Флуоресценция как метод идентификации

Также применимы другие спектроскопические методы. Идентификация нескольких термопластов, например ПК, АБС, ПП, ПС, ударопрочного ПС и ПВХ может быть получена с помощью ИК-Фурье анализа, основанного на тех же принципах [37]. Под гамма-излучением молекулы ПВХ с высокой молекулярной массой, содержащие атомы хлора, выделяют возвратный квант рентгеновского излучения, легко улавливаемый анализатором рентгеновской флуоресценции. Полиолефины, у которых молекулярная масса намного ниже, испускают слабый сигнал обратного рассеяния, который едва заметен на рентгеновском анализаторе и поэтому полиолефины могут быть легко распознаны и отделены [16, 38]. Компания предложила технологию автоматической идентификации и сортировки использованных полимеров, в которой при составлении рецептуры полимера в нее включается флуоресцирующий краситель для полимера каждого типа — свой. Эти красители, которые легко регистрируются, можно добавлять в незначительных количествах 5 г на 1 т полимера достаточно для идентификации диодным устройством [39]. [c.340]

Анализ с помощью плоскостной (тонкослойной, бумажной) Ш X технически осуществляется почти так же, как и препаративное разделение, и отличается от последнего лишь малым объемом разделяемой пробы. Пятна разделенных ГАС выявляются сравнительно просто визуальным наблюдением их свечения при УФ облучении или окрашивании после опрыскивания слоя специфическими реагентами [267, 268]. В аналитических работах метод ТСХ чаще всего применяется для качественной идентификации отдельных групп соединений по характеру окрашивания (свечения) и параметрам удерживания (величинам И ). Получение точных количественных данных о составе разделяемой смеси с помощью ТСХ обычно связано с определенными трудностями. Некоторые перспективы улучшения разделения и облегчения количественного анализа кроются в применении уже упоминавшейся высокоэффективной круговой тонкослойной ЖХ и сканирующих устройств, фотометрирующих интенсивность спектров рассеяния или флуоресценции разделенных соединений [156]. [c.34]

Качественная идентификация компонентов анализируемой смеси производится одним из следующих методов химическим микроанализом по характерным окраскам, появляющимся в результате взаимодействия анализируемого вещества с добавляемым реагентом, по спектрам поглощения в ультрафиолетовой или инфракрасной областях по спектрам флуоресценции по масс-спектрам или же по спектрам ядерного магнитного резонанса. [c.98]

Одним из основных факторов, повлиявшим на углубление нашего понимания фотохимии, было развитие в течение нескольких последних десятилетий методов обнаружения и идентификации промежуточных продуктов фотохимических реакций. К ним относятся атомы, радикалы и ионы как первичные продукты фотолиза, возбужденные состояния этих первичных продуктов, возбужденные состояния, возникающие в первоначально поглощающем свет материале, включая триплетные, которые участвуют затем в флуоресценции, фосфоресценции и безызлучательных переходах (внутренняя конверсия и интеркомбинационная конверсия). Именно возможность изучения этих активных интермедиатов на коротких временных шкалах привела к появлению утонченных экспериментов с временным разрешением, которые рассматриваются в следующем разделе. Эксперименты с временным разрешением позволяют зондировать фотохимическую систему в заданный момент времени вскоре после поглощения кванта света, когда интересующие промежуточные продукты еще сохраняются. В этом разделе дается краткий обзор наиболее важных методик, пригодных для изучения промежуточных продуктов, с целью ввести читателей в круг обсуждаемых исследований с временным разрешением. Здесь не место для обсуждения теоретических основ спектроскопии будет лишь сделана попытка указать методики, которые могут быть с пользой применены. Одна из тем, которая многократно возникает, — это вопрос о том, как лазеры упростили более старые способы спектроскопических измерений и сделали возможными совершенно новые способы исследований. [c.194]

Для идентификации веществ, детектированных по методу отражения или флуоресценции, результаты сканирования ТС-хроматограмм следует записывать в виде графиков. Это, конечно, осуществимо и для веществ, погло- [c.200]

Доступным для использования во внутриаптечном контроле является метод флуориметрии. По характеру флуоресценции кристаллов или растворов можно, например, осуществить идентификацию препаратов некоторых алкалоидов, витаминов и др. Для возбуждения флуоресценции на растворы испытуемых веществ воздействуют ультрафиолетовым излучением с длиной волны 365—366 нм. Некоторые лекарственные вещества сами не флуоресцируют, но при взаимодействии с рядом реактивов образуют флуоресцирующие продукты. [c.249]

Флуоресценция под действием рентгеновских лучей может быть использована для идентификации наполнителей, содержащих тяжелые атомы [1, 11, 56, 62]. Метод состоит в использовании коротковолновых рентгеновских лучей для возбуждения и счетчика Гейгера для обнаружения рентгеновских лучей флуоресценции. Спектры испущенных рентгеновских лучей очень характерны для флуоресцирующих атомов. По интенсивности испускания рентгеновских лучей можно определить количество присутствующего наполнителя. [c.284]

Беллами, Лори и Пресс [9] использовали флуоресценцию при хроматографической идентификации ускорителей и антиоксидантов в вулканизатах. Основной материал экстрагировали ацетоном и экстракт упаривали досуха. Остаток растворяли в бензоле и раствор наносили на колонку из окиси алюминия. Через колонку пропускали чистый бензол для проявления, т. е. разделения зон различных химических соединений. Зоны антиоксидантов определяли путем наблюдения флуоресценции, вызываемой ультрафиолетовым излучением. Зоны ускорителей локализовали добавкой небольших количеств олеата кобальта к бензольному раствору перед пропусканием через колонку из окиси алюминия. Окрашенные продукты реакции образуют в колонке очень характерные окрашенные зоны. Выдавленную колонку разделяют на соответствующие части с помощью флуоресценции или цветных реакций, а адсорбированные вещества вытесняют из окиси алюминия этиловым спиртом. Выделенный материал идентифицируют с помощью других химических проб. Дополнительные сведения о хроматографических методах приведены в главе X. [c.302]

Обнаружение и идентификация веществ не являются единственной задачей, разрешимой методом наблюдения собственной флуоресценции вещества. Использование этого же приема позволяет выявлять некоторые общие данные относительно химической структуры интересующего вещества. Ианример, можно с уверенностью сказать, что вещество не является углеводородом, если его флуоресценция изменяется в зависимости от pH среды, или что оно не является простейшим производным бензола, если обладает флуоресценцией красного цвета, и т. д. [c.65]

Еще в прошлом веке флуоресценцию использовали в качестве метода грубой идентификации веществ. Так, при описании новых органических соединений наряду с такими свойствами, как цвет, форма кристаллов и др., часто упоминали способность к испусканию видимой флуоресценции. В течение многих лет широко пользовались качественной регистрацией видимой флуоресценции как невооруженным глазом, так и с помощью фотографии или микроскопа этот метод в руках опытного специалиста и до сих пор еще служит мощным инструментом в криминалистике, медицине и биологии, а также при определении примесей и браковке материалов, при детектировании хроматографических зон и т. д. [315], Приблизительно до 1945 г. количественная флуориметрия оставалась, по мнению некоторых исследователей, ненадежным методом, хотя она и применялась довольно широко во многих областях. Это объясняется недостаточным вниманием к основным принципам флуориметрии и отчасти отсутствием соответствующего оборудования. [c.377]

В области анализа органических соединений фотолюминесценция имеет меньше конкурентов, особенно если речь идет об определении малых количеств. Помимо высокой чувствительности, метод имеет и то преимущество перед абсорбционной спектрометрией, что он дает не один, а два, а иногда и четыре спектра в качестве основы для идентификации (спектры испускания и возбуждения как флуоресценции, так и фосфоресценции). Известно, что для возникновения флуоресценции или фосфоресценции вещество должно поглотить свет, но не каждое поглощаю- [c.378]

Определение полиароматических углеводородов в объектах окружающей среды включает концентрирование их путем экстракции, а затем идентификацию и количественное определение. Количественное определение 3,4-бензпирена с использованием внутренних стандартов проводят по линейчатым спектрам флуоресценции экстрактов с пределом обнаружения 10 % [546, 547], а с использованием метода добавок — до Ы0 % [548—552]. Определение в воде полициклических ароматических соединений, включая 3,4-бензпирен, в основном проводят путем экстрак- [c.255]

Из сказанного ясно, как осторожно должны делаться выводы из наблюдений флуоресценции лшогокомнонентных систел[. Это относится прежде всего к методам идентификации, основапиым на сравнении цвета флуоресценции двух смесей анализируемого вещества и эталона. Тождество цвета флуоресценции двух смесе отнюдь еще не доказывает их идентичности. [c.6]

Чувствительный метод идентификации ЫНг-концевого остатка основан на применении дансилхлорида (1-диметиламинонафталин-5-сульфонилхлорида). Благодаря интенсивной флуоресценции дансильных групп можно обнаружить и определить минимальные количества дансиламииокислот. [c.175]

Способность высокомолекулярных соединении нефти к люминесценции лежит в основе методов дистанционного зондирования [102]. Проводится анализ флуоресцентного отклика нефтяной системы на зондирующий импульс лазерного излучения. Интенсивность, форма и структура сигнала соотносятся с репером, в качестве которого служит сигнал комбинационного рассеяния воды. В качестве каналов информации при идентификации нефтей и нефтепродуктов можно использовать не только ширину спектра и положение максимума длины волны флуоресценции, но и такие зависимости, как зависимость продолжительности жизни возбужденного состояния по снектрз, зависимость параметров спектров от длины волны возбужденного света. Про- [c.57]

Определение ПАУ в объектах окружающей среды, основанное на применении эффекта Шпольского, включает в себя их концентрирование путем экстракции н-гексаном, а затем идентификацию и количественное определение. В частности, количественное определение бенз(а)пирена проводят по линейчатым спектрам флуоресценции экстрактов [18]. Предел обнаружения с использованием внутренних стандартов составляет 10 7-10 8 о/д а д случае метода добавок - до 3 10 %. Как правило, спектры люминесценции регистрируют при 77 К (жидкий азот). Снижение температуры позволяет улучшить отношение сигнал/шум, однако сложность требуемого оборудования (гелиевые криостаты) гфепятствует внедрению сверхнизких температур. Обычно экстракт замораживают быстрым по-фужением тонкостенной кварцевой пробирки в жидкий азот. Иногда наносят каплю раствора на охлаждаемую площадку криогенератора. Для возбуждения люминесценции гфименяют источники с непрерывным спектром (ксеноновые лампы), из которого с помощью монохроматора или интерференционного фильтра вьщеляют полосы в 1-3 нм. Длины волн, рекомендуемые для возбувдения каждого ПАУ, приведены в [c.250]

Идентификацию компонентов смеси проводят по величинам Rf. Количеств, определение в-в в зонах мож.но.осуществлять непосредственно на слое сорбента по площади хроматографич. зоны, интенсивности флуоресценции компонента или его соед. с подходящим реагентом, радиохим. методами. Использ. также автоматич. сканирующие приборы, измеряющие поглощение, пропускание, отражение света или радиоактивность хроматографич. зон. Разделенные зоны можно снять с пластин вместе со слоем, десорбировать компонент в р-ритель и анализировать р-р спектрофотометрически. С помощью ТСХ можно определить в-ва в кол-вах от Ю до 10 г ошибка определения не менее 5—10% число определяемых компонентов не более 20—30. ТСХ широко использ. для разделения и анализа как неорг.,,так и орг. в-в, в т. ч. синтетических полимеров, лек. ср-в, пестицидов, аминокислот, липидов, ПАВ, витаминов, стероидов. [c.584]

Наиб, распространение для определения N-концевых остатков находит данейльный метод. Его первая стадия-присоединение дансилхлорида (1-диметиламинонафталин-5-сульфохлорида) к непротонированной а-аминогруппе с образованием дансилпептида (ДНС-пептида) Затем последний гидролизуют 5,7 н. р-ром НС1 при 105°С, в результате чего освобождается N-концевая а-ДНС-аминокислота, к-рая обладает интенсивной флуоресценцией в УФ-области спектра для ее идентификации достаточно 0,1-0,5 нмоля в-ва. [c.250]

В большинстве случаев пробы афлатоксипов определяли на одной пластинке со стандартами, разделенными в одном направлении (рис. 8.24). Однако в этом случае разность наклонов калибровочных графиков, соответствующих двумерному и одномерному разделению, достигала 15%, что обусловлено воздействием второго элюента при двумерном разделении на квантовый выход флуоресценции определяемого вещества. Чтобы предотвратить воздействие второго элюента, Белжаарс [15 предложил так называемый антидиагональный метод, основанный на элюировании определяемых и стандартных растворов идентичными растворителями на одних и тех же пластинках. Как показано на рис. 8.24, одну пробу и два стандарта наносят в левом углу пластинки не по диагонали. Для идентификации на участки сорбента, где проводят одномерное разделение, дополнительно наносят два стандарта. С помощью подобранного элюента примеси перемещают в верхнюю часть пластинки (рис. 8.24). Для количественной оценки участки позади и впереди фронта афлатоксипов при облучении УФ-светом следует отметить точками, которые помогают определить соответствующие участки сорбента на стадии сканирования фотометром. Количественные результаты представлены па рис. 8.25. [c.208]

В работе Эйгофа и Колера [72] рассматриваются идентификация и определение полициклических ароматических углеводородов (после предварительного разделения методом хроматографирования на бумаге) по спектрам флуоресценции твердых растворов в н-геп-тане при температуре 790 К. [c.129]

В [12] осуществлена идентификация ди- и триметилбензо(/г)-хинолинов в образце сырой нефти. Исходный концентрат азотсодержащих соединений подвергался разделению методом микро-препаративной хроматографии высокого давления с использованием обращенной фазы с последующим разделением посредством капиллярной газовой хроматографии. По линейчатым спектрам флуоресценции и фосфоресценции в продуктах препаративного разделения в н-гексановых матрицах при Т = К идентифицированы 2,3- и 2,4-диметилбензо(/г)хинолины. Идентификация осуществлялась сравнением со спектрами искусственных смесей определяемых изомеров. [c.86]

Хроматография. В концентрате обнаружены органические примеси, которые отделяли с помощью жидкостной хроматографии высокого давления — ЖХВД. Главный компонент системы ЖХВД (рис. 11.1)—колонка из нержавеющей стали 316, 1,5X2,2—3,0 мм, заполненная сильноосновной анионообменной смолой (Bio-Rad Aminex А-27, номинальный диаметр 8—12 мкм). В качестве элюента использовали аммиачно-ацетатный раствор (рН=4,4), в котором концентрация ацетата возрастала от 0,015 до 6,0 М за период от 24 до 36 ч при скорости потока 10 мл/ч. Выделенные вещества обнаруживали но поглощению УФ-лучей с длиной волн 254 и 280 нм и собирали в виде фракций для последующей идентификации и определения свойств. Можно использовать и другие методы детектирования, например, смешать элюент с сернокислым раствором Се , а затем измерить флуоресценцию Се" (см. рис. 11.1.). Цериевый окислительный детектор указывает на присутствие окисляемых веществ [4]. В экспериментах с радиоактивными метками меченые компоненты обнаруживали при помощи автоматического контроля за радиоактивностью элюата [12]. [c.130]

Мы попытались возможно полнее очертить сферу и методы целесообразного использования рассматриваемого приема люминесцентного анализа в целях идентификации или обнарунченпя веществ по флуоресценции, так как в недавнем прошлом отсутствие ясности в этом вопросе нередко приводило к тому, что при помощи люминесцентного анализа пытались разрешать задачи, заведомо этим методом неразрешимые. Так, например, в немецкой работе, опубликованной в 1940 г. [14], в статье, озаглавленной Люминесценция пахучих веществ , автор описывает свечение 252 ( ) просмотренных им органических соединений (спиртов, альдегидов, кето-нов, простых и сложных эфиров) и в конечном счете приходит к выводу, что флуоресценция — свойство настолько атипичное, что не годится для целей распознавания веществ. Разумеется, автор прав нельзя решить, посмотрев люминесценцию жидкости, какое вещество она собой представляет. Однако неправильно поставлена сама задача невозможность ее решения этим путем с очевидностью вытекает из самой природы явления и не требует подтверждения экспериментом. [c.64]

Идентификация двух-и трехатомных фенолов (пирокатехина, пирогаллола, резорцина, флуорглюцина, орсина и гидрохинона) [102]. Идентифицировать эти вещества можно методом бумажной хроматографии. Хроматограмму обрызгивают сахаром (2,0 г) в растворе соляной кислоты (10 мл) и спирта (90 мл), нагревают 40—60 секунд и наблюдают возникающую характерную для различных фенолов окраску и флуоресценцию в ультрафиолетовом свете. [c.214]

Методы определения. В СССР для идентификации Б. и для количественного его определения пользуются флуоресцентными методами, основанными на применении квазилинейчатых спектров. Высокоспецифичные квазилииейчатые спектры флуоресценции Б. появляются при растворении его в гексане,гептане или октане и замораживании при низких температурах. Обычно применяют октан, обеспечивающий наиболее высокую чувствительность анализа, и жидкий азот (—196 °С). Для идентификации Б. пользуются аналитической линией его спектра флуоресценции, а для количественного определения применяют либо метод внутреннего стандарта, либо метод добавок (Дикун н др.). См. также Environmental ar inogens.,. . [c.246]

Для идентификации соединений пробы пластинки облучали УФ-светом при 254 и 350 нм, а рассчитанные величины Кги степень окраски (флуоресценции) пятен на хроматограмме сравнивали со стандартами. Для экспрессной хроматофафической идентификации сложных смесей нефтепродуктов в природных водах в Научно-исследовательском центре экологической безопасности РАН (С.-Петербург) был разработан один из современных вариантов ТСХ — равновесная проточная ТСХ (ПТСХ). Для идентификации целевых компонентов использовали метод равновесной элютивной хроматографии в плоском слое сорбента. [c.203]

Измерение фотолюминесценции — это чувствительный и гибкий метод химического анализа. Поэтому, выбирая метод анализа для измерения квантовых выходов или идентификации продуктов фотохимической реакции, следует обсудить и возможность применения фотолюминесценции. Часто при помощи прямых измерений флуоресценции удается следить за расходом исходного реагента или накоплением продукта (например, карба-зола из дифениламина [131]). В некоторых системах перед идентификацией необходимо провести разделение смеси продуктов, и если можно вызвать их флуоресценцию или фосфоресценцию, то фотолюминесценцию можно использовать для определения малых количеств веществ, которые могут быть разделены при помощи, например, тонкослойной или газовой хроматографии. Такие измерения представляют собой, по сути дела, аналитическое применение флуоресценции и фосфоресценции и рассматриваются в гл. V. В данном разделе мы обсудим некоторые специфические применения фотолюминесценции в фотохимических исследованиях. [c.367]

Из обычных аминокислот флуоресцируют только те, которые содержат ароматические системы, например триптофан, тирозин и фенилаланин [343]. Они поглощают только ниже 300 нм, и в этой области возбуждаются также многие другие распространенные соединения, например продукты гидролиза белков. Поэтому Ваалкс и Юденфренд [344] разработали для тирозина химический метод (реакция с а-нитрозо-р-нафтолом в присутствии азотной и азотистой кислот) получения флуоресцирующего продукта, который можно возбудить в видимой области при 460 нм. Такой способ применяется, например, для определения тирозина в плазме или ткани с использованием сравнительно простой методики, не требующей полного выделения тирозина. В биохимических исследованиях такой принцип — сдвиг параметров флуоресценции в более длинноволновую область — очень часто используется с целью избежать помех, обусловленных многими сопутствующими веществами, и обеспечить более надежную идентификацию. [c.435]

Обратимся теперь к совершенно другой области. Не говоря уже о применении спектрофлуориметрии для определения конкретных веществ, ее можно использовать в качестве эмпирического метода, или метода отпечатков пальцев для идентификации сложных смесей естественного и искусственного происхождения или для сравнения различных фракций, полученных из природных продуктов. Мы рассмотрим здесь применение спектрофлуориметрии для анализа нефтяных фракций. Видимая флуоресценция нефтяных масел и сложных смесей углеводородов, таких, как вазелин, воск и т. д., была известна давно она обусловлена следами ароматических или гетероциклических соединений, поглощающих в ближней ультрафиолетовой или фиолетовой областях. Эйзенбранд [349, 350] исследовал такое испускание из жидкого парафина и желтого вазелина и дерезнна, возбуждаемых линией ртути 366 нм. Эта флуоресценция в расчете на единицу концентрации суммарного углеводорода слаба и относительно неспецифична. Паркер и Барнс [351] наблюдали гораздо более интенсивную флуоресценцию в ультрафиолетовой области приблизительно при 360 нм, возбуждаемую светом с длинами волн короче 300 нм. Авторы исследовали множество различных типов масел для автомобильных двигателей и нашли, что все они дают по существу одинаковые спектры испускания и возбуждения флуоресценции. Они пришли к выводу, что испускание вызвано не примесями в маслах, а ароматическими углеводородами, присутствующими в этой конкретной фракции самой [c.437]

Спектры испускания флуоресценции хелатов металлов обычно размыты, и для строгой идентификации их недостаточно. Поэтому при проведении анализа стараются подобрать специфичный реагент и подходящие условия опыта. Кроме того, часто бывает необходимо отделять мешающие элементы. Флуоресцирующие хелаты пригодны для определения ряда металлов, например алюминия, галлия, бериллия, циркония, тория, германия, магния, цинка, вольфрама, олова, таллия, ванадия, рутения и т. д. (см. обзоры Уайта [374]). Для иллюстрации рассмотрим один пример — хорошо известное флуо-риметрическое определение ионов алюминия с помощью 8-оксихинолина. В принципе метод прост проводят реакцию при pH 5—6 и оксинат алюминия экстрагируют хлороформом для измерения его флуоресценции. Галлий и индий также дают оксинаты, имеющие полосы флуоресценции, перекрывающие полосы оксината алюминия (рис. 182), и Коллат и Роджерс [377] разработали метод для одновременного определения галлия и алюминия в смеси. Он основан на том, что относительная эффективность возбуждения двух оксинатов при 366 и 436 нм различна (т. е. различны отношения их коэффициентов погашения при этих длинах волн). К сожалению, различия недостаточны для очень точного определения, и этим методом особенно трудно определять небольшие количества одного элемента в присутствии гораздо больших кон-центраций другого. [c.462]

Методы определения технического и химического классов красителей на вторичном ацетате целлюлозы, а также способы идентификации индивидуальных дисперсных красителей описаны в работе [18]. Дифференциацию красителей одного цвета (желтый, оранжевый и др.) проводят с помощью флуоресценции в УФ-свете, отношения к диазотированию и сочетанию (ароматическиеамины), восстановлению, окислению, а также различными капельными пробами, исследованием цвета раствора в концентрированной серной кислоте. Указанные приемы часто достаточны для идентификации большого числа красителей. В случае, когда красители показывают идентичные реакции, их подвергают хроматографическому анализу или исследуют с помощью ИК-спектроскопии. [c.415]

Поскольку многоядерные ароматические углеводороды относятся к веществам, существенно загрязняющим атмосферу, Савицкий и др. [32—34] использовали ТСХ для их разделения и идентификации. Как адсорбенты применялись оксид алюминия, целлюлоза, ацетатцеллюлоза и силикагель лучшими растворителями для этого разделения были смеси воды с диметилформамидом и уксусной или муравьиной кислотой. Уменьшение процентного содержания воды благоприятствовало разделению более легких углеводородов, и, наоборот, увеличение процентного содержания воды благоприятствовало разделению более тяжелых углеводородов. Наилучшее общее разделение многоядерных ароматических углеводородов получено на слоях целлюлозы со смесью диметилформамид—вода (1 1). Пятна обнаруживали по их флуоресценции при УФ-облучении, кроме того, разработан метод количественного анализа с применением снектрофотофлуорометрии. [c.45]