Гормоны разделение

Начиная с работ М. С. Цвета, открывшего элютивную жидкостно-адсорбционную хроматографию, ее развитие сопровождалось ростом числа приложений в области биологии и медицины. Разработка А. Мартином и Р. Синджем (1941) жидкостной распределительной хроматографии значительно расширила возможности хроматографических методов. Преимуществами распределительной хроматографии является возможность работы в области линейной изотермы сорбции, что позволяет избавиться от деформации хроматографических полос. Кроме того, использование органических жидкостей в качестве неподвижной фазы улучшает возможность подбора необходимого сорбента. Она с успехом применяется для анализа и разделения лекарственных препаратов, гормонов, пестицидов, антибиотиков и других веществ. Основным недостатком классической жидкостной хроматографии является длительность процесса, достигающая суток. [c.78]

Небольшие органические молекулы, находящиеся в живых тканях, можно разделить на две большие группы. Одна из них включает водорастворимые вещества, такие, как аминокислоты и сахара, нерастворимые в апротонных растворителях (хлороформе или эфире). Другая группа охватывает жирорастворимые вещества, которые растворяются в хлороформе, эфире или других органических растворителях, но обычно не растворяются в воде. Эти соединения носят общее название липиды. Ясно, что такое грубое разделение, основанное на способности к растворению в определенных типах растворителей, не учитывает общие специфические структурные особенности соединений. Внутри каждой обширной группы веществ можно выделить ряды соединений с общими функциональными группами и характерными структурными особенностями. Низкая растворимость в воде предполагает, что в липидах преобладают неполярные (т. е. углеводородные) фрагменты, а высокополярные группы и группы, обладающие способностью образовывать водородные связи, или вообще отсутствуют, или составляют незначительную часть молекулы. Среди соединений, входящих в класс липидов, встречается немало таких, которые имеют чрезвычайно большое значение для биологии. К ним относятся витамины А и О (разд. 22.2) и стероидные гормоны (разд. 22.2), находящиеся в следовых количествах и все вместе составляющие лишь очень малую часть от общего содержания липидов в любой живой системе. [c.329]

В настоящее время этот метод используют в промышленности для очистки витаминов, гормонов, антибиотиков и кислот от примесей, а также для разделения и концентрирования различных катионов и анионов. Различают несколько разновидностей хроматографического метода адсорбционную, ионообменную, распределительную, газожидкостную, тонкослойную хроматографию. [c.322]

Экстракция органических соединений широко распространена в основном орг. синтезе, нефте-, коксо-и лесохимии и др. отраслях пром-сти. Примеры разделение смесей углеводородов нефтяных фракций на группы компонентов близкого хим. состава (ароматич. углеводороды и легкие парафины) извлечение ароматич. углеводородов (бензол, толуол, ксилолы) из продуктов каталитич. риформинга очистка смазочных масел вьщеление фенолов из фракций кам.-уг. смолы извлечение бутадиена из смеси углеводородов в произ-ве СК извлечение из водных р-ров орг. к-т с послед, их концентрированием (уксусная, акриловая, лимонная к-ты). В хим.-фармацевтич. и микробиол. отраслях пром-сти экстракцию используют в произ-ве лек. препаратов - алкалоидов, антибиотиков, витаминов, гормонов в пищ. пром-сти - для очистки масел и жиров и др. [c.421]

В последние годы в практику контрольно-аналитических лабораторий институтов, производственных фармацевтических объединений вводится метод жидкость-жидкостной хроматографии (ЖХ). Правильный подбор двух несмешивающихся жидких фаз —подвижной и неподвижной — может обеспечить высокое разделение при обычной температуре как летучих, так и нелетучих веществ. Метод ЖХ уже применяется для разделения жирных кислот, аминокислот, хелатов, спиртов, аминов, углеводородов, стероидов, гормонов, алкалоидов, антибиотиков и др. [c.59]

Гормоны объединяют химически неоднородные регуляторы к ним относятся стероиды, производные жирных кислот, аминокислоты, производные аминокислот, а также пептиды и белки (обстоятельно обсуждаются далее рассмотрение белковых гормонов в главе Белки вряд ли уместно, так как разделение пептидов и белков имеет исторические корни и сегодня едва ли можно их четко разграничить). [c.233]

Из уравнения (17.19) следует, что степень разделения при молекулярной дистилляции больше, чем при простой перегонке в (Мв/Ма)° раз. Процесс молекулярной дистилляции дорогостоящий, поэтому его применяют для разделения небольших количеств высокоценных веществ витаминов, аминокислот, гормонов и т.п. [c.113]

Используется наиболее часто. Применяется для разделения нейтральных и кислых белков, пептидов и аминокислот, гормонов, ферментов, РНК, полисахаридов, полярных липидов (особенно фосфолипидов), гемоглобинов и др. Оптимальная область pH 8—9, [c.155]

Имеется несколько вариантов классификации гормонов, например по месту их синтеза. Таким путем можно выделить гормоны гипоталамуса, гипофиза, щитовидной железы, надпочечников, поджелудочной железы, половых желез и др. Такое разделение гормонов имеет ряд недостатков, так как некоторые гормоны могут синтезироваться в нескольких железах, например половые гормоны частично могут синтезироваться в надпочечниках. [c.134]

В последнее время появились данные, согласно которым fi-меланотропин не является истинным гормоном, а представляет собой продукт разрушения белкового гормона р-липотропина в ходе разделения биологического материала на фракции. [c.266]

Процесс молекулярной дистилляции применяют для разделения относительно небольших количеств дорогостоящих термически нестабильных веществ витаминов, аминокислот, гормонов и т. п. При больших расходах разделяемых смесей возникает необходимость увеличивать поверхность испарения, объем дистиллятора и, соответственно, неоправданно увеличиваются затраты на герметизацию оборудования и на работу вакуум-насоса. [c.418]

Ионообменное разделение очень широко используется также в органической химии и биохимии. Метод позволяет разделять самые разные вещества, однако наибольшее значение имеют способы разделения аминокислот, нуклеотидов, антибиотиков, витаминов, гормонов, органических кислот и различных оснований. [c.489]

Трудность разделения гибридных структур высокомолекулярных углеводородов и отсутствие достаточно специфических реакций предельных (парафино-циклопарафиновых) углеводородов гибридного строения являются причиной слабой изученности химической природы этой группы высокомолекулярных углеводородов нефти. До сих пор почти отсутствуют данные о соотношении пента- и гексаметиленовых колец в составе предельной высокомолекулярпой углеводородной части сырых нефтей и нефтепродуктов. В бензино-керосиновых фракциях нефтей для решения этой задачи успешно была использована открытая Зелинским [74] реакция избирательной дегидрогенизации гексаметиленов в присутствии платинового катализатора. За последнее время появились сообщения об использовании этой реакции и при изучении строения таких сложных органических соединений, как политерпены, стерины, желчные кислоты, витамины, гормоны и др. [75]. Однако в литературе не встречалось указаний об использовании метода избирательной каталитической дегидрогенизации нри изучении строения предельных высокомолекулярных углеводородов нефти. Нам представлялась весьма заманчивой и перспективной возможность использования этого метода в комбинации с хроматографией и спектроскопией (инфракрасной и ультрафиолетовой) для более глубокого познания химического строения предельной части высокомолекулярных углеводородов нефти гибридного характера. Но прежде чем воспользоваться этим методом, нада было доказать его применимость для решения указанной выше задачи и проверить экспериментально надежность и воспроизводимость получаемых при этом результатов, показать пределы точности метода. [c.213]

Особое распространение получили методы, основанные на использовании антигенов и антител, меченных ферментами, — так называемый иммунофермеитный анализ. Они используются для изучения широкого круга соединений — антител, пептидных и стероидных гормонов, вирусных и бактериальных антигенов, различных белков и ферментов. Существуют гетерогенные (твердофазные) и гомогенные методы иммуноферментного анализа, принципиально различающиеся способом разделения компонентов иммунохимической реакции. Твердофазные методы основаны на применении антител или антигенов, иммобилизованных на нерастворимых носителях. [c.306]

Аффинная Ж. X. основана на образовании прочной связи со специфич. группами неподвижной фазы (лигандами, аффинантами). Взаимод. лигандов с разделяемыми в-вами основано на биол. ф-ции последних. Так, при разделении ферментов лигандами служат их субстраты, ингибиторы или коферменты, токсинов-рецепторы, белков-антитела и т. д. Особенно эффективна в биотехнологии и биомедицине для выделения ферментов, белков, гормонов. [c.152]

Применеиие. Ж х важнейший физ -хим метод исследования в химии, биологии, биохимии, медицине, биотехнологии Ее используют для анализа, разделения, очистки и выделения аминокислот, пептидов белков ферментов, вирусов, нуклеотидов, нуклеиновых к-т, углеводов, липидов, гормонов и т д, изучения процессов метаболизма в живых организмах лек препаратов, диагностики в медицине, анализа продуктов хим и нефтехим синтеза попупродуктов, красителей, топлив, смазок, нефтей, сточных вод, изучения изотерм сорбции из р-ра, кинетики и селективности хим [c.153]

Пористое стекло (диаметр пор 5 — 250 нм), как и наиболее широко применяемые носители иа основе агарозы, отличается низкой неспецифической сорбцией и высокой емкостью. Аффинная хроматография нашла широкое применение при разделении ферментов, полнпептидных и белковых гормонов, антител, антигенов, а также транспортных и рецепторных белков. [c.354]

Силикагель (НФХ) селективнее ири разделении изомеров (о, м, и), а также сорбатов, различающихся но функциональности (производные бензола, фенола и т.д.). При разделении гомологов (пептап - декап) спиртов, кислот лучше применять алкилсиликагели (ОФХ). Если в анализируемой смеси иреднолагаются комноненты разной химической природы витамины, лекарства, наркотики, токсины, гормоны начинать разработку метода лучше с ОФХ. [c.35]

Хроматографические методы, в которых разделение компонентов смеси основано на различии в размерах, форме или суммарном заряде молекул, часто недостаточно эффективны для разделения смесей белков. В таких случаях может оказаться полезной аффинная хроматография [48]. Успех метода зависит от того, удастся ли найти вещество, которое будет специфически взаимодействовать с подлежащим очистке белком. Для фермента таким веществом может быть конкурентный ингибитор катализируемой этим ферментом реакции, а для участвующего в гормональной регуляции белка-рецептора — соответствующий гормон. Это вещество связывают с подходящим нерастворимым гидрофильным носителем, и полученный материал используют при хроматографии как стационарную фазу. Вещества такого типа часто сами оказываются большими природными макромолекулами, и приемы, используемые для соединения их с носителями, сходны с методами приготовления иммобилизованных ферментов [см. разд. 27.4.2 (5)]. Реакции, с помощью которых белки, содержащие аминогруппы или фенольные группировки, могут быть связаны с носителем на основе сшитого полиакриламида, содержащего некоторое число гидразидных или 4-аминоанилидных остатков (схемы 30, 31 Б — остаток белка). Хорошие результаты получены в тех случаях, [c.322]

Согласно современным представлениям, плазма циркулирующей крови содержит свыше ста белков, включая гормоны и ферменты. Возможности электрофоретических методов разделения довольно ограничены с их помощью удается получить лишь около 20 белковых фракций. Однако иммунохимические методы, особенно иммуноэлектрофорез, обладают большими возможностями они позволяют идентифицировать до 30 фракций белков сыворотки. Значение иммуноэлектрофореза становится еще более наглядным, если принять во внимание, что с помощью микрометода Шейдигера[16] можно анализировать белок в чрезвычайно малых количествах — до 5—10 мкг. [c.20]

Комбинированное использование тонкослойной гель-фильтрации с электрофорезом или иммунодиффузией до настоящего времени представляет собой один из наиболее тонких методов микроанализа белков. Хансон и др. [10] разработали метод двумерного разделения, используемый для анализа белков. На первом этапе белки подвергают гель-фильтрации в тонком слое сефадекса G-200 или G-100, а на втором — электрофорезу. Они предложили прибор, в котором хроматографическую пластинку можно закреплять под углом для гель-фильтрации и горизонтально для электрофореза. В описанных экспериментах использовали стеклянные пластинки размером 30 x 30 см и толщиной 1 мм, на которые наносили слой геля сефадекса толщиной 0,5 мм. Для набухания сефадекс оставляли в 0,05 М вероналовом буферном растворе pH 8,6. Сначала проводили гель-фильтрацию, а затем в направлении, перпендикулярном первому, в течение 3 ч вели электрофорез при градиенте напряжения 10 В/см. Этот метод весьма успешно был применен для анализа сывороток крови человека, спинномозговой жидкости и гормона роста. [c.240]

Неионообменная порошковая целлюлоза применяется в качестве носителя при распределительной хроматографии и электрофорезе на колонках и в слоях. Целлюлоза используется для хроматографического разделения сахаров, глицеридов, спиртов, фенолов, аминов, карбоновых и аминокислот, пептидов, белков, нуклеиновых кислот, уроновых кислот, липидов, алкалоидов, антибиотиков, гормонов, ферментов, витаминов, гербицидов и инсектицидов, неорганических ионов, красителей, углеводородов и других веществ. Применяется также для электрофореза белков, пептидов, аминокислот, нуклеиновых кислот, нуклеотидов. [c.127]

Флорисил применяется для разделения азотсодержащих веществ, лини стероидов, глюкозидов, ацетилированных сахаров, нуклеотидов, алкалои антибиотиков, витаминов, гормонов, углеводородов, терпенов и других веще( [c.264]

Гель-хроматография (гель-фильтрация, или ситовая хроматография) — метод разделения, очистки и анализа веществ, основанный на различии в размерах или массе молекул. В качестве стационарной фазы используют различные гели с трехмерной сетчатой структурой декстраны (полисахариды), полиакри ламиды, пористые силикагели, цеолиты и др. При разделении смеси небольшие молекулы диффундируют через поры набухшего в растворителе геля, а крупные молекулы проходят через пространство между частицами геля. При промывании геля растворителем в первую очередь перемещаются крупные молекулы, а затем уже мелкие, т. е. компоненты смеси элюируют в порядке уменьшения их молекулярной массы. Гель действует как молекулярное сито. Аппаратурная простота метода и мягкие условия разделения способствовали особенно широкому применению гель-хроматографии в биохимических исследованиях. Основное назначение гель-хроматографии — разделение высокомолекулярных веществ. С ее помощью выделены и очищены многие ферменты, пептидные гормоны, нуклеиновые кислоты. [c.498]

Аффиная хроматография является самостоятельной областью жидкостно-адсорбционной хроматографии, выделяемой по специфическому механизму взаимодействия разделяемых веществ с сорбентом. Метод основан на характерной особенности биологически активньгх веществ селективно и обратимо связывать определенные вещества, называемые аффинными лигандами или аффиантами. Таким образом, ферменты связывают соответствующие ингибиторы, антитела — антигены, гормоны — их рецепторы и т.п. Если по аналогии с обращенными фазами приготовить сорбенты с привитыми аффинными лигандами, появляется возможность селективного хроматографического выделения близких по свойствам биологически активных соединений и их разделения между собой. Наиболее часто применяемые аффинные лиганды приведены в табл. 3.65. [c.201]

Современную синтетическую и теоретическую органическую химию отличает широкое применение физических методов, которые облегчают выяснение структуры соединения и исследование механизма реакции. Современная органическая химия вооружена множеством специфических приемов для введения определенных групп в органические соединения, эффективными методами для разделения смесей и очистки веществ. Стабильной теоретической базой органической химии являются электронная теория и представления квантовой химии. В настоящее время можно синтезировать почти любое сложное органическое соединение, теоретически можно предсказать существование новых необычных соединений. Синтезированы природные соединения с очень сложной структурой алкалоиды стрихнин и морфин, зеленый пигмент растений хлорофилл, витамин В12 (Р. Вудворд), полипептиды с более чем 30 остатками аминокислот например, гормон инсулин человека, состоящий из 51 остатка аминокислот (П. Зибер), рибонуклеиновые кислоты, состоящие из 50 и более нуклеозидов (Г. Корана). [c.12]

Химики издавна применяли перегонку для разделения жидких смесей, очистки и идентификации полученных ими веществ. Выполнение этих задач все более усложнялось по мерё развития химической науки, в особенности органической химии. Возникла необходимость разделения близкокипящих веществ и азеотропных смесей. Все большее значение стало приобретать разделение сжиженных газов, широко применяемое в настоящее время в промышленности. Наряду с этим развитие производства высокомолекулярных продуктов, в частности промышленности витаминов, гормонов и других препаратов, показало недостаточность применявшихся ранее методов вакуумной разгонки и привело к возникновению так называемой молекулярной перегонки. [c.3]

Разновидностью хроматографического метода разделения веществ с помощью колонки, заполненной твердофазным наполнителем, является так называемая гельхроматография, в основу которой положен принцип молекулярного сита. Твердое вещество представляет собой органический полимер, который под действием растворителя набухает. При этом в его структуре появляются поры определенного размера, которые пропускают растворитель или растворенные в нем ионы либо молекулы с небольшим радиусом, но задерживают крупные молекулы, размер которых превышает радиус пор. Этот метод успешно используют для отделения, например, неорганических солей от больших органических молекул, таких, как протеины, гормоны, полисахариды, нуклеиновые кислоты и т. д. [c.416]

Несмотря на то что описываемый метод является эмпирическим, он дает весьма удовлетворительные результаты при препаративном разделении веществ биологического происхождения, напримёр антибиотиков, бактерий, желчи, сывороток крови, препаратов растительного происхождения, клеток, ферментов, гормонов, иммунизирующих агентов, неорганических веществ, соков, белковых гидролизатов, спинномозговой жидкости, экстрактов из биологических тканей, мочи, вирусов. [c.469]

Интерес к ионному обмену резко возрос после создания синтетических ионообменных смол (о которых гбварилось в предыдущем разделе) и ионообменных материалов на основе целлюлозы и декстрана. Последние нашли широкое применение для разделения больших по размеру молекул, таких, как молекулы белков, нуклеиновых кислот, гормонов, вирусов и гермицидов. [c.478]

Основные научные работы посвящены исследованию биополимеров (в частности, пептидно-белковой природы) и биорегуляторов — антибиотиков (хлорамфеникола, пенициллина, стрептомицина, стреп-тотрицина, полимиксина, виридо-мицина и др.), гормонов, синтетических и природных противораковых веществ (сарколизина, акти-ноксантина). Первые работы, направленные на изучение строения и свойств хлорамфеникола, осуществил (с 1949) совместно с М. М. Шемякиным. Совместно с сотрудниками разработал комплексный метод разделения гормонов гипофиза (1950-е) метод выделения и очистки антибиотика полипептидной природы полимиксина (1958— [c.546]

Благодаря работе Санжера были достигнуты большие успехи в установлении структуры ряда других гормонов, в частности адренокортикотропных гормонов (АКТГ) из передней доли гипофиза [100, 102]. Было установлено, что АКТГ имеют 39 аминокислотных остатков в нолипентидной цепи. Для установления последовательности аминокислот двумя группами исследователей были использованы различные протеолитические ферменты в сочетании с частичным кислотным гидролизом или без него. В первом случае после переваривания трипсином и химотрипсином были получены пептидные фрагменты, разделение которых достигалось с помощью электрофореза, противоточного распределения, ионообменной и бумажной хроматографии. Затем проводили определение последовательности аминокислот с помощью фенилизотиоциа-ната и метода динитрофенилирования для К-концевых аминокислот соответствующих пептидов, а также гидролиз карбоксипептидазой аминокислот с С-конца гормона. Таким образом была определена последовательность аминокислот для бычьего кортикотро-пина VI [103] [c.412]

Разработанные в последние годы методы селективного гидролиза, разделения и идентификации открыли новые возможности для химического изучения структуры полипептидов и белков. Как уже указывалось, эти природные продукты включают разнообразный материал антибиотики, гормоны, токсины, ферйенты,. вирусы, волокна и т. д. Хотя за короткий период времени был достигнут большой прогресс в выяснении структуры различных природных продуктов, работа по установлению химической структуры белков в значительной степени осложнена их макромолеку-лярной природой. Изучение последовательности аминокислот в полипептидах и белках показывает наличие в них своеобразных группировок аминокислот. Например, из семи основных аминокислот, имеющихся в АКТГ, четыре расположены по соседству, а все семь включены в последовательность из 14 аминокислот из семи кислых аминокислот, ирисутствуюпщх в этом гормоне, три находятся по соседству друг с другом. В рибонуклеазе три остатка серина и три остатка аланина находятся рядом аналогична располагаются три ароматические аминокислоты в инсулине. Для ряда ферментов — тромбина, трипсина, химотрипсина и фосфоглюкомутазы было отмечено наличие одинаковой последовательности из шести аминокислот. Отмечено, что в структуре-и механизме действия протеолитических ферментов важную роль играют определенные трипептиды [160]. В настоящее время из-за ограниченности наших знаний относительно точного молекулярного механизма действия гормонов и ферментов можно делать только предположения о значении тёх или иных аминокислотных группировок. Вопрос о связи определенной последовательности аминокислот с функциями различных соединений может быть выяснен лишь по мере накопления экспериментального материала. Тем самым, по-видимому, станет возможным значительно более полное понимание механизма действия природных соединений на молекулярном уровне. [c.418]

В работе [38], посвященной анализу стероидных гормонов с помощью высокоэффективной жидкостной хроматографии, авторы исследовали несколько видов носителей для фиксации амберлита ЬА-1 [н-додеканаль(триалкилметил)амин] в качестве неподвижной фазы. Эти же авторы приводят полезные сведения о разделении андрогенов с применением в качестве носителя фторопласта Р1азкоп СТРЕ-2300, представляющего собой трехзвенный полимер, в основном состоящий из трифторэтилена (рис. 28.1). [c.229]