Хроматография нанесение пробы

В тонкослойной хроматографии большое значение для получения надежных и воспроизводимых результатов имеет овладение техникой эксперимента (приготовление сорбента, его нанесение, установление толщины слоя, подготовка пластинок, нанесение пробы вещества, подача растворителя, проявление хроматограмм и другие операции). [c.134]

Аппаратура для бумажной хроматографии. Основными элементами аппаратуры для БХ являются хроматографические камеры или сосуды, стойки с лотками, пипетки для нанесения проб, приспособления для сушки и элюирования, пульверизаторы, лампы для облучения хроматограмм, приспособления для измерения / /, планиметры и денситометры для количественных определений. [c.353]

Аппаратура для БХ включает хроматографические камеры или сосуды, стойки с лотками, пипетки для нанесения проб, приспособления для сушки, пульверизаторы, сосуды для элюента, лампы для облучения хроматограмм и др. Хроматографические камеры значительно различаются по форме и размерам, и это в большой степени зависит от характера процесса хроматографирования (восходящее, нисходящее, круговое, двумерное, препаративное), На рис. 9.15 изображена камера для восходящей хроматографии, на рис. 9.16 — аппаратура для нисходящей бумажной хроматографии. [c.239]

Метод электрофореза на носителе во многом подобен методу хроматографии. Камера для электрофореза состоит из трех частей, двух электродных сосудов и расположенной выше подставки для носителя, например бумаги. Камеры должны быть плотно закрыты для предотвращения испарения растворителя. Носитель укладывают горизонтально, уровень растворителей в обеих электродных камерах должен быть одинаковым. Электроды, платиновый или графитовый, встроены в диафрагму. Вещество наносят на носитель в виде точек или полос. Место нанесения пробы зависит от предполагаемого направления движения. При движении разделяемых, веществ к аноду пробу наносят на катодную сторону, и наоборот. Для количественной и качественной оценки процесса разделения (проявление вещества и т. д.) применяют методы, используемые в бумажной хроматографии. [c.387]

Закрытые (адсорбционные) хроматографические колонки необходимо кондиционировать для стабилизации адсорбционной активности поверхности. Состояние равновесия требуется и для тонкослойной хроматографической системы. Когда течение подвижной жидкой фазы прекращается хотя бы на короткое время, возникает резкое изменение химического состояния слоя сорбента, находящегося в равновесии с окружающей газовой средой. Подвижная фаза состоит из растворителей различной летучести и полярности. Именно поэтому даже в момент нанесения пробы в ТСХ очень важно, чтобы объемная скорость потока элюента была постоянной. В ТСХ это условие необходимо выполнять более строго по сравнению с колоночной жидкостной хроматографией, где поток через кондиционированную колонку может быть приостановлен на несколько минут без существенного влияния на результаты разделения. Соответствующий экспериментальный подход описан ниже. [c.19]

На рис. 6.18 представлена зависимость ширины пиков вещества у основания от длины пути разделения 2/, изменяющегося в пределах от 20 до 70 мм. Три графика (слева направо) соответствуют пробам липофильных красителей в количестве 750, 100 и 20 нг. Размывание пиков различно для различных веществ. Оно всегда больше для зеленого красителя со средней величиной В) и меньше для голубого с более низким значением В). Во время перемещения фиолетового красителя с большим В на относительно малое расстояние наблюдается лишь небольшое размывание пиков, однако с увеличением расстояния размывание усиливается. Чем меньше количество нанесенного вещества, тем меньше размывание ширины пиков веществ у основания. Обсуждаемые соотношения приведены в табл. 6.8 в нее включено также сравнение размеров пробы в ВЭТСХ и колоночной хроматографии. Исходя из максимальной ширины ников у основания, рассчитывают объем сорбента, необходимый при нанесении пробы в количестве 20 нг. Он составляет 3—42 мм и соответствует от 10 до 70 мм. Пересчитывая эти результаты для колонок соответствующей длины, получают величину внутреннего диаметра в пределах 0,6—0,9 мм. Колонки с такими малыми диаметрами вряд ли найдут применение в высокоэффективной колоночной жидкостной хроматографии. На основании этого можно утверждать, что при разделении на ВЭТСХ-пластинках удовлетворительных результатов можно добиться на удивительно малом объеме [c.143]

В одной из таких разработок за основу взят имеющийся в продаже автоматический пробоотборник, используемый в газовой хроматографии. Диаметр стартового пятна Ьд при нанесении проб малого объема не превышает 1 дмм, а диаметры пятен после разделения не превышают 1 — 3 мм в зависимости от длины пути. [c.220]

Рис. 3.3. Нанесение пробы на пластинку для тонкослойной хроматографии.

Нанесение пробы. Разделяемую смесь можно вносить в колонку растворенной в минимальном количестве растворителя, используемого в качестве элюента, как было описано для обычной колоночной хроматографии. Значительно более [c.443]

Интенсивная сушка целесообразна лишь в случае нанесения проб веществ в соответствующим образом осушенной атмосфере при работе с абсолютно сухими разделяющими жидкостями. Это обычно необходимо только в случае анализа методом хроматографии в тонких слоях смесей углеводородов. На очень активных адсорбентах велика опасность разложения веществ. [c.19]

Метод хроматографии на бумаге основан на различии коэффициентов распределения отдельных компонентов раствора между двумя не-смешивающимися растворителями. В зависимости от величин коэффициентов распределения элементы на хроматограмме располагаются в виде отдельных полос или зон. Их положение характеризуется величиной Кг (отношение расстояния от центра пятна до места нанесения пробы-линии старта к расстоянию от фронта растворителя до линии старта). [c.55]

Рио. 16. Схема прибора для радиальной хроматографии [27] л — стеклянная пластинка В — тонкий слой сорбента В—отверстие для укрепления жгута из ваты Г — место нанесения пробы Д — жгут из аты Е — стеклянный кристаллизатор Ж — растворитель [c.42]

Мы видим, что длина удваивается по сравнению с обычной хроматографией. Если Ь = Ьуп, то объем нанесенной пробы V определяется уравнением [c.9]

В газо-жидкостной хроматографии, так же как и в газо-адсорбционной, ширина зон на выходной кривой определяется шириной начальной зоны. Если неподвижная жидкость обладает недостаточно хорошей растворяющей способностью, то образование широкой начальной зоны при нанесении пробы приводит к расширению зон на выходной кривой. В этом случае повышение эффективности колонки может быть достигнуто либо подогреванием анализируемой смеси перед вводом ее в колонку [41 ], либо применением малых проб. [c.198]

При горизонтальной хроматографии в тонких слоях пластинка в камере расположена строго горизонтально. В зависимости от способа подачи растворителя и приема, применяемого для нанесения пробы, могут быть следующие разновидности метода. [c.29]

Определенное значение имеет также качество адсорбционных слоев на пластинке. Слои должны быть однородными и по возможности плотными. Повреждение слоев адсорбента, например при нанесении проб, вызывает обычно значительное изменение размеров пятна при хроматографии, затрудняет количественный перенос пятен с пластинки. [c.44]

Качественная идентификация и количественное определение бромофоса методом тонкослойной хроматографии. Пластинку с нанесенными пробой и стандартом помещат в хроматографическую камеру, содержащую подвижный растворитель [1, 2]. Условия хроматографирования приведены в таблице 20. [c.67]

Приборы и посуда. Пластинки для хроматографии. Пульверизаторы стеклянные для опрыскивания пластинок. Пипетки для нанесения проб. Прибор для отгонки растворителя. Камера для хроматографирования. Микропипетки для нанесения стандартных растворов. Колбы для экстракции. Воронки. [c.146]

Нанесение проб испытуемых веществ на пластинку. Количество наносимого вещества или смеси веществ на пластинку играет существенную роль при разделении веществ с помощью тонкослойной хроматографии. Если нанести очень много вещества, то получатся чересчур большие и плохой формы пятна, которые [c.74]

Техника хроматографирования в тонких слоях состоит в подготовке пластинок, нанесении пробы, проявлении хроматограммы и детектировании пятен. Положение пятна разделенного вещества описывается, так же как и в бумажной хроматографии, посредством измерения величины R , т. е. путем сопоставления с стандартных веществ вещества идентифицируются способом свидетелей . [c.323]

Оборудование для тонкослойной хроматографии КТХ-01 отечественного производства предназначено для качественного анализа многокомпонентных смесей органических и неорганических веществ, а также для препаративного получения веществ, составляющих эти смеси. Оборудование поставляется в трех вариантах в виде полного (КТХ-01-1), среднего (КТХ-01-2) или малого (КТХ-01-3) комплектов, различающихся наличием тех или иных устройств. В комплект КТХ-01 входит оборудование для приготовления хроматографических пластин, для нанесения пробы, для проведения тонкослойной хроматографии, для детектирования пятен химическими методами и для обнаружения их в ультрафиолетовом свете. [c.326]

Методы тонкослойной и бумажной хроматографии рассматриваются совместно оба метода широко используются в рядовой и исследовательской работе и очень важны для аналитика. В своей основе каждый из методов прост, но для получения хороших результатов методическим тонкостям следует уделять должное внимание. Полная автоматизация хроматографических процессов от нанесения пробы до обработки полученной хроматограммы с точки зрения изготовителей приборов не является экономически выгодной. В литературе проблемы автоматизации тонкослойной и бумажной хроматографии отражены недостаточно. Обычно рассматриваемые процессы хроматографирования можно разделить на три отдельные стадии а) нанесение пробы, б) разделение пробы 4 проявление хроматограммы и в) количественная обработка результатов. Для каждой из этих стадий описан ряд автоматических и механических средств, обсуждаемых в соответствующих разделах главы. В конце главы рассматриваются полностью автоматические системы, предназначенные в первую очередь для препаративных целей. [c.272]

Техника нанесения пробы анализируемого вещества. Решающую роль в получении четких хроматограмм и особенно в количественных расчетах играют и количество наносимой пробы, и правильное ее нанесение на тонкий слой сорбента. Применяются два способа нанесение пробы в виде точки и в виде полосы. Последним способом пользуются главным образом в препаративной хроматографии. [c.138]

Нанесение проб испытуемых веществ на пластинку. Объем пробы играет существенную роль при разделении веществ с помощью хроматографии. Если нанести очень много вещества, то получатся чересчур большие и плохой формы пятна, которые сливаются с пятнами соединений, имеющих близкую величину / у. Пробы испытуемых веществ (обычно от 0,1 до 50 мкг) наносят на пластинку в виде растворов в эфире, хлороформе или другом подходящем растворителе точечными каплями при помощи стеклянного капилляра или пипетки емкостью 0,1 мл. Для препаративного ра зделения смесей веществ пробы наносят в виде сплоп ной линии. Расстояние между отдельными пробами при стандартной величине пластинки должно быть не менее 2 см. [c.71]

ГО разделяемого материала крайне необходима в промышленных процессах. Но использование метода ЖХ для разделения больших количеств сопряжено с определенными трудностями. Довольно ограниченная емкость хроматографических сорбентов означает, что чрезмерное увеличение нагрузки колонки ухудшает ее разделительную способность. В то же время размеры хроматографической колонки нельзя увеличивать до бесконечности, поскольку это приводит к возникновению других проблем, таких как проблема нанесения пробы, появление нежелательных мертвых объемов и т. д. В хроматографии всегда необходимо находить компромиссные решения. Изложенная ситуация часто изображается схемой, приведенной на рис. 9.1. Этот треугольник показывает, что если мы хотим увеличить емкость, то жертвуем скоростью и(или) разрешением. В общем случае, для того чтобы работать в линейной области изотермы сорбции, количество вещества, вводимого на колонку с обычной емкостью, не должно превышать 1 мг на 1 г сорбента. Следовательно, на препаративной колонке, содержащей 1 кг сорбента, можно разделить без заметного ухудшения ее разделительной способности пробу, масса которой не превышает 1 г. Вводимое количество можно увеличить, но только до такого уровня, при котором эффективность колонки и ее разрешение еще обеспечивают необходимый выход продукта желаемой оптической чистоты. Табл. 9.1 дает представление о величине пробы для колонок различных размеров. [c.226]

Б. При хроматографии, высушивании, нанесении пробы, проявлении, оценке разделения, документации и т. д. можно применять ранее разработанные хорошо известные способы тонкослойной хроматографии. Например, для разделения основных аминокислот в аминокислотном анализаторе применяют буфер, имеющий концентрацию Ыа" 0,35 М и pH 5,23 этот же буфер пригоден для разделения основных аминокислот на пластинке Фиксион 50 х 8 . При этом, кроме основных, хорошо разделяются и идентифицируются ароматические аминокислоты Тир и Фен. [c.245]

Термин число разделений , определяемый как максимально возможное число веществ, полностью отделенных друг от друга в области разделения от места нанесения пробы до фронта элюента при данных условиях эксперимента, имеет то преимущество, что основывается на практическом опыте. Здесь важным фактором является то, что число разделений можно не связывать с понятием числа тарелок, которое, как это будет показано далее, неприменимо в КТСХ. Поскольку рассматриваемая проблема относится к теории хроматографии, то представляется целесообразным поставить вопрос о правдоподобном объяснении взаимосвязи КТСХ со следующими терминами. [c.76]

Условием успешных количественных хроматограмм является стандартизация метода ХТС путем использования сорбентов с определенным размером частиц и определенной степени чистоты, а также воспроиаводимой тол-ш,ины слоя. В остальном требуется выполнение тех же предварительных условий, что и в случае хроматографии на бумаге. Для нанесения пробы следует применять соответствуюш,ее приспособление, а именно калиброванный стеклянный капилляр или стеклянный поршневой шприц с микрометрической подачей (см. стр. 21). [c.52]

После нанесения проб хроматографическую бумагу протягнвают до стартовой линии, не касаясь нанесенных проб, через 50%-ный раствор ДМФА в ацетоне или этаноле, находящийся в эмалированной кювете. Затем бумагу отжимают между листами фильтровальной бумаги и проделывают ту же операцию с другим ее концом. После этого в течение 10 мин испаряют на воздухе растворитель с поверхности бумаги, а затем последнюю помещают в герметично закрываемую хроматографическую камеру, насыщенную предварительно в течение ночи парами системы растворителей ДМФА — гексан. Разделяют методом нисходящей бумажной хроматографии до тех, пор, пока подвижный растворитель (гексан) не пройдет хроматографический путь, равный 40 см. Затем хроматограмму сушат на воздухе и проявляют. [c.303]

Качественная идентификация и количественное определение деспироля методом тонкослойной хроматографии [1, 2]. После выполнения газо-хроматографического анализа раствор в колбе упаривают до объема 0,2—0,3 мл и остаток количественно наносят на пластинку на расстоянии 1,5 см от края. Диаметр пятна должен быть не более 1 см. С двух сторон от пробы наносят стандартные растворы препаратов группы ДДТ и деспироля в количестве 5 и 10 мкг. Пластинку после нанесения проб помещают в хроматографическую камеру, содержащую смесь гексана и ацетона (4 1). После того как фронт растворителя поднимется на 10 см, пластинку вынимают и высушивают на воздухе, затем обрабатывают проявляющим реактивом АеМОз и облучают ультрафиолетовым светом в течение 30 мин. [c.23]

Приборы и посуда. Пластинки для хроматографирования (стеклянные пластинки размером 9X12 см тщательно промывают раствором соды, хромовой смесью, дистиллированной водой и сушат в вертикальном положении перед нанесением сорбционной массы их протирают спиртом). Станок для сушки пластинок. Колбы конические на 250—300 мл. Делительные воронки на 250 мл. Прибор для отгонки растворителя. Насос водоструйный. Баня водяная. Камера для хроматографирования. Пульверизатор стеклянный. Прибор для встряхивания. Эксикатор. Пипетки для нанесения проб. Шприц медицинский или микропипетки для нанесения стандартного раствора. Хроматограф с термоионным детектором. Баллон с азотом, содержащий Ог не более 0,003 /о. Баллон с водородом. Баллон с воздухом. Колонка стеклянная длиной 1—1,5 м. диаметром 3 мм. [c.119]

Посуда и приборы. Воронки химические. Камера для опрыскивания пластинок. Колбы конические на 150—200 мл. Колбы с оттянутым концом для отгонки растворителя. Лампа кварцевая ПРК-4 или ПРК-7. Микропипетка на 10— 20 мкл. Пипетки для нанесения проб. Пластинки для хроматографии Силуфол размером 50X150 мм (производство Чехословакии). Пластинки стеклянные размером 50X150 мм с тонким слоем силикагеля (используют в случае отсутствия предыдущих). Прибор для отгонки растворителя. Пульверизатор стеклянный. Стаканы батарейные для фракционирования силикагеля 11 = 20 см, с1 = 14 см. Фильтры беззольные (синяя лента). Хроматографические стаканы Ь= 16 см, с1 = 9,5 см и Ь = 25 см, с1=16 см. Шкаф сушильный. Электрическая мельница для размола силикагеля. Цилиндры мерные на 5, 10 и 100 мл. [c.174]

Определение тонкослойной хроматографией. Полученный пос.пе выпаривания остаток растворяют в 0,5 мл ацетона и полностью наносят на пластинку микропипеткой или пипеткой Пастера. Одновременно готовят стандарты, внося в фарфоровую чашку 5—10 мкг вещества, что соответствует 0,5—1,0 мл рабочего раствора зоокумарина. Образцы наносят на пластинки в следующей последовательности стандарт (5 мкг), образец (I повторность), образец (II повторность), стандарт (10 мкг). Размер пятна не должен превышать 0,5 см. Места нанесения проб располагают на расстоянии 1,5—2,0 см друг от друга и от нижнего и боковых краев пластинки пятна не должны по гружаться в растворитель. [c.229]

Пробы соединений, разделенных в газовом хроматографе, наносят на стартовую линию слоя сорбента. Поток газа из хроматографической колонки делят на две части (рис. 8-1) меньшую часть направляют в пламенно-ионизационный детектор, а основную часть — на слой сорбента. В зависимости от типа анализа на пластинку со слоем сорбента можно наносить только один хроматографически разделенный компонент, его часть или все компоненты. Можно различать тиетоды импульсного нанесения проб (точками) и непрерывного нанесения проб (полосой). [c.326]

Еще один остроумный прибор (рис. 9-11) был описан Казу и Кавалотти [10]. В этом приборе соединения, разделенные в газовом хроматографе, автоматически анализируются с помощью ленты, пропитанной реактивом. Однако он не позволяет применять в анализе сразу несколько реактивов. При анализе разных соединений требуется каждый раз заменять ленту с реактивом. Казу и Кавалотти использовали одновременно две ленты если не переделывать устройство для нанесения проб образцов на ленту, то с большим числом лент работать довольно трудно. [c.355]

Учитывая ослабление интереса к бумажной хроматографии, мы рассмотрим только чаще всего употребляемую, доступную или простую аппаратуру для БХ. Более полное описание различных видов аппаратуры можно найти в рекламной литературе и в специальных монографиях по БХ (см., например, [50], а также список литературы в гл. 13). За последнее десятилетие аппаратура и техника БХ почти не совершенствовались. Некоторая работа в этом направлении проведена только Бущем и Кроушоу [19], ее мы обсудим ниже. Список аппаратуры для БХ включает хроматографические камеры или сосуды, стойки с лотками, пипетки для нанесения проб, приспособления для сушки, пульверизаторы, чашки для обнаружения и пропитки, сосуды для элюента, сушильные шкафы, лампы для облучения хроматограмм, приспособления для измерения Rf, а также планиметры и денситометры для количественных определений, ко-лировальные машины и т. д. [c.62]

После нанесения пробы хроматограмму вкладывают в хроматографическую камеру и начинают элюирование. При этом необходимо знать, какое количество вещества неподвижной фазы содержится в подвижной фазе, которая используется для элюирования. Гидрофильные элюенты, чаще всего на основе бутанола, или даже однофазные элюенты (например, смесь изопропиловый спирт — вода) содержат такое количество воды, что в ходе элюирования бумага может впитать из них необходимую воду и набухнуть. В этом случае хроматографирование можно начинать немедленно и получить в результате пятна также правильной круглой формы это обстоятельство доказывает, что разделение происходит по принципу распределительной хроматографии. Однако, если содержание воды в подвижной фазе невелико, ниже примерно 10% (а это имеет место при использовании таких систем, как бутилацетат — вода, бензол — пропионовая кислота — вода, тетрахлорметан — уксусная кислота — вода, системы Буша и др.), необходимо до начала элюирования ввести в бумагу требуемое количество полярной неподвижной фазы. С этой целью бумагу выдерживают над водой в камере с влажной атмосферой (приведение в равновесие), обрабатывают ее водяным паром, опрыскивают мелкодисперсным аэрозолем, содержащим вещества неподвижной фазы, или пропитывают влажным эфиром по методу Буша и Кроушоу [19]. [c.89]