Справочник химика 21

Химия и химическая технология

Статьи Рисунки Таблицы О сайте English

Аминокислоты ароматические, поглощение

    Спектрофотометрический метод определения белка основан на способности ароматических аминокислот (триптофан, тирозин и в меньшей степени фенилаланин) поглощать ультрафиолетовый свет с максимумом поглощения при 280 нм. [c.33]

    Ультрафиолетовые спектры белков отличаются сильным поглощением, характеристическим для ароматических фрагментов аминокислот, входящих в их состав фенилаланин, тирозин, триптофан. Эти спектры поглощения используют для аналитического определения остатков указанных аминокислот. Резкий максимум поглощения, характерный для нуклеиновых кислот и нуклеопро-теидов, позволяет определить их содержание в отдельных клетках. [c.361]


    Метод основан на способности ароматических аминокислот (триптофана, тирозина и в меньшей степени фенилаланина) поглощать ультрафиолетовый свет с максимумом при 280 нм. Измеряя величину оптической плотности при этой длине волны, находят количество белка в растворе. Поскольку белки отличаются по содержанию ароматических аминокислот, их поглощение в ультрафиолетовой области спектра может сильно различаться. Условно считают, что при концентрации усредненного белка в растворе, равной 1 мг/мл, величина оптической плотности при 280 нм-равна 1,0 (при толщине слоя жидкости в 1 см). [c.83]

    ПОЛОСЫ с достаточной степенью точности определяется формой полос поглощения указанных ароматических аминокислот с учетом содержания последних в белке. Спектры поглощения простых амидных производных фенилаланина, тирозина и триптофана в этой области представлены на рис. 13-7 и 13-9. Низкоэнергетическая полоса триптофана соответствует двум перекрывающимся переходам Ьа и [26]. Полоса, соответствующая Ьь-переходу, имеет четко выраженную колебательную структуру, тогда как полоса Ьа носит более диффузный характер. Максимум О—О-полос для обоих указанных переходов у производных трип- [c.21]

    Ультрафиолетовые спектры поглощения определяются возбуждением электронных уровней атомов и молекул и обладают максимумами, положение которых характерно для определенных атомных группировок, сопряженных двойных связей и др, В белках ультрафиолетовые спектры поглощения в основном определяются ароматическими аминокислотами — фенилаланином /--макс— 260 м х), тирозином и триптофаном 280 жр-), причем спектры поглощения могут быть даже использованы для аналитического определения этих аминокислот. Нуклеиновые кислоты и нуклеопротеиды обладают настолько резким максимумом поглощения при 260—265 лр., что при помощи фотографирования в ультрафиолетовом микроскопе легко определить их содержание в отдельных клетках (Брумберг). Зависимость ультрафиолетовых спектров поглощения от pH, сос- тава среды, от образования комплексов с другими соединениями позволяет исследовать изменения состояния растворенных веществ так, по смещению максимума поглощения с 280 до 260—265 м а было обнаружено образование комплекса между белками и полисахаридами (Розенфельд). Линейные полимеры обычно не имеют интенсивных полос поглощения в видимой и ближней ультрафиолетовой областях спектра. [c.61]


    В области видимого спектра растворы важнейших аминокислот практически не поглощают, а в УФ-области поглощают растворы только тех аминокислот, которые содержат в молекуле бензоидные фрагменты или гетероциклические ядра ароматического характера - фенилаланин, тирозин, гистидин, триптофан. Относительно интенсивное поглощение при X = 260-290 нм характерно для тирозина и триптофана. Высокая мольная экстинк-ция тирозина при 280 нм используется для определения содержания белка в растворах. [c.455]

    В качестве примера рассмотрим спектр КД медьсодержащего белка (рис. 13-8). КД в области d—d-полос спектра поглощения меди отчасти обусловлен асимметрией окружения иона меди в структуре белка. Такова же причина и нередко наблюдаемого кругового дихроизма ароматических аминокислот белков. Для тирозина знак КД может быть как Положительным, так и отрицательным, но при этом он остается постоянным для всей полосы поглощения. Вследствие этого полосы КД по форме сходны с полосами поглощения [19, 46]. Фенилаланин ведет себя сложнее. Колебательные полосы, следующие за О—0-полосой с [c.25]

    УФ-спектры. Алифатические аминокислоты не имеют максимумов поглощения выше 220 нм. Аминокислоты с ароматическими заместителями (Try, Туг, Phe) поглощают в области выше 250 нм. [c.345]

    О конформационных изменениях полимеров часто можно судить по-изменению спектров поглощения ароматических боковых цепей аминокислот, а также пуриновых и пиримидиновых оснований (рис. 2-28). Другими ценными методами являются инфракрасная спектроскопия раман-спектроскопия, флуоресцентный анализ и КД-спектроскопия все эти методы рассматриваются в гл. 13. [c.191]

    В случае ароматических кислот наличие полос поглощения ароматического цикла в интервале 1600—1500 см значительно усложняет спектр, однако Р-фенилаланин, тирозин и подобные им вещества имеют почти обычные для аминокислот полосы поглощения [13, 17]. [c.336]

    Наиболее характерными физико-химическими свойствами белков являются высокая вязкость растворов, незначительная диффузия, способность к набуханию в больших пределах, оптическая активность, подвижность в электрическом поле, низкое осмотическое давление и высокое онкотическое давление, способность к поглощению УФ-лучей при 280 нм (это свойство, обусловленное наличием в белках ароматических аминокислот, используется для количественного определения белков). [c.44]

    Разностные ультрафиолетовые спектры. Поглощение света белками в области 250—300 ммк обусловлено в основном наличием в их молекулах ароматических аминокислот трех типов. К ним относятся триптофан и тирозин (последний в ионизованной форме), максимум поглощения которых лежит при 280 ммк, и фенилаланин, для которого наблюдается более слабое поглощение при 260 ммк. Более сильное поглощение белка при 270 ммк, чем при 280 ммк, свидетельствует обычно о том, что большую часть ароматических остатков в белке составляют остатки фенилаланина. [c.298]

    Количественной характеристикой степени саморазложения радиоактивного соединения служит коэффициент разложения К, под которым понимают число распадающихся молекул вещества (или число образующихся молекул продуктов реакции) на 100 эв поглощенной энергии. Для большинства органических соединений (насыщенные и ароматические углеводороды, спирты, эфиры, органические галогепиды) коэффициент разложения не превышает 10. Для ненасыщенных углеводородов, ввиду их меньшей стабильности и склонности к реакциям полимеризации, а также для четвертичных аммониевых солей и аминокислот коэффициент разложения достигает значений нескольких тысяч, а для цепных реакций может составлять величину порядка 10 . [c.88]

    Белковые АК - твердые вещества, выделяемые в виде белого порошка, обычно хорошо растворимые в воде и в полярных растворителях. Многие аминокислоты поглощают в ультрафиолетовой (УФ) области, но особенно специфическое поглощение при 280 нм имеют ароматические АК (фенилаланин, тирозин и триптофан) и поэтому содержание белка часто определяют именно по характеру спектра поглощения в УФ-об-ласти. [c.8]

    Белковые вещества обладают рядом характерных оптических свойств. Они вращают плоскость поляризации света влево (в обычных условиях), причем величина удельного оптического вращения [a D колеблется чаще всего от —30 до —70°. Эта величина определяется наличием асимметрических углеродных атомов в аминокислотных остатках и сложной конфигурацией пептидных цепей в молекулах белков. Все протеины обладают способностью поглощать лучи в ультрафиолетовой зоне спектра, причем характерным является поглощение на волне 280 ммк, обусловленное наличием ароматических аминокислот, в первую очередь тирозина. Инкремент показателя преломления белков [c.31]


    Ароматические аминокислоты при облучении в водном растворе проявляют свойства, которые типичны как для ароматических соединений, так и для аминокислот. Например, тирозин и диоксифенилаланин, подобно некоторым другим фенольным соединениям (стр. 173), после облучения в водных растворах, содержащих кислород, подвергаются характерным изменениям в спектре поглощения. Изменения сходны с изменениями, производимыми окислительными энзимами ЬбО, Г61, N16]. При нагревании облученных растворов ароматических аминокислот образуются неидентифицируемые вещества большего молекулярного веса. Из алифатических аминокислот такие вещества не возникают [Ь65]. [c.246]

    Ультрафиолетовые спектры поглощения определяются возбуждением электронных уровней атомов и молекул и обладают максимумами, положение которых характерно для определенных атомных группировок, сопряженных двойных связей и др. В белках ультрафиолетовые спектры поглощения в основном определяются ароматическими аминокислотами — фенилаланином (А зх=260 ммк), тирозином и триптофаном (А зх=280 ммк), причем спектры поглощения [c.55]

    Методика накопления заключалась в адсорбции органического вещества на активированном угле марки ОУБ-кислый с последующей десорбцией ацетоном и щелочью. В составе выделенного органического вещества были определены углеводы, фенолы, пуриновые и пиримидиновые основания (аминопроизводные гетероциклических соединений, входящие в состав нуклеопротеидов — специфических веществ живых клеток), различные аминокислоты (гликоколь, лизин, аспарагин и др.), уроновые кислоты, сахара, фульвокислоты, ароматические вещества, порфирины и др. [40, 41]. Спектры поглощения в инфракрасной области указали на присутствие таких функциональных групп как ОН, СО, СОС, СП. В результате кислотного гидролиза выделенного органического вещества было получено смолообразное вещество, представляющее собой продукт конденсации в кислой среде природных органических соединений подземных вод. Содержание углерода в этом продукте оказалось низким — 35—40%- Это может быть объяснено [c.73]

    Вторую полосу поглощения, обусловленную ионной карбоксильной группой, труднее различить в инфракрасном спектре, где ее интенсивность заметно меньше, чем интенсивность полосы 1600 лi , тогда как во многих спектрах комбинационного рассеяния она отчетливо видна [5]. Хотя многие аминокислоты, несомненно, поглощают в этой области, трудно доказать, что какая-либо отдельная полоса обусловлена указанной группой. Фасон и др. [18] обнаружили у ряда ароматических цистегшов полосы поглощения вблизи 1400 и 1406 одну из которых, согласно их предположению, можно рассматривать как поглощение ионизованной карбонильной группы Кегел и др. [32] также относят к этому поглощению полосу 1408 см , которая проявляется в спектрах подавляющего большинства исследованных ими аминокислот. Эрлих и Сазерленд [50] также относят полосу 1410 см в спектре Ы-метиламино-янтарной кислоты к симметричному колебанию С00 . Учитывая, однако, малую интенсивность полосы в инфракрасном спектре, при идентификации ее следует быть очень осторожным. [c.346]

    В случае ароматических кислот наличие полос поглощения ароматического цикла в интервале 1600—1500с.И значительно усложняет спектр, однако -фенилаланин, тирозин и подобные им вещества имеют почти обычные для аминокислот полосы поглощения [13, 17]. Для антра-ниловой кислоты обычные карбоксильная и аминная полосы поглощения несколько видоизменены вследствие наличия внутренней водородной связи, и эта кислота ведет себя не как типичная аминокислота. Отсутствие в этом случае диполярной формы, возможно, объясняется образованием водородной связи. [c.282]

    Кроме того, Клотц и Груен [20] отметили всегда присутствующую в спектрах исследованных ими аминокислот полосу поглощения вблизи 1300 см , а также полосу поглощения средней интенсивности в интервале 1335— 1300 см , которая находится почти во всех опубликованных спектрах аминокислот, охватывающих эту область частот [12, 17—19, 22]. Однако полосы поглощения в этом интервале частот наблюдаются также у многих амидов и ароматических аминов, так что они не могут рассматриваться как характеристические при идентификации аминокислот. [c.293]

    Большинство аминокислот практически не поглощает свет в доступной для регистрации области, так что их приходится окра-тпвать нпнгидрином. Этот метод окраски будет подробно рассмотрен в приложении 2, посвященном аминокислотным анализаторам. Пептиды и белки поглощают свет в области 206—215 нм за счет пептидной связи и в широкой области спектра с максимумом вбли- и1 280 нм за счет присутствия в них ароматических аминокислот. Азотистые основания и нуклеиновые кислоты хорошо поглощают вблизи 260 нм. Поэтому не удивительно, что основной метод детектирования в хроматографии белков и нуклеиновых кислот — это регистрация поглощения света в ультрафиолетовой области спектра. Соответствующие приборы мы будем для краткости именовать УФ-детекторами. [c.82]

    УФ-спектры [41, 42]. В области видимого спектра растворы протеиногенных кислот практически не поглощают, а в УФ-области для ароматических аминокислот можно наблюдать относительно высокое поглощение (ср. УФ-спектры тирозина и триптофана, рис. 1-8). Характеристический максимум поглощения этих аминокислот лежит > 250 нм слабое поглощение цистина, которое объясняется наличием дисульфидной группы, обнаруживается при 240 нм. [c.35]

    В УФ-части спектра зрительного пигмента обычно присутствуют также две полосы. 7-Полоса с Ятах при 280 нм обусловлена ароматическими аминокислотами (тирозином и триптофаном) белка, в то время как имеющая низкую интенсивность р-полоса при 330 нм обычно рассматривается как цис-полоса , обусловленная тем, что ретинальдегидные хромофоры имеют г( с-конфигурацию (ср. цис-ппш- каротиноидов разд. 2.3.3). Имеются доказательства, что фотохимическая активность связана с р-полосой поглощения. [c.309]

    Для определения содержания белка в растворах широко используются фотометрические методы анализа [1, 2]. В ряде случаев возможно определение белка по собственному поглощению при длинах волн 220 и 280 нм [1]. Более селективным является фотометриро вание окрашенных комплексов белка, полученных по различным реакциям ксантопротеиновой, биуретовой и реакции Лоури [2, 3]. Среди них наиболее специфичной и чувствительной является реакция Лоури, в которой белок вступает во взаимодействие с реактивом Фолина [4] в сочетании с биуретовой реакцией. Именно сочетание этих двух фотометрических реа1кций (реакция на пептидные связи и на обязательные ароматические аминокислоты белка) делает метод высокочувствительным и избирательным, т. е. позволяет его использовать для определения белка в сложных смесях. По данным [5], метод Лоури чувствительнее метода, основанного на биуретовой реакции, в 100 раз, а в сравнении с методом определения по собственному поглощению — в 10—20 раз. [c.37]

    Цианурфторид (20] реагирует с тирозином и боковыми цепями некоторых аминокислот, например с амино- и сульфгидрильными группами, но не взаимодействует с другими ароматическими аминокислотами. После реакции с цианурфторидом полоса поглощения тирозина в УФ-области исчезает. Цианурфторид устойчив в диоксане, но медленно гидролизуется в воде с образованием циануровой кислоты. Ни циануровая кислота, ни продукты реакции с аминокислотами не поглощают в области выше 290 нм. При взаимодействии ЦФ с белком оба процесса, гидролиз реагента и реакция с остатками аминокислот, включая тирозин, идут одновременно. Оптимальная область pH для модификации остатков тирозина составляет 9,0—12,6. Продукт реакции с аминогруппой гидролизуется до свободной кислоты при обычном кислотном гидролизе. Степень замещения можно определять дифференциальной спектрофотометрией в сравнении с иитактным тирозином, не модифицированным ЦФ. Для этого реакционную смесь разделяют на две части в одной половине поддерживают нейтральное pH, другую подщелачивают до 12,6. Разница в поглощении между двумя растворами позволяет рассчитать концентрацию тирозина. Добавление гуанидина способствует полной ионизации некоторых маскированных остатков тирозина. [c.351]

    Полосы поглощения в УФ-области остатков триптофана, тирозина и фенилаланина сами по себе могут дать информацию относительно их непосредственного окружения. В зависимости от окружения может наблюдаться смещение максимума полос поглощения или изменение интенсивности. Ветлауфер и сотр. [256], а также Донован [257] и сотр. исследовали влияние заряда вследствие ионизации карбоксила, протонирования аминогруппы или других факторов на УФ-спектры ароматических аминокислот. Бигелов с сотр. [258, 259] изучали влияние растворителей и состава раствора. [c.375]

    Остаток ароматической аминокислоты может быть доступен для растворителя и подвергаться воздействию среды, или он может быть маскирован в глубине глобулы, т. е. окружен боковыми цепями других аминокислот. В зависимости от состава среды или природы соседних аминокислот в УФ-спектре могут наблюдаться те или иные изменения, которые измеряют с помощью дифференциальной спектрофотометрии между нативным и денатурированным или гидролизованным белком или же снятием спектров в различных средах. Например, по данным Инада [10], в дифференциальном спектре остатков триптофана в пепсине максимум лежит в области 298 нм, а Ае = 365 см" , по данным Донована [257], Ае = 240М см . Если построить график поглощения растворов пепсина при 298 нм в зависимости от pH, то на кривой будут видны две стадии изменения состояния 6 остатков триптофана [10, 260, 261] = 2 с рК 4,0 и = 4 с рК 7,2 (продукт необратимой денатурации). Две стадии наблюдаются в изменении поглощения для 2 из 6 остатков триптофана в лизоциме п = 1 с рК 3,15 (Ае = 375 М см" ) и = 1 с рК 6,2 (Ае == = 438 М- см- ). [c.375]

    В состав молекулы гуминовых кислот входят ароматические, безазо-тистые и азотсодержащие гетероциклические шести- и пятичленные кольца они соединены между собой мостиками — NH—, — СНг— и др. Имеются данные о наличии в гуминовой кислоте углеводных остатков (гексоз, пентоз и др.) и органических азотистых соединений (различных аминокислот и др.), которые, по-видимому, связаны с ее ароматическим ядром в форме боковых периферических цепей. Однако имеющиеся данные пока еще не позволяют построить структурную формулу гуминовой кислоты. Наличие в составе ее молекулы функциональных групп 3—6 фенольных гидроксилов (ОН), 3—4 карбоксильных (СООН), а также метоксильных (О — СНз) и карбонильных (—С—О) групп, определяет свойства гуминовых кислот и характер взаимодействия их с почвой. Фенольные гидроксильные и карбоксильные группы в гуминовой кислоте обусловливают участие ее в процессах обменного поглощения катионов, определяют кислотные свойства этой кислоты. Водород карбоксильных групп способен замещаться различными катионами с образованием солей, получивших название гуматов, например [c.102]

    Из простейших аминокислот и органических кислот могли синтезироваться молекулы с сопряженными двойными связями, обладавшие способностью поглощать мягкий ультрафиолет (пурины и ниримидины, ароматические аминокислоты) и видимую часть солнечного спектра (порфирииы, каротиноиды). Без сомнения, соединения типа порфиринов, отличающиеся от насыщенных соединений способностью поглощать кванты с небольшой энергией и длительное время после поглощения кванта находиться в реакционноспособном состоянии, способностью к люминесценции, к участию в процессах миграции энергии, должны были сыграть большую роль в эволюции веществ и затем — простейших организмов. [c.15]

    Экспериментальные исследования колебательно-вращательных спектров показали, что полосы при некоторых частотах можно привести в соответствие с колебаниями определенных групп атомов или отдельных атомов в молекуле. Такие частоты назвали характеристическими. Различные молекулы, содержащие одну и ту же связь или одну и ту же атомную группировку, будут давать в ИК-спектре полосы поглощения в области одной и той же характеристической частоты. Это и является основой качественного анализа по инфракрасным спектрам. Характеристические частоты дают возможность установить по спектру наличие определенных групп атомов в молекуле и тем самым позволяют судить о качественном составе вещества и строении молекул. Например, полосы в области 3000...3600 см могут быть приписаны только О—Н- или N—Н-связям, и отсутствие полос в этой области спектра однозначно свидетельствует об отсутствии ОН- и NH-rpynn в анализируемом веществе. Примеры такого рода исследований весьма многообразны. С помощью инфракрасных спектров было установлено строение многих олефинов, ароматических соединений, карбонильных соединений, аминокислот и других групп веществ. Было выяснено, например, что большинство аминокислот существует в растворе в ионизированном состоянии, которое можно предстало [c.65]

    Для быстрых предварительных и сравнительных оценок может быть полезным определение белка по поглощению ультрафиолетового света при Я = 280 ммк, обусловленному входящими в его состав ароматическими аминокислотами. Чувствительность его довольно велика — около 0,2 мг/мл. Однако в присутствии нуклеиновых кислот результаты существенно искажаются. Частично С1 орректировать эти искажения можно, определяя поглощение не только при 280 но и при 260 ммк — в области максимального поглощения света нуклеиновыми кислотами. Существуют специальные таблицы и формулы, позволяющие по этим данным оценить соотношения содержания белка и нуклеиновых кислот. Однако для точных количественных определений малоизученных белков этот метод не может быть рекомендован. [c.34]

    Белки денатурируют при облучении ультрафиолетовым светом, а также большими дозами рентгеновых и у-лучей. Действие ультрафиолетового света особенно выражено при длинах волн от 260 до 310 ммк, причем основное поглощение обусловлено кольцами тирозина и триптофана. Показано, что при длительном воздействии ультрафиолетовых лучей происходит разрыв пептидных связей, смежных с ароматическими кольцами. При действии ионизирующего излучения могут также возникать разрывы между а-углеродными атомами и боковыми цепями аминокислот. Кроме того, возможны вторичные процессы, вызванные образованием различных свободных радикалов типа ОгН, Н2О2, ОН и т.д. Последние являются сильными окислителями, воздействующими на тиоловые группы и разрывающими дисульфидные связи. [c.187]


Смотреть страницы где упоминается термин Аминокислоты ароматические, поглощение: [c.12]    [c.194]    [c.23]    [c.241]    [c.242]    [c.36]    [c.180]    [c.127]    [c.279]    [c.251]    [c.20]    [c.243]    [c.138]    [c.95]   
Биофизическая химия Т.2 (1984) -- [ c.34 , c.36 ]




ПОИСК





Смотрите так же термины и статьи:

Аминокислоты ароматические

Ароматически аминокислоты



© 2025 chem21.info Реклама на сайте