Анализ хроматографический стероидов

За последние пятнадцать лет тонкослойная хроматография стала одним из практически универсальных, точных и чрезвычайно полезных методов. Техника выполнения хроматографического разделения относительно проста, а требуемое оборудование недорого. Тонкослойная хроматография пригодна для исследования как летучих, так и нелетучих соединений и применяется для анализа витаминов, стероидов, лекарственных веществ, синтетических органических материалов, красок, эфирных масел, смол, пестицидов и т. д. Во многих случаях только этот метод дает ключ к практическому решению запутанных проблем. В настоящее время многие исследователи используют сочетание тонкослойной хроматографии с другими методами, в частности с газовой хроматографией. [c.10]

С пористыми стенками, на которые нанесен твердый носитель, однако в них наблюдается размывание задней границы хроматографических пиков (образование хвостов ) из-за адсорбции полярных соединений на неполярных фазах. Капиллярные колонки с внутренним диаметром 0,76 мм применяются редко, однако для них отношение размера пробы к скорости потока гелия может быть довольно большим. Увеличивая длину такой колонки, можно добиться такого же разделения, как и на колонках меньшего диаметра. Для анализа высококипяш их соединений, таких, как стероиды, а также для анализа соединений в количествах порядка 10 7о или менее лучше использовать насадочные колонки. [c.204]

Часто считают, что сепаратор с высокими эффективностью и коэффициентом обогащения необходим в любой системе ГХ — МС. Это не всегда верно. Прежде чем вводить сепаратор в систему,, нужно рассмотреть основные характеристики масс-спектрометра. Необходимость сепаратора зависит также и от скорости газового потока из хроматографической колонки. В спектрометре с отдельными насосами для ионного источника и анализатора допускается гораздо большее давление в ионном источнике, чем в спектрометре с одним общим насосом. Имеет значение и производительность насоса. Важно учитывать также и сложность структуры молекул образца. Так, для достоверной идентификации стероидов, имеющих большой молекулярный вес, требуются спектры гораздо более высокого качества, чем для идентификации углеводородов с малым молекулярным весом. Возможно даже, что при анализе углеводородов соблюдение оптимального режима масс-спектрометра не обязательно. [c.206]

В конструкциях газовых хроматографов часто применяют тефлон благодаря его относительно высокой термической стабильности и химической инертности. Однако в некоторых анализах алкалоидов и стероидов при использовании тефлона наблюдались искажения формы хроматографических пиков [61]. Короткие тефлоновые трубки (длиной 15 см и с внутренним диаметром 0,16 см) вызывали значительное размывание задних границ пиков (удлинение хвостов пиков) как для полярных, так и для неполярных соединений. При увеличении длины трубки до 50 см происходило недопустимое ухудшение разрешающей способности. Более того, при нагревании тефлоновой трубки до 300° С наблюдались потери основных компонентов, содержащих аминогруппу. Эти потери объясняются в основном взаимодействием с реакционноспособными группами на поверхности тефлона, так как при последующих [c.207]

Хара и др. [257] разработали двумерный сканирующий денситометр с самозаписывающим интегратором для анализа тонкослойных хроматографических пластинок. Этим прибором, в частности, было с точностью 5 % определено содержание стероидов. Выявлен ряд источников погрешностей (см. т. 1, гл. XI, разд. 2). [c.335]

Сорбенты с небольшим (но превышающим емкость монослоя) количеством жидкой фазы на носителях с малой удельной поверхностью (сорбенты малой емкости) получили очень широкое распространение. Большинство хроматографических анализов в биохимии, медицине, пищевой промышленности, в контроле загрязнений окружающей среды выполняют на таких сорбентах малой емкости. Метод ГААХ стал стандартным для анализа аминокислот, жирных кислот, стероидов, сахаров, для определения пестицидов в почве, воде и кормах и др. [c.162]

Применение в хроматографии. В последние годы, с развитием методов хроматографического разделения веществ, предложено использовать различные полимеры, в том числе поливинилпирролидон как вспомогательный материал. Описано применение его в бумажной хроматографии при определении лекарственных веществ, в газохроматографических колонках для анализа стероидов и некоторых других полифункциональных соединений, для фракционирования смесей протеинов [87, 88]. [c.144]

Неомыляемые остатки соевого масла хроматографическое разделение и характеристика. (Анализ фракции масла, содержащей углеводороды, стероиды. НФ SE 30 на хромосорбе W.) [c.70]

Количественное выделение и газо-жидкостный хроматографический анализ общего содержания пищевых и нейтральных стероидов кала. (Полный анализ в-в для расчета их баланса в организме без использования радиоактивности.) [c.198]

Ниже описаны отдельные типы сточных вод, их характеристики и оптимальные методики анализа. Стоки, попадающие в поверхностные воды, содержат бензин, керосин, топливные и смазочные масла, бензол, толуол, стирол, ксилол, жирные кислоты, фенолы, глицериды, стероиды, пестициды и металлорганические соединения. Перечисленные соединения составляют примерно 90% или выше от общего количества всех органических примесей (данные основаны на приблизительной оценке загрузки аналитической лаборатории). В числе других веществ, загрязняющих окружающую среду, можно назвать нитросоединения, асфальты, воска, твердые парафины, карбонильные и сернистые соединения, хлорированные углеводороды и бифенилы ( последние два типа соединений производятся промышленностью в больших количествах), а также соли трех- и многоосновных органических кислот. Методы газо-хроматографической идентификации этих соединений в данной главе подробно не рассматриваются, не потому, что это невозможно (напротив, такие анализы уже описаны), а потому, что природа и содержание подобных примесей для целей настоящего изложения имеют второстепенное значение [1—5]. В приведенном списке вещества-загрязнители расположены в соответствии с возрастающей трудностью их определения. Состав стоков завода, производящего органические растворители, проверить нетрудно. Однако гораздо труднее получить аналогичные результаты, анализируя канализационные воды в нескольких милях ниже, поскольку в этом случае примеси, сбрасываемые заводом, смешиваются с другими веществами и, вероятно, успевают прореагировать с некоторыми из них. В результате при любом анализе органических примесей в сточных водах мы можем узнать только о соединениях, присутствующих в пробе в момент анализа, но не о составе исходных стоков. [c.519]

В курсе приведены многочисленные примеры практического применения главным образом газовой и молекулярной жидкостной хроматографии на адсорбци-онно или химически модифицированных адсорбентах для анализа углеводородов, их производных и гетероциклических соединений. Особое внимание уделено анализу вредных примесей, разделению углеводов, стероидов, гликозидов, азолов, азинов, а также таких важных галогенпроизводных, как фреоны и пестициды. Адсорбция микотоксинов, представляющих собой одну из серьезнейших пищевых и кормовых проблем, рассматривается как в аспекте хроматографического их анализа, так и в аспекте хроматоскопического исслв1Дования структуры их молекул. В конце курса приведены примеры адсорбции и хроматографии синтетических и природных макромолекул. Здесь рассматривается иммобилизация некоторых ферментов и клеток (например, для осахарнвания крахмала, изомеризации глюкозы, для решения проблем искусственной почки), а также вопросы хроматографической очистки вирусов, в частности, вирусов гриппа и ящура. [c.4]

В хроматографическом анализе сложных смесей и в применении хроматографии для изучения структуры молекул особенно остро стоит проблема идентификации и определения структуры изомеров сложных органических соединений. Так, например, углеродный остов важного в биохимии семейства стероидов такой же, как и у углеводорода цикло пентанпергидрофенантрена [c.21]

Для определения карбонильных групп в стероидах в работе [81] в качестве избирательного реагента был предложен ацетилгидра-зид-З-иодпиридиний- Ч-бромид. Этот реагент образует гидразоны с кетостероидами, имеющими карбонильные группы в положении 3, если эти стероиды являются еще и а,р-ненасыщенными, и с кетостероидами, имеющими карбонильные группы в положениях 17 и 20, и не образует этих производных со стероидами с кетогруппами в положении П. Кроме того, при хроматографическом анализе для производных стероидов с двумя активными карбонильными группами характерно существенно меньшие значения величины Rf, чем для производных стероидов с одной карбонильной группой. [c.113]

Часто требуется несколько видоизменить процедуры силилирования. Многие соединения не успевают полностью силилироваться за 5 мин (например, из-за пространственной затрудненности гидроксильной группы) в этих случаях приходится увеличивать продолжительность реакции. В таких случаях можно через определенные интервалы времени отбирать пробы реакционной смеси, вводить их в газовый хроматограф и отмечать пробу, для которой хроматографический пик целевого соединения максимален. Время, прошедшее с момента начала реакции до момента отбора отмеченной пробы, и принимается за необходимую продолжительность реакции. При анализе кетонов могут возникнуть трудности, связанные с тем, что кетоны частично взаимодействуют с реагентом с образованием ТМС-эфиров в енольной форме. Поэтому при анализе стероидов [53] предлагалось перед силилированием превращать их в метоксимные производные [52], В реакциях силилирования широко используют пиридин, поскольку он является прекрасным растворителем и действует как акцептор НС1 в реакциях с использованием хлорсиланов. Кроме пиридина используют и такие растворители, как диметилсульфоксид, диметилформамид, тетра-гидрофуран и ацетонитрил. Иногда, особенно при анализе малых проб с малой концентрацией определяемых соединений, реакцию ведут без использования растворителя. Всегда желательно избегать присутствия влаги в некоторых случаях это даже необходимо, так как многие ТМС-производные легко гидролизуются водой, причем происходящие в результате этого потери производных могут сделать невозможным количественный анализ и вызвать появление ложных хроматографических пиков. [c.50]

Для идентификации и количественного анализа кислых компонентов в смесях с нейтральными соединениями было предложено [61] после хроматографического разде-ления исходной смеси на аналитической колонке пропускать поток газа-носителя через реактор (100 X 0,5 см), заполненный гидроокисью калия на кварцевом порошке (115 100). В этом реакторе происходит селективное поглощение кислых компонентов. Путем сравнения хроматограмм, полученных на аналитической колонке и на колонке со щелочным реактором, можно идентифицировать и количественно определить кислые и нейтральные компоненты анализируемой смеси. В качестве примера в работе приведены результаты анализа малых количеств фенола и крезолов в тяжелом масле каменноугольной смолы и показано, что этот метод пригоден и для анализа таких соединений, содержащих активный водород, как инден, флюорен, пиррол, индол и карбазол, а также для идентификации кетостероидов и эстрогенов в смеси стероидов. [c.82]

Проблемы газохроматографического анализа отдельных классов органических соединений и групп промышленно важных органических продуктов рассмотрены в ряде обзоров и монографий. Так, анализ антибиотиков описан Вечменом и Вейнстейном [И6], анализ стероидов— Хефтманном [24], методы хроматографического анализа в химии древесины —Холькиным [117], анализ вредных загрязнений в окружающей среде — в монографии под редакцией Гроба [118] и в книге Фишбейна [119]. [c.47]

Примеры аналитической хроматографии в системе твердое тело—жидкость (с высокой, средней и низкой скоростью анализа) приведены в разд. П1 данной главы. Здесь же хотелось бы упомянуть многоколоночную хроматографическую систему с высокой разрешающей способностью, разработанную Вестергаар-дом с сотр. [13]. Анализ по методу Вестергаарда проводится со средней или низкой скоростью, однако высокая разрешающая способность, большое число автоматизированного вспомогательного оборудования позволяет применять этот метод для большого числа ежедневных серийных анализов стероидов, содержащихся в моче (более 100 анализов в день). Для этого метода [c.215]

Серийные анализы 17-кетостероидов мочи были успешно проведены Вестергаардом и Якобсеном [17] с применением многоколоночной хроматографической системы, описанной в разделе, посвященном хроматографии стероидов в системе жидкость— жидкость. [c.230]

Установлено, что вещества обычно разделяются методами газовой хроматографии при условии, если их точки кипения не больще чем на 50—100° превышают рабочую температуру колонки. Вещества с меньшей летучестью можно проанализировать хроматографически при специальном подборе параметров работы колонки. При этом увеличивают рабочую температуру или уменьшают рабочее давление. Исследования можно проводить с небольшими пробами, снижая концентрацию вещества в газе-носителе. Увеличение температуры хотя и приводит к повышению давления паров веществ, анализируемых хроматографически, тем не менее ограничено стабильностью и летучестью применяемой неподвижной фазы. В настоящее время максимальная температура составляет обычно 300—350°, хотя ароматические углеводороды подвергались разделению при 445° [1]. При хроматографическом разделении веществ с более высокими точками кипения не допускается уменьшение рабочего давления из-за высокого перепада давления по колонке. Однако его снижали примерно до 200—300 мм рт. ст. при анализе сложных эфиров жирных кислот [2]. С созданием высокочувствительных ионизационных детекторов стало возможным разделять вещества со значительно меньшими давлениями пара и таким образом анализировать смеси веществ с точками кипения, на 150—200° превышающими температуру колонки. В связи с этим методы газовой хроматографии стали применяться для анализа некоторых термически неустойчивых веществ. Например, используя эти детекторы, удалось разделить терпены и стероиды при 200° [3]. [c.497]

Пиролитическая газовая хроматография. Как указывалось в гл. 1, варианты, сочетающие в едином комплексе химические превращения и хроматографические процессы, называют реакционной газовой хроматографией. К ним относят и описанные выше методики удаления и превращения. Кроме того, разновидностью реакционной газовой хроматографии является пиролитическая (пиролизная) газовая хроматография—-гибридный метод, включающий термическое разложение пробы (как правило, нелетучего или неустойчивого соединения) и хроматографический анализ получаемых продуктов. Пиролитическая газовая хроматография является, в частности, прекрасным методом идентификации и определения структуры полимерных материалов [183]. Ее применяют для исследования фармацевтических продуктов, красок, тяжелых цефтспродуктов, стероидов, парафинов, имеются работы по исследованию микроорганизмов. Идентификацию нелетучих и неустойчивых соединений проводят путем сравнения хроматограмм продуктов пиролиза этих соединений (пирограмм) с соответствующими хроматограммами продуктов пиролиза эталонных веществ. Таким образом можно определить структуру различных полиолефинов, полиэфиров и др. Так, процентное содерлсание этилена в продуктах пиролиза полиэфиров можно считать мерой содержания эток-сигрупп, а содержание бутилена в продуктах пиролиза этилен-бутиленового сополимера — мерой содержания бутиленовых групп. [c.194]

В литературе описаны хроматографические методы определения различных высококипящих кислородных соединений в биологических объектах [8], причем наибольшее значение, по-видимому, имеет анализ стероидов, который после предварительной подготовки (гидролиз, этерификация и т. д.) осуществляется на колонках с силиконами при температурах порядка 200—275 °С. Обычно стероиды анализируют в виде триметилсилиловых эфиров, получаемых путем реакции с бмс-триметилсилилацетамидом, бмс-триметилсилилтри-фторацетамидом или с другим подобным реагентом. [c.240]

Детектор сечения ионизации имеет универсальное применение. Он используется прежде всего в хроматографическом анализе инертных газов, жирных кислот, стероидов, в производственной (потоковой) газовой хроматографии и препаративной хроматографии. Следует особо отметить, что детекторы [c.449]

В этой главе приведен список монографий по хроматографии, электрофорезу и противоточному распределению, опубликованных с 1962 по середину 1978 г., и периодических изданий по хроматографии. Более двухсот монографий, посвященных этим вопросам, можно найти в hemi al Abstra ts с 1962 по 1972 г. Вначале приводятся только те книги, в которых рассматривается лабораторное применение методов, а затем приводятся монографии, в которых обсуждается более широкий круг вопросов. В список не включены узкоспециализированные монографии, посвященные анализу какой-либо одной группы соединений, например аминокислот, антибиотиков, белков, стероидов и т. п., сборники хроматографических данных, а также некоторые руководства, написанные в учебных целях. Среди монографий по ионному обмену указаны только книги, посвященные методам разделения. [c.356]

Как отмечали Новотны и сотр. [1], в силу чрезвы-чайной сложности смесей летучих соединений, определяющих запах пищевых продуктов, загрязнений воздуха, табачного дыма и физиологических жидкостей, для их достаточно эффективного разделения требуются высокоэффективные капиллярные колонки. Кроме того, многие компоненты таких смесей (а также некоторые пестициды, производные наркотиков, фармацевтические вещества, аминокислоты., стероиды и сахариды) при анализе в обычной газохроматографиче-ской системе сильно разрушаются или совсем не доходят до детектора. В связи с этим иногда пытаются использовать для подобных специфических анализов более инертные и высокоэффективные стеклянные открытые хроматографические колонки. Некоторые из этих попыток были связаны с подробным анализом соединений определенного класса, другие сводились к поверхностному анализу для демонстрации преимуществ этих хроматографических систем. [c.158]

При термической деструкции анализируемых веществ, разделенных на тонком слое сорбента, для ускорения и достижения большей полноты извлечения детектируемых веществ из сорбента в ряде случаев в хроматографическую систему вводят окислители или восстановители [31]. Этот прием широко используют в элементном анализе. Мукхер-жье с сотр. [32] экспериментально показал, что ряд веществ (например, некоторые эфиры, стероиды и терпены) пе ниролизуются нолностью даже при 800—900°С, частично оставаясь в слое сорбента. Устранить это нежелательное явление можно введением в сорбент катализаторов разложения, например окиси меди. Однако применение подобных катализаторов ограниченно, так как они могут влиять па процесс хроматографического разделения и прп нагревапни вступать в реакции с сорбентом. [c.68]

В практике хроматографических работ наибольшее )аспространение получили хромосорбы W, G, Р, А и НР 10, И, 44, 48—52]i. Последний является носителем высшего качества (High — Performan e), технология его производства предусматривает очень тщательную обработку и особый контроль. Этот носитель адсорбционно и каталитически инертен, что позволяет использовать его для анализа стероидов. Хромосорбы G, Р и А также являются носителями специального назначения. [c.13]

Уилк и Брилл [64] обрабатывали пятна алкалоидов на хроматографической пластинке парами иода. При этом образовывался ряд производных, и по расположению пятен на пластинке можно было осуществить идентификацию исходных соединений. Уилк и сотр. [10] обрабатывали пластинку с нанесенными на них пробами полиядерных ароматических углеводородов парами иода в затемненной камере в течение различных промежутков времени (от нескольких минут до нескольких часов) до завершения реакции. О полноте иодирования судили по интенсивности окраски пятен. Далее избыток иода удаляли и элюировали пластинку соответствующим растворителем. Аналогичный метод был использован при анализе ряда ароматических аминов. Шмидт [65] нашел, что из 43 исследованных им фармацевтических препаратов 23 реагировали с иодом непосредственно на пластинке. Уилк и Тауп [66] исследовали процесс дегидратации холестерина, адсорбированного на хроматографических пластинках и обработанного парами иода. Эти авторы выделили пять соединений производные димера и три-мера холестерина, тример, 1-изопропил-4-метилницен и 10-изо-пропил-7-11Н-индено-2,1-фенантрен. Браун и Тернер [67] исследовали действие иода на фенольные стероиды, адсорбированные на слое силикагеля. Эстрон давал два соединения — [c.204]

Рассмотрение научной и производственной литературы показывает, что хроматографический анализ позволяет эффективно раз- делять, выделять, количественно определять и идентифицировать алкалоиды, антибиотики, барбитураты, витамины, гликозиды, гормоны, органические кислоты, лекарственное растительное сырье, наркотики, настои, отвары, спирты, стероиды, сульфаниламиды, терпены, углеводы, фенолы, фенокислоты, аминокислоты, галогенсодержащие препараты и многие другие физиологически активные вещества. [c.275]