Приборы для ионообменной хроматографии

Рис. 14.17. Прибор для разделения редкоземельных металлов при помощи ионообменной хроматографии с использованием лактата [S] (с разрешения автора).

Вымывание широко применяется также в ионообменной хроматографии. Как видно из приведенного выше описания, метод требует часто довольно много времени для разделения компонентов, однако затраты труда здесь невелики. Необходимо иметь также в виду широкие возможности автоматизации этого процесса. Промывая водой и измеряя электропроводность фильтрата, получают зависимость, аналогичную той, которая показана на рис. 10 (на оси абсцисс отложена электропроводность). Таким образом, контроль за ходом процесса может осуществляться на расстоянии, что особенно важно, например, при работе с радиоактивными веществами. Кроме того, прибор, отмечающий электропроводность, может передать сигнал на реле с тем, чтобы после извлечения первого компонента переключить поток жидкости во второй сосуд. [c.69]

ИОННАЯ ХРОМАТОГРАФИЯ, разновидность ионообменной хроматографии, в к-рой разделяемые ионы определяют в проточном, как правило, кондуктометрич. детекторе. Анализ осуществляется в автоматизир. приборе-ионном хроматографе. [c.257]

Если разделяемые вещества окрашены, то удается без особого труда следить за их продвижением и отбирать отдельные фракции. Однако в большинстве случаев хроматографируемые вещества бесцветны. Практика показала, что для количественной оценки процесса разделения необходимо непрерывно собирать большое количество (несколько сот) относительно небольших фракций (0,5—20 мл). Поскольку процесс хроматографирования часто длится непрерывно несколько дней, ясно, что проведение такой операции без автоматизированной аппаратуры было бы связано с большими трудностями. Поэтому были сконструированы автоматические коллекторы фракций. Поскольку применение автоматических сборников имеет большое значение не только для всех процессов разделения на колонках, т. е. для адсорбционной, распределительной и ионообменной хроматографии, но и вообще для автоматизации многих обычных лабораторных операций, ниже приведено детальное описание такого типа приборов. [c.560]

Устройство приборов для хроматографии и осуществление самого эксперимента сравнительно просты. Выбрав подходящую систему ионного обмена и проведя рекомендованную обработку (регенерацию) ионообменника, при идентичных условиях элюирования (скорость потока, температура и т. д.) можно получать хорошо воспроизводимые хроматограммы. Благодаря этому фракционирование белков с помощью ионообменной хроматографии имеет широкое распространение. [c.23]

В отличие от ранее рассмотренных видов хроматографии ионообменная хроматография основана на химическом взаимодействии активных групп неподвижной фазы с ионами разделяемых соединений. Она используется для разделения смесей белков н аминокислот, которые в водном растворе находятся в виде ионов (см. 11.1.3). Ионообменная хроматография положена в основу действия специальных приборов — автоматических аминокислотных анализатор О В. [c.498]

Книга написана в виде руководства по тонкослойной хроматографии. В общей части приведены краткие сведе ния, касающиеся адсорбционной, распределительной, ионообменной хроматографии и разделения на молекулярных ситах. Основное внимание уделено технике работы методом тонкослойной хроматографии. Описаны наиболее удобные и доступные приборы и материалы. [c.3]

Рефрактометрия широко используется в производстве сахара с целью измерения концентрации растворов сахарозы [54]. За последнее время были описаны многочисленные примеры применения в гель-проникающей хроматографии дифференциальных, автоматических регистрирующих рефрактометров [39]. Дифференциальный рефрактометр также использовался для регулирования режима разделения нейтральных сахаров в виде бо-ратных комплексов при ионообменной хроматографии [55]. Однако чувствительность прибора к изменениям концентрации буферного раствора, наряду с наличием ложных пиков, вызывает некоторые затруднения при его широкой эксплуатации. [c.72]

Прибор для хроматографии на ионообменных смолах стоит дешевле. Если нужно провести большое число повторяющихся разделений, стоимость хроматографа для газо-жидкостной хроматографии быстро окупится благодаря экономии человеко-часов. Однако для эпизодических разделений более выгодно затратить дополнительное время на жидкостную хроматографию на смолах. [c.256]

Хроматографический анализ. Анализ основан на хроматографии (см. 6.3), позволяющей разделять двух- и многокомпонентные смеси газов, жидкостей и растворенных веществ методами сорбции в динамических условиях. Анализ производится с помощью специальных приборов - хроматографов. Разработано несколько методов анализа, которые классифицируются по механизму процесса и природе частиц (молекулярная, ионообменная, осадительная, распределительная хроматография) и по формам применения (колоночная, капиллярная, тонкослойная и бумажная). Молекулярная хроматография основана на различной адсорбируемости молекул на адсорбентах, ионообменная хроматография - на различной способности к обмену ионов раствора (см. 8.6). В осадительной хроматографии используется различная растворимость осадков (см. 8.6), образуемых компонентами анализируемой смеси при взаимодействии с реактивами, нанесенными на носитель. Распределительная хроматография базируется на различном распределении веществ между двумя несмешивающимися жидкостями ( 8.2). Молекулярная (жидкостная адсорбционная), ионообменная и осадительная хроматография обычно проводятся в хроматографических колонках соответственно с адсорбентом, ионообменным материалом или инертным носителем с реагентом. [c.513]

Р и с. 11. Прибор для ионообменной хроматографии. [c.37]

Установки высокого класса точности и отдельные модули таких установок изготавливаются специальными фирмами и исследовательскими институтами при участии инженеров-меха-ников, специалистов по электронике, оптике, вычислительной технике и т. д. Приборы для жидкостной хроматографии удовлетворяют требованиям ионообменной хроматографии — лиган- [c.45]

Преимущество фракционирования на колонках с гелем, заключающееся в большей разрешающей способности на единицу длины колонки и, следовательно, в более коротких колонках и меньших временах элюирования, обусловлено применением гранул геля небольшого диаметра. Меньшее сопротивление потоку жидкости наблюдалось при применении шариков сферической формы с очень узким распределением по размерам. Этот факт согласуется с данными Гамильтона [238] для ионообменной хроматографии. В этой же работе Гамильтон предложил также удобный гидравлический прибор для получения узких фракций шариков. Смесь шариков ионообменной смолы помещают в делительную воронку и следующие друг за другом но размерам фракции этих шариков поднимаются вверх и удаляются из воронки под действием потока воды возрастающей скорости, впускаемого через дно воронки. Поскольку несульфированные полистирольные шарики не смачиваются водой, для их разделения необходимо использовать смачивающие растворители, например ксилол или диэтилбензол. С помощью описанного способа легко удавалось получить фракции, содержащие 80% шариков, размеры которых отличались от среднего не более чем на 20%. На колонках, заполненных этими фракциями, достигали удовлетворительного разделения. [c.138]

Прибор следует содержать в чистоте Вытирать пролитый растворитель. Применять очищенные растворители, не содержащие примесей и взвешенных твердых частиц или частиц пыли. Твердые частицы могут оседать в насосах и выводить их из строя. Они могут приводить к закупориванию трубок либо даже ячеек детектора. Если хроматограф, предназначенный для разделения смесей методом ионообменной хроматографии, должен оставаться длительное время без использования, необходимо промыть полностью всю его систему дистиллированной водой. В ионообменной хроматографии растворы фосфатов часто применяют в качестве подвижных фаз, но они являются благоприятной средой для развития плесени, что ведет к закупориванию системы и колонок хроматографов. [c.248]

Современная ионообменная хроматография быстрее и удобнее, а также обладает более высокой разделительной способностью, чем классические методы. Повы-щение эффективности достигнуто в основном благодаря четырем факторам 1) лучшей конструкции узлов хроматографических приборов 2) более эффективным ионообменным смолам и колонкам 3) меньшим размерам проб и 4) автоматическому детектированию разделенных веществ. [c.12]

Рис. и. Прибор для ионообменной хроматографии [c.452]

Хроматографический метод — количественное определение субстрата или продуктов ферментативной реакции с помощью различных видов хроматографии. Так, в настоящее время для количественного определения аминокислот широко применяется автоматический прибор Штейна и Мура, в котором используется ионообменная хроматография. [c.198]

В настоящее время во многих лабораториях имеются автоматизированные приборы-анализаторы, действие которых основано на сочетании метода ионообменной хроматографии со спектро-фотометрией. Эти приборы, напоминающие по размерам и форме небольшой шкаф, способны осуществить менее чем за 24 ч непрерывной работы полный качественный и количественный анализ сложной смеси аминокислот, получающейся при гидролизе белка. [c.17]

В первых жидкостных хроматографах (тина ионообменных хроматографов) прошедшая через колонку подвижная фаза с комиоиеитами пробы просто собиралась в небольшие сосуды, а затем методами титриметрии, колориметрии, полярографии и т.д. определялось содержание комиоиеита в этой порции. Т.е. процессы разделения пробы п определения ее количественного состава были разделены во времени и пространстве. В современном жидкостном хроматографе эти процессы объедипепы в одном приборе. [c.19]

Тонкослойная хроматография АК на тонком слое катионообменни-ка, позволяет разделить АК в буфере pH 3,3 по величине заряда АК. В этом случае принцип разделения - ионообменная хроматография (ИОХ). Разделение АК методом ИОХ осуществляют на колонках, а анализ смеси АК проводят в специальных приборах - анализаторах АК. [c.18]

Ч1ротеииы с помощью кислотного, основного или ферментативного гидролиза могут расщепляться на простейшие составляющие — а-ами-нокарбоновые кислоты, обычно называемые просто а-аминокислотами. Ка.чественный анализ получающихся при этом смесей аминокислот связан с относительно большими трудностями. Э. Фишер (1901 г.) обрабатывал такие смеси спиртом и разделял образующиеся в результате смеси сложных эфиров а-аминокислот дробной перегонкой. В настоящее время эти соединения разделяют и идентифицируют методами газовой хроматографии. Использование ионообменной хроматографии позволяет разделить подобные смеси без предварительной этерификации. Существуют приборы, которые автоматически проводят качественный и количественный анализ смесей такого рода. При этом первоначально а-аминокислоты разделяются на ионообменных смолах, элюаты обрабатываются нингидрином, а образующиеся синие окрашенные вещества анализируются колориметрически, кривые поглощения записываются с помоп ью самописца. [c.647]

В последнее время появилась возможность определять аминокислотный состав белков с помощью автоматических аминокислотных анализаторов. Когда в 1948 г. Мур и Стейн [551 в дополнение к классическим методам органической химии, а также манометрическому и бактериологическому анализу ввели ионообменную хроматографию, наступил поворотный момент в развитии химии аминокислот. В основу работы созданных сотрудниками Рокфеллеровского института современных автоматических аминокислотных анализаторов была положена ионообменная хроматография. Принцип работы этих приборов заключается в следующем. Исследуемый белок гидролизуют, затем гидролизат подвергают хроматографии на смоле типа дауэкс 50 х8 в Na-форме. Элюирование производят с помощью непрерывной подачи буферного раствора. Выходящий из колонки элюат попадает в пластмассовую ячейку особой формы, где он смешивается с раствором нингидрина. Подачу нингидрина осуществляет специальный насос, работающий синхронно с насосом, подающим буферный раствор на колонку. Затем смесь элюата с нингидрином проходит через тефлоновый капилляр, который погружен в кипящую баню. В этих условиях в растворах происходит нингидриновое окрашивание, интенсивность которого измеряется в проточной кювете спектрофотометрически. Поглощение света регистрируется самописцем. Применение сферических смол [80] позволило сократить время исследования одного образца примерно в четыре раза, а использование особых ячеек сделало вполне допустимыми для анализа очень малые количества исследуемого вещества — порядка 0,01—0,05 мкмоля [38]. Введение одноколоночной процедуры значительно упрощает метод [9, 29, 43, 60]. С помощью этой методики в одной и той же пробе можно определить кислые, нейтральные и основные аминокислоты, что не только экономит исследуемый материал, но и повышает точность и сокращает время исследования. Работая на стандартном аминокислотном анализаторе и пользуясь некоторыми модификациями известных методов, можно полностью закончить анализ одного вещества в течение 3 ч [91. [c.32]

Достоинствами некоторых хроматографических методов являются возможность осуществления в одном приборе метода кон-центрироваиня и метода определения, а также экспрессность определения, воз.можность разделения компонентов с близкими свойствами. Методы позволяют получать результаты даже при анализе микроколичеств веществ. Ионообменная хроматография как метод предварительного концентрирования применяется не очень широко из-за больших объемов перерабатываемых растворов, а следовательно, из-за большой поправки на холостой опыт. Статический ионный обмен, простой и доступный прием, получил известное распространение. [c.89]

Ионообменная хроматография является основным методом разделения нитросоединений в аналитических целях. Этот метод позволяет разделять ряд нитроалканов и нитроароматических соединений. Для детектирования в основном применяют полярографию [2]. Для этой цели был разработан специальный хроматополярографический прибор [3]. Предельный диффузионный ток, обусловленный органическими вешествами, измеряют на ртутном капельном электроде при постоянном потенциале (-1В). [c.297]

Первые приборы для непрерывного анализа раствора, вытекающего из хроматографической колонки, были предложены Тизелиусом [118] и Клэссоном [16]. В этих приборах измеряли показатель преломления раствора. Высокая точность может быть достигнута с помощью интерферометрических рефрактометров, но они, по-видилюму, еще пе применялись в ионообменной хроматографии. [c.199]

Кинетика обмена в ионообменной хроматографии аминокислот и пептидов сильно зависит от температуры. Воспроизводимый контроль температуры колонки требуется для того, чтобы получить воспроизводимые последовательность и время выхода пиков, необходимые для идентификации аминокислот или пептидов и для разделения близких по свойствам соединений. Эти контролируемые условия обычно достигаются путем циркулирования воды из термостата по рубашке колонки. Термостат снабжается контрольным термометром. Емкость термостата, мощность нагрева и скорость подачи воды насосом должны быть достаточными для поддержания температуры в рубашке колонки с точностью 0,5 °С в диапазоне 30—70 °С. Одной из тонкостей программирования температуры является скорость повышения температуры при переходе от одной температуры к другой, как это предписывается многими методиками анализа. В тех случаях, когда по методике для данного прибора требуется смена температуры, которая происходит в течение 20 мин, любой другой температурный градиент может привести к нежелательным результатам. Поэтому неудивительно, что некоторые методики не удается воспроизвести на сходных приборах, если режимы изменения температур не одинаковы. Целесообразно включать градиентное термостатирование в основную кoн tpyкцию анализатора. [c.28]

Для анализа вод н других водных жидкостей. Функциональная схема прибора предусматривает сочетание ионообменной хроматографии и детектирования по электропроводности с компенсацией электро-прпводяшего фона элюента за счет дополнительной компенсационной колонки. Микропроцессорное устройство обеспечивает формирование и запоминание высот хроматографических пиков, времени удерживания 99 последовательных пиков, расчет концентрации ионов. Отображение параметров и результатов расчетов на цифровом индикаторе. Возможность вывода результатов на внешнее цифропечатаюшее уст-ро(к тво и самописец. Диапазон измерения электропроводности 0... 100 к кСм. Питание от сети переменного тока 220 В или от автономного источника 2 В. Масса 12 кг. [c.101]

На основе нингидриновой реакции были разработаны методы количественного определения аминокислот, в частности метод распределительной хроматографии на бумаге, впервые внедренный в 1944 г. (А. Мартин и Р. Синдж). Эта же реакция используется благодаря своей высокой чувствительности в автоматическом анализаторе аминокислот. Впервые такой прибор сконструировали Д. Шпакман, С. Мур и У. Стейн (рис. 1.7). После разделения смеси аминокислот в колонках, заполненных специальными ионообменными смолами (сульфополистирольный катионит), ток элюента из колонки поступает в смеситель, туда же поступает раствор нингидрина интенсивность образующейся окраски автоматически измеряется на фотоэлектроколориметре и регистрируется самописцем. Этот метод нашел широкое применение в клинической практике при исследовании крови, мочи, спинномозговой жидкости. С его помощью за 2—3 ч можно получить полную картину качественного состава аминокислот в биологи- [c.42]

Кроме трех описанных основных способов осуществления хроматографического процесса, в некоторых случаях могут применяться другие приемы, облегчающие хроматографическое разделение смеси. Один из таких приемов основан на использовании зависимости адсорбируемости веществ от температуры. Скорость движения веществ в хроматографической колонке можно регулировать при помощи какого-либо нагревательного прибора или холодильника, передвигаемого вдоль колонки. Этот способ в отдельных случаях в молекулярной хроматографии может дать хорошие результаты. В ионообменной хроматографии, вследствие незначительного влияния температуры на процесс ионообменной адсорбции, этот способ не имеет значения. В распределительной хроматографии этот прием еще не применялся, хотя его применение вполне целесообразно, ввиду сравнительно большого влияниятемнературына растворимость веществ. [c.39]

Ионообменной хроматографией можно отделить катионы от анионов. Ионообменной колонкой служит бюретка емкостью 5— 10 мл или стеклянная трубка диаметром 0,5—0,6 см, длиной 10— 12 см. Колонку заполняют вофатитом или другим подходяшим катионитом. Собирают прибор (см. рис. 74). Через слой адсорбента пропускают вначале 5—10 мл дистиллированной воды, затем 5— 10 мл исследуемого раствора. Колонку промывают 2—3 раза небольшими порциями (по 3—4 мл) дистиллированной воды. Фильтрат и промывные воды, не содержащие катионов тяжелых металлов, собирают в стакан или колбу и исследуют на присутствие анионов. [c.362]

Большинство спектрометров, имеющихся в продаже, а также самодельные основаны на конструкции, разработанно Ниром [86]. Недавно Нир [87] опубликовал описание усовершенствованной первоначальной конструкции, обеспечивающей высокую точность анализа. В связи с анализом урана описано также много других приборов. Они обычно различаются степенью сложности электронной части и коллекторной системы для точного измерения отношения изотопов. Прибор, отражающий современные тенденции, описан Ридли и Сильвером [88]. Проба и добавленный изотоп должны находиться в равновесии, что обычно достигается в подходящем растворе. Иногда требуются химические превращения для перевода пробы и добавленного изотопа в одну и ту же химическую форму. Далее определяемый элемент отделяют от пробы тем или иным экстракционным методом чаще всего применяют экстракцию избирательным растворителем или ионообменную хроматографию [83]. [c.348]

Описан прибор с автоматической регистрацией, основанный на измерении сцинтилляции специального пластика NE-101 фирмы Nu lear Enterprises Ltd . Метод применя.яся для детектирования радиоактивных в-в при ионообменной хроматографии. [c.72]

Первые приспособления для ионообменной хроматографии отличаются от современных приборов способом введения элюента и пробы в колонку, типом смолы и размерами колонки, а также способом детектирования. Раньше обычно применяли выпускавшиеся промышленностью анионо- и катионообменные смолы, которые различали только по размеру частиц после рассеивания. Чаще всего пользовались смолами, частицы которых проходили через сито с размером ячейки 100 меш (0,149 мм), но задерживались ситом с отверстиями 200 меш (0,074 мм). Типичные колонки имели внутренний диаметр 10—20 мм и длину 100—500 мм. Колонку заполняли Смолой без особых предосторожностей. После введе я пробы в верхнюю. часть кодонки через нее непрерывно подавали подходящий элюент, который обеспечивал перемещение ионов пробы вдоль колонки и отделение их друг от друга. Часто злюент двигался под действием собственного веса, в результате чего скорость потока иногда оказывалась небольшой, а поток неравномерным. Обычно разделение длилось довольно долго. [c.11]

УФ-детектор — очень чувствительный и очень селективный прибор. Если элюент не поглощает УФ-излучения в области рабочих длин волн, можно использовать метод градиентного элюирования. Однако даже при этом может наблюдаться дрейф нулевой линии, так как при принятой обычной конструтсции ячейки одновременно определяется изменение показателя преломления. Используя измерительную ячейку подходящей конструкции, можно с помощью оптических методов подавить указанное изменение показаний за счет изменения показателя преломления. В ионообменной хроматографии можно менять значения pH и ионную силу элюента, если ионы не поглощают в УФ-области. [c.66]

В основу действия прибора (рис. 111.12) положен метод ионной хроматографии, который сочетает в себе принцип ионообменной хроматографии с детектированием по электропроводности и с компенсацией электропроводящего фона элюента. В качестве элюентов используются электролиты, обладающие высокой электропроводностью. Для подавления фона служит вторая ионная колонка (подавительная, или компенсационная), стоящая после разделительной. Вторая колонка превращает элюент в раствор с низкой электропроводностью после того, как произошло разделение компонентов пробы в рабочей колонке. Таким образом, срок службы компенсационной колонки определяется концентрацией ионов в элюенте. [c.197]

Кроме инструментальных методов (УФ-, ИК-, ЯМР- и масс-спектроскопии) в этот раздел включены и хроматографические методы. При использовании хроматографических методов в некоторых случаях требуется простое оборудование (колоночная, бумажная, тонкослойная, ионообменная и гель-хроматография), а в других — сложные приборы (газовая хроматография и высокоэффективная жидкостная хроматография). Хроматография пригодна для разделения многокомпонентных смесей с нослс-дую1цим качественным и количественным анализом компонентов, обладаЮ]цих близкими химическими и физическими свойствами. Эту проблему нельзя решить с 1юмо1цыо большинства чувствительных химических реакций или физико-химических методов. [c.272]

В работе Гросса [5] описано получение S-этил-1-С -/-гомоци-стеина из йодистого этила-1- и 8-бензил-/-гомоцистеина. Исходное вещество (1,14 г), полученное из метионина через 8-бен-зил- /-гомоцистеин [6] и Ы-ацетил-5-бензил- /-гомоцистеин [7], восстанавливают металлическим натрием в жидком аммиаке, и образовавшийся меркаптид обрабатывают 0,63 г йодистого этила-ЬС Прибор для проведения реакции представляет собой модификацию прибора, о котором идет речь в примечании 2. Вещество, оставшееся после испарения аммиака, растворяют в воде, и полученный раствор подкисляют соляной кислотой до pH 1—2, затем этот раствор пропускают через колонку [8] (высота 2,5 м, диаметр 22 см), наполненную ионообменной смолой дауэкс-50 (степень сшивания 8%) с величиной зерен 200—400 меш. Фракции, содержащие продукт реакции, полученные при элюировании 2,5 н, соляной кислотой, объединяют и испаряют при пониженном давлении. Остаток растворяют в воде и с помощью раствора едкого натра создают среду с pH 6,2. Для очистки вещество сублимируют при температуре 180—200° и давлении 1 мм рт. ст. Выход 0,400 г (60%),[а]д + 23°, концентрация 1% в 2 н. растворе соляной кислоты. Методом бумажной хроматографии в системе бутиловый спирт — вода— уксусная кислота (10 5 2) или в системе третичный амиловый спирт — вода — пиридин (7 6 8) при температуре 22—25° на бумаге ватман № 4 показано, что вещество состоит из свободной аминокислоты и радиохимических примесей RjSi,61 и 0,61 соответственно. [c.218]