Спектры флуоресценции влияние

Спектр излучения растворов остается постоянным при возбуждении любыми монохроматическими длинами воли (спектральной линией), лежащими в области поглощения. Эта независимость спектра флуоресценции раствора от длины возбуждающего света является следствием влияния растворителя на возбужденные молекулы. [c.483]

Вторичный светофильтр предназначен для устранения влияния возбуждающего света. Установленный после анализируемого объекта, он пропускает свет люминесценции и полностью поглощает возбуждающие его лучи. Выбор первичного и вторичного светофильтров производят в соответствии с оптическими характеристиками анализируемого соединения спектром возбуждения и спектром флуоресценции. [c.214]

В качестве приемника излучения для спектров флуоресценции обычно используются фотоумножители, спектрального прибора — монохроматор, реже светофильтры. Назначение спектрального прибора — выделить интересующую нас линию из всего спектра, испускаемую возбужденным атомом или другими частицами, которым возбужденный атом передал свою энергию при соударениях или которые в свою очередь возбудились, поглотив какие-то кванты света, испущенные оптически возбужденным атомом. Попадание па фотоумножитель излучения, содержащего только длину волны спектральной линии атома определяемого элемента, уменьшает влияние постороннего излучения, которое должно рассматриваться как шум относительно определяемого сигнала. [c.134]

Для выяснения влияния заместителей при атоме N в положении 5 на фотохимические свойства были изучены электронные спектры поглощения и спектры флуоресценции соединений (III а-г) в спирте [c.50]

Влияние растворителей на спектры флуоресценции [c.436]

Впервые возможность определения рзэ в твердых материалах была обнаружена при изучении природных и искусственных шеелитов [1564, 1778, 1780—1785]. Кристаллический Са 04 под действием ультрафиолетовых лучей испускает непрерывный спектр флуоресценции во всей видимой области. Рзэ, введенные сплавлением в его решетку в ничтожных количествах (порядка 10" — —10 г/г основы), оказываются способными излучать собственные дискретные спектры фосфоресценции, которые и служат для обна-)ужения и определения большинства элементов, за исключением а, Се, Но, УЬ, Ьи и У. Наиболее удобно определять 5т, обладающий самыми интенсивными полосами, и N(1, спектр которого отличается от спектров других элементов наличием излучения в глубокой инфракрасной области, благодаря чему отсутствует влияние остальных рзэ, в том числе и 5т в 100-кратном количестве [1781]. Чувствительность определения индивидуальных элементов приведена в табл. 39. [c.203]

Вопрос зависимости флуоресценции от химического строения вещества и влияние на спектр флуоресценции тех или иных группировок составляет задачу молекулярного спектрального анализа, [c.152]

Флуоресцентный анализ распространен больше, чем анализ по первичным спектрам, потому что он проще, быстрее и обладает более высокой чувствительностью. Однако интенсивность линий определяемых элементов в спектре флуоресценции, как правило, значительно больше зависит от валового состава пробы, чем при возбуждении электронами. Поэтому, если пользоваться первичными спектрами, влияние третьих элементов вносит меньшую ошибку в -результат анализа. [c.268]

Кривые поглощения или флуоресценции можно снять непосредственно с хроматографического пятна. Рис. 4, а показывает спектр возбуждения, полученный для 3,1 мкг риванола по числу и положению пиков в спектре он точно соответствует спектру, найденному при исследовании вещества в кювете. Только слабое гипсохромное смещение наблюдается для а-пика. Это обусловлено влиянием адсорбента [5,15—18]. Рис. 4,6 изображает спектр флуоресценции, где пунктирная кривая-—спектр, соответствующий адсорбенту. Предельное количество риванола, которое может быть определено флуоресцентным методом, равно 3 нг. [c.123]

Рис. 22. Влияние кислотного гидролиза на спектр флуоресценции ядра из кожицы лука.

Метод спектральной флуоресцентной микроскопии дает возможность выявлять эффект деблокирования фосфатных групп НК. Влияние обработки уксусным ангидридом на спектр флуоресценции клеточных ядер проростков гороха показано на рис. 23. [c.187]

При рассмотрении влияния растворителя на спектры флуоресценции мы должны различать два типа органических соединений углеводороды и органические вещества, в состав которых входит кислород или азот, которые имеют кислотный или основной характер и обладают динольным моментом. [c.42]

При рассмотрении влияния на спектры флуоресценции концентрации водородных ионов мы уже подчеркнули необходимость вести флуорес- [c.43]

При работе с этими соединениями отмечено влияние природы растворителей на спектры генерации. Циклогексан по сравнению с толуолом смещает спектр в коротковолновую область, полосы генерации сужаются. В а-метилнафталине исчезает колебательная структура в спектрах флуоресценции и генерация осуществляется на одной полосе, соответствующей максимуму флуоресценции [38]. [c.260]

Поляризационные спектры флуоресценции в действительности гораздо сложнее, чем это показано на рис. 19. В значительной степени это объясняется присутствием нескольких перекрывающихся переходов, однако значение ро, равное 0,5, далеко не всегда получается даже для чистых 5] 5о-переходов, й ро может принимать различные значения для разных компонент колебательной структуры полосы флуоресценции, т. е. поляризация испускания флуоресценции при постоянной длине волны возбуждения может зависеть от длины волны испускания (см., например, [64]). То, что предельная поляризация не всегда принимает максимально возможное теоретическое значение, в работе [65] отнесено на счет влияния крутильных колебаний молекулы в возбужденном состоянии. [c.63]

НИИ ртутной лампы, выделенной двойным кварцевым монохроматором. Спектры анализировали с помощью второго двойного монохроматора, поэтому наложением возбуждающего света, рассеянного анализирующим монохроматором, можно было пренебречь. Однако один источник помех показан кривой 6, он является сигналом от кюветы с чистым этанолом. Это испускание дает линза из плавленого кварца, используемая для фокусировки флуоресценции на входную щель анализирующего монохроматора. От этой флуоресценции избавлялись заменой линзы из плавленого кварца на линзу из синтетической двуокиси кремния или устраняли облучение линзы с помощью кюветы из синтетической двуокиси кремния с бензолом, помещенной между образцом и фокусирующей линзой анализирующего монохроматора. Остальные кривые иллюстрируют три эффекта самопоглощение флуоресценции, влияние сильного поглощения возбуждающего света и концентрационное тушение. В разбавленных растворах антрацена (кривые 1 и 2) самопоглощение флуоресценции ничтожно, и были получены практически неискаженные спектры. При увеличении концентрации первая (коротковолновая) полоса флуоресценции сильно поглощалась из-за перекрывания с полосой поглощения и практически полностью отсутствовала в более концентрированном растворе (кривая 5). Напротив, поглощение при 400 нм было пренебрежимо мало во всех растворах, и интенсивность основной колебательной полосы при этой длине волны, таким образом, являлась мерой скорости испускания флуоресценции растворов. Поглощение было полным при концентрации 3,4 10 Л4, и интенсивности флуоресценции при 400 нм в этом растворе и в растворе концентрации 3,4-10" М были одинаковыми (кривые 3 ц 4). Интенсивность флуоресценции уменьшалась в растворе концентрации 3,4-10 М из-за концентрационного тушения (см. раздел. II, Б, 2). [c.220]

Спектры флуоресценции и фосфоресценции и их эффектив-ность подвержены многообразным влияниям растворителя. Не которые из них сложны и пока еще недостаточно хорощо исследованы. Можно выделить следующие виды влияния раствори- [c.354]

Фиг. 108. Влияние реабсорбции на спектр флуоресценции хлорофилла а в эфире [63].

По красной флуоресценции комплекса вольфрама (VI) с карминовой кислотой молено определять вольфрам в интервале содержаний 0,04—0,36 ррт [65. Максимум спектра флуоресценции комплекса — 585 нм, максимум возбуждения — 515 нм. Определению мешают многие ионы, но влияние некоторых можно устранить введением аскорбиновой кислоты. Мешающие ионы отделяют. [c.241]

Таким образом, введение в положение 5 электороноакцепторной нитрогруппы сдвигает максимум поглощения в длинноволновую область. Одинаковое влияние на положение длинноволнового максимума поглощения оказывают и фенильная и этильная группы при атоме азота. Батохромный сдвиг в спектре флуоресценции увеличивается с ростом [c.64]

Изучают влияние НАД, пирувата и АДФ на флуоресценцию аурамина О, связанного с ЛДГ. Для этого вначале снимают спектр флуоресценции раствора, содержащего 0,04 мМ апо-ЛДГ и 0,15 мМ аурамина О в 0,1 М К-фосфатном буфере (pH 7,0), содержащем 5 мМ ЭДТА, а затем добавляют к пробе лиганды в следующих конечных концентрациях 6 мМ НАД, 6 мМ пируват, 9 мМ АДФ. Регистрируют увеличение флуоресценции комплекса аурамина О с ЛДГ под действием использованных соединений. Ставят контроль, в котором учитывают влияние добавок на флуоресценцию зонда в отсутствие белка. Рост интенсивности эмиссии связанного с белком аурамина О может быть обусловлен либо увеличением его количества, либо изменением флуоресцентных характеристик зонда. В любом случае увеличение флуоресценции зонда при связывании лигандов в активном центре свидетельствует о конформационной перестройке участков моле- [c.343]

Изучению прочности взаимодействия воды с хлорофиллом, выявлению места такого взаимодействия, выяснению влияния связанной воды на спектральные свойства пигмента посвящена работа [352]. Для рассмотрения этих вопросов авторы использовали спектры поглощения в инфракрасной и видимой областях, спектры флуоресценции. Качественно установлено, что связанная вода в хлорофилле а VL Ь имеет различную прочность. Место возможного взаимодействия хлорофилла а с водой — атомы кислорода циклопентанонного кольца. [c.139]

Различная сольватация молекул, находящихся в основном или возбужденном состоянии, приводит не только к сдвигу максимума флуоресценции, но и к изменению относительных интенсивностей электронно-колебательных элементов тонкой структуры полос испускания. Например, усиление взаимодействия растворителя с растворенным веществом может сопровождаться заметным повышением интенсивности запрещенных правилами симметрии вибронных полос, отвечающих слабым электронным переходам [320, 359]. Особенно хорошо изучено влияние растворителей на спектр флуоресценции пирена, впервые описанное Накадзимой [356] и позднее использованное Донгом и Винником [357] для разработки эмпирического параметра полярности растворителей, так называемой Рг/-шкалы (см. разд. 7.4). [c.443]

Как указывал С. И. Вавилов [1], свечение растворов становится замечательным и едва ли чем-нибудь заменимым средством изучения жидкого состояния . С этой точки зрения представляют интерес некоторые результаты исследования влияния растворителя на спектры флуоресценции, которые мы приводим в настоящей работе. Изменения положений спектров флуоресценции под действием растворителя у некоторых соединений бывает очень велики (порядка 10 ООО сж" ). Считалось, что влияние раствори-таля на спектры флуоресценции и поглощения зависит от целого ряда свойств реастворителя и растворенного вещества. Однако в работе [2] показано, что существует такое расположение растворителей, в отношении которого частоты максимумов спектров флуоресценции изображаются [c.262]

Очевидно, речь должна идти о воздействии физического фактора, тесно связанного с химическим строением. В литературе делались попытки сопоставления влияния растворителей на спектры флуоресценции и поглощения с дипольным моментом [л, диэлектрической постоянной е или показателем преломления п, однако без особого успеха. Для иллюстрации отсутствия связи между изменением у фл и л, е и п растворителей такое сопоставление в отношении исследованных нами веществ выполнено на рис. 2. Неудача попыток сопоставить действие растворителей на спектры с [а, е и п объяснялась одновременным действием всех этих факторов. Не отрицая возможного влияния этих факторов, следует отметить, что сопоставление изменений спектров флуоресценции с этими характеристиками растворителей нельзя считать вполне оправданным, (л, и п являются макроскопическими характеристиками сред и не отражают тех микроусловий, в которых находится молекула растворенного вещества. На молекулу растворенного вещества может оказывать преимущественное действие именно микроструктура растворителя. Микросвойством, неразрывно связанным с присутствием определенных группировок атомов, характеризующих данный химический класс, являются заряды на отдельных атомах молекул. Надо думать, что на электронное облако молекулы растворенного вещества будут оказывать влияние в основном заряды, сконцентрированные на отдельных атомах молекулы растворителя, которые могут приближаться вплотную к противоположно заряженным атомам молекулы растворенного вещества. К сожалению, данных о величине зарядов на отдельных атомах молекул почти нет, так что провести количественное сопоставление [c.263]

Несмотря на сходство спектров, приведенных на рис. 96, а и б, они имеют и определенные различия. Различия в спектрах нельзя объяснить влиянием среды, поскольку реакции окисления обоих углеводородов проводились в одинаковой среде (в ледяной уксусной кислоте), а физические свойства исследовавшихся углеводородов близки. Следовательно, различие в спектрах означает, что излучающие частицы неидентичны. Основываясь на этом выводе, можно при поиске излучающих частиц сразу же исключить из рассмотрения катализатор. Вывод относительно катализатора твляется существенным. До того как были сняты спектры, можно, .. <5ыло думать, что люминесцирует именно катализатор, поскольку при использовании хорошо люминесцирующих катализаторов спектры флуоресценции катализаторов совпадают со спектрами хемилюминесценции [9]. [c.207]

Для многих веществ чрезвычайно чувствительными к примесям являются спектры флуоресценции. Это связано с эффективным переносом энергии от молекул- хозяев к случайным молекулам примеси [13, 36, 59, 85, 144]. Испускаемое излучение является характеристичным для молекул примеси, а не для основных молекул например, в случае когда содержание тетрацена в антрацене составляет 0,1 часть на миллион, флуоресценция антрацена едва различима, а при содержании 0,3 частей на миллион она полностью подавляется [144]. Перенос энергии изучался и во многих других случаях. Соловьев исследовал влияние второй примеси на спектры поглощения и люминесценции первой примеси в решетке основного вещества. Так, добавка стильбена в кристаллы дибензила, легированные нафта-ценом, вызывает заметные изменения сйектра нафтацена [121]. Теория примесной флуоресценции была разработана Перлиным [84]. [c.170]

В других системах наблюдались слабые линии с красной стороны от предполагаемых начал чисто электронных полос нри низких температурах, при которых о колебательном возбуждении в основном состоянии не может быть и речи природа этих полос не установлена. Сидман исследовал систему антрацена нри 3800 А и нашел, что в дополнение к основной прогрессии, начинающейся приблизительно при 25 ООО с красной стороны существует также слабый спектр, поляризованный вдоль оси Ь. Он измерил семь линий, включая две резкие линии при 24 809 и 24 926 см . Определив из спектров флуоресценции, что начало системы в эмиссионном спектре расположено при 24 929 см , Сидман пришел к заключению, что эта частота соответствует отдельному электронному переходу. Он предположил, что этот переход может соответствовать уровню захваченного экситона типа, впервые предложенного теоретически Френкелем. Расчеты [27] подтверждают, что экситонная полоса этого перехода в антрацене лежит приблизительно на 200 ниже самого низкого уровня с к = О, на который в основном происходят сильные переходы. Кроме того, вследствие несовершенств или дефектов решетки могут быть индуцированы переходы на уровни, соответствующие началу полосы. Однако Лейси и Лайонс [57] недавно высказали предположение, что в привлечении таких специальных механизмов нет необходимости, так как начало электронной полосы, поляризованной вдоль оси Ь, лежит ниже, чем предполагалось ранее, и, возможно, достаточно низко для того, чтобы можно было объяснить полосы, наблюдаемые Сидманом. Кроме того, нельзя не принимать во внимание влияние небольших количеств примеси, в частности антрахинона, особенно после выяснения подобной проблемы в случае спектра кристаллического нафталина. [c.561]

Совершенно ясно, что соблюдение этого же правила позволит элиминировать кажущееся влияние растворителя, поскольку оно фактически обусловливается вышеуказанным различием цвета флуоресценции ионов н молекул. Однако бы.ио бы, разумеется, неправильным думать, что изме-11ение спектров флуоресценции при залюне одного растворителя другим обусловливается единственно толыш указанными колебаниями в степени диссоциации и гидролиза флуоресцирующих молекул. [c.44]

Влиянию концентрации на интенсивность свечения и на спектры флуоресценции растворенного вещества уделялось много внимания со стороны физиков вопрос этот детально изучен, и в нем достигнута полная ясность. Тем не менее в работах по люминесцентному анализу недоучет влияния концентрации флуоресцирующего вещества обусловливает нередко существенные недоразумения. Можно смело сказать, что во многих случаях именно здесь надо искать причину расхождений указаний отдельных авторов относительно цвета флуоресценции растворов одного и того же вещества. Влияние концентрации мо/кет сказываться в двух нанравлв ниях в концентрационном тушении и во вторичной абсорбции. Оба явле ния уже рассмотрены в главе И. [c.48]

Другую группу образуют заместители, содержащие атомы с неподеленной парой электронов (КНз, ОСН3, СМ). Если эти заместители сопряжены с антраценовым ядром и сопряжению не препятствуют стерические факторы, то их влияние оказывается значительно более существенным, чем заместителей первой группы. Длинноволновая полоса поглощения становится отличной от соответствующей полосы антрацена , и сдвиг ее в красную область более значителен [19, 22]. Кроме того, для соединений, содержащих заместители второй группы, характерна сильная зависимость спектров флуоресценции от природы растворителя (размывание колебательной структуры и сильное батофлорное смещение при переходе от неполярных растворителей к полярным). У соединений, содержащих заместители [c.29]

При введении в орто-положенпе фенильного радикала 2-фенил-бензазола гидрокси- или тозиламиногруппы возникает ВВС. Эффект от ее образования выражается в появлении длинноволновой полосы поглощения ( макс 340—360 нм) и аномально большом стоксовом сдвиге спектра флуоресценции. Авторы работы [148], детально изучившие влияние ВВС на флуоресцентные свойства 2-(2-тозиламинофенил)бензоксазолов, считают, что причина аномально большого стоксова сдвига заключается в частичной трате энергии возбуждения на перенос протона и упрочнение ВВС в возбужденном состоянии. Чем прочнее водородная связь в основном состоянии, тем меньше энергии тратится на ее упрочнение в возбужденном состоянии, тем меньше стоксов сдвиг и выше интенсивность [c.107]

При исследовании влияния межмолекулярной водородной связи, обусловленной растворителем, на спектральные свойства азинов установлено, что спектры флуоресценции в полярных растворителях претерпевают незначительный гипсофлорный сдвиг, но иногда наблюдается батофлорный эффект, вызванный разрывом водородной связи в возбужденном состоянии [44]. Так же, как и в случае гетероциклов с одним атомом азота, протонирование азинов приводит к изменению относительного расположения пп - и яя -уровней и резкому увеличению интенсивности флуоресценции [45]. [c.128]

Использование спектрографов для вакуумного ультрафиолета в соединении с масс-спектрографами было в дальнейшем развито Хюрцелером, Инграмом и Моррисоном [77]. Потенциалы появления исходных ионов и их различных осколков могут быть определены со все возрастающей точностью методами фотоионизации (вместо методов ионизации при помощи электронов). Подобная работа проводилась Ви-лисовым, Курбатовым и Терениным [78], которые сравнивали эффект использования электронов и фотонов на некоторых алифатических и ароматических аминах. Вообще под влиянием удара фотона получается несколько осколков в обоих случаях дробление иона состоит главным образом в отщеплении водородных атомов. В случае бензилалеина был найден спектр флуоресценции NH,, который, однако, отсутство- [c.95]

Термин флуоресценция был введен Стоксом (1852) для давно известного явления [68] — способности некоторых веществ светиться при обыкновенной температуре под влиянием освещения и только во время освещения (способность светиться после освещения получила название фосфоресценции). Стокс сформулировал свой известный закон, согласно которому длина волны в спектре флуоресценции всегда больще длины волны поглощенного света. Ломвдель (1871) на примере хлорофилла и некоторых других органических соединений показал, НТО закон Стокса имеет исключения. С начала 80-х годов химики начали изучать зависимость между способностью веществ к флуоресценции и их химическим строением. Р. Мейер (1897) связал эту способность с присутствием в молекулах особых групп — флуорофоров . Кауфман, автор монографии Флуоресценция и химическая конституция (1906), ввел понятие о группах — флуорогенах , способность которых к флуоресценции проявляется в присутствии других групп ауксохромов. Штарк (1907) открыл способность флуоресцировать при освещении ультрафиолетовыми лзгчами. Однако к этому времени стало ясно, что спектры флуоресценции для структурной органической химии менее перспективны, чем ультрафиолетовые спектры. Со всей определенностью это положение сформулировал Штарк Так как связь флуоресценции с коротковолновыми полосами поглощения может считаться надежно установленной и так как полосы поглощения легче обнаружить и измерить, чем полосы флуоресценции, представляется целесообразным вопрос о связи между положением полос флуоресценции и молекулярной конституцией заменить вопросом о связи между спектрами поглощения и конституцией [69, с. 223]. За 50 лет положение мало изменилось. Спектры флуоресценции, несмотря на их успешное применение в отдельных случаях (о чем будет упомянуто далее), не стали таким же мощным средством исследования в аналитической органической химии, как другие методы, рассмотренные [c.241]

Фронтальное освещение — это наилучший способ наблюдения спектров флуоресценции концентрированных растворов, но при этом также возможны существенные искажения спектров. Например, на рис. 82 показано влияние добавления нафтацена к раствору 7У-фе1шл-2-нафтиламина. Возбуждающий свет [c.216]

Искажение спектра флуоресценции в результате самопоглощения или поглощения флуоресценции вторым веществом при расположении в линию больше, чем, при фронтальном освещении или освещении под прямым углом, так как в сильнопоглощающем растворе весь свет флуоресценции должен пройти весь слой жидкости до того, как попасть в регистрирующий прибор. Тем не менее расположение в линию имеет преимущество перед фронтальным расположением, так как его легче осуществить и наблюдаемая интенсивность не так сильно зависит от точного положения кюветы, содержащей образец. По этой причине такой метод используется для исследования влияния больших концентраций на флуоресценцию растворенного вещества. При выполнении таких измерений не следует игнорировать тот факт, что часть спектра подвержена самопо-глощению. Например, на рис. [c.219]