ДНФ-производные ионообменная хроматография

Эту технику нельзя, конечно, четко выделить отдельно, поскольку она зависит от набивки колонны это лишь развитие и совершенствование ранее описанных методов. Однако данный метод имеет столь большие преимущества в эффективности и в скорости разделения, что целесообразно отдельно рассмотреть области его применения. Были применены набивки для ионного обмена, адсорбции и гель-фильтрации использование всей этой техники описано Леонардом для разделения некоторых цитокининов (производных аденозина), включая их разделение ня цис- и транс-то-меры [34]. Применение в области нуклеиновых кислот находится еще в стадии становления, но со временем этому методу несомненно предназначено сыграть важную роль в разделении смесей нуклеозидов, а колонки для гель-фильтрации будут широко применяться при обессоливании элюатов нуклеозидов после ионообменной хроматографии. [c.75]

Ионообменная хроматография. Ионообменные смолы являются полимерными органическими соединениями, содержащими функциональные группы, способные вовлекаться в ионный обмен. Различают положительно заряженные анионообменники, представленные органическими основаниями и аминами, и отрицательно заряженные катионообменники, содержащие фенольные, сульфо- или карбоксильные группы. Из сильно- и слабоосновных анионообменников чаще используют производные полистирола и целлюлозы, несущие функциональные группы [c.29]

Рис. 22.9. Схема потоков четырехканального анализатора, применяемого при ионообменной хроматографии кислотных производных сахаров, в которой в качестве подвижной фазы используют уксусную кислоту или водный раствор ацетата натрия (первый канал — хромовая кислота, второй канал — карбазол, третий и четвертый каналы — перйодат) [75].

Как и для других производных сахаров ионного характера, ионообменная хроматография является наиболее подходящим методом анализа смесей фосфатов сахаров и их выделения из природных источников. [c.120]

Другим общепринятым методом разделения оснований является ионообменная хроматография. Большинство оснований содержит по крайней мере один заместитель, способный к ионизации, в результате чего молекулы приобретают положительный или отрицательный заряд (табл. 37.5). Вследствие этого возможно использование как катионитов, так и анионитов. Хорошим примером разделения оснований является хроматография на катионите дауэкс 50 (№) в 2 н. соляной кислоте [33]. При этом основания элюируются в следующем порядке урацил, цитозин, гуанин, аденин. Аналогичным образом, но при элюировании в линейном градиенте соляной кислоты (1—4 М) выделяли метилированные основания (в основном метилированные производные гуанина) из полных гидролизатов РНК хлорной кислотой [63]. Также на катионите анализировали основания, отщепленные от полирибонуклеотидов в ходе ступенчатой деградации полинуклеотидной цепи периодатным окислением [53]. [c.44]

Ионообменная хроматография находит широкое применение для выделения и очистки нуклеозидов при органическом синтезе. Описано выделение производных уридина и цитидина из смеси, [c.47]

Основная цель применения ионообменной хроматографии для многочисленных задач технологии и анализа состоит в разделении смесей и поглощении отдельных компонентов их. Естественно, что и теория ионообменной хроматографии должна основываться на рассмотрении одновременного процесса обмена всех компонентов смеси. Однако до настоящего времени при расчетах как по статике, так и по динамике ионного обмена обычно исходят из законов статики обмена индивидуальных ионов. Степень такого приближения не всегда обоснована. Упрощенный подход объясняется в основном тем, что расчет реальных систем, представляющих собой смеси ионов, связан с громоздкими математическими вычислениями, которые для задач статики сводятся к решению систем нелинейных алгебраических уравнений, а для задач динамики— к решению систем нелинейных дифференциальных уравнений с частными производными. Многочисленные работы по статике обмена индивидуальных ионов свидетельствуют о том, что даже в этой сравнительно более простой области исследования окончательно не решены вопросы о механизме обмена и, следовательно, о количественных закономерностях, которым подчиняется обмен. [c.12]

Отдельные сахара можно определить количественным методом газожидкостной хроматографии в виде триметилсилильных производных [15, 22], или ионообменной хроматографией [22] с предварительным качественным определением их бумажной хроматографией. [c.219]

Ионообменная хроматография была впервые применена в биохимии Кохом и его сотр. [4], которые использовали ее для разделения производных нуклеиновых кислот, а также Муром и Штейном [5], разделявшим таким методом аминокислоты. [c.232]

Однако с позиций ионообменной хроматографии самое существенное состоит в том, что соотношение между значениями рК при этом изменяется мало. Иными словами, в слабокислой среде производные цитозина характеризуются наибольшим средним положительным зарядом (т. е. наибольшей долей положительно заряженных молекул). Положительный заряд производных аденина меньше, производных гуанина — еще меньше, а урацил или тимин и их соответствующпе нуклеозиды остаются незаряженными. [c.317]

Ионообменная хроматография незаменима при разделении вы-сокополярных веществ, которые без перевода в производные не мог/г быть проанализированы методом ГЖХ. К таким соединениям относятся аминокислоты, пептиды, сахара. [c.32]

Ионообменная хроматография цслсх ообразна при разделении высоко1КМ[ярных всществ, которые без перевода в производные не могут быть проанализированы методом ГЖХ. К а аким соединениям относятся аминокислоты, пептиды, гетероциклические основания, углеводы. [c.54]

Эфиры борной кислоты и ее производных. При взаимодействии моносахаридов и их производных, содержащих г<ис-а-гликольные группировки, с борной кислотой или ее солями образуются устойчивые отрицательно заряженные комплексы. Это свойство нашло широкое применение для разделения сахаров методом распределительной хроматографии и электрофореза на бумаге а также методом ионообменной хроматографии на смолах и угле Борные эфиры сахаров были в свое время успешно использованы для установления конфигурации аномерного центра (см. стр. 34). Несмотря на то что комплексы сахаров с борат-анионом известны давно, строение их было выяснено только недавно Было показано, что существуют два типа боратных комплексов монокомплекс XXVII и дикомплекс XXVIII [c.148]

При наличии в анализируемом объекте >-глюкозамина и >-галактозамина долгое время удавалось определять только сумму аминосахаров. Разделение этих моносахаридов было впервые осуш ествлено в виде их Ы-2,4-динитрофенильных производных методом хроматографии на бумаге или кизельгуре . Затем был предложен более удобный способ разделения О-глюкозамина и О-галактозамина методом ионообменной хроматографии после разделения каждую фракцию можно анализировать по методу Эльсона —Моргана. [c.281]

Идентификацию и количественное определение сахаров можно осуществить различными хроматографическими методами хроматографией на бумаге [202, 204, 213, стандарт TAPPI Т 250 рт-7Ъ тонкослойной хроматографией [235] газовой хроматографией частично в комбинации с масс-спектроскопией [18, 102, 204, 244, стандарт TAPPI Т 249 ргп-75]. Позднее для определения полисахаридного состава древесины и технических целлюлоз применили автоматизированный анализ сахаров методом ионообменной хроматографии через боратные комплексы [73, 75, 76, 200]. Описан быстрый спектроскопический метод определения сахаров [192, 193, 194], основанный на измерении поглощения при 322 и 380 нм продуктов дегидратации сахаров (производных фурана), образовавшихся после полного гидролиза древесины или технической целлюлозы. [c.30]

Определение карбонильных групп основано на их окислении (например, по методу медного числа, стандарт Zell heming Merkblatt IV/8/70), восстановлении (например, борогидридом натрия) или получении производных (например, с гидроксиламином). Для определения карбоксильных групп в беленых целлюлозах предложили использовать метод ионообменной хроматографии [183]. Карбоксильные группы в целлюлозе можно определять различными методами [28, 46, 47]. [c.31]

Как указывалось ранее, наряду с методами бумажной и ионообменной хроматографии для определения аминокислот из гидролизатов [65, 89, 118, 154, 162] существует ряд других методов, используемых в меньшей степени или находящихся еще в стадии разработки. Применялась также газовая хроматография для разделения этерифицированных аминокислот [9, 87] или продуктов окисления аминокислот [195]. Хотя этот метод очень чувствителен, применение его ограничено, так как некоторые аминокислоты не образуют достаточно летучие производные. Был сделан ряд усовершенствований для улучшения существующих методов. Колориметрический метод определения гистидина улучшен за счет дегазации раствора перед добавлением окрашивающего реагента — диазосульфаниловой кислоты [159]. Аспарагин и глутамин могут быть определены путем этерификации с последующим восстановлением боргидридом лития. После гидролиза эти амиды идентифицируются в виде соответствую1цих кислот, в то время [c.401]

Высокоскоростная ионообменная хроматография Фенолы и их производные (биологическое приложение) Анионообменная смола [типа LSF, Anal. hem, 39, 1422 (1967)] 10 мМ раствор муравьиной кислоты (pH 3), содержащий 1 М КС . Температура 80 °С, давление 55— 70 атм 50 [c.41]

Использование жидкостной хроматографии для систематического разделения свободных альдегидов и кетонов не получило широкого распространения. Большинство статей, посвященных применению жидкостной хроматографии для этих соединений, касается главным образом выделения п очистки синтетических продуктов. При хроматографировании альдегидов на окиси алюминия следует иметь ввиду, что они могут подвергаться некоторым катализируемым реакциям в щелочной среде и образовывать различные промежуточные продукты. Эти реакции ограничивают обычное применение жидкостной хроматографии альдегидов, особенно если в качестве сорбента используют окись алюминия. Карбонильные соединения наиболее часто разделяются в форме их бисульфитных соединений путем ионообменной хроматографии на смолах основного характера. В этом случае используется химическая активность карбонильных соединений по отношению к ионам бисульфита, что приводит к образованию а-оксисульфокислот. В жидкостной хроматографии карбонильных соединений также используется образование их производных, главным образом оксимов и 2,4-динитрофенилгидразонов. [c.48]

Альдегиды и кетоны можно разделить хроматографически, если они находятся в свободном состоянии или в виде производных. Хотя карбонильные соединения являются неионогенными, большинство исследователей для их разделения используют ионообменную хроматографию. Очень часто также необходимо решать задачи группового отделения альдегидов и кетонов от органических кислот и других веществ. Кислоты связываются количественно на колонке с сильноосновной анионообменной смолой амберлит IRA-400 (НСО ). Альдегиды и кетоны переходят в фильтрат, а кислоты затем десорбируются раствором карбоната натрия [1]. Для отделения кетонов от спиртов можно использовать количественную сорбцию кетонов на анионообменных смолах в бисульфитной форме, тогда как спирты переходят в элюат. Кетоны можно элюировать горячей водой или раствором, содержащим смесь карбоната и бикарбоната [2]. [c.49]

В связи с быстрым развитием хроматографии аминокислот на сульфокатионитах использование других ионитов носит ограниченный характер. На начальных этапах ионообменной хроматографии для разделения аминокислот пытались использовать амберлит IR -50 [23, 24]. К недостаткам этого катионита относятся трудности уравновешивания колонки, и необходимость соблюдения точных значений pH образца. Сильноосновный анионит дауэкс 2-Х10 находит применение для разделения аспарагиновой и глутаминовой кислот, а также их производных [25]. На анионитах сильнее других аминокислот удерживаются ци-стеиновая кислота, фосфосерин и подобные им вещества, которые, следовательно, можно отделять и получать в чистом виде. Как и в случае сульфокатионитов, степень разделения на анионитах зависит от диаметра частиц, их однородности, степени. сшитости и других факторов. [c.334]

Циклосерин выделяли из культуральной жидкости адсорбцией на смоле дауэкс 50-Х2 (Ыа+) при pH 3 с последующим элюированием 1%-ным водным раствором пиридина [95]. Методом ионообменной хроматографии были выделены и очищены три новых антиметаболита ь-2-амино-4-метокси-гранс-3-бутено-вая кислота [96], иминометильное производное орнитина [97] и 2гамино-4-метил-5-гексеновая кислота [98]. [c.227]

Среди приведенных в литературе хроматографических систем примерно 40% занимает ТЖХ, 40% составляет ЖЖХ и 20% — ионообменная хроматография. В ТЖХ в качестве основного адсорбента используют силикагель, обычно с диаметром частиц около 10 мкм. Иногда хроматографию проводят на силикагеле с диаметром частиц 5 мкм и совсем редко пользуются более крупными ситовыми фракциями. Из других адсорбентов иногда используют окись алюминия и полиамид. В ЖЖХ обычно используют химически связанные фазы. Наибольшее распространение получила хроматография с обращенными фазами, при которой в качестве стационарной фазы служат производные октадекана (С-18). В меньщей степени используют полярные органические фазы типа карбовакс 400. По размерам частиц используемые адсорбенты аналогичны тем, которые применяются в,ТЖХ. В ионообменной хроматографии предпочтение отдается [c.366]

Производные индола и карбазола сильнее удерживаются на оксиде алюминия, чем на силикагеле, перекрывая широкие области удерживания на обоих адсорбентах Для вьщеления этих соединений из нефти используют катионообменную хроматографию, а для дальнейшего разделения можно применять, например, оксид алюминия [39, 151] с последующим анализом вьщеленных фракций УФ-спектроскопией. Ароматические амиды типа 2-хинолонов сильно адсорбируются как на оксиде алюминия, так и на силикагеле, что облегчает их отделение от других полярных соединений. Амиды можно выделить также ионообменной хроматографией. Этот класс соединений еще мапо исследован, и выделено из нефти только два типа амидов [9]. [c.105]

Схему выделения, разделения и исследования нефтяных кислот разработал Зайферт [194], Кислые соединения экстрагирую кз нефти спиртовым раствором едкого натра. Двухступенчатой ионообменной хроматографией их разделяют на четыре фракции фенолы, кислоты и две смешанные фракции, содержащие наряду с кислотами их производные и фенолы. Чистые карбоновые кислоты восстанавливают с помощью гидрида лития -алюминия в углеводород. Продукт восстановления разделяют жидкостной хроматографией иа нейтральном оксиде алюминия на ряд фракций (рис. 45), одну из которых, содержащую моно- и биароматические соединения, разделяют на кислом оксиде алюминия. Выделе1шые при разделении фракции анализируют различными методами с целью определения их химического состава. На основании полученных результатов можно судить о химическом строении кислот, содержащихся в нефти. [c.128]

Особенно широко применяют при идентификации летучих производных аминокислот метод ГЖХ в сочетании с такими инструментальными методами, как ИК-спектроскопия, масс-снектромет-рия, а также другие варианты хроматографии, в частности ионообменную, хроматографию на бумаге и в тонком слое. [c.69]

Имеются определенные ограничения в требованиях к изотермам при рассмотрении закономерностей динамики ионного обмена. Напомним, что вся аналитическая хроматография базируется на линейных зависимостях между количеством сорбированного вещества и его концентрацией в растворе в условиях равновесия. Препаративная хроматография (динамический процесс специфической сорбции и десорбции) основана на использовании в основном криволинейных изотерм (изотерм динамики ионного обмена в случае ионообменной хроматографии). При этом одним из центральных вопросов является анализ вида кривизны — знака второй производной от сорбционной емкости по концентрации вещества во внешнем растворе. Все это говорит о том, что при разработке препаративных динамических процессов также целесообразно использовать определенные разумные ограничения по отношению к точности аналитического описания изотерм вонного обмена. При сложных соотношениях в уравнении [c.83]

В настоящее время в ионообменной хроматографии белков и ферментов применяются почти исключительно эти производные. Недавно для тех же целей были синтезированы ионообменные производные агарозы (см. табл. 5.6). Структура матриц этих ионов такова, что в нее легко проникают даже крупные макромолекулы, благодаря чему в ионном обмене участвуют группы, расположенные внутри зерен ионита. Теоретические основы хроматографии белков на ионитах рассматриваются Ти-зелиусом ([211]. В ряде статей и монографий (некоторые из них указаны в табл. 5.13) описаны методы сорбции на ионитах и методы хроматографии белков. В большинстве случаев для хроматографии белков применяют DEAE-целлюлозу. После по- [c.316]

Первый нуклеотид, инозиновая кислота (по-гречески — мышечная ткань), был выделен Либихом [2] в 1847 г. из мясного экстракта отчасти как результат полелп1ки, поднятой Берцелиусом по поводу наличия креатина в сыром и вареном мясе). С тех пор было выделено большое число мононуклеотидов, как правило, 5 -фосфаты, хотя в яде тигровых змей и родственных видов был найден также аденозин-З -фосфат 13]. Эти соединения выделяют прямой экстракцией тканей или организмов 14—9], в которых они обычно присутствуют в небольших количествах в качестве промежуточных соеди-нени1 обмена. Однако основным источником мононуклеотидов являются их полимерные производные, нуклеиновые кислоты. При щелочном гидролизе в мягких условиях [10, 11] рибонуклеиновой кислоты образуется смесь 2 - и З -фосфатов нуклеозидов, которую можно легко разделить с помощью ионообменной хроматографии 112], Для выделения аналогичных 5 -эфиров требуется применение ферментативного гидролиза, как правило, с использованием фосфо-диэстеразы змеиного яда 113, 14]. Подобная ферментативная обработка дезоксирибонуклеиновой кислоты после предварительной обработки дезоксирибонуклеазой приводит к дезоксинуклеозид-5 -фосфатаы [15—17]. Очищенная диэстераза змеиного яда значи- [c.123]

Разделение смеси электролитов при ионообменной хроматографии достигается с помощью особых адсорбентов, способных обменивать свои ионы на ионы, находящиеся в анализируемом растворе. К таким адсорбентам относятся т. н. иониты (ионообменники). Важнейшими ионитами являются синтетические смолы, обладающие ионообменными свойствами. Для аналитической практики большой интерес представляет катионный обмен, осуществляемый с помощью адсорбентов, способных обменивать свой катион на катионы, содержацщеся в исследуемом растворе. В катионитах — смолах, изготовляемых на основе фенола или стирола и их производных — активными группами обычно являются сульфогруппы (—ЗОдН), связанные с бензольным ядром или с атомом углерода боковой цепи. Реже в качестве активных групп выступают карбоксилы (—СООН) и гидроксилы (— ОН). Вследствие того, что сульфогруппы связаны со скелетом смолы, они не переходят в раствор. Подвижными являются только водородные ионы этих групп или другие замещающие их ионы. Если обмениваемыми катионами адсорбента являются Н -ионы, то адсорбент называется Н-катионитом. [c.392]

В присутствии кислорода гидратированный электрон захватывается с образованием перекисных [уравнение (131)] и гидроксильных радикалов с последующим их превращением в гидроперекиси [уравнение (132)], гликоли [уравнения (132) и (133)] и производные барбитуровой кислоты [уравнения (132) и (134)]. Методом ионообменной хроматографии из облученного раствора тимина, насыщенного воздухом, была выделена сравнительно устойчивая гидроперекись, идентифицированная путем сравнения с синтезированным независимым путем цис- и транс-изомерами 4-окситимин-5-гидроперекиси и 5-окситимин-4-гидроперекиси [296, 308]. Гидроперекись, образовавшаяся при облучении водного насыщенного воздухом раствора тимина, оказалась смесью 80% цис- и 20% транс-изомеров [309]. Радиационный выход гидроперекисей в облученных водных растворах тимина, урацила и диметилурацила составляет [c.189]