Связывающие белки сывороточные

Другой важной функцией сывороточных белков является их транспортная функция. Так, сывороточный альбумин связывает и переносит многие слаборастворимые продукты метаболизма. Трансферрин переносит железо, а церулоплазмин (аг-белок, см. дополнение 10-3)—медь. Транскортин — это переносчик стероидных гормонов, в частности кортизола белок, связывающий ретинол, является переносчиком витамина А, а белки, связывающие кобаламин, переносят витамин Bi2. Липопротеиды, подразделяющиеся на три основных класса, переносят фосфолипиды, нейтральные липиды и эфиры холестерина". Главным компонентом этих веществ служит липид. Фракция U1 сыворотки содержит липопротеид с высокой плотностью , фракция, идущая непосредственно перед -бел-ками, содержит липопротеид с очень низкой плотностью, а в -фракции присутствует липопротеид с низкой плотностью. Все эти белки сейчас интенсивно исследуются. Большой интерес к ним обусловлен их связью с сосудистыми заболеваниями, а также с отложением холестерина и других липидов, переносимых белками плазмы, в атеросклеротических бляшках. [c.104]

Исследовалась способность ряда ГНР связываться с гидрофобными участками ("карманами") сывороточного альбумина, т.к. это может повлиять на дальнейшее взаимодействие ЛВ с гидрофобными полостями макромолекулы альбумина и соответственно на один из основных параметров фармакокинетики - процент связывания ЛВ с сывороточным альбумином крови. Сродство ряда ГНР к гидрофобным полостям макромолекулы САБ оценивали по спектрам ЭПР гидрофобного спинового зонда 2, спектр ЭПР которого является суперпозицией узкого и широкого сигналов ЭПР, соответствующих зонду в воде и зонду, находящемуся в гидрофобной полости белка [2]. [c.562]

За процессом электрофоретического разделения сывороточных белков легко следить, окрасив сыворотку крови конго красным. Краситель связывается с альбумином и мигрирует вместе с ним. Следует отметить, что в результате окрашивания скорость миграции альбумина несколько увеличивается. [c.143]

Связывание белков на активированных гелях происходит при щелочных pH. Сывороточный альбумин наиболее полно связывается при pH 8 количество связанного химотрипсина увеличивается с ростом pH при pH 10 связывание максимально. [c.199]

Найдено, что некоторые оптические изомеры по-разному связываются сывороточными белками. Так, наблюдается различное связывание О- и Ь-изомеров В,Ь-триптофана бычьим сывороточным [c.367]

Монотонное изменение величин т- п Ахх работе [132] связывается с постепенной внутримолекулярной перестройкой сывороточного альбумина, при которой меняется расположение радикального фрагмента зонда относительно водного окружения белка и изменяется ориентация радикала относительно молекулярных осей существенно несферической молекулы сывороточного альбумина. [c.189]

В отличие от карбоксипептидазы большая часть природных белков не содержит ионов металла в активном центре. Ионы металлов часто образуют с белками обратимые комплексы. Бычий сывороточный альбумин (БСА) связывает до 20 ионов переходных металлов на молекулу. В соответствии с данными фиг. 78 можно ожидать, что при физиологических pH происходит связывание с имидазолом или карбоксильными группами, расположенными благоприятно для образования комплексов, что, по-видимому, и имеет место в данном случае. Однако из фиг. 78 следует также, что единственная сульфгидрильная группа в БСА должна быть местом преимущественного связывания металла. Так, каждый третий ион меди, приходящийся на молекулу БСА, по-видимому, связывается с сульфгидрильной группой. На высокую специфичность связывания с ионами металлов указывает также возможность получения для целей рентгеноструктурного-анализа производных гемоглобина и миоглобина, содержащих тяжелые атомы. [c.414]

В случае реакции иодида и других анионов с сывороточным альбумином положение еще менее удовлетворительно. Ни для одной из боковых групп этой макромолекулы нельзя предположить наличия заметного сродства к простым анионам. Большинство других белков, хотя они и содержат боковые группы такого же типа, не реагирует сколько-нибудь заметно с простыми ионами. Поэтому реагирующие участки этого белка не могут пока быть идентифицированы. Следует отметить, однако, что, кроме Л", ряд других анионов также реагирует с этим белком, и в любом случае детальное изучение показывает, что, как и в случае Л , имеется один или два участка с весьма сильным сродством, семь или восемь участков с несколько более слабым сродством, а остальные участки еще менее реакционноспособны. Поэтому можно предположить, что эти участки настолько неспецифичны, что, по-видимому, одни и те же участки связывают любые анионы, и их естественно искать среди положительно заряженных участков. Однако все [c.617]

Ряд других белков обладает специфической способностью связывать некоторые соединения. Сывороточный альбумин способен связывать некоторые красители и ряд иных природных и синтетических веществ [1,2]. [c.82]

Электрометрическое титрование и определение электропроводности белковых растворов в присутствии хлористых солей щелочных металлов показало, что небольшие количества этих одновалентных ионов также связываются с белками [27, 55, 56]. В сыворотке крови это количество, однако, настолько мало, что оно не может быть определено ни компенсационным диализом [39], ни электрофоретическим измерением чисел переноса [57]. Данные же электрометрического титрования и определений электропроводности показали, что около 10 функциональных групп молекулы сывороточного альбумина довольно прочно соединяются с анионами хлористых или роданистых солей и что, кроме того, значительное количество этих анионов связано с белком более слабыми связями [27]. Максимальное число ионов, связанных белком, хорошо совпадает с числом групп противоположного знака, находящихся в белковой молекуле. Так, например, было установлено, что яичный альбумин соединяется с метафосфорной кислотой, образуя кристаллическое соединение, в котором содержится приблизительно по одной молекуле метафосфорной кислоты на каждую положительно заряженную группу белка [58]. [c.88]

Растворенный сывороточный альбумин связывает приблизительно 40 г воды на 100 г сухого белка [1]. Эта цифра близка к максимальному количеству воды, которое может присоединить [c.110]

Можно ожидать, что те белки, которые имеют большое сродство к воде и сильно гидратируются, будут значительно легче растворяться в воде. Однако растворимость и способность к гидратации не зависят друг от друга. Так коллаген имеет значительно большее сродство к воде, чем сывороточный альбумин, и в сухом виде при выдерживании в атмосфере водяного пара связывает больше воды, чем альбумин (см. фиг. 23). Тем не менее коллаген [c.111]

Глобулярные белки могут также связывать небольшие анионы, однако это явление очень плохо изучено, поскольку аналогичного явления для низкомолекулярных веществ никогда не наблюдалось. Способность связывать анионы варьирует в широких пределах в зависимости от типа белка по-видимому, наиболее отчетливо она выражена для сывороточного альбумина. Равновесная ассоциация этого белка с хлоридом и тиоциана-том изучена довольно подробно [931] как и следовало ожидать, более поляризующийся тиоцианат связывается прочнее. Еще более загадочна специфическая активация фермента амилазы ионом хлора [932, 933] константа ассоциации фермента и активирующего иона в этом случае должна быть довольно большой, поскольку для 50% НОЙ активации достаточно концентрации иона хлора 5 10н. [c.324]

Связывание углеводородов определяется не только их размерами, но и пространственным строением, а также природой гидрофобных областей. Наглядное доказательство этого можно получить, проанализировав данные по связыванию различных углеводородов 7-глобулином и сывороточным альбумином. Так, молекулы изопропилбензол а, имеющие приблизительно равные объемы с гептаном, связываются белками различно, а связывание гептана и толуола одинаково, хотя объем молекулы гептана больше молекулярного объема толуола. В то же время молекулы циклогексана и толуола, имеющие одинаковые молекулярные объемы и, по-видимому, сходное пространственное строение, связываются 7-гло5улином и сывороточным альбумином в равных количествах. [c.39]

Тем не менее небольшую избирательность адсорбции оптических антиподов изученного ранее азокрасителя 92 594 наблюдал Каруш при адсорбции изомеров этого соединения на сывороточном альбумине. Адсорбция (—)-антипода близка к адсорбции рацемата и сильно отличается от адсорбционной способности (- -)-изомера красителя. -Триптофан связывается с сывороточным альбумином в 100 раз прочнее, чем О-триптофан . Полученные данные подтверждают прежние наблюдения по адсорбции на белке антиподов красителя, образующегося из фенил-(/г-ами-нобензоиламино)-уксусной кислоты . [c.177]

Таким образом, в соответствии с первичной структурой белка можно выделить два обширных класса железосодержащих белков сывороточный трансферрин и кональбумин из яичного белка, с одной стороны, и лактоферрины молока, слез, желудочного сока, бронхиальной и тканевой секреции, — с другой. Общее отличительное свойство этих белков — их уникальная способность связывать металл, поэтому общее название сидерофилины для всех белков, обладающих такой способностью, наиболее точно их описывает. Однако термин трансферрин получил широкое распространение и служит для того, чтобы объединить все члены этого класса соединений с наиболее тщательно изученным прототипом этих белков — сывороточным трансферрином. Поэтому пока не достигнуто согласие между всеми работающими в этой области, для облегчения общения следует сохранить оба термина. [c.332]

И. Компоненты среды. Некоторые лекарства прочно связываются с сывороточными белками (например, цисплатин), и присутствие сыворотки в культуральной среде может, следовательно, снизить действующую концентрацию препарата. Влияние сыворотки (в концентрации 5—20%) на чувствительность клеток к цисплатину зависит от продолжительности воздействия (рис. 8.6 А и Б). Так, при 3-часовом воздействии лекарства на [c.278]

Так, сывороточный альбумин человека может связывать от 20 до 25 молекул кардиолипина до того, как начинается полимеризация этого белка [75, 76]. Такие реакции с вовлечением в основном аминогрупп были выявлены между сывороточным альбумином и другими фосфолипидами (ФЭ, ФХ, ФС) или также между 7-глобулинами быка и ФЭ [77]. [c.305]

Суть бесколоночного метода заключается в следующем. Фракционируемую сыворотку смешивают с уравновешенным соответствующим буферным раствором ДЭАЭ-сефадексом, который связывает почти все сывороточные белки, оставляя в растворе IgG, легко отделяемый при отмывании. Смешивание с ДЭАЭ-сефадексом повторяют дважды (каждый раз со свежей порцией ионообменника) и в результате получают препарат IgG, свободный от примеси других белков сыворотки, о чем судят по иммуноэлектрофоретическому анализу. Благодаря тому что фракция IgG совсем не связывается с ионообменником, белки этого класса удается выделить почти количественно в нативном состоянии, не опасаясь денатурации, что является большим преимуществом данного метода по сравнению с другими методами выделения IgG. [c.219]

Эритроциты предварительно фиксируют формалином или глютараль-дегидом, а затем связывают их с гамма-глобулином, который выделяют из иммунных сывороток и очищают от других сывороточных белков. Связывание гамма-глобулина с поверхностью эритроцитов производят с помощью хлорида хрома. Для этого к 8 объемам дистиллированной воды добавляют 1 объем иммуноглобулинов, выделенных из иммунной сыворотки, 1 объем 50%-й взвеси формалинизированных эритроцитов и 1 объем 0,1 — 0,2%-го раствора хлорида хрома. Смесь оставляют на 10 — 15 мин при комнатной температуре, затем обрабатывают эритроциты, как при РНГА. [c.64]

АЛЬБУМИН СЫВОРОТОЧНЫЙ (серумальбумин), один из гл. белковых компонентов сыворотки крови. Построен из одной полипептидной цепи (в бычьем Л. с. содержится 581 остаток аминокислот), образующей неск. доменов мол. м. 67 ООО. В организме связывает и переносит жирные к-ты и др. ПАВ, билирубин, аминокислоты, гормоны, лек. в-ва. АЛЬБУМИН ЯИЧНЫЙ (овальбумин), фос4югликопроте-ид яичного белка мол. м. 45 ООО. Известно веек, форм, отличающихся содержанием остатков фосфосерина. Примен. в конд. произ-ве. [c.27]

Скорость освобождения п-нитрофенола может быть определена путем измерения оптической плотности раствора при 400 нм. Одновременно со связыванием аминокислот или белков на НФОМ-геле имеет место гидролиз п-нитрофениловых эфиров в водной среде в присутствии избытка гидроксил-ионов. На рис. 8.4 показано влияние pH на освобождение п-нитрофенола при связывании фенилаланина на НФОМ-геле. Зависимость от pH эффективности связывания фенилаланина и сывороточного альбумина на НФОМ-гелях иллюстрируется данными табл. 8.6. Очевидно, что наибольшие количества фенилаланина связываются при pH 9. Этот выра- [c.206]

В табл. 8.6 показана кроме того зависимость количества связанного сывороточного альбумина от pH. Наибольшее количество связывается также при pH 9. При более высоких pH в случае белка наряду с возрастанием концентрации гидроксильных ионов растет и число ННг-групп, способных связываться (для е-амино-групп лизина р/С 9,4—10,6). Из характера зависимости количества фенилаланина, связанного с НФОМ-гелем, от концентрации фенилаланина, взятого для связывания, установлено, что для каилучшего связывания необходима относительно высокая кон [c.207]

Резкое изменение окружения зонда в области 40° С в работе [193] связывается с предденатурационым конформационным переходом, которой ранее был обнаружен и другими физическими методами. Резкое увеличение полярности окружения радикального фрагмента зонда в этой области и проскальзывание зопда относительно молекулы белка позволило авторам работы [193] предположить, что изменение конформации сывороточного альбумина в этой области температур имеет характер набухания. [c.189]

Исходя из того, что одна молекула белка связывала от одного до двух свободных радикалов, авторы предположили, что в сывороточном альбумине имеется две различные аминогруппы, реагирующие с иминоксильными свободными радикалами. В случае присоединения парамагнитной метки к аминогруппе, расположенной на поверхности молекулы белка, получается спектр ЭПР со слабой иммобилизацией спин-метки. Другая аминогруппа, расположенная в глубине белковой глобулы, при связывании со спин-меткой дает спектр ЭПР сильно иммобилизованных свободных радикалов. В последнем случае свободный радикал, связанный ковалентной связью с молекулой белка, гидрофобно взаимодействует с близлежащим участком полипептидиой цепи. При кислотно-щелочной денатурации сывороточного альбумина, а также при переваривании спин-меченого белка пепсином широкие компоненты спектра ЭПР сильно иммобилизованных свободных радикалов исчезали, и сигнал ЭПР исследуемой системы приближался по своим параметрам к спектру ЭПР описанного (стр. 166) спин-меченого поли- -лизина. [c.167]

Способность белков связывать ионы водорода, о которой птла речь выше, отражает их общую способность взаимодействовать с неболглпими ионами. Такие взаимодействия имеют важное физиологическое значение. Многие ферменты, например, проявляют каталитическую актишюсть только при условии, если в состав их молекул входят ионы двухва.пентных металлов , перенос ионов в крови осуществляется главным образом белками (в частности, сывороточным альбумином) и т. д. [c.73]

Равновесие 2К5Н- - /гОг = — ЗН + НгО сильно сдвинуто вправо, если раствор нейтрален или содержит неболь-щие количества щелочей в кислых растворах, наоборот, устойчивы сульфгидрильные группы 5Н. Связи — 5 —5 — могут быть внутримолекулярными или связывать мономерные единицы белка (например, сывороточный альбумин) в одну крупную частицу. В стабилизации формы молекулы играют роль и гидрофобные связи. Гидрофобные связи возникают за счет сил взаимодействия между углеводородными частями молекул белка. Углеводородные группы белковых частиц, находящихся в водной среде, ориентированы во внутренние зоны частицы, а гидрофильные группы (ОН, СООН) находятся на внещней стороне, которая обращена к воде. Вследствие этого внутри молекулы белка возникает углеводородное ядро, причем для того, чтобы его разрушить и перевести углеводородные группы в водную среду, надо затратить работу. Это и означает, что между углеводородными частями молекулы действуют силы притяжения. Кроме водородных, дисуль-фидных и гидрофобных связей, в поддержании формы молекулы белка принимают участие и другие факторы имеет значение возникновение солевых мостиков, действие сил Ван-дер-Ваальса особенно большое влияние оказывают молекулы воды. Сохранение определенной формы молекулы важно с биологической точки зрения. Оно обеспечивает, в частности, такое взаимное расположение групп атомов на поверхности молекулы, которое необходимо для проявления каталитической активности белка, его гормональных функций и т. д. Поэтому устойчивость глобул, так же как и многие особенности структур биологически активных молекул, не случайное свойство, а одно из средств стабилизации организма. [c.57]

Растворимость белка и способность к гидратации не зависят друг от друга. Так, коллаген связывает больше воды, чем сывороточный альбумин, но в отличие от последнего не растворяется в воде. Чтобы понять это внешнее несоответствие, необходимо вспомнить, что растворимость белка зависит от соотношения полярных и неполярных групп в молекуле, их взаимного расположения и от результирующего дипольного момента. Большое количество полярных группировок должно увеличивать как сродство белков к воде, так и их растворимость. Однако ионные группы могут оказывать и обратное действие, соединяясь с группировками противоположного знака и образуя внутри- и межмолекулярные солеобразныё связи. Образование же таких межмолекулярных связей всегда ведет к дегидратации и способствует возникновению крупных нерастворимых агрегатов. [c.179]

Различными методами показано [109], что Со (NHg) образует комплекс с бычьим сывороточным альбумином лишь при очень высокой концентрации последнего, тогда как Со образует весьма устойчивый комплекс. Изучение изменения во времени высот волн (точнее осциллополярографических пиков) разряда комплексного (с белком) иона Со (II) и свободного Со (II) (аквоком-плекса) показало, что пик комплекса растет со временем, тогда как пик разряда свободных Со (II) растет, достигает максимума и затем падает пропорционально i " . В предположении, что падение высоты пика до нуля отвечает полному покрытию поверхности электрода белком, рассчитана плош адь, приходящаяся на белковую молекулу. Площадь эта весьма велика, что приводит к выводу [109] о расплющивании (при одновременной денатурации) белков до слоя толщиной 6—8 А. Наличие двух каталитических волн на полярограммах белка в растворе соли кобальта объяснено двумя формами катализатора — с расплющенным, сильно адсорбированным белком (первая волна) и слабо адсорбированным — глобулярным [109]. Изучение изменения высот каталитических волн во времени показало, что вторая волна падает и исчезает через десятки секунд, тогда как первая сначала растет за счет медленного расплющивания белковой молекулы, затем в течение десятков минут падает. Падение волн связывается с образованием полимолекулярпого покрытия поверхности электрода [109]. [c.109]

Первые препараты сывороточного трансферрина были получены по методу Кон [16], а также фракционированием с помощью сульфата аммония в сочетании с осаждением этанолом [1]. Впо--следствии стали использовать ионообменную хроматографию, которая проще и, вероятно, мягче, чем методы, в которых используется спирт [17]. Последнее замечание, по-видимому, имеет некоторое значение, так как Шэйд [18] указывал, что некоторые препараты трансферрина могут быть физиологически неактивны, хотя их способность связывать железо остается неизменной. Самой главной проблемой при очистке трансферрина было отделение его от связанного с гемом сывороточного белка, гемопексина. Кристаллизацию сывороточного трансферрина проводили следующим образом постепенно добавляли спирт к концентрированному раствору белка [19] с одновременной диффузией спирта в раствор белка во время его концентрирования в аппарате для ультрафильтрации [20] кристаллы были также выделены из концентрированных растворов при низкой ионной силе и низких значениях pH [13]. [c.333]

Трансферрины (сидерофилины) — группа белков из разнообразных источников, характеризующихся способностью специфично, прочно и обратимо связывать ионы Ре(П1) и ионы других переходных металлов. Функция сывороточного трансферрина, который наиболее подробно изучен, состоит в том, чтобы транспортировать ион железа в кровь и направлять его к ретикулоцитам, которым он нужен для биосинтеза гемоглобина. Система трансферрин — ретикулоцит до сих пор является уникальной для изучения взаимодействия металла с белком и белка с клеткой. [c.357]

Обсуждая вопрос о реакционной способности белков, нельзя не упомянуть о прочности образующихся связей. Известно много случаев медленного спонтанного отщепления заместителей. Хорошо, известно, например, что формальдегид может связываться с белками как прочной связью, так и обратимо [1]. Росс и Стенли [25] описали даже реактивацию обработанного формалином вируса табачной мозаики после длительного его диализа. Несмотря на то, что некоторые исследователи этот факт не подтвердили [44], другие [45] привели в его пользу достаточные основания. Имеются доказательства того, что при длительном стоянии [34] происходит гидролиз ацетилированных фенольных групп вируса табачной мозаики (но не его фенилуреидопроизвод-ного). Подобным же образом в результате спонтанного гидролиза отщепляются малонильные заместители от фенольных ги-дроксильных групп сывороточного альбумина. [46]. В отличие от природных фосфопротеидов фосфорилированный сывороточный альбумин при стоянии легко претерпевает частичное дефосфори-лирование [47]. Такое поведение производных белка следует всегда учитывать при оценке доли участия реакционноспособных групп в исследуемых процессах. [c.277]