Гидрофобная хроматография применение

Примеры применения гидрофобной хроматографии [c.184]

Область применения тонкослойной хроматографии практически безгранична, что объясняется возможностью большого выбора слоев различных сорбентов. Для разделения полярных веществ применяют слои адсорбентов, для гидрофильных — распределительную хроматографию на целлюлозе или силикагеле, для гидрофобных — импрегнированные слои (обращенные фазы). Можно применять также ионообменную или гель-хроматографию в тонком слое. Метод тонкослойной хроматографии в настоящее время применяют в основном для целей качественного анализа. Количественное определение возможно в такой же степени, как и в бумажной хроматографии. При проведении определений можно работать с очень небольшими количествами веществ, разделение проходит быстро и с умеренными затратами. Тонкослойную хроматографию в связи с этим можно применять для предварительных опытов по выбору фаз для разделения больших количеств веществ методом колоночной хроматографии. [c.361]

При решении первой задачи особенно привлекательна возможность использования аддитивного расчета логарифмов коэффициентов распределения, который в настоящее время разработан лучше, чем непосредственные аддитивные расчеты коэффициентов емкости. С другой стороны, применение хроматографии открывает новые возможности для измерения коэффициентов распределения, в особенности гидрофобных соединений либо веществ, недоступных в чистом виде. Решение обеих задач базируется на линейной зависимости между логарифмами коэффициентов распределения и коэффициентов емкости [c.72]

Показано использование системы адсорбционного концентрирования в схеме серийного газового хроматографа. В качестве набивки концентратора рассмотрены три типа гидрофобных адсорбентов активные угли, полимерные адсорбенты и модифицированная сажа. Выявлены преимущества и недостатки каждого вида адсорбента. Показано наиболее перспективное применение модифицированной сажи, обладающей высокой термической стабильностью, высокой механической прочностью и невысоким адсорбционным потенциалом. [c.197]

И подобных методах применение колонок со смолами распространяется на несколько большее число более гидрофобных соединений. Однако тот факт, что кривые зависимости log С от концентрации органического растворителя сходятся при высоких концентрациях (разд. Г.1), ограничивает применимость растворяющей хроматографии. Например, для растворения спиртов выше н-амилового потребовалась бы 6 М уксусная кислота но в этом растворителе значения С для спиртов различаются так незначительно (рис. 48), что разделение их становится невозможным. [c.255]

Носитель неподвижной фазы должен обладать достаточно развитой поверхностью, быть химически инертным, прочно удерживать на своей поверхности жидкую фазу и не растворяться в применяемых растворителях. В качестве носителей используют вещества различной химической природы гидрофильные носители — силикагель, целлюлоза и др. и гидрофобные — фторопласт, тефлон и другие полимеры. Успешно развивается применение в жидкостно-жидкостной распределительной хроматографии высокого давления. [c.348]

Данные по хроматографии самого антрахинона, его алкилпроизводных и родственных соединений приводятся всего в нескольких работах. При хроматографировании с применением в качестве гидрофобных неподвижных фаз 1-бромнафталина , керосина , бензина и в качестве подвижных фаз водных растворов спиртов и органических кислот антрахинон имеет сравнительно небольшие значения 1 (<0,5). В то же время при использовании систем с гидрофильными неподвижными фазами — формамидом или диметилформамидом и гидрофобными подвижными фазами величины указанных соединений чаще обычно >0,5. Это подтверждает двойственный характер антрахинона большое сродство к гидрофобным растворителям и несколько меньшее к гидрофильным растворителям, с которыми он может образовывать комплексы типа [c.128]

По хроматографии оксипроизводных антрахинона имеется весьма обширная литература, включающая, как указывалось выше, некоторые теоретические обобщения относительно связи строения с хроматографическими характеристиками. Прежде всего следует указать, что введение оксигрупп в молекулу антрахинона увеличивает ее полярность и гидрофильность, что должно бы приводить к значительному уменьшению величин при применении обычных хроматографических систем и их увеличению в системах с обращенными фазами. Однако такие простые зависимости характерны только для Р-оксипроизводных антрахинона. Различное поведение оксипроизводных а- и Р-рядов в настоящее время объясняют тем, что а-изомеры могут образовывать внутримолекулярные водородные связи с карбонильными группами антрахинонового ядра, что уменьшает способность этих соединений к взаимодействию с гидрофильными элюентами и неподвижными фазами за счет водородных связей и увеличивает их сродство к гидрофобным фазам. В результате этого [c.129]

Гептахлор определяется в воде при помощи бумажной хроматографии с обращенными фазами после предварительного выделения путем экстракции эфиром. Необходимость применения бумажной хроматографии с обращенными фазами обусловливается резко выраж енным гидрофобным характером гептахлора. Подвижным растворителем служит 70%-ный водный раствор ацетона. Неподвижный растворитель — касторовое масло. [c.75]

Гель-хроматография, как представляется на первый взгляд, должна быть идеальным методом отделения полимеров и определения их характеристик. Однако большинство известных сорбентов, применяемых в гель-хроматографии, для решения зтой задачи не подходят. На поверхности гелей сефадекса имеются вицинальные гидроксильные группы, которые в нейтральной среде легко образуют комплексы с ионами большинства металлов (типичным соединением этого типа является глицерат железа Британской фармакопеи). Поэтому при применении в больших концентрациях эти ионы дают хвосты , а при малых концентрациях полностью адсорбируются. На поверхности пористых стекол и пористого силикагеля (и их производных) обычно располагается значительное число силанольных групп, которые также энергично взаимодействуют с мономерными и полимерными ионами металлов. Тем не менее методом гель-хроматографии удается разделить гидролизуемые полимерные соединения некоторых металлов, например рутения [12], родия (III) i[13], и растворимые ферроцианиды [14—16]. Характер перемещения небольших мономерных ио ов внутри сорбента, применяемого для гель-хроматографии, в значительной степени определяется ионным обменом с остаточными карбоксильными группами (благодаря которым происходит вытеснение ионов) и гидрофобной адсорбцией, особенно сильной на сефадексе LH-20, при использовании которого, кроме того, может наблюдаться эффект высаливания [17]. [c.328]

Рис. 15. Различные гомологические ряды производных алкил-агарозы (ЗерЬ-Сп-Х), которые могут использоваться в гидрофобной хроматографии. Дополнительные ряды могут быть образованы при применении других функциональных групп, введении функциональной группы в различные положения углеводородной цепи или получении цепи, содержащей несколько функциональных

Стандартные белковые образцы могут также использоваться для выяснения количественного выхода белка при обратнофазовой хроматографии. Применение для этих целей метилированной (метил- С) карбоангидразы (New England Nu lear) показало, что выход этого относительно гидрофобного белка при хроматографии на колонке Vyda С-18 составляет 100%, причем в случае карбоангидразы полнота выхода практически не меняется при внесении в колонку от 50 нг до 2 мг белка (разд. V, Б, 7, в). Регистрируемое детектором количество элюированного белка линейно возрастало в зависимости от массы внесенного препарата, что подтверждалось аминокислотным анализом (рис. 6-5). Однако такие гидрофобные белки, как овальбумин, часто элюируются с меньшей эффективностью (выход <80%). [c.120]

Иная ситуация имеет место при проведении эксклюзионной хроматографии в водных средах. Из-за специфических особенностей многих разделяемых систем (белки, ферменты, полиэлектролиты и др.) и разнообразия применяемых сорбентов существует очень много вариаций состава подвижной фазы для подавления различных нежелательных эффектов [34, 35]. Общими приемами модификации является добавка различных солей и применение буферных растворов с определенным значением pH. В частности, поддержание рН=<4 дает возможность подавить слабую ионообменную активность силикагелей, обусловленную присутствием на их поверхности кислых силанольных групп. Требуемая ионная сила подвижной фазы достигается при концентрации буферного раствора 0,05-0,6 М оптимальную концентрацию подбирают экспериментально. Для предотвращения ионообменной сорбции катионных соединений наиболее часто используют такой активный модификатор, как тетраметиламмонийфосфат при рН=3. Однако при разделении некоторых белков могут проявляться гидрофобные взаимодействия, в свою очередь осложняющие эксклюзионный механизм разделения. Те же эффекты иногда проявляются и при работе с дезактивированными гидрофильными сорбентами. Для их устранения к растворителю добавляют метанол. Иногда в водную подвижную фазу вводят полярные органические растворители, полигликоли, кислоты, основания и поверхностно-активные вещества. [c.48]

В качестве сорбентов для И. х. могут использоваться нейтральные носители, пропитанные жидкими ионитами, т.е. несмещиваюшимися с водой орг. основаниями или к-тами, напр, триоктиламином, триоктилметиламмонием, алкиловыми эфирами алкилфосфорной к-ты. Разбавленные р-ры ионогенных ПАВ в сочетании с нейтральными гидрофобными носителями находят применение в ион-парной хроматографии (см. Жидкостная хроматография), к-рая отличается высокой эффективностью и большим числом варьируемых параметров для подбора оптим. селективности разделения. [c.264]

Как уже упоминалось выше, наибольшее применение в ВЭЖХ находят сорбенты с привитыми алкильными группами. Фирмы выпускают сотни типов таких сорбентов. Для правильного выбора сорбентов для обращенно-фазо-вой хроматографии предложены разные системы оценок, по одной из них проводят измерения эффективности, факторов удерживания, гидрофобности, стерической селективности, оценки водородной связи, оценки ионообменной емкости при разных значениях pH элюента. В табл. 4.1.48 приведено описание этих параметров, а в табл. 4.1.49 по этим параметрам сопоставлены наиболее известные коммерческие сорбенты i8. [c.312]

В индивидуальном состоянии интерлейкин 2 человека удалось получить на основе использования метода хроматографии высокого давления на обращенной фазе и применения моноклональных антител. Он представляет собой сравнительно небольшой гидрофобный белок, содержащий 133 аминокислотных остатка (рис. 129). Аминокислотная последовательность интерлейкина 2 человека определена по структуре соответствующего гена (Т. Танигучн, 1983) [c.228]

Применение блоков пористого фторопласта-4 позволило успешно решить важную проблему препаративной хроматографии — осуществление непрерывного хроматографического процесса [213— 216]. Для этого кольцо из пористого фторопласта-4 горизонтально размещают между ограничивающими его стенками. С внутренней поверхности кольца с ним контактирует скользящий датчик элюентов, с внешней — скользящий приемник элюатов, изготовленные из монолитного фторопласта-4, гидрофобность которого обеспечивает герметичность скользящих контактов по отношению к водным растворам. При вращении кольца-носителя неподвижной фазы каждый из компонентов разделяемой смеси движется в слое носителя по траектории, определяемой скоростью вращения, скоростью потока и коэффициентами распределения. При постоянстве этих величин остается постоянной форма и длина траектории каждого компонента, т. е. расстояние от окна датчика исходного раствора до соответствующего приемника. [c.229]

Среди других работ можно назвать работу [103], посвященную разделению двух ранее неизвестных желчных кислот из желчи крыс с применением хроматографии на целите в системе жидкость—жидкость, синтетическую работу [104] с применением окиси алюминия низкой активности, изучение метаболизма [105] с применением гидрофобного целита, а также работу [106], посвященную изучению строения стероидных кислот, выделенных из ephalosporium a remonim, и работу [107], посвященную омылению стероидных кислот под действием ферментов. В последних двух случаях применяли силикагель. [c.242]

ТСХ). В некоторых применениях хроматографии в неорганическом анализе успешно нспользуют полярную подвижную фазу, в качестве которой может служить анализируемый водный раствор или водный элюент. В этом случае менее полярная жидкость, являющаяся неподвижной фазой, удерживается а неполярном (гидрофобном) носителе. Такой процесс типичен для хроматографии с обращенной фазой (известной также под названием экстракционной хроматографии). В распределительной хроматографии органический реагент может использоваться двумя различными способами либо для превращения разделяемых ионов в комплексные соединения, которые затем распределяются между двумя фазами, либо для обнаружения или определения in situ, т. е. непосредственно на бумажной или тонкослойной хроматограмме. Выбор реагента для inepBOiro из этих случаев опирается на соображения, изложенные в разделе, посвященном экстракции, а для второго случая он основывается яа тех же принципах, которые используются при проведении цветной или флуоресцентной пробы и (или) определения. [c.235]

Важным в практическом отнощении примером явилось применение газовой хроматографии для анализа ацетилена и его производных в смеси с высокояолярными веществами — водой и аммиаком. В ходе разработки метода производственного контроля способа получения изопрена из ацетилена и ацетона [10] было осуществлено газо-хроматографическое разделение содержащих ацетон смесей ацетилена с аммиаком, а также водных смесей продуктов селективного гидрирования диметилэтинилкарбинола (рис. 5). При этом были использованы колонки с нолиэтиленгликолем, нанесенным на хлористый натрий [11]. Гидрофобный характер поверхности и низкая адсорбционная способность хлористого натрия обеспечили малое зремя удерживания и удобную для количественной оценки форму пиков воды и аммиака. Химически инертность Na l позволила применить колонки [c.282]

Для хроматографического разделения органических соединений, которые растворимы лучше в малополярных и неполярных растворителях, используется обращенная распределительная хроматография, т. е. хроматография, где в качестве носителя неподвижной фазы применяются вещества, обладающие гидрофобными свойствами. Использование обращенной распределительной хроматографии в аналитической и препаративной практике расширяет область применения распределительной хроматографии. [c.209]

Жидкие ионообменники нашли также применение в качестве неподвижной фазы в хроматографии. Ди-(2-этилгексил)-фосфат оказался эффективным для разделения редкоземельных элементов. Его наносили на кель F (полифтортрихлорэтилен) [91] или диатомит, который делали гидрофобным путем обработки парами дихлордиметилсилана [92, 93]. Для этого фосфат растворяли в летучем растворителе (ацетон или хлороформ), смешивали носитель с этим раствором и затем выпаривали растворитель. На 1,0 г носителя должно приходиться 100 [91, 93] или 200 мг [92] жидкого ионообменника. При заполнении колонки следует принимать специальные меры, чтобы избежать образования пузырьков воздуха и каналов. Сохацка и Сикерски [93] на колонке с различным соотношением ди-(2-этилгексил)-фосфата и диатомита разделяли редкоземельные элементы при вымывании азотной кислотой и вычисляли значения Р (число тарелок на 1 см) для каждой колонки. Для колонок с 50—100 мг ионообменника на 1 г носителя величина Р постоянна и равна 30. При более высоком содержании фосфата Р уменьшалось и достигало 5,1 при 500 мг фосфата на 1 г носителя. [c.312]

Из табл. 1,3 видно, что при анализе всех перечисленных групп реакционноспособных соединений в качестве неподвижных фаз весьма часто используют силиконы. Это не случайно, так как в последнее время наиболее широкое применение в газовой хроматографии нашли кремнийорганические соединения — полиоргано-силоксановые жидкости, эластомеры, каучуки. Кремнийорганические жидкости обладают вязкостью, мало изменяющейся с температурой, и низкой температурой застывания (до —80°С). Поэтому при соответствующей термической тренировке сорбента их можно использовать в широком интервале температур. Все силиконовые жидкости гидрофобны, что имеет большое значение при разделении соединений, склонных к реакциям гидро- [c.44]

Гидриды бора являются веществами чрезвычайно активными по отношению к воде и кислороду. Поэтому для их анализа возможно применение только метода газо-жидкостной хроматографии с использованием инертного твердого носителя и гидрофобных неподвижных фаз, не растворяющих кислород и, конечно, не содержащих гидроксильных групп. Особенно высокие требования предъявляются к очистке и осушке газа-носителя, к подготовке пробы и способу ее ввода в хроматограф. Для разделения диборана, тетраборана, пентаборана и дегидропентаборана применяют специальный хроматограф, включающий вакуумную систему отбора пробы [c.157]

Возможности газоадсорбционной хроматографии значительно расширила разработка различных методов геометрического, адсорбционного, ионообменного и химического модифицирования поверхности неорганических адсорбентов, а также разработка синтезов достаточно однородно- и крупнопористых органических полимерных адсорбентов с разными функциональными группами, в том числе и довольно термостойких. Применение в качестве газов-носителей сильно сжатых газов, в частности вблизи их критической температуры (так называемая флюидная хроматография), а также различных паров, сильно расширившее круг анализируемых труднолетучих веществ, также оказалось возможным лишь при использовании в качестве неподвижных фаз нелетучих термостабильных адсорбентов. Значительно возросла роль адсорбентов, в особенности гидрофобных и термостойких, для адсорбционного накопления примесей из влажной атмосферы и воды для последующего газохроматографического анализа, в частности для снижения фона при использовании для детектирования хромато-масс-спектрометрии и инфракрасной Фурье-спектроскопии. [c.11]

В работах [204,205 авторы использовали флуоресцентный зонд (пирен) для исследования полярности и динамических свойств привитых слоев некоторых коммерческих гидрофобных адсорбентов. В спектре флуоресценции пирена имеется пять основных колебательных полос, обозначаемых цифрами от I до V соответственно. Соотношение интенсивностей этих полос может служить критерием для оценки полярности окружения молекул пирена. Так, для раствора пирена в гексане соотношение интенсивностей П1/1 равно 1,63, а для раствора в воде 0,51 [204 . У алкилкремнеземов Лихросорб КР-2 и КР-18, диспергированных в воде, полярность окружения адсорбированного пирена соответствует полярности октанола 1. При увеличении содержания метанола в водной фазе полярность окружения уменьшается, что авторы связывают с проникновением молекул метанола в привитый слой и блокированием остаточных силанольных групп. В водно-ацетонитрильных смесях при малом содержании ацетонитрила (< 14%) полярность поверхности уменьшается, однако при содержании ацетонитрила 14-28 % полярность поверхности вновь возрастает, что объясняют насыщением привитого слоя молекулами ацетонитрила. Авторы [205] проводили аналогичные исследования с применением специальной кюветы, позволяющей моделировать условия жидкостной хроматографии. Изучали два коммерческих С18-адсорбента — мономерный и полимерный. Исследования показали, что полярность поверхности (точнее, полярность окружения адсорбированного пирена) уменьшается с ростом содержания воды в подвижной фазе для смесей ацетонитрил-вода, метанол - вода и тетрагидрофуран - вода. Поведение мономерного и полимерного привитых слоев было в целом аналогично. По мнению авторов [205], полученные результаты свидетельствуют о проникновении молекул пробы (пирена) в гидрофобный привитый слой в условиях обращенно-фазовой жидкостной хроматографии. В своей следующей работе [206[ авторы исследовали поведение в системе пирен-привитый слой С18 — растворитель в широкой области состава растворителя метанол-вода. Было показано, что при уменьшении содержания воды в растворителе от 90 до 20 % полярность окружения адсорбированного пирена проходит через минимум, соответствующий 50 %-му содержанию воды. По мнению [206[, при содержании воды более 50% привитый слой схлопывается , занимая меньший объем. При этом происходит выталкивание адсорбированных молекул пробы в водный раствор. Кроме того, полярность поверхности может увеличиваться за счет взаимодействия воды с остаточными силанольными группами. При дальнейшем снижении содержания воды от 50 до 20% происходит рост полярности привитого слоя, аналогичный описанному в более ранних работах [204,205[. [c.214]

Чаще всего ферменты проявляют высокую специфичность по отношению к своим субстратам и ко-ферментам, поэтому наиболее подходящими лигандами служат производные субстратов и коферментов, ковалентно связанные с носителем, например с сефадексом. Они могут быть присоединены к носителю либо непосредственно, либо через связующую ножку (линкер) из 3—8 атомов углерода. Использование линкера помогает разрешить проблемы, связанные с тем, что присоединение лиганда к носителю может препятствовать его взаимодействию с ферментом. Вместе с тем введение гидрофобного линкера иногда осложняет выделение из-за проявления эффектов хроматографии на гидрофобных лигандах (см. йиже). Примером успешного применения аффинной хроматографии может служить очистка множества различных дегидрогеназ на аффинных [c.70]

Одной из ее модификаций является хроматография, основанная на гидрофобном взаимодействии носителя (фенил- или октилсефароза) с соответствующими неполярными аминокислотными радикалами белковых молекул. Применение эффективных сорбентов (различные производные силикагеля) и высокого давления при элюировании с них белков привело к возникновению ряда вариантов жидкостной хроматографии высокого разрешения. [c.30]