Подвижная фаза чистота

Подвижная фаза (растворитель) является одной из составляющих системы жидкость — жидкость, ответственной за процесс разделения в распределительной хроматографии. Поэтому, кроме обычных требований, предъявляемых к растворителям в других видах жидкостной хроматографии (химической инертности по отношению к используемым неподвижным фазам, носителям и компонентам разделяемых смесей, низкой вязкости, чистоты, совместимости с детекторами, доступности и дешевизны), в распределительной хроматографии к подвижной фазе предъявляются и некоторые специфические требования. [c.66]

Чистота растворителя в жидкостной хроматографии имеет очень большое значение, так как различные примеси в подвижной фазе влияют на все основные стадии процесса подачу растворителя, разделение в колонке, детектирование и воспроизводимость результатов. Требуемая степень чистоты растворителя определяется выбранным вариантом разделения и используемой аппаратурой. [c.127]

Стоимость становится важным моментом при увеличении масштабов разделения, особенно когда возрастают факторы трудности, требования к чистоте и степени извлечения или минимальному времени разделения. При увеличении стоимости растворителей и насадки следует принимать во внимание время жизни колонок и процессы регенерации и рецикла подвижной фазы. Очевидно, на стоимость значительно влияет оплата рабочей силы. В настоящее время для продуктивности академических исследовательских программ и коммерческих операций важным фактором является общее время разделения. [c.16]

Разделение (хроматографирование). В качестве подвижной фазы для разделения обычно используют смеси растворителей высокой степени чистоты. Хроматографирование проводят в закрытом сосуде (обычно в прямоугольной камере с крышкой), насьщенном парами растворителей. Предварительное насыщение камеры устраняет частичную ассоциацию веществ со смешанными растворителями, устраняет краевой эффект (испарение растворителя больше у краев пластинки, чем в середине) и способствует образованию круглых, четких без размытых краев пятен на одной линии по поверхности пластинки. Насыщение камеры проводят обычно путем наложения на стенки фильтровальной бумаги, насыщаемой смесью растворителей подвижной фазы в течение некоторого времени (0,5—2 ч) непосредственно перед разделением. Для получения компактных пятен необходимо применять растворители с низкой точкой кипения. Пластинку ставят в камеру, погружая в растворитель примерно на 1 см, и выдерживают до подъема фронта растворителя нужной высоты. Обычно разделительный путь не превышает 10 см. [c.34]

Требования к чистоте растворителя при градиентном элюировании значительно выше, чем при изократическом. В процессе градиентного элюирования примеси, содержащиеся в растворителях, концентрируются в начале колонки и вымываются из нее по мере возрастания элюирующей силы подвижной фазы. При этом наблюдается сильный дрейф нулевой линии, а некоторые примеси элюируются узкими зонами и регистрируются детектором в виде самостоятельных пиков. В изократическом режиме примеси в начале эксперимента также могут концентрироваться на сорбенте, но в системе достаточно быстро устанавливается динамическое равновесие, и нулевая линия выравнивается на каком-то определенном уровне сигнала детектора. Этот сигнал во многих случаях можно скомпенсировать электрически, но при этом соответственно уменьшается линейный динамический диапазон детектора. [c.132]

Дифференциальный рефрактометр непрерывно регистрирует изменение показателя преломления элюата на выходе из колонки. Главным достоинством этого детектора является универсальность, так как при выборе подходящего растворителя он может детектировать любые вещества. Поэтому он занимает второе место (после УФ-детектора) по частоте использования. К другим достоинствам рефрактометра относятся возможность работы с любыми растворителями в широком интервале скорости потока, невысокие требования к чистоте подвижной фазы, надежность и удобство в эксплуатации. Некоторые модели детекторов могут работать при температуре до 150 °С, что является исключительно важным для эксклюзионной хроматографии ряда синтетических полимеров. [c.153]

Увеличение концентрации разделяемой смеси при сохранении прежних условий хроматографирования приводит к нарушению линейности сигнала детектора и перегрузке сорбента. В данном случае линейность сигнала большого значения не имеет. Разумеется, при интерпретации препаративных хроматограмм этот эффект следует иметь в виду. На рис. 5.20,в представлена хроматограмма, детектирование которой осуществлялось за пределами линейной области. Минимальная высота впадины между пиками составляет около половины высоты пиков. Однако истинное качество разделения выше, чем, это показывает хроматограмма в таком нелинейном режиме детектирования. Картина, подобная приведенной, не должна обескураживать оператора получение чистых фракций даже в этом случае вполне вероятно. В приведенном примере пики хотя и имеют плоские вершины, но еще симметричны следовательно, перегрузка касается пока только работы детектора. При дальнейшем увеличении концентрации образца возможна перегрузка сорбента, что приведет к образованию хвостов и снижению чистоты фракций (пунктирная линия на рис. 5.20,в). Перегрузку сорбента иногда удается уменьшить, взяв подвижную фазу лучшей растворяющей способности (рис. 5.20, г). [c.231]

При выборе неподвижной фазы обычно исходят из селективности, необходимой для требуемого разделения. Кроме того, необходимо учитывать свойства подвижной фазы и некоторые другие параметры. Если предполагается провести разделение сравнительно большого образца, то следует учесть емкость фазы, а в тех случаях, когда предполагается получить воспроизводимые данные по удерживанию, необходимо учесть чистоту фазы (или воспроизводимость ее свойств). [c.47]

Чистота подвижной фазы. Для измерения точных значений Кр следует использовать растворители самой высокой чистоты. Присутствие небольших количеств загрязнений другой полярности может оказать существенное влияние на результаты. Даже в тех случаях, когда начинают использовать другую партию растворителя, полученную от одной и той же фирмы, следует проверять его чистоту. При применении в качестве подвижной фазы смешанных растворителей для каждого хроматографического опыта следует использовать свежую смесь, учитывая изменения в составе, вызываемые различиями в испарении или адсорбции в процессе каждого проявления или различиями в химическом взаимодействии между компонентами раствора. [c.154]

На воспроизводимость значений Rf влияют качество и активность адсорбента, чистота растворителя и насыщение его паров в камере (см. рис. П.42), температура окружающего воздуха, глубина слоя подвижной фазы и ее скорость, размер пробы, а также точность измерения центра пятна [2, 7]. [c.186]

Хроматография на бумаге относится к числу микрометодов. В качестве носителя неподвижной фазы применяют чистую целлюлозу в виде специальной фильтровальной бумаги, которая должна обладать высокой чистотой и очень равномерной плотностью. Отдельные сорта различаются между собой толщиной и впитывающей способностью. Неподвижной фазой в большинстве случаев служит постоянно присутствующая в целлюлозе вода. Однако неподвижной фазой на бумаге может быть и другой растворитель (силиконовое и парафиновое масло, керосин). Вещество наносят в определенной точке на бумагу (точка старта), как и в случае тонкослойной хроматографии (ср. разд. А,2.6.3). Разделение происходит при движении подвижной фазы (проявлении). Экспериментально хроматографию на бумаге осуществляют в закрытом сосуде, атмосфера в котором должна быть насыщена парами всех компонентов применяемой системы растворителей. [c.94]

В качестве носителя неподвижной жидкой фазы здесь применяется специальная фильтровальная бумага высокой степени чистоты и равномерной плотности. Считают, что неподвижной фазой служит постоянно присутствующая в целлюлозе вода. Подвижной фазой является органический растворитель или смесь растворителей. [c.318]

Этот способ основан на том, что отдельные вещества по-разному распределяются между двумя несмешивающимися жидкостями, т. е. имеют различные коэффициенты распределения. Растворяясь в жидкости, которая может перемещаться по бумаге (подвижная фаза), вещество перемещается вместе с этой жидкостью. Способность вещества к перемещению на бумаге характеризуется величиной Rf, которая показывает отношение скорости движения определяемого вещества к скорости движения растворителя. Метод распределительной хроматографии на бумаге находит применение для идентификации отдельных компонентов лекарственных смесей, для установления степени чистоты препаратов и для количественного анализа. Хромато- [c.49]

Прибор следует содержать в чистоте Вытирать пролитый растворитель. Применять очищенные растворители, не содержащие примесей и взвешенных твердых частиц или частиц пыли. Твердые частицы могут оседать в насосах и выводить их из строя. Они могут приводить к закупориванию трубок либо даже ячеек детектора. Если хроматограф, предназначенный для разделения смесей методом ионообменной хроматографии, должен оставаться длительное время без использования, необходимо промыть полностью всю его систему дистиллированной водой. В ионообменной хроматографии растворы фосфатов часто применяют в качестве подвижных фаз, но они являются благоприятной средой для развития плесени, что ведет к закупориванию системы и колонок хроматографов. [c.248]

Тантал отделяют 4491 от микроколичеств вольфрама на фторопласте, пропитанном циклогексаноном. Подвижной фазой является 0,5 Л/ НГ, элюирующая вольфрам. Метод применяют при радиоактивационном определении вольфрама в тантале особой чистоты. [c.79]

Дикарбоновые кислоты (от щавелевой до адипиновой) определяют методом жидкостной распределительной хроматографии 1. В качестве твердого носителя используют диатомовый кирпич. Неподвижная фаза — 0,5 н. раствор серной кислоты, подвижная фаза — раствор к-бутилового спирта в хлороформе с постепенно повышающейся концентрацией. Адипиновая кислота вымывается 4%-ным раствором к-бутанола, глутаровая — 6%-ным, янтарная и щавелевая — 10%-ным. Длительность анализа 2—3 ч, относительная ошибка — до 10%. Метод очень чувствителен к качеству предварительной обработки носителя и к чистоте реактивов. [c.45]

Если трудно подобрать один растворитель с необходимой элюирующей способностью, используют смесь двух растворителей. Это дает широкую возможность более тонкого выбора элюирующей способности и позволяет получать подвижные фазы с практически непрерывно изменяющейся элюирующей способностью. Обычно свойства бинарной смеси растворителей (элюирующая способность, растворимость различных веществ, вязкость) являются промежуточными между свойствами чистых растворителей, хотя возможны и сильные отклонения [35]. Следует учитывать, однако, что между молекулами бинарной или тройной смеси при адсорбции имеет место конкуренция и хотя бы частичное взаимное вытеснение (подробнее см. разд. 1 этой главы). Обычно зависимость элюирующей способности смеси от состава имеет такой вид быстрое увеличение элюирующей способности при добавлении небольшого количества полярного растворителя и затем более медленный ее рост при дальнейшем добавлении этого растворителя. Это обстоятельство следует иметь в виду, если используются растворители недостаточной чистоты, так как возможные примеси в них могут сильно изменять элюирующую способность. [c.232]

При выборе газа-носителя следует учитывать такие факторы, как доступность, стоимость, чистота и правила техники безопасности. Все перечисленные выще газы удовлетворяют этим требованиям. При работе с взрывоопасным водородом следует тщательно выполнять правила техники безопасности. Окончательный выбор обусловлен типом детектора. Обычно газы-носители поступают в ГХ-систему достаточно чистыми и не требуют дополнительной обработки. Исключение составляет аргоновый детектор, газ для которого нужно высушивать перед употреблением. В схему хроматографа следует ввести два манометра для определения давления на входе и выходе из колонки и расходомер для определения скорости подвижной фазы. Однако манометры обычно не используют, поскольку данные по удерживанию определяют относительно стандарта, проходящего через колонку в тех же условиях. Чтобы определить оптимальную скорость газа-носителя и добиться воспроизводимости условий эксперимента, используют ротаметр или расходомер. Оптимальный расход газа-носителя определяют графически, строя зависимость ВЭТТ от линейной скорости газа-носителя (см. рис. 1.8), используя уравнения (1.16), (1.17) или (1.18). Расход газа-носителя обычно изменяется в пределах от 50 до 100 мл/мин для колонок с внутренним диаметром 0,6 см от 15 до 50 мл/мин для колонок с внутренним диаметром 0,3 см и от 1 до 5 мл/мин для капиллярных колонок. [c.47]

Чистоту реагента проверяют методом бумажной хроматографии (подвижная фаза — 40 /о-ный этанол), а его концентрацию устанавливают спектрофотометрически в 0,2 н. соляной кислоте при А, = 492,5 нм е = 305 600. [c.158]

Макропрепаративная 0,1 кг Как можно большая, обычно 0,001—0,1 г образца на 1 г насадки Соответствует требованиям уровня чистоты и степени извлечения. Часто вполне достаточно умеренного разрешения Желателен. Для анализа фракций он-лайн или офф-лайн , необходим дополнительный диапазон измерения при низкой чувствительности Фракции образца собирают. Подвижная фаза может быть возвра-щена в процесс [c.12]

Другой пример показан на рис. 1.26. Смесь эфиров холестерина хорошо разделили на пластинке со слоем из силикагеля, используя в качестве проявителя смесь бензол — гексан 50 50 [96]. Как видно из сопоставления данных и к, приведенных на рис. 1.26, уравнение (1.14) с 6 = 1,5 достаточно хорошо предсказывает соответствующие значения к, полученные из данных по аналитической ЖХ на силикагеле с использованием той же подвижной фазы. Было легко достигнуто масштабирование на основе данных по разделению в ТСХ для разделения 10 г образца методом препаративной ЖХ. Чистота фракции была установлена также с помощью ТСХ. Аналитические ЖХ-разделения показаны для сравнения. [c.65]

Примером совместного применения тестов Хроматографическая чистота (ни одна из примесей не должна превышать 0.25% ТСХ в подвижной фазе хлороформ-метанол=1 1) и Обычные примеси (не более 2% ТСХ в подвижной фазе толуол-изопропанол-гидроксид аммония= 70 29 1) является миконазола нитрат (USP XXIII, с. 1026). [c.422]

В газовой хроматографии подвижную фазу рассматривают как инертную считается, что она не вступает во взаимодействие ни с веществом, ни с неподвижной фазой. Следовательно, природа подвижной фазы — газа не оказывает влияния на процессы распределения или адсорбции — десорбции и газ-носитель не влияет на селективность. Его влияние на хроматографический процесс сказывается через эффективность колонки, котофая зависит от разницы в скоростях диффузии веществ в газах [член В уравнения Ван-Деемтера (1.53)]. Природа газа-носителя влияет на продолжительность анализа, поскольку оптимум скорости потока различен для разных газов и время удерживания уменьшается с уменьшением коэффициентов диффузии, вещества. Оказывает влияние также и определенное ограничение давления, обусловленное разницей вязкости газов. Принимаются во внимание и такие обстоятельства, как стоимость газа, его чистота, безопасность и обеспечение максимальной чувствительности используемых детекторов. Исходя из этого в газовой хроматографии используют ограниченный набор газов азот, водород, аргон и гелий. [c.114]

Способ Б, Технический продукт перекристаллизовывают из нетролейрого эфира и очищают методом бумажной хроматографии. Подвижной фазой является смесь — петролей-ный эфир бензол = 5 1. Реагент элюируют петролейным эфиром, растворитель упаривают на воздухе и препарат высушивают до воздушно-сухого o тoян я. Чистота реагента 98,81%. [c.74]

Ограничения метода градиентного сканирования. Основной недостаток описанного выше метода градиентного сканирования состоит в необходимости использования селективных детекторов. Универсальные детекторы, т. е. регистрирующие любой компонент, обязательно будут давать гигантский сигнал при смене состава подвижной фазы. Из-за этого фона обнаружение компонентов образца окажется невозможным. Поэтому необходимо применять детектор, не реагирующий на смеиу состава подвижной фазы. Наиболее обычным в ВЭЖХ является детектор, регистрирующий изменение поглощения в УФ-области. Естественно, что он может быть применен в условиях градиентного элюирования, если выбранные растворители не поглощают при рабочей длине волны детектора. Обнаружение по поглощению в УФ-области может, однако, быть практически универсальным, если мы выберем более короткие длины волн (например, 210 нм). В таком случае мы можем говорить о почти универсальном обнаружении [34]. Возможность применения коротких длин волн зависит от природы и чистоты растворителя. В связи с этим в ОФЖХ ацетонитрил следует предпочесть метанолу. Однако, как указывалось выше, водно-метанольные градиенты позволяют оценить поведение компонентов в изократических условиях на основании единичного опыта, так как в данном случае соблюдается уравнение (3.46). Применительно к смесям тетрагидрофурана и воды уравнение (3.46) выполняется лишь приблизительно, а для смесей ацетонитрила и воды вообще становится неверным (см. табл. 3.1). [c.248]

Итак, как мы могли убедиться, в качестве неподвижной твердой фазы в ТСХ применяются самые различные материалы, более того, механизмы разделения осуществляемого этим методом, также могут быть соверщенно разными, поэтому обобщить свойства применяемых в ТСХ отдельных растворителей и их смесей довольно сложно. Соотношение между природой разделяемых соединений и растворяющей системой обсуждалось в гл. 3, а элюенты, используемые для различных типов хроматографии, и их соотношение с сорбентами и разделяемыми соединениями рассматривалось в гл. 4—6. При выборе растворителя или смеси растворителей для ТСХ следует учитывать растворимость хроматографируемых соединений в подвижной фазе, а также растворяющую силу (полярность) растворителя или его избирательность. О влиянии полярности растворителя на процесс адсорбции говорилось в гл. 4, разд. 4,3. На рис. 9.9 показан состав различных смесей растворителей одинаковой полярности. Под избирательностью данного растворителя по сравнению с другим растворителем почти такой же полярности подразумевают способность первого избирательно растворять один из компонентов смеси. В статье Снайдера [58] дается классификация 82 растворителей. Общие соотнощения между хроматографируемыми соединениями, элюирующей системой и природой слоя сформулированы Германском [18]. При разделении методом ТСХ чистота растворителей, безусловно, имеет такое же важное значение, как и при разделении другими хроматографическими методами. [c.110]

Некоторые авторы [261, 266] отмечают специфическое взаимодействие между антиоксидантами и веществами, присутствующими в растворителях. Так, при определении полигарда [266] наблюдалась зависимость высоты пика стабилизатора от качества применяемого в подвижной фазе гептана. Поэтому для приготовления и при анализе растворов стандартов следует использовать растворитель той же партии, что и для анализируемых проб. Во всех случаях чистоте растворителя в ВЭЖХ придается большее значение, чем в спектральных методах анализа. Используемые в качестве элюентов растворители перед проведением анализа пропускают через микропористые фильтры [256, 266], подвергают специальной очистке. [c.250]

Как уже говорилось выше, энантиомерная чистота определяется из относительных площадей пиков сравниваемых стереоизомеров. При использовании хирального агента или хиральной добавки к подвижной фазе диастереомеры в принципе не обязательно вызывают идентичные сигналы детекторов. В методе с использованием хиральной неподвижной фазы элюируются энантиомеры, сигналы которых одинаковы. [c.116]

Хиральные краун-эфиры нашли разнообразное применение. Так, например, на основе краун-эфира с хиральными звеньями 2,2 -дигидроксиби-нафтила-1,Г, создана подвижная фаза для хроматографии. Подобные краун-эфиры проявляют свойства энантиоселективных комплексообразователей, с их помошью расщепляют рацематы аминокислот и аминов. Если хиральный краун-эфир (78) растворить в хлороформе и встряхивать с водным раствором соли рацемического а-фенилэтиламина, то в хлороформный слой переходит преимущественно один из энантиомеров (оптическая чистота до 14 %) [57], [c.386]

Толщина бумаги, размеры нор, предшествующее пабухание и степень чистоты оказывают вполне понятное влияние на соотношение между содержанием в бумаге неподвижной и подвижной фаз, а тем самым также на величину Для более плотных бумаг наблюдаются более низкие значения Так как но этим бул1агам растворители продвигаются медленно, то некоторые исследователи (Циммерман 11]) полагали, что здесь имеет место прямое влияние скорости продвижения на величину Д,. Одпако [c.144]

При анализе в режиме адсорбционной хроматографии необходима тщательная осущка растворителя, поскольку влага в подвижной фазе заметно изменяет фактор удерживания и степень разделения компонентов. При градиентном элюировании требования к чистоте растворителей сильно возрастают. Примеси в элюенте могут концентрироваться в начальном участке колонки и при увеличении полярности подвижной фазы элюироваться, что является причиной появления на хроматограмме ложных пиков. [c.177]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология