Разделение органических кислот на бумаге

Условия хроматографического разделения органических кислот на анионообменных смолах с использованием в качестве элюента муравьиной кислоты были изучены в работе [54]. Авторы нашли, что степень поперечной сшивки сильноосновной анионообменной смолы дауэкс-1 не влияет на порядок элюирования карбоновых кислот. Молярную концентрацию муравьиной кислоты, необходимую для элюирования 94 кислот из колонки, заполненной дауэксом 1-Х10, определяли по методу Дэвиса и сотр. [55]. Условия элюирования зависели от рК разделяемых кислот. Важна также и растворимость кислот в муравьиной кислоте, потому что она влияет на образование хвостов хроматографических зон. При выборе соответствующего градиента концентрации муравьиной кислоты было достигнуто полное или частичное отделение некоторых кислот (яблочной от мезовинной, янтарной от адипиновой и винной от хинолиновой кислоты), при этом было подавлено образование хвостов . Элюат собирали по фракциям, состав которых анализировали с помощью хроматографии на бумаге после предварительного удаления муравьиной кислоты путем выпаривания досуха в вакууме над силикагелем. [c.177]

В специальных случаях для обнаружения и измерения пятен как на бумаге, так и в колонках применяются другие физические методы, Так, например, для наблюдения за разделением органических кислот использовался метод осциллометрии [2, 20]. [c.258]

РАЗДЕЛЕНИЕ СМЕСИ ОРГАНИЧЕСКИХ КИСЛОТ С ПОМОЩЬЮ ХРОМАТОГРАФИИ НА БУМАГЕ (БЕЗ КОЛИЧЕСТВЕННОГО ОПРЕДЕЛЕНИЯ) [c.451]

Бумага. Для разделения органических кислот методом бумажной хроматографии в качестве носителя используют различные сорта хроматографической бумаги № 2, 3, 4. Предварительно бумагу отмывают 1%-ным раствором щавелевой кислоты, а затем промывают водой и высушивают. Такая обработка бумаги исключает появление теней при хроматографировании кислот. Удовлетворительные результаты получают при разделении не менее 50—100 мкг каждой кислоты. [c.153]

Для разделения органических кислот и оснований применяют те же растворители, что и для гидрофильных веществ, но содержащие добавки сильных кислот или оснований. Для них также применяют ионообменную бумагу, содержащую гидрозоль алюминия или ионообменные смолы. [c.624]

Положение органических кислот на хроматограмме можно определить следующим образом. Сухие полоски бумаги после разделения органических кислот опрыскивают рН-индикато-ром (бромфенол-голубым или бромкрезол-зеленым). [c.164]

В методе обращенных фаз неподвижным растворителем является неполярное органическое вещество, а подвижным — полярное органическое соединение. В качестве носителя применяют бумагу, предварительно гидрофобизированную путем ацетилирования. Разделение жирных кислот проводят восходящим способом с использованием метода [c.304]

В данном руководстве приводятся методики разделения и количественного определения органических кислот на бумаге, предложенные А. Е. Петровым-Спиридоновым, Р. Я- Школьником и [c.152]

В последнее время для разделения смесей аминокислот широко используют метод электрофореза на бумаге, при котором на полосы фильтровальной бумаги наносят смесь аминокислот, бумагу смачивают буферным раствором с определенным значением pH и пропускают через нее электрический ток. Через несколько часов вследствие различия ИЭТ аминокислот и, следовательно, разных скоростей и направлений их движения в электрическом поле смесь аминокислот разделяется на бумаге на индивидуальные аминокислоты, количество которых может быть определено тем или иным методом. В настоящее время электрофорез используется для разделения не только аминокислот, но и белков, нуклеиновых кислот, органических кислот и ряда других соединений. Благодаря тому что аминокислоты являются амфотерными электролитами, они могут давать соли одновременно как с кислотами, так и с основаниями [c.188]

Метод хроматографии на бумаге основан на разделении веществ между двумя фазами, одной из которых — неподвижной — является бумага, на которой задерживается большая часть водной фазы вторую — подвижную фазу — представляет собой протекающий органический растворитель. Условия эти более благоприятны для разделения органических веществ, чем для неорганических, ионный характер которых мешает переходу их из водной фазы в органический растворитель. Несмотря на это, хроматография на бумаге неорганических веществ получила большое развитие, так как было найдено, что можно подобрать способ, при котором ионный характер веществ маскируется образованием ониевых солей с сильными минеральными кислотами или образованием комплексов с различными органическими реактивами. [c.256]

Специфические методы количественного определения имеются не для всех органических кислот, причем эти методы часто довольно трудоемки и сложны. Одновременно в растениях может быть 5—6 и более органических кислот и их разделение обычными химическими методами требует большой затраты времени. Более быстрыми являются методы, основанные на применении ионообменных смол и хроматографии на бумаге. [c.125]

На первых этапах работы, не имея возможности идентифицировать отдельные химические соединения, мы ограничивались лишь разделением всей массы органического вещества на шесть фракций. Впоследствии нам удалось уточнить химический состав отдельных фракций и выделить из них некоторые чистые компоненты. Для этого были использованы метод очистки некоторых фракций на ионообменных смолах и методы хроматографирования сахаров и органических кислот на бумаге. [c.47]

Фильтровальная бумага применяется для разделения нейтральных суспензий при температуре до 100 °С. При комнатной температуре она выдерживает действие щелочей с концентрацией до 10% (масс.) и разбавленных растворов минеральных кислот. Бумажные фильтры устойчивы по отношению к органическим растворителям. О плотности фильтровальной бумаги можно судить по цвету ленты на [c.98]

Распределительная хроматография в начале своего развития довольно щироко применялась в анализе органических веществ, как очень тонкий и эффективный метод. Было произведено разделение близких по свойствам органических кислот, дубильных веществ, аминокислот, пенициллинов и т. д. Подтверждением универсальности метода распределительной хроматографии является полная пригодность и исключительная эффективность этого метода при разделении неорганических веществ с очень близкими химическими свойствами. Например, для разделения редкоземельных элементов, которые имеют незначительные различия в свойствах, требуется провести не мене 40 ООО операций (для выделения их в чистом виде). До появления многоступенчатого метода анализа лишь несколько редкоземельных элементов были получены в чистом виде с содержанием 95%- В настоящее время разработаны надежные методы идентификации редкоземельных элементов хроматографией на бумаге и получение их в чистом виде на колонках. [c.105]

Для хроматографического разделения гидрофобных веществ бумагу импрегнируют различными гидрофобными веществами нафталином, парафином, раствором каучука и т. д. Такая гидрофобная бумага служит носителем для неполярных растворителей в качестве неподвижной фазы. В качестве подвижной фазы применяют в этом случае смеси кислот с низшими спиртами. Такой вариант распределительной хроматографии позволяет разделять малые количества сложных смесей веществ, как органических, так и неорганических, и называется методом обращенных фаз. [c.107]

Через несколько часов, когда можно ожидать разделения аминокислот, бумагу вынимают из ванночки и растворитель удаляют высуи иванием. После этого для лучшего разделения аминокислот лист бумаги поворачивают на 90° и снова помещают в ванночку и по бумаге пропускают другой растворитель. После вторичного пропускания растворителя бумагу обрабатывают каким-либо реактивом, дающим окрашивание при взаимодействии с аминокислотами, чаще всего нингидрином или изатином. На бумаге появляются окрашенные пятна, соответствующие отдельным аминокислотам. По месту положения пятен и интенсивности их окраски судят о наличии и содержании в гидролизате белка тех или иных аминокислот. Фотография хроматограммы показана на рисунке 21. Метод распределительной хроматографии на бумаге позволяет быстро и точно определить содержание аминокислот. В последние годы хроматографические методы успешно применяются для разделения и определения сахаров, органических кислот и ряда других соединений. [c.218]

Фосфорнокислые эфиры обнаруживают на бумаге следующим способом. Сначала их гидролизуют смесью хлорной и соляной кислот в присутствии молибдата, после чего восстанавливают фосфорномолибденовую кислоту и обнаруживают молибден сероводородом. Разделение органических фосфорнокислых, эфи- ж ров при помощи хроматографии на бумаге описано в литературе [c.904]

Выбор системы растворителей и некоторые осложнения при хроматографировании кислот были рассмотрены в введении. В отличие от низших жирных кислот для этой группы в основном применимы кислые системы растворителей, содержащие, в частности, муравьиную, уксусную и пропионовую кислоты. Последние после разделения анализируемых кислот должны быть удалены с бумаги. Вас применил сернистую кислоту, отличающуюся от вышеназванных кислот более высокой константой диссоциации и быстрее улетучивающуюся с бумаги. В этих системах органические кислоты, за исключением щавелевой кислоты, образуют на хроматограмме пятна круглой формы. Щавелевая кислота, как более сильная по сравнению с кислотами растворителя, дает пятна продолговатой формы, что, однако, не влияет на разделение, так как из этой группы кислот щавелевая имеет наинизшую величину Е/. Определенные трудности, связанные с удалением с хроматограмм кислот, содержащихся в растворителях, принудили Шефтель и сотрудников [1—3] изыскать системы растворителей, содержащие легко летучие компоненты, ускоряющие улетучивание с бумаги ранее названных кислот. К таким компонентам относятся метилбензоат, эвкалиптол и др. Эти вещества испаряются с хроматограммы вместе с летучими кислотами при высушивании на воздухе в течение нескольких часов. В таких системах подлежащие разделению кислоты слабо растворимы для повышения их растворимости добавляют низшие спирты. [c.244]

Кетокислоты в растительных продуктах можно определить методом распределительной хроматографии на бумаге, разработанным И. А. Егоровым и М. Б. Борисовой для анализа кетокислот в вине. В основу этого метода положена реакция образования гидразонов кислот при взаимодействии их с фенилгидразином. Гидразоны разделяют с помощью бумажной двухмерной хроматографии. Количество гидразона каждой отдельно выделенной кетокислоты, в том числе и пировиноградной, определяется после элюирования пятен в фотоэлектроколориметре по цветной реакции гидразона с NaOH. Р. Я- Школьник (1954) разработал метод количественного разделения органических кислот с помощью распределительной хроматографии иа силикагеле. Этот метод применяют для разделения кислот, находящихся в растительных тканях. Разделение кислот ведут на хроматографической колонке. Элюируемые кислоты титруют 0,01 н. спиртовым раствором NaOH. [c.215]

Таким путем удается добиться и разделения сахаров. Хроматография на бумаге была применена для качественного анализа редуцирующих сахаров в таких разнообразных материалах,. как яблочный сок, яичный белок и кровь [49, 216]. Для локализации положения отдельных сахаров на бумаге был применен аммиачный раствор окиси серебра, хотя в более поздней работе указывается, что флуоресценция, появляющаяся после конденсации редуцирующего сахара с ж-фенилендиамином, дает более надежные результаты. Как силикагель, так и фильтровальная бумага были применены для хроматографического разделения органических кислот, выделенных из фруктов [99, 139]. На этом же принципе основано определение молочной кислоты в молоке и янтарной — в яичных продуктах [60]. Особый интерес для биохимика представляет применение хроматографии на бумаге для разделения пуринов, пиримидинов и нуклеозидов из гидролизата нуклеиновой кислоты [134]. Удалось улучшить метод определения витамина В в рыбьих жирах и продуктах облучения эргостерина, основанный на измерении характерной абсорбции в ультрафиолетовом свете или интенсивности окраски производных с треххлористой сурьмой точность определения была значительно повышена после хроматографического удаления примесей, мешающих определению [79, 95]. [c.164]

Относительная влажность может существенно влиять и на процессы жидко-жидкостного распределения, если вода является неподвижной фазой. Однако предсказать характер изменения Ш трудно. Обычно разделение неорганических ионов на силикагеле [88] при использовании в качестве растворителей водных растворов органических кислот или смеси ацетона и 1н НСЮ4 (95 5) сопровождается снижением значений Кг при увеличении влажности. Влага, содержащаяся в воздухе, влияет также на результаты хроматографического разделения на бумаге (см., например, рис. 43 в публикации [4]). [c.349]

Купферон 2 6H6N(NO)ONH4, аммонийная соль нитрозофенилгидроксиламина, является весьма ценным реактивом в химическом ана 1изе. Осаждением купфероном в сильнокислых растворах можно, осуществить. полное отделение железа, ванадия, циркония, титана, олова, ниобия и тантала от алюминия, бериллия, фосфора, бора, марганца, никеля и урана (VI). Соединения, образуемые купфероном, являются солями,, в которых аммоний замещен на металл. Осаждение проводится в охлажденных льдом растворах, содержащих свободную минеральную или органическую кислоту. Применяется холодный 6%-ный раствор купферона, который вводят в анализируемый раствор медленно при перемешивании до тех пор, пока избыток его не будет отмечен по появлению быстро исчезающего тонкого белого осадка, отличного от хлопьевидного нерастворимого соединения купферона с металлами. Осаждение обычно происходит сейчас же по добавлении реактива. Если осадок надо будет прокалить и взвесить, то фильтровать лучше при осторожном отсасывании через бумажный фильтр, вложенный в конус. Если же предполагается провести только разделение элементов и для дальнейшей работы нужен будет фильтрат, то лучше всего перед осаждением вводить мацерированную бумагу и фильтровать через бюхнеровскую воронку. [c.143]

В литературе описано много работ по разделению и количественному определению органических кислот на бумаге методом распределительной хроматографии основным из них является метод Лугга и Овертолла и его модификации [c.152]

Для разделения лантаноидов возможно применение бумажной хроматографии и электрофореза на бумаге. Электрофорез ведется из растворов органических кислот. Подвижность ионов лантаноидов падает с ростом порядкового номера элемента и ростом концентрации кислоты. Быстрое разделение достигается при применении этилендиаминтетрауксусной и нитрилуксусной кислот. Методом непрерывного электрофореза в растворах 0,7 М винной и а-оксиизомасляной кислот при pH = 2,2 можно отделить малые количества прометия от больших количеств других редкоземельных элементов. [c.287]

Белки в пробе можно коагулировать, например нагреванием. Липиды, воски, парафины и другие липофильные соединения удается отделить от гидрофильных компонентов методом экстракционного разделения между фазами петролейного эфира и водных спиртов (например, 60- и 95%-ного метанола в зависимости от природы веществ) в одной делительной воронке или в нескольких, применяя метод противоточного распределения. Различные виды аминокислот (основные, кислые и нейтральные) можно предварительно разделить посредством электрофореза на бумаге или в геле. Для отделения различных органических кислот и ряда соединений типа фенолов от сахароподобных веществ пригодны даже такие старые методы, как осаждение ацетатом свинца, основным ацетатом свинца и т. п. Некоторые группы алкалоидов можно высадить из экстрактов с помощью специфических реагентов, а затем выделить их. В тех случаях, когда представляют интерес органические вещества средней полярности, можно иногда очистить пробу непосредственно на бумаге, на которой должен проводиться хроматографический анализ. Неочищенную пробу хроматографируют сначала чистым петролейным эфиром (иногда несколько раз), липиды при этом перемещаются вместе с фронтом растворителя. Далее хроматограмму сущат, после этого можно хроматографировать пробу еще раз чистой водой, если целевое вещество полностью нерастворимо в ней. Вода вымывает из пробы соли, сахара, аминокислоты и т. д., которые перемещаются вместе с фронтом элюента или вблизи него. В заключение пробу хроматографируют специально подобранным элюентом, следя при этом, чтобы фронт растворителя не продвинулся на такое же расстояние, как при предыдущих операциях по очистке. [c.88]

Целлюлоза, как и полиамиды, относится к числу наиболее часто применяемых органических сорбентов, особенно в распределительной хроматографии. В ТСХ используют два типа целлюлозы — природную волокнистую и микрокристаллическую. Длина волокон природной целлюлозы составляет от 2 до 25 мкм, а средняя степень полимеризации колеблется между 400 и 500. Частицы микрокристаллической целлюлозы крупнее—от 20 до 40 мкм, а средняя степень полимеризации ниже—между 40 и 200. Благодаря применению очень коротких волокон целлюлозы в форме порошка в ТСХ не получается такое быстрое растекание хроматографируемых веществ вдоль волокон, которое имеет место на целлюлозе, иопользуемой в в>и-де хроматографической бумаги, и поэтому при одних и тех же концентрациях ТСХ дает более четкие пятна и позволяет получить лучшее разделение, чем БХ. Микрокристаллическая целлюлоза химически чище, чем природная целлюлоза, хотя некоторые марки последней, например MN 300 HR, вполне сравнимы по чистоте с микрокристаллической целлюлозой. На чистой щеллюлозе проводят главным образом количественный анализ или разделение фосфорных кислот, фосфатов и т. п. Большинство марок товарной целлюлозы выпускают без связующего, поскольку адгезионные свойства ее слоев намного выше, чем у неорганических сорбентов. В некоторые марки этого адсорбента добавляют флуоресцентный индикатор. Добавка гипса может даже оказать отрицательное влияние, как, например, при разделении аминокислот, но иногда может и улучшить разделение. [c.104]

В настоящее время изучено очень много различных растворителей, пригодных для разделения омесей аминокислот, сахаров, органических кислот и других веществ хроматографией на бумаге, составлены таблицы значений Яр этих веществ в различных ра1Створителях, и для разделения смеси тех или иных веществ очень легко подобрать соответствующий растворитель. Но необходимо помнить, что отдельные аминокислоты, например, можно определять при различии их значений Яр не менее чем на 0,05, а сахара —на 0,1—0,2. [c.30]

В одну из точек на бумагу наносят исследуемый pa t вор. Для хорошего разделения необходимо, чтобы количество каждой из органических кислот, нанесенных на бумагу, составляло 0,05— 0,10 мг. Если для хроматографического разделения используют 4—6%-ный раствор кислот, полученный из осадка бариевых солей, то обычно бывает необход имо внести в одну точку 0,005 мл раствора. [c.129]

Описан микроколориметрический метод определения пальмитиновой и олеиновой кислот. После разделения жирных кислот хроматографией на пропитанной парафином бумаге ватман № 3 хроматограммы проявляют уксуснокислой медью из вырезанных пятен извлекают медь четырехкратным нагреванием с 5 мл 0,06 н. H2SO4 при 60—80° элюаты соединяют и добавляют 0,06 н. H2SO4 до 20 мл 4 мл элюата смешивают с 4 мл 1 % раствора дитизона в четыреххлористом углероде, центрифугируют и органический слой фотоколориметрируют при 625 ммк. Калибровочная кривая строится по шкале стандартных растворов сернокислой меди в серной кислоте, содержащих в 4 мл 1, 2, 3, 4 мкг меди. По величине экстинкции находят количество меди, а по количеству меди вычисляют содержание пальмитиновой и олеиновой кислот в микрограммах. Точность определения 5%- Метод применим для определения жирных кислот в биологических жидкостях. [c.34]

АВ-17 в ОИ -форме. На анионите задерживались все кислоты. После промывания колонки водой кислоты вытесняли 0,1 п. щелочью. Щелочной раствор солей органических кислот подавали на третью колонку с катионитом КУ-2 в Н+-форме. На этой колонке происходило превращение солей в свободные кислоты, которые вытекали пз колонки. Раствор кислот упаривали досуха, и остаток растворяли в спирте. Спиртовые растворы кислот хранили до хроматографического анализа. Для разделения кислот применяли растворитель бутанол—уксусная кислота—вода. После разделения кпслот бумагу вынимали из камеры и просу-пп1вали в течение 24 час. до полного удаления следов уксусной кпслоты. Высушенную бумагу опрыскивали индикатором бром-крезолзеленым. Кислоты выступали в виде желтых пятен на зеленом фоне. В качестве свидетелей применяли яблочную, лимонную, янтарную II щавелевую кислоты. Для сравнительно-количественных определений сравнивали площадь пятен, измеренную планиметром. [c.213]

Мак-Рае и Мак-Кинли [283] предложили методику детектирования органических фосфорсодержащих инсектицидов, основанную на методике, разработанной Уэйдом и Моргано.м [284] для эфиров фосфорной кислоты. Инсектициды разделяли на бумаге Ватман № 1, пропитанной минеральным маслом [в % (масс.)] элюентом метанол — вода — 0,5%-ная аммиачная вода (19 1 1). Другим возможным вариантом являлось разделение на ацетилированной бумаге, пропитанной минеральным маслок (2%) и 70%-ньш водным ацетоном. Хроматограммы опрыскивали 0,1 %-ным раствором РеСЬ-бНгО в 80%-ном этаноле с последующим опрыскиванием 1 %-ным раствором салицилсульфокислоты в 80%-ном этаноле. Определение было основано на связывании ионов трехвалентного железа эфирами фосфорной кислоты. Свободные ионы железа реагируют с салицилсульфокислотой и окрашивают фон. Хроматограммы на бумаге Ватман № 1 выдерживали в парах брома для окисления эфиров тиофосфорной кислоты. При детектировании эфиров фосфорной кислоты стадию бромирования можно опустить. Необходимое окрашивание можно получить, только если остаточная влага в бумаге имеет рН=1,5-ь2,5. [c.330]

Мюллер и др. [4] разработали методику разделения на бумаге и идентификации органических кислот в пробах речной воды. Образцы отбирали в емкость, содержавшую несколько гранул NaOH. После фильтрации пробу объемом 3—4 л концентрировали упариванием до объема г 30 мл и подкисляли неорганической кислотой. Органические кислоты экстрагировали эфиром в течение 15 ч. После экстракции кислоты нейтрализовали разбавленным NaOH. Полученный раствор нагревали на водяной бане для удаления эфира и упаривали водный раствор до объема 1 мл. Пробу экстракта подкисляли и пропускали через колонку с силикагелем [c.444]

Бумага адсорбирует разделяемые ионы, вследствие чего хроматограммы часто получаются нечеткие, с размытыми краями зон. Для подавления сорбции определяемых ионов к органическому растворителю, например к бутиловому спирту, прибавляют соляную кислоту. Тогда бумага насыщается сильно сорбирующимся ионом водорода и сорбция разделяемых катионов резко снижается, а их разделение происходит только вследствие различий в коэффициентах распределения между подвижной и неподвижной фазами. Оптимальное соотношеиие соляной кислоты и органического растворителя можно выбрать, хроматографируя стандартные растворы известного состава. Для последующей работы с исследуемыми растворами неизвестного состава выбирают тот растворитель, с которым получены наиболее четкие результаты. [c.337]