти в нейтральной среде. В зависимости от pH среды ферменты могут катализировать совершенно различные реакции. Так, тканевые катепсииы при реакции среды, близкой к нейтральной, катализируют синтез белка, а при кислой реакции его расщепление. При отклонении величины pH от оптимальных значений активность ферментов, как показывает опыт, сильно снижается нли даже вовсе прекращается, что в конечном итоге приводит организм к гибели. [c.205]

Фибриллярные, или волокнистые, белки (от латинского с гова ЬгШа — волокно) состоят из макромолекул в виде тонких вытянутых нитей, обычно соединенных между собой. В эту группу входят белки, являющиеся составными частями кожи и сухожилий (коллаген, желатин), волоса и рога (кератин), мышц (миозины) и др. В организме они выполняют в основном механические функция, хотя некоторые из фибриллярных белков обладают и биологической активностью. Так, названный выше миозип является ферментом он расщепляет аденазинтрифосфорную кислоту (АТФ), которая обладает большим количеством энергии, выделяемой при ее расщеплении. [c.338]