Время удерживания в жидкостной хроматографии

Жидкостная адсорбционная хроматография. Жидкостная адсорбционная хроматография применяется для группового разделения углеводородов на алкано-циклоалкановую и ареновую фракции, а также для разделения аренов по степени цикличности. Хроматографические колонки заполняют силикагелем или двойным адсорбентом — оксидом алюминия и силикагелем. В качестве десорбентов при анализе керосиновых и масляных фракций для вымывания насыщенных углеводородов используют н-алканы С5 — С7, для десорбции ароматических и гетероатомных компонентов — бензол, спиртобензольные смеси, ацетон, хлороформ. Применение ступенчатого или непрерывного увеличения полярности подвижной фазы позволяет значительно уменьшить время удерживания веществ. Этот метод называется градиентным элюированием. [c.130]

Метод отбора проб приходится применять во всех случаях, когда дтя проведения количественного определения каких-либо компонентов необходимо предварительно разделить реакционную смесь. Наиболее эффективными методами разделения явля[отся различные виды хроматографии. Если все анализируемые компоненты обладают достаточной летучестью, их разделяют с помощью газожидкостной хроматографии. Современные газо-жидкостные хроматографы являются высокоавтоматизированными приборами, которые позволяют разделить за короткое время достаточно сложные смеси, идентифицировать компоненты по времени удерживания и измерить количество каждого из них с по.мощью высокочувствительных детекторов. [c.60]

Таким образом, исправленное время удерживания как и удерживаемый объем связано со строением молекул. Соотношения (31), (32) для газо-жидкостной хроматографии и соответственно соотношения [c.566]

Отсутствие зернистого носителя дает возможность увеличить длину капиллярной колонки от нескольких десятков до нескольких сотен метров. Столь значительное удлинение колонки резко улучшает разделение анализируемой смеси и позволяет разделять вещества с очень близкими коэффициентами Генри, например орто-, мета- и лара-изомеры, изотопные соединения. Уменьшение диаметра колонки до 0,02 см позволяет работать с очень малыми дозами (порядка 0,1—10 мкг), т. е. капиллярная хроматография является тонким микрометодом анализа. При малых дозах и соответственно малых количествах жидкой фазы на единицу объема капиллярной колонки объемы удерживания и время удерживания компонентов значительно меньше, чем в газо-жидкостной хроматографии в заполненных колонках. Это намного сокращает время анализа, а также позволяет работать при более низких температурах. Объемная скорость потока газа-носителя очень мала, что очень важно при использовании дорогостоящих газов-носителей, таких, например, как гелий и аргон. Отметим, однако, что указанные достоинства в полной мере проявляются лишь при высокочувствительном и неинерционном детекторе. Наилучшим оказался пламенно-ионизационный детектор. [c.117]

Все это привело к некоторому компромиссному решению при создании жидкостных хроматографов, которое было достигнуто путем сохранения достаточно высокой удельной поверхности адсорбента при уменьшении размеров его гранул до 2—10 мкм. Уменьшение размера гранул, сокращая пути диффузии, влечет за собой, однако, уменьшение проницаемости колонны, В результате этого увеличиваются времена удерживания, а следовательно, усиливается размывание пиков. Для сокращения времен удерживания в набитых такими адсорбентами колоннах применяют значительное повышение давления у входа в колонну. В зависимости от вязкости элюента это давление составляет обычно от единиц до немногих десятков мегапаскалей, обеспечивая достаточную для аналитических целей скорость потока элюента через колонну. Так как жидкий элюент можно считать практически несжимаемым, то при постоянной скорости потока ш удерживаемые объемы получаются умножением соответствующих исправленных времен удерживания на ш. [c.284]

В жидкостной хроматографии широко применяют ЭВМ, измеряющие площади пиков. Они выводят на печать полное сообщение, включая название веществ, площади пиков, времена удерживания, поправочные коэффициенты на отклик детектора и содержание (в масс.%) для различных компонентов образца. [c.177]

Разделение олигомеров и полимеров методом жидкостной хроматографии на твердых адсорбентах может быть основано на двух главных эффектах адсорбционном и диффузионном. В первом случае время удерживания определяется в основном энергиями адсорбционного взаимодействия макромолекул и молекул элюента с поверхностью твердого тела и между собой (как и в адсорбционной жидкостной хроматографии молекул, см. лекции 16 и 17). Во втором случае время выхода вещества зависит в основном от гео- [c.337]

Взаимодействие каждого вещества с подвижной и неподвижной фазами является его индивидуальной характеристикой. Основным параметром, применяемым в хроматографии для целей качественного анализа, является удерживание. В газовой и жидкостной колоночной хроматографии время удерживания вещества зависит от многих факторов качества набивки ко- [c.628]

Поскольку растворители, составляющие подвижную фазу, летучи и в системе детектирования жидкостного хроматографа с датчиком по теплопроводности не могут дать пиков, необходимых для расчета, перед подачей подвижной фазы в колонку вводится раствор какого-либо высококипящего нефтепродукта в подвижной фазе. Благодаря этому на хроматограмме фиксируются высококипящие компоненты нефтепродукта, время проявления которых равно времени удерживания используемых растворителей (рис. 2). [c.7]

В газо-жидкостном хроматографе веш ество вносят в колонку — длинную узкую трубку с нелетучей жидкой фазой, нанесенной на пористый инертный твердый материал, Через колонку пропускают струю газа-носителя при определенной, регулируемой температуре. Вещество в виде паров движется по колонке с током газа, непрерывно подвергаясь распределению между газовой (подвижной) и жидкой (неподвижной) фазами. Время, в течение которого данное вещество проходит колонку (так называемое время удерживания) зависит от летучести вещества и его способности абсорбироваться данной жидкой фазой. Оба свойства определяются тонкими особенностями структуры конкретного соединения, так что время удерживания весьма характерно и индивидуально для каждого вещества в конкретных условиях разделения. Поэтому, если в колонку внесена смесь веществ, то ее компоненты появляются на выходе из колонки в разное время достигается их разделение. После выхода из колонки газовый поток попадает в детектор, регистрирующий появление вещества, а сигналы с детектора через усилительную схему посту- [c.74]

Авторы настоящей монографии в течение ряда лет занимаются разработкой жидкостных хроматографических методов разделения различных смесей органических соединений — от продуктов основного органического синтеза до лекарственных веществ и их метаболитов, выделенных из биологических объектов. В центре внимания постоянно находилась взаимосвязь, существующая между строением веществ, составом хроматографической системы, условиями ее работы и величинами удерживания разделяемых соединений. К сожалению, уровень теории жидкостной хроматографии, которая тесно связана с теорией растворов, пока не позволяет с достаточной для практических целей точностью описывать и предсказывать поведение сложных органических соединений. Именно ио этой причине мы вслед за нашими предшественниками широко используем феноменологическое моделирование. Этот путь, не претендуя на глубину физико-химического описания процесса, в то же время дает возможность выявить многие существенные его стороны и, по нашему мнению, в обозримом будущем останется в жидкостной хроматографии как единственный подход, приносящий реальные плоды хроматографисту-практику. Общую цель наших исследований можно сформулировать как создание системы представлений и моделей, пригодных в качестве инструмента при интерпретации и прогнозировании хроматографических данных. [c.9]

Посторонние примеси. В устройство ввода жидкостного хроматографа вносят 0,050 мл 0,1%-ного раствора испытуемого образца в подвижной фазе. Записывают хроматограмму. Затем вводят 0,050 мл 0,0002%-ного калибровочного раствора 5-фторурацила в подвижной фазе, записывают хроматограмму, измеряют время удерживания и площадь пика 5-фторурацила. На хроматограмме испытуемого образца находят пик, соответствующий 5-фторурацилу, и измеряют его площадь. Содержание 5-фторурацила в процентах в испытуемом образце X рассчитывают по формуле [c.266]

Однако, если при тонкослойной хроматографии на цилиндрической поверхности используется большой путь, приходится сталкиваться с общей задачей элюирования, характерной для колоночной жидкостной и газовой хроматографии (т.е. с тем, что для быстро перемещающихся зон отмечается недостаточно высокая разрешающая способность, а для медленно перемещающихся зон характерно избыточное время удерживания и их трудно обнаружить). Когда значение Rr слишком велико (значение к слишком мало), произведение NQ стремится к нулю если значение Rr слишком мало (слишком велико значение к ), продолжительность элюирования t->oD, произведение NQ приобретает конечное значение, а отношение NQ /t стремится к нулю. Оптимальное значение Rr (для жидкостной хроматографии) попадает в интервал от 0.2 до 0.4 (величина к в интервал от 4 до 1.5). [c.257]

Настоящий раздел в основном посвящен математическому описанию фактора разделения в круговой ТСХ. Согласно Кайзеру (гл. 1), расширение зоны в ТСХ является в первом приближении функцией длины пути разделения (в противоположность колоночной жидкостной хроматографии, где длина пути разделения одинакова для всех веществ). В связи с тем, что в ТСХ время разделения всех веществ одинаково, влияние диффузии (член В в уравнении Ван Деемтера) одно и то же для всех веществ. В отличие от ТСХ в ЖКХ вещества характеризуются разными временами удерживания и пропорциональными длительностями диффузии или размывания пиков. [c.47]

Несмотря на тщательное соблюдение методик, описанных выше, иногда о.бнаруживается, что система с определенными жидкожидкостными хроматографическими колонками показывает непрерывное уменьшение времени удерживания образца. Если предполагается, что подвижная фаза предварительно насыщена неподвижной и что в ней не протекают нежелательные химические реакции (например, окисление неподвижной фазы), можно предположить еще две дополнительные причины потери неподвижной фазы при эксплуатации колонок. Во-первых, на растворимость неподвижной фазы в подвижной может влиять давление внутри колонки. Однако при давлениях, используемых в настоящее время в жидкостной хроматографии (вплоть до 350 атм), этот эффект незначителен ввиду малой степени сжимаемости жидкостей. [c.141]

В настоящее время в жидкостной хроматографии в качестве неподвижных неполярных фаз используют химически связанные фазы, которые получают простым способом и с воспроизводимыми свойствами. Неподвижные неполярные фазы называют обращенными фазами (ОФ), поскольку в отличие от обычной хроматографии в этом виде хроматографии неподвижная фаза неполярная и наиболее сильная адсорбщ1я (наибольщее удерживание) происходит из полярных элюентов, а именно из воды. Снижая полярность элюента, например в результате добавления метанола, можно уменьшить удерживание. Хроматография с обращенными фазами впервые была описана Говардом и Мартином [23], которые нанесли на силикагель парафиновое масло и н-октан и, используя водные элюенты, разделили с помощью этой распределительной системы жирные кислоты. Чтобы на силикагель легче было нанести неполярную неподвижную фазу, Говард и Мартин проведи силанизацию силикагеля диметилдихлорсиланом. Такими же хроматографическими свойствами, как эти обращенные фазы, обладают активные угли, особенно если они графитированы. Механическая прочность подобных фаз мала [c.126]

В главе XVIII показано, что теплота адсорбции зависит от геометрической и электронной структуры молекулы адсорбата и адсорбента. Следовательно, изменяя природу адсорбента (или неподвижной жидкости в газо-жидкостной хроматографии), мояс-но изменить времена удерживания и даже последовательность выхода компонентов. Для -алканов теплота адсорбции является линейной функцией числа атомов углерода (п) в молекуле (см. стр. 492, 493), поэтому при одной и той же температуре колонки [c.564]

Высокоэффективная жидкостная хроматография в нормальнофазовом варианте (полярный сорбент — неполярный элюент) рекомендуется для разделения изомеров. Изомеры имеют различное время удерживания на силикагеле благодаря разному расположению полярных групп. Идентификацию пиков на хроматограмме проводят методом добавок индивидуальных изомеров. Количественное определение одного из изомеров проводят методом абсолютной калибровки. [c.206]

Разделение бензола, нафталина и фенантрена методом жидкостной хроматографии — типичный пример разделения высококипящих органических веществ, трудно разделяемых методом газовой хроматографии. Разделение методом ВЭЖХ проходит за 5 мин, время удерживания возрастает с увеличением числа ароматических колец. Ароматические вещества хорошо детектируются при А, = 254 нм. [c.209]

Основным прибором в газо-жидкостной хроматографии (ГЖХ) является колонка — металлическая или стеклянная трубка диаметром несколько миллиметров и длиной несколько метров. Колонка заполнена пористым материалом, пропитанным жидкостью (жидкой фазой). Исследуемое вещество в газообразном или в жидком состоянии вводят в доток инертного газа-носителя, обычно азота, гелия или водорода, и пропускают через колонку, нагретую до определенной температуры. Компоненты анализируемой смеси обладают различной растворимостью в жидкой фазе и поэтому выходят с другого конца трубки неодновременно. Многократно адсорбируясь и десорбируясь с поверхности носителя, они находятся в колонке строго определенное для каждого из них время. Этот период называют временем удерживания, и его регистрируют специальным детектором. [c.84]

Выбор сорбента и колонки для ГВЭЖХ также имеет свои особенности. Прежде всего, колонка должна быстро приходить в равновесие с растворителем постоянно изменяющегося состава как в процессе градиентного элюирования, так и при возвращении к исходному составу растворителя при подготовке колонки к новому анализу. Если для старых колонок в жидкостной хроматографии, работавших однократно, градиент формировался и использовался один раз, после чего сорбент в колонке заменялся свежим, и это позволяло применять силикагель и оксид алюминия, то для ГВЭЖХ эти сорбенты не подходят, так как уравновешивание их со слабым растворителем после градиента слишком длительно. Однако современные обращенно-фазные и другие привитые сорбенты достаточно быстро приходят в равновесие с исходным растворителем после окончания градиентного элюирования, что позволяет успешно использовать их для этих целей. Время, необходимое для уравновешивания колонки, для каждого сорбента устанавливается экспериментально по достижению постоянства времени удерживания веществ, входящих в анализируемую смесь. Это время различно как для разных сорбентов, так и для разных по составу растворителей, и может колебаться от десятков до нескольких сотен минут. [c.66]

Жирные кислоты [9]. Общее содержание составляет 77%. Идентифика ция их произведена газо-жидкостной хроматографией метиловых эфиров Последние получают этерификацией жирных кислот диазометаном [9, 11] Условия хроматографирования температура 160° С, газ-носитель — ар гон скорость газа 60 мл мин. Время удерживания в мин С14 — 6 Qj—12 ie — 14 Qe — 28 j - 32 Q - 37 U — 48. [c.373]

Точно определенный диапазон эксклюзии между мертвым объемом и суммой мертвого объема и объема пор Vo + Vp обеспечивает малые времена удерживания, определяемые коэффициентом распределения К. Получаются узкие пики, что позволяет проводить их правильную колююственную обработку. Поскольку, как правило, проба не вступает ни в какие химические или физические взаимодействия, ее компоненты элюируются без потерь. Следовательно, данный метод пригоден для препаративного разделения. В то же время, проба не влияет на разделяющую колонку, как это происходит в других видах жидкостной хроматографии. [c.292]

Адсорбция в ЖХ и ГХ - процесс термодинамический, зависит от температуры. Следовательно, величина удерживания зависит от температуры. Кроме того, от температуры зависит вязкость растворителя, что определяет эффективность колонки. Таким образом, все три основные характеристики колонки селективность, емкость и эффективность зависят от температуры. Для стабилизации условий разделения, чтобы получить воспроизводимые времена удерживания, амплитуды пиков и хорошее разделепие необходимо термостатирование колонок. Обычно температура термостата 30-50 °С, стабильность поддержания температуры - 0.3-0.5°С. Как видно, условия разделения очень мягкие, не то что в ГХ (100-300°С). Многие жидкостные хроматографы не имеют термостатов, так как колебания температуры в комнате не очень велпкп и воспроизводимость показаний приемлемая. [c.12]

Смит и Вэддингтон [29] при проведении газохроматографического анализа алифатических спиртов, диолов и эфиров на ароматических полимерах ПАР-1 и порапак О отметили, что для отдельных классов соединений наблюдается линейная зависимость логарифма времени удерживания от температуры кипения элюента. Небольшие отклонения от линейности обнаружены ири изменении структуры алкильной цепи. Характер удерживания спиртов, диолов, эфиров на исследованных полимерах оказался в основном аналогичным удерживанию этих соединений в газо-жидкостном варианте хроматографии на колонках, заполненных сорбентом целит—апиезон Ь, хотя времена удерживания на них гораздо меньше. Для компонентов с близкими температурами кипения порядок элюирования таков диол, спирт, эфир. Диолы разделяются на ароматических полимерах без разложения. [c.33]

При газохроматографическом разделении алифатических аминов на пористых ароматических сорбентах наблюдаются размывание заднего фронта и большая асимметрия пиков аминов. По мнению авторов [30], размывание обусловлено существованием двух типов активных центров на полимере кислотных центров, которые можно нейтрализовать обработкой основанием, и ионов металлов, которые дезактивируются добавлением нелетучего комплексообразователя, например полиаминов. Времена удерживания алифатических аминов зависят от их структуры, причем порядок элюирования аналогичен наблюдаемому в газожидкостном варианте хроматографии на неполярных жидких фазах. Разделение аминов на пористых полимерах, модифицированных 1—5% полиэтиленимина, осуществляется главным образом адсорбцией на неполярном полистироле наблюдается линейная зависимость между температурой кипения аминов и логарифмом времени удерживания первичных, вторичных и третичных аминов. Добавление полиэтиленимина дезактивирует активные центры. При нанесении больших количеств полиаминов на пористые полимеры разделение амииов осуществляется комбинацией газоадсорбционной и газо-жидкостной хроматографии [30]. [c.33]

КОЛОНКИ и последующее ее уменьщение. Время появления максимума пика на хроматограмме называется временем удерживания ta,, где I — индекс, соответствующий -му компоненту разделяемой смеси. При постоянных условиях работы и составе фаз хроматографической системы время удерживания является величиной, постоянной для данного вещества. Иногда в начальной части хроматограммы регистрируется небольшой пик, природа которого связана с кратковременным нарущением равновесия в колонке при вводе пробы. Этому пику соответствует время удерживания несорбирующегося вещества to и свободный объем системы. Свободный объем системы Уде — это объем, занимаемый подвижной фазой от устройства для ввода пробы до детектора. Часть свободного объема системы, находящаяся в пределах колонки, называется свободным объемом колонки Vm (рис. 1.3). В идеале свободный объем системы не должен превышать свободный объем колонки. В современных жидкостных хроматографах внеколоночные объемы сведены к минимуму, и измеряемую экспериментально величину /о в первом приближении можно считать отвечающей свободному объему колонки. Свободный объем колонки — ее важная характеристика, для его определения в изучаемую смесь иногда специально вводят несорбирующееся соединение для измерения Iq. Однако, как показано многими исследованиями последних лет, корректное определение свободного объема — весьма нелегкая, если вообще разрешимая задача. В противоположность свободному объему различают объем неподвижной фазы в колонке Vs. Отношение этих величин называют фазовым отношением колонки ф [c.17]

Подлинность. В устройство ввода жидкостного хроматографа вносят 0,005 мл 1%-ного раствора испытуемого образца в подвижной фазе. Записывают хроматограмму и измеряют время удерживания. Такие же операции выполняют с 1 %-ным раствором ремантадина в подвижной фазе. Время удерживания адапромина, отнесенное к времени удерживания ремантадина, равно 1,30 0,05. [c.264]

Изотерма сорбции определяет (при различных концентрациях) равновесное отношение доли сорбированного растворенного вещества к доле, оставшейся в подвижной фазе. Равновесие зависит от температуры в случае адсорбционно11 и ионообменной (или лигандообменной) хроматографии при повышении температуры равновесие обычно смещается в сторону подвижной фазы. Отношение равновесных концентраций вещества в неподвижной и подвижной фазах называют коэффициентом распределения К. Отношением количеств (а не концентраций) между двумя фазами определяется величтш к. В колоночной жидкостной хроматографии для обозначения этой величины использовали термин "коэффициент емкости", а в последнее время "фактор удерживания" к. Это важнейший параметр, от которого зависит степень удерживания. Величины Кик пропорциональны (коэффициентом пропорциональности является фазовое отношение). (См. более подробное обсуждение в разд. III, Б. 2.) [c.146]

При сравнении колоночной жидкостной хроматографии с тех, а такое сравнение необходимо, можно увидеть, что в КЖХ в отличие от ТСХ и КТСХ время удерживания анализируемых веществ превышает время удерживания элюента Принимая это во внимание, можно констатировать, что эффективность КЖХ, измеренная по отношению к числу разделений, существенно ниже не только по сравнению с КТСХ, по даже с ТСХ. В связи с этим можно прийти к выводу, что основным условием эффективности разделения ВЭКЖХ является использование колонок с плотной упаковкой сферических частиц сорбента (мелкодисперсного с незначительными отклонениями размеров от средней величины). [c.79]