Жидкостная хроматография на связанных фазах

В [19] исследован механизм удерживания СбО и С70 и высших фуллеренов при разделении методом жидкостной хроматографии с использованием модифицированных хроматографических неподвижных фаз с различными химически связанными алкильными группами. Показано важное значение поверхностной структуры связанных фаз. [c.39]

Во многих колонках для ЖХ эффекты в подвижной фазе преобладают над эффектами в неподвижной. Если вызываемый диффузией в застойной подвижной фазе дополнительный вклад в уширение полосы мал (1.25), Н не зависит от к [27]. Но когда эти процессы уширения важны, Н зависит от к, даже если эффекты массопереноса в неподвижной фазе отсутствуют [10]. Кроме того, характер зависимости Я от и указывает на то, что высокие линейные скорости подвижной фазы могут быть использованы без значительного понижения эффективности колонки. После рассмотрения принципов оптимизации времени (этому вопросу посвящен следующий раздел) мы детально обсудим характерные особенности жидкостной хроматографии, связанные с высокоскоростным разделением все эти особенности нашли отражение в уравнении уширения (1.24). [c.29]

Третий член учитывает скорость доставки вещества в объем жидкой фазы или в поры твердого сорбента. Для газо-жидкостной хроматографии он связан с коэффициентом диффузии вещества в жидкости. В случае применения вязких жидкостей и достаточно низких температур этот член уравнения (38) может играть решающую роль в размывании. [c.30]

Фронтальный метод впервые был описан Тизелиусом (1940) для жидкостной хроматографии, а Джеймсом и Филлипсом (1953) был внедрен в газовую хроматографию. Проба непрерывно подается в колонку. После заполнения колонки сначала из нее выходит наименее прочно связанный с неподвижной фазой компонент данной смеси. При дальнейшем пропускании пробы из колонки выходит также второй компонент, ближайший к первому по своему сродству с неподвижной фазой, так что из колонки выходит двухкомпонентная смесь. Постепенно к ней присоединяются другие компоненты, пока, наконец, через колонку не будет протекать задаваемая смесь первоначального состава. Этот метод успешно используется для очистки больших количеств смесей от следов сильно адсорбируемых примесей. [c.17]

Более детальный анализ зависимости (4.55) пока не представляется возможным, и дальнейшие исследования в этом направлении, несомненно, потребуют проведения целенаправленных систематических экспериментов. В то же время, по нашему мнению, уравнения (4.52) и (4.55) относятся к числу наиболее общих закономерностей жидкостной хроматографии с бинарными подвижными фазами. Они должны соблюдаться во всех системах, где определенные множества сорбатов взаимодействуют с поверхностью по одному и тому же вытеснительному механизму. Подобное явление наблюдается и при хроматографии на полярных химически связанных неподвижных фазах. В качестве дополнительных примеров, подтверждающих сказанное, мы включили в табл. 4.28 также данные, полученные в условиях тонкослойной хроматографии на окиси алюминия и полиамидном сорбенте. [c.144]

Многие органические соединения с большой молекулярной массой, особенно биополимеры, перевести в газовую фазу затруднительно или вообще невозможно. Удовлетворительного разделения смесей таких соединений с помощью обычной, жидкостной распределительной хроматографии получить не удается из-за неоднородности неподвижной фазы и неламинарного характера движения подвижной фазы, связанных с большим диаметром колонок. Для разделения таких соединений применяется жидкостная хроматография высокого давления (молекулярная жидкостная хроматография). Она представляет собой дальнейшее развитие колоночной распределительной хроматографии и в отличие от последней позволяет проводить разделение микроколичеств веществ с высокой степенью эффективности в течение короткого времени. [c.135]

Жидкостная хроматография. При определении констант устойчивости методом жидкостной хроматографии раствор, в котором находятся металл и лиганд, вводят в колонку и элюируют раствором, содержащим либо избыток металла [109], либо избыток лиганда [ПО]. Если в качестве подвижной фазы используется раствор металла, то на хроматограмме наблюдаются два пика, соответствующие свободному металлу и металлу, связанному в комплекс. На основании такой информации можно рассчитать константу устойчивости комплекса [109]. В настоящее время этот метод применяют только для исследования систем, в которых образуется комплекс состава 1 1. Если образец элюируется подвижной фазой, содержащей избыток лиганда, то на хроматограмме наблюдается единственный пик. [c.164]

Особый тип наполнителей колонок в жидкостной хроматографии представляют наполнители, на поверхности которых имеются химически связанные или привитые фазы (НСФ). Эти наполнители находят все более широкое распространение в жидкостной хроматографии, хотя в хроматографическом анализе нефтепродуктов применяются пока мало. [c.66]

ТАБЛИЦА 19. Носители с химически связанными фазами для жидкостной хроматографии [3, 5] [c.68]

Носители с химически связанными фазами используют для анализа нефтепродуктов методом высокоэффективной жидкостной хроматографии. [c.70]

Вопросы селективности жидкостной хроматографии удобно рассматривать в связи с химической природой разделяемых веществ. С этой целью, пользуясь статистической теорией бинарных растворов Гильдебранда и Скетчарда [10], выразим коэффициент распределения через энергию межмолекулярного взаимодействия компонентов раствора, связанную с их химическим строением. Рассмотрим систему, состоящую из компонента 1 и двух не-смешивающихся растворителей 2 и 3, образующих две фазы [c.279]

Г. X. нримен. для физ.-хим. исследований и измерени физ.-хим. констант, в частности для определения изотер адсорбции, уд. пов-сти адсорбентов, констант Генри, тепло ты адсорбции при малых заполнениях нов-сти, энергии водородных связей и пр. На основе констант Генри методами Г. X. можно исследовать влияние структуры молекул ш межмол. взаимод., а в ряде случаев изучать структуру сложных молекул (хроматоскопия). Г. х. имеет ряд преимуществ перед газо-жидкостной хроматографией, связанных в осн. ( более высокой термич. стабильностью тв. неподвижно) фазы по сравнению с жидкой. [c.114]

Полярные носители со связанными фазами (НСФ) используют при обычном нормально-фазовом разделении таким же образом, как адсорбенты в жидкостно-адсорбционной хроматографии (например, силикагель). На НСФ хорошо разделяются образцы средней и высокой поляр-носги. Обращекко-фазовую хроматографию проводят на относительно неполярной стационарной фазе, содержащей, например, алкилы С или С18, с использованием очень полярной (например, водной) подвижной фазы. Таким образом разделяют обычно менее полярные соединения. Разделение на носителях с химически связанными фазами происходит так же, как и в жидкостно-жидкостной хроматографии, т. е. на основе типа и числа функциональных групп в молекуле разделяемого вещества. [c.66]

Важной разновидностью хроматографической колонки является капиллярная колонка, представляющая собой длинный капилляр, свернутый в спираль. При газо-жидкостной хроматографии неподвижная жидкая фаза наносится непосредственно на стенкн капилляра. Колонка, наполненная зернистым носителем, является по существу системой связанных между собой капилляров разных диаметров, разной длины и формы, образованных каналами между зернами носителя и между этими зернами и стенками трубки. Очевидно, что выход компонента из такого набора параллельных, не строго одинаковых капилляров будет происходить через несколько различаюи иеся промежутки времени, что приведет к некоторому расширению хроматографиче- [c.549]

Механизм распределения компонентов смеси между фазами может быть различным по этому признаку различают адсорбционную и распределительную (различная растворимость в неподвижной жидкой фазе) хроматографию. Механизм распределения непосредственно связан с агрегатным состоянием подвижной и неподвижной фаз различают газовую или газоадсорбционную хроматографию (подвилшая фаза — газ, неподвижная — твердое тело, механизм — адсорбционный), га-зонсидкостную (подвижная фаза — газ, неподвижная — вы-сококипящая жидкость, механизм распределительный), жидкостную (подвижная и неподвижная фазы — жидкости, механизм распределительный). Два первых типа хроматографии наиболее широко применяются в современной аналитической практике, особенно для анализа сложных органических смесей. Способы размещения неподвижной жидкой фазы также разнообразны. Наиболее широко распространенный, классический способ — колоночная хроматография. Стеклянная или металлическая колонка наполняется слоем однородных по раз- [c.232]

Что касается самого процесса ТСХ, то здесь можно усмотреть далеко идущую аналогию с жидкостной хроматографией на колонках. Неподвижную фазу образует н идкость, связанная со слоем фиксированного на подложке гранулированного сорбента, свойства и характеристики которого близки, а иногда даже идентичны таковым для материалов, используемых в качестве носителей неподвижной фазы в колоночной хроматографии. Здесь используются те же производные целлюлозы или силикагеля, к которым надо добавить только полоски ацетилцеллюлозы. Подвижную фазу образует жидкий элюент с аналогичными, рассмотренным ранее свойствами. Неизменной остается и сущность хроматографического процесса, базирующегося на равновесном распределении вещества между неподвижной и подвижной фазами. Как и в любом хроматографическом процессе (гель-фильтрация в тонком слое была рассмотрена в гл. 4), для целей хроматографического фракционирования это распределение должно быть сильно сдвинуто в пользу неподвижной фазы. Из всех вариантов хроматографпп для разделения компонентов белков и нуклеиновых кислот методом ТСХ (сами биополимеры очень редко выступают здесь в качестве объектов) практически пспользуют только два нормальнофазовую распределительную и ионообменную. [c.458]

Интенсивные исследования последних десятилетий, громадный объем накопленных экспериментальных данных позволяют сегодня уже говорить о классификации вариантов в рамках метода высокоэффективной жидкостной хроматографии. Конечно, при этом остается в силе классификация по механизму сорбции, приведенная выше. Однако часто в литературе по ВЭЖХ используются и другие классификация и терминология, не всегда до конца логичные. Так, в соответствии с типом сорбента можно различать хроматографию в системах жидкость— твердое тело, распределительную, на химически связанных неподвижных фазах. Часто, в особенности в зарубежной литературе, хроматографию на твердых адсорбентах относят к адсорбционной. Как показали исследования, ставить знак равенства между этими двумя терминами нельзя, так как не всегда именно поверхность твердого адсорбента ответственна за удерживание — зачастую главную роль играет адсорбированный на йей слой компонентов подвижной фазы (хроматография на динамически модифицированных сорбентах). С другой стороны, сорбция на химически связанных неподвижных фазах часто имеет обычный адсорбционный механизм. [c.15]

Б. Содержание компонентов блеомицина. Проводят определение, как описано в разделе Высокоэффективная жидкостная хроматография дополнений к т. 1, используя колонку высотой 25 см и внутренним диаметром 4.6 мм, заполненную частицами силикагеля 5—10 мкм в диаметре, поверхность которых модифицирована химически связанными октадецилсилильными группами. Линейный градиент подвижной фазы начинается смесью 9 объемов 1-пентансульфоновой кислоты ИР и 1 объема метанола Р (оба вещества предварительно фильтруют и дезаэрируют) и заканчивается с.месью 6 объемов 1-пентаисульфоновой кислоты ИР [c.55]

Б. Содержание компонентов блеомицина. Проводят определение, как описано в разделе Высокоэффективная жидкостная хроматография дополнений КТ. 1, используя колонку высотой 25 см и внутренним диаметром 4,6 мм, заполненную частицами силикагеля 5—10 мкм в диа.метре, поверхность которых модифицирована химически связанными октадецилсилильными группами. Линей.ный градиент подвижной фазы начинается смесью 9 объемов 1-.пентаисульфоновой кислоты ИР и 1 объема метанола Р (оба вещества предварительно фильтруют и дезаэрируют) и заканчивается смесью 6 объемов 1-пентапсульфоновой кислоты ИР и 4 объемов метанола Р подбирают такую линейную скорость изменения состава подвижной фазы, которая обеспечивает достижение окончательного состава через 60 мин. (При необходимости, для получения удовлетворительных результатов хроматографии к подвижной фазе добавляют 1,86 эдетата динатрия Р на [c.60]

Применяя методику Генри [40] (см. разд. II, Г этой главы), Фитцпатрик с сотр. [73] усовершенствовал высокоскоростную жидкостную хроматографию производных 17-кетостероидов мочи (2,4-динитрофенилгидразонов). В хроматографии с обычным расположением фаз авторы применяли в качестве неподвижной фазы зипакс, пропитанный 0,75—1,5% оксидипропионитрила, и в качестве подвижной фазы — изооктан в хроматографии с обращенными фазами в качестве неподвижной фазы применялся корасил с прочно связанным С18-силаном и в качестве подвижной фазы водный этанол (1 1). При этом достигали хорошего разделения всех четырех эпимерных форм андростерона и их отделения от других производных андростана, а также примесей (из мочи и плазмы крови). Время, необходимое для разделения, равнялось приблизительно 0,5 ч при точности, эквивалентной относительному стандартному отклонению 10% на микрограмм и ниже. [c.229]

Конкретный вид уравнения (И.1) определяется характером процессов, протекающих в слое. В упомянутой выше статье Пето [17] рассматривался случай газо-жидкостной хроматографии. При этом принималось, что скорость процесса в целом лимитируется кинетикой поглощения на поверхности раздела газообразной и жидкой фаз и диффузией поглощенного вещества внутри жидкой фазы. Разобраны две конкретные модели распределения жидкости на поверхности твердого тела — в виде равномерной пленки и в виде капелек жидкости. Укажем, что такими же уравнениями можно описать и случай газоадсорбционной хроматографии. Для этого можно предположить, что твердое тело представляет собой однородную среду, в которой после адсорбции на поверхности происходит диффузия молекул внутрь. Подобная модель не вскрывает реального механизма поглощения газов твердыми телами, однако она позволяет упростить расчеты. В дальнейшем мы остановимся на более детализированной модели, связанной с конкретным механизмом поглощения газа твердым телом. [c.89]

Первоначально НСФ стали разрабатьтать с целью устранения одного из основных недостатков жидкостной распределительной хроматографии малой стабильности жидкой стационарной фазы, уноса ее подвижной фазой. В дальнейшем обнаружилось множество достоинств НСФ. Эти носители стабильны, при их применении не требуются специальные приемы работы (например, использование форколонки или насьпцение подвижной фазы жидкостью, применяемой в качестве неподвижной фазы). Б то же время они обладают высокой селективностью, и выбор их значительно более разнообразен, чем выбор адсорбентов в адсорбционной хроматографии. Носители с химически связанными фазами особенно пригодны для разделения образцов, содержащих соединения с сильно различающимися значениями к, т. е. образцов, для разделения которых необходимо градиентное элюирование. Большое разнообразие функциональных групп, которые могут быть введены в НСФ, позволяет относительно просто проводить как обычную, так и обращенно-фазовую хроматографию. (Напомним, что в обычной жидкостной распределительной хроматографии неподвижная фаза более полярна, чем подвижная, а в обращенно-фазовой, наоборот, более полярна подвижная фаза.) [c.66]

Варианты газовой хроматографии — газо-жидкостная и газоадсорбционная хроматографии — имеТют свои преимущества и недостатки, поэтому выбор наиболее эффективного способа анализа в каждом случае определяется характером конкретной задачи. Так, в начальный период развития газовой хроматографии анализировали только газы и легколетучие жидкости на колонках с сильными адсорбентами. Переход к газо-жидкостной хроматографии способствовал уменьшению коэффициента распределения Г для более тяжелых. сорбатов, в результате чего появилась возможность анализировать их хроматографическим методом. Использование неподвижных жидкостей самой разнообразной химической природы сделало газожидкостную хроматографию универсальным методом, позволяющим осуществлять разделение на основе различных видов физико-химических взаимодействий между сорбатами и растворителями. Кроме того, линейность изотерм растворения обеспечивала получение практически симметричных пиков сорбатов (при правильном подборе условий процесса). Однако существенные ограничения, связанные с летучестью неподвижных жидкостей, не позволяли проводить высокотемпературные процессы разделения высококипящих веществ ни в аналитическом, ни в препаративном вариантах. Поэтому дальнейшее развитие газо-адсорбционной хроматографии с применением однороднопористых адсорбентов различной химической природы было необходимо для обеспечения дальнейших успехов газовой хроматографии как метода анализа и исследования высококипящих соединений. Кроме того, используя высокочувствительные детекторы для определения микропримесей, можно не опасаться неблагоприятного влияния испарения неподвижной фазы на характеристики детектора. [c.33]

Еще одно важное достижение семидесятых годов — применение химически привитых фаз. Это пористые силикагели, поверхность которых покрыта ковалентно связанными органическими молекулами, содержащими кремний (органосил анами). Особенно важное значение приобрели силикагели с углеводородными прививками типа н-октильных или н-октадецильных радикалов. Они делают поверхность силикагеля похожей на органический растворитель. В качестве подвижной жидкой фазы в сочетании с такими привитыми неподвижными фазами обычно применяют смесь органического растворителя с водой. При помощи такой обращеннофазовой хроматографии в настоящее время осуществляют больще половины всех экспериментов в высокоэффективной жидкостной хроматографии. Этот метод особенно хорошо подходит для разделения соединений, хотя бы отчасти растворимых в воде (лекарственные средства, биохимические препараты, ароматические соединения и т.п.). [c.242]

В газо-жпдкостпой хроматографии в качестве носителя применяются макропористые вещества. Требуется, чтобы носитель смог впитать в себя и удержать достаточное количество растворителя (неподвижная фаза). В качестве таких веществ у нас используются различные марки кирпича (ипзепский, апрелевский и др.). Микропористость носителя нежелательна, так как она приводит к сорбционной активности и связанным с ней размыванием полос. Носитель обычно обрабатывают раствором неподвижной фазы в летучем растворителе (например, эфире), который затем испаряется. Количество наносимой неподвижной фазы колеблется в широких пределах — от 0,1 до 30—40% веса посптеля. Число растворите.лей, используемых в газо-жидкостной хроматографии, превышает сотню. К ним относятся малополярные вещества — вазелиновое масло (разделение углеводородов), сквалап (разделение углеводородов, спиртов, кетонов, эфиров), динонилфталат (разделение фенолов, спиртов, галоидопроизводных), силиконовое масло и смазка апие-зон (разделение высококипящих веществ), диметилформамид (разделение изомеров) и др. [c.315]

Химически связанные фазы применяются в основном в современной высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) в виде обращенных фаз , когда неподвижная фаза неполярна, а подвижная — полярна, а в самое последнее время — в распределительной ион-парной хроматографии, которая позволяет анализировать как ионизированные, так и неионизиро-ванные соединения. Использование химически связанных фаз относительно ограничено по той причине, что, во-первых, не совсем ясен механизм разделения и нельзя предсказать параметры удерживания, во-вторых, при разделении на указанных фазах главную роль играют адсорбционные явления и теряются преимущества газо-жидкостной хроматографии. [c.239]

Роль твердой неподвижной фазы в газоадсорбционной хроматографии (ГАХ) или газо-твердофазной хроматографии выполняют частицы адсорбента. В то время как в газо-жидкостной хроматографии (ГЖХ) процесс разделения определяется в основном равновесием между процессами растворения и испарения разделяемых веществ, в ГАХ он связан с равновесием между адсорбцией и десорбцией. [c.296]

Кроме загрязнения неподвижной фазы отбираемых фракций в газо-жидкостной хроматографии наблюдается также смывание ее с начального участка колонны большими дозами разделяемой смеси. Это вызвано тем, что в большинстве хроматографов испаритель перегревается и на начальном участке колонны происходит частичная конденсация разделяемых веществ . Исследовали колонны диаметром 3 10 и 100 мм, дозируя разные количества метилкаприлата. После ввода больших доз эффективность колонны значительно уменьшилась. Наибольшее снижение эффективности вызывали первые дозы, после чего эффективность асимптотически приближалась к постоянному значению, экспоненциально связанному с величиной пробы. В конце опытов колонну разрезали и в каждой части определяли углерод, с целью установления содержания неподвижной фазы. Эти опыты показали, что начальный участок колонны чрезвычайно обеднен неподвижной фазой, за ним следует область чрезмерно высокого ее содержания, наконец, вторая половина колонны сохраняет исходное содержание фазы. Первоначально колонна соответствовала 2540 теоретическим тарелкам. После введения пробы общее число тарелок сократилось до 1810. Аналогичные результаты получились при вводе других веществ, например додекана. [c.178]

Настоящая работа посвящена изучению распределения твердой неподвижной фазы на носителе и связанным с этим вопросом эффективности колонок. Известно, что в газо-жидкостной хроматографии при наличии адсорбции зависимость удельного объема удерживания от количества неподвижной фазы описана уравнением Пернелла-Березкина [4—5]. Можно представить два механизма распределения твердой фазы на поверхности инертного носителя, при которых это уравнение окажется правильным и для адсорбции на поверхности твердой неподвижной фазы. [c.16]

В жидкостной, а иногда и в газовой хроматографии очень часто применяют химически связанные фазы. Такие фазы нельзя отнести ни к жидким, ни к твердым. Для обозначения жидкостной хроматографии на таких фазах обычно употребляют термин хроматография на связанной фазе [1]. По логике вещей в названии хроматографической системы вначале указывается подвижная, а затем неподвижная фаза. Так, ЖСФХ — это жидкостная хроматография на химически связанных неподвижных фазах. [c.31]