также Буферы, Буферная

При добавлении к буферному раствору щелочи концентрация водородных ионов и pH изменяется также незначительно. Щелочь при этом будет реагировать с другим компонентом буфера (СНдСООН) по реакции нейтрализации [c.75]

Буферное действие фосфатной системы основано на возможности связывания водородных ионов ионами НРО," с образованием Н,РО, (Н + + НРО," —> Н,РО, ), а также ионов ОН с ионами Н,РО, (ОН + + Н,РО, —> НРО/ + Н,0). Буферная пара (Н,РО, —НРО/) способна оказывать влияние при изменениях pH в интервале от 6,1 до 7,7 и может обеспечивать определенную буферную емкость внутриклеточной жидкости, величина pH которой в пределах 6,9—7,4. В крови максимальная емкость фосфатного буфера проявляется вблизи значения pH 7,2. Фосфатный буфер в крови находится в тесном взаимодействии с бикарбонатной буферной системой. Органические фосфаты также обладают буферными свойствами, но мощность их слабее, чем неорганического фосфатного буфера. [c.588]

Основная трудность, возникающая при работе с рН-статом, связана с необходимостью интенсивного перемешивания раствора, которое может денатурировать белок. Кроме того, у системы существует постоянная времени, и для некоторых кинетических экспериментов она может оказаться слишком большой. По этой причине для точной регистрации небольших изменений pH применяют чувствительные рН-метры. При этом отпадает необходимость и в титровании кислотой или щелочью, и в перемешивании в ходе реакции. Вмонтированную в прибор магнитную мешалку можно выключить в ходе эксперимента. Изменение pH за все время проведения опыта настолько незначительно, что не сказывается на скорости реакции. В сущности шкала pH при этом утрачивает свое значение, и прибор должен быть проградуирован в мВ. Чувствительность метода зависит от постоянной времени усилителя и самописца, а также от буферной емкости образца и среды. При достаточно низкой концентрации буфера некоторые приборы способны зарегистрировать сдвиг на всю шкалу при появлении всего лишь 0,1 мкмоля ионов водорода. При использовании чувствительных рН-метров можно измерять значения начальной скорости реакции с точностью до нескольких секунд. [c.226]

Буферные растворы играют важную роль в аналитической химии и вообще в лабораторных работах, особенно в области биохимии, где равновесия и скорости реакций очень сильно зависят от pH. Кровь, молоко и другие жидкости животного происхождения содержат большое количество буфера (ионы бикарбоната и угольная кислота, а также белки). Нормальное значение pH крови человека равно примерно 7,4. Обычные колебания составляют менее 0,1 единицы pH, и повышение или понижение pH на 0,4 приводит к смертельному исходу. Скорости большинства ферментативных реакций существенно зависят от pH. [c.215]

Далее, соли, также имеющие характеристические значения величин R или при своем перемещении по колонке или по бумаге вытесняют часть остальных веществ, уменьшая эффективность разделения. Кроме того, описан ряд случаев, когда присутствующие соли вызывали удвоение полос или пятен некоторых индивидуальных веществ [82, 96). Наконец, соли могут мешать обнаружению компонентов смеси. Самое простое решение — всем отказаться от использования солей. В качестве буферов вместо неорганических солей можно применять органические вещества, которые затем удаляют отгонкой. О таких летучих буферных системах более подробно, сказано в главе, посвященной ионообменникам. [c.451]

Степень удерживания образца снижается с увеличением ионной силы подвижной фазы и увеличивается с увеличением ионообменной емкости сорбента. Ионная сила подвижной фазы возрастает при возрастании концентрации буфера и сохранении неизменным pH или при добавлении соли. Важна также концентрация буферных растворов, так как в растворе наблюдается конкуренция между ионами образца и буфера. Уменьшение концентрации буферного раствора увеличивает сродство смолы к образцу, что приводит к увеличению времени удерживания. Концентрация буферного раствора колеблется от 0,001 до 6 моль/л, причем верхняя граница определяется растворимостью соли, используемой в качестве буфера, а нижняя — самой буферной силой, так как в слабом буферном растворе нельзя контролировать уровень pH. Сильных буферных растворов также следует избегать, так как возможно выпадение осадка и забивание колонок. Сила растворителя зависит от типа противоиона, причем степень удерживания образца увеличивается в ряду, обратном ряду активности ионов, приведенному выше. [c.36]

Наиболее мощными буферными системами крови являются гемо-глобиновый и оксигемоглобиновый буферы, которые составляют примерно 75% всей буферной емкости крови. Буферные свойства гемоглобина по своему механизму действия идентичны белковым буферным системам кислые продукты обмена веществ взаимодействуют с калиевой солью гемоглобина с образованием эквивалентного количества их калиевых солей и свободного гемоглобина, обладающего свойством слабой органической кислоты. Кроме того, система окси-гемоглобин — гемоглобин участвует в еще одном своеобразном механизме поддержания постоянства pH крови. Как известно, венозная кровь содержит большие количества углекислоты в виде бикарбонатов, а также СО2, связанной с гемоглобином. Через легкие углекислота выделяется в воздух однако сдвига pH крови в щелочную сторону не происходит, так как образующийся оксигемоглобин является более сильной кислотой, чем гемоглобин. В тканях, в артериальной крови под влиянием низкого парциального давления кислорода оксигемоглобин диссоциирует и кислород диффундирует в ткани. Образующийся при этом гемоглобин, однако, не обусловливает изменения pH крови в щелочную сторону, так как в кровь из тканей поступает углекислота. [c.82]

Для электрофоретического разделения нуклеиновых кислот применяют также неоднородные буферные системы [387, 1087]. При электрофорезе в комбинированном полиакриламидно-агарозном геле применяли трис-боратный буфер [983]. Электрофоретические свойства нуклеиновых кислот, а значит, и их разрешение при электрофорезе в какой-то степени зависят от используемой буферной системы [778, 1004, 1070]. По нашему мнению, в каждом конкретном случае наиболее подходящий буфер [c.372]

Действие буферных систем в организме связано также с рядом физиологических механизмов все кислоты в конце концов попадают в кровь, где могут связываться бикарбонатным буфером [c.82]

Почва и почвенные растворы также обладают определенной буферной характеристикой, которая обусловливается наличием коллоидов и поглощенных катионов. Большое значение имеют энергия поглощения водородных ионов коллоидами и степень диссоциации коллоидов. Органическое вещество почвы преимущественно состоит из слабых кислот, поэтому оно увеличивает буфер-ность почвы. [c.214]

Десорбцию антибиотиков осуществляют после избирательного вытеснения примесей действием водных растворов кислот, промывки колонны с сорбированным тетрациклином раствором аммония хлорида с pH 6—6,5, элюированием буферным раствором аммиака или борной кислоты. Полученные препараты очищают переосаждением, осветлением концентрата углем, дальнейшей кристаллизацией и перекристаллизацией основания из водного раствора, кристаллизацией в виде гидрохлорида или хроматографией в виде оснований, хлоргидратов, металлических солей или других производных, а также иротивоточным распределением в системе кислый буфер — н. бутиловый спирт. [c.693]

Как можно показать с помощью теоретических выкладок, использование ионов буфера с большими молярными коэффициентами экстинкции приводит к более чувствительному детектированию. Молярный коэффициент экстинкции в УФ-спектре имидазола в максимуме при 205 нм составляет 5000. Имидазольный буфер можно использовать в области от 190 до 220 нм для непрямого детектирования, т.е. область применения ограничена нижней УФ-областью. Вследствие того, что многие вещества также поглощают в УФ-области, при детектировании могут возникать помехи. Расширение области непрямого детектирования в сторону более высоких длин волн и/или в область более щелочных значений pH достигается 4-аминопиридином (4-АП). В максимуме поглощения при 205 нм 4-АП обладает молярным коэффициентом экстинкции 15500, при 245 нм - около 15600. При 254 нм существует еще один пик с экстинкцией около 14000. Это примерно в три раза больше, чем молярный коэффициент экстинкции имидазола при 214 нм. Подвижность 4-АП примерно такая же, что и у имидазола. Преимущество 4-АП проявляется в том, что ом применим в более широкой области длин волн - даже при 270 нм можно проводить непрямое детектирование. Кроме того, буфер 4-АП можно использовать до значений pH 10.1 без уменьшения чувствительности буферной системы вследствие исчезновения заряда 4-АП. [c.61]

Неблагоприятную адсорбцию белков на поверхности капилляра можно уменьшить также добавками низших полиаминов, например, 1,3-ДАП. При этом получают высокую эффективность, однако из-за большой собственной электропроводности буфера следует использовать электрические поля низкой напряженности. Действие буферных добавок, вероятно, частично объясняется необратимой адсорбцией на стенках капилляра. Поэтому одновременно со снижением адсорбции пробы происходит резкое уменьшение электроосмоса. В качестве примера на рис. 60 показано разделение стандартных белков. [c.69]

Гидратация ацетальдегида тщательно изучена Беллом и сотр. [26] (см. также [14], стр. 151 и сл.). Эта реакция — частный пример большой группы реакций присоединения к двойным связям С=0 или С=М, но в отличие от большинства таких реакций она ничем не осложнена. Гидратация ацетальдегида обратима и при 25 °С имеет константу равновесия 1,6 реакция подвержена и общему кислотному, и общему основному катализу. Для разнородной группы кислых катализаторов — четырех карбоновых кислот, фенола и семи солей пиридиния, — с хорошей точностью приложимо каталитическое уравнение Бренстеда (а =0,54). Каталитические коэффициенты сопряженных оснований этих кислот плохо коррелируют с константами основности, хотя и имеют общую тенденцию изменяться в том же направлении. Экстраполяцией скорости реакции в буферных растворах к нулевой концентрации буфера найдено, что при 25 °С в отсутствие других катализаторов, кроме Н3О+, Н2О и ОН", приложимо уравнение [c.419]

Добавка второго хирального селектора, В этом методе в буферной системе находятся два различных хиральных селектора. Однако этот способ до настоящего времени только в отдельных случаях приводил к улучшению разрешения при разделении энантиомеров. Например, комбинация хирального краун-эфира с ЦД для некоторых проб проявляет синергический эффект. Иногда к улучшению селективности приводит также использование двух различных ЦД в одной буферной системе. Однако, в общем случае введение второго селектора и, таким образом, второй равновесной системы в буфер приводит к потере селективности. [c.90]

Дальнейший рост концентрации хирального селектора может резко ограничить подвижность анализируемых веществ, так что они Детектируются очень близко к ЭОП. В этом случае из-за слишком малой зоны движения разделение энантиомеров может стать невозможным. Кроме того, при повышении концентрации ЦД растет вязкость буфера, что замедляет ЭОП и увеличивает время анализов. В капиллярах с заторможенным ЭОП рост концентрации ЦД также приводит к уменьшению подвижности анализируемых веществ, повышению вязкости буферной системы и, вследствие этого, к увеличению времени анализов. [c.92]

Для того чтобы иметь возможность приготовить буферные растворы с любым значением pH, необходимо иметь достаточно большой ассортимент веществ, которых изменяется постепенно. Например, буфер, приготовленный из хлоруксусной кислоты и хлорацетата натрия, имеет оптимальную емкость для pH = 2,7, так как величина рК хлоруксусной кислоты равна этому значению. В менее кислой области эффективен формиатный буфер, приготовленный из формиата натрия и муравьиной кислоты, у которой рК = 3,75. В области еще более высоких pH можно использовать ацетатный буфер, так как у уксусной кислоты рК = 4,8. В щелочных растворах часто используют аммиачный буферный растзор, содержащий смесь ионов аммония (рК = 9,2) и ам-миа1ка, а также боратный буферный раствор, состоящий из борной кислоты (рХ = 9,1) и ее натриевой соли. [c.105]

Электрофорез сыворотки крови проводят в 1%-ном агаре в ме-динал-вероналовом буфере (pH 8,6) с ионной силой 0,05. Все белки сыворотки при pH 8,6 заряжаются отрицательно и перемещаются в электрическом ноле в сторону анода. Однако практически медленно продвигающиеся фракции белков сыворотки обычно движутся в сторону катода. Аномальное движение этих фракций объясняется наличием в агаровом геле электроэндоосмотического тока жидкости, направленного в описанных выше условиях от анода к катоду, а также тока жидкости, возникающего при неравномерном испарении воды с поверхности геля. Неравномерное испарение приводит к неравномерному распределению электрического поля в нем. Уменьшить испарение воды можно двумя способами 1) герметически закрывая электрофоретическую камеру во время электрофореза, 2) проводя электрофорез при низкой температуре (в холодильнике или холодной кОмнате, буферный раствор должен быть заранее охлажден). [c.92]

После выбора подходящего хирального селектора и оптимального значения pH следует оптимизировать также ионный состав разделяющего буфера. Как показано на рис. 90, подвижность буферных ионов влияет на форму пика и разрешение анализируемых веществ. [c.94]

Во всех трех случаях выдерживались одинаковые условия ввода пробы, и все условия разделения, за исключением буферных ионов, поддерживались одинаковыми. Ясно видно, что в случае применения в качестве буфера лимонной кислоты получается лучшее разрешение и, как следствие, более высокая эффективность разделения. Это приводит также к большей чувствительности системы. Этот пример показывает, что и при низких значениях а путем улучшения эффективности можно достичь достаточного хорошего разрешения анализируемых веществ. [c.94]

Одним из самых важных применений электрофореза является использование его в анализе естественных смесей коллоидов, например белков, полисахаридов и нуклеиновых кислот, а также продуктов, полученных фракционной перегонкой. При электрофорезе между раствором белка и буфером в специальной У-образной трубке, снабженной электродами, образуется резкая граница, за движением которой можно проследить с помощью оптической шлирен-системы (разд. 11.10). Эти опыты обычно проводят при температуре 4° С, т. е. при максимальной плотности воды, так что температурный градиент в электрофоретической кювете, вызванный нагреванием током, сопровождается наименьшим градиентом плотности. Градиенты плотности горизонтально поперек кюветы стремятся вызвать конвекцию. На рис. 20.1 [1] показана электрофоретическая картина плазмы крови человека в буферном растворе (pH 8,6) диэтилбарбитурата натрия с ионной силой 0,10 (после 150 мин при 6,0 В/см и 1°С). Строится график зависимости градиента показателя преломления от расстояния в кювете (горизонтальная ось). Одна картина получена для той части кюветы, в которой белки опускаются вниз, а другая — для той части, где белки поднимаются вверх. Начальные положения границ указаны на рисунке тупыми концами стрелок. Различные виды белков представлены альбумином, аг, аг-, р-, у-глобу-линами и фибриногеном ф. Площадь под определенным пиком почти точно пропорциональна концентрации белка, дающего эту границу. Так, например, процент альбумина может быть получен делением площади пика альбумина на суммарную площадь всех пиков белков. е-Граница в спускающейся части и б-граница в поднимающейся части картины обусловлены не белковыми компонентами, а изменениями концентрации соли, которые возникают в опытах с обычным переносом вблизи начального положения границы. [c.603]

Хотя лигандная хроматография является более эффективным методом благодаря более широкому спектру р/Са, что позволяет лучше разделять аминокислоты, следует учитывать ряд обстоятельств. Большое значение имеет химическая и физическая стабильность смолы. Значительное внимание должно быть уделено также чистоте буферной системы. Поддержание равновесия ионов металла между смолой и элюирующими буферами существенно для получения воспроизводимой картины деления аминокислот (идентификация пиков). Кроме того, очень важны требования к скорости течения буфера и рабочим температурам. Изготовление смол с более высокой стабильностью и контроль за концентрацией иона металла в системе устранят многие трудности и позволят использовать в полной мере все возможности этого метода. [c.38]

Буферные смеси широко используются в объемном анализе, наиример, с помощью а.ммиачного буфера (NH40H + NH4 1) определяют содержание в воде ионов кальция и магния (трилономет-рический метод). С помощью буферных смесей определяют также pH раствора — колориметрически (по окраске) и потенциометри-чески (измерением ЭДС). [c.57]

Буферным действием обладают практически все физиологические жидкости и это имеет чрезвычайно большое биологическое значение. Для человека очень важно буферное действие крови изменение pH крови на несколько десятых приводит к серьезным нарушениям жизнедеятельности организма. Водородный показатель крови колеблется в пределах 7,3—7,4. В процессах обмена веществ в кровь может попасть большое количество органических кислот, однако pH крови остается всегда постоянным. Почвы и почвенные растворы также обладают определенной буфер-ностью и это очень важно для развития растений и почвенных микроорганизмов. Буфериость характерна и для клеточного сока растений. [c.121]

При проведении исследований по гидролизу изучаемых веществ в присутствии гомогеиата кожи количественное соотношение между буферной системой и диоксаном сохранялось таким же. Теми же были концентрации действующих веществ. Отличия состояли лишь в том, что в пробирки с буфером, диоксаном и веществом добавляли гомогенат кожи крысы в количестве 300 мл. Пробирки тщательно встряхивали, затем перед помещением в термостат также проводили контрольное титрование (пробу предварительно фильтровали на воронке со стеклянным фильтром). [c.148]

В ОФХ часто используют буферные растворы. Следовательно, знание растворимости каждого буферного компонента в подвиж-1ЮЙ фазе являе1ся критическим требованием. Наиболее часто применяют фосфатный буфер в сочетании с водно-ацетонитрильным элюентом. Фосфатные буферные растворы имеет незначительное поглощение в УФ-свете, а также три эффективных буферных области при pH близких к 2, 7 и 12. Э-т свойства делают их очень привлекательными для ра зделения многих сорбатов. [c.313]

При препаративной хроматографии на ионитах применяют летучие буферы, которые легко отгоняются с водой при упаривании элюата. Для приготовления таких буферов часто используют углекислый аммоний, который, однако, не имеет достаточной буферной емкости. Более выгодны соли муравьиной, уксусной и пропионовой кислот с пиридином или триметиламином. Уксуснокислый и муравьинокислый аммоний также достаточно легко удаляются в вакууме масляного насоса при 30—50°. [c.557]

Вновь можно вндеть, что 0,02 М фосфатная смесь — также х фоший буфер, хота и послабее описанного в первом случае. Буферная емкость второго раствора ниже емкости первого. [c.153]

В качестве буферных веществ могут служить также цвиттерионные молекулы (внутренние соли), которые обладают большой буферной емкостью, но не вносят значительного вклада в общую электропроводность системы. Цвиттерионы могут образовывать ассоциаты с белками и поверхностью капилляра и, тем самым, уменьшать адсорбцию белков. За счет применения аминосульфоната, аминосульфата и, в последнее время, фосфонийсульфоната в очень высоких концентрациях в качестве добавок к фосфатному буферу в нейтральных условиях можно разделять как основные, так и кислые белки. [c.67]

В качестве нейтральных хиральных добавок к элюенту также опробованы циклодекстрины (ЦД), преимущественно в виде -формы. Обычно ЦД используют в обращенно-фазовом режиме с силикагелем С,з и водными буферными элюентами [212—214], Первые исследования, проведенные с замещенными миндальными кислотами, показали, что заместитель оказывает очень сильное влияние на разделение и что удерживание падает с ростом pH или концентрации (3-ЦД. Полное разделение энантиомеров а = 1,8) для о-хлорминдальной кислоты наблюдалось в буфере при pH 2,1 и концентрации /3-ЦД 14,4 мМ, в других условиях селективность была низкой и падала с ростом pH. [c.161]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология