Флуоресценции тушения метод

Некоторые неорганические ионы трудно или невозможно превратить во флуоресцирующее соединение. В таких случаях следует прибегать к косвенным методам. Существует два типа таких методов. В косвенных методах первого типа ион может реагировать с флуоресцирующим соединением, образуя нефлуоресцирующие продукты тогда мерой концентрации реагирующего иона служит уменьшение интенсивности флуоресценции. Такие методы относят иногда к методам тушения , [c.473]

Усиление флуоресценции Поляризация флуоресценции Спектральные методы Тушение биолюминесценции [c.43]

Концентрационное тушение обусловливает верхний предел диапазона определяемых концентраций приблизительно Ю " М. Высокая интенсивность флуоресценции объясняет низкий предел обнаружения метода, составляющий 10 %. [c.97]

Успешно применяются люминесцентные измерения при изучении быстрых реакций электронно-возбужденных молекул. В результате протекания таких реакций интенсивность флуоресценции (люминесценции) исходного соединения уменьшается, происходит тушение флуоресценции. Эти реакции тушения конкурируют с дезактивацией возбужденных молекул по другим механизмам. Так как время затухания флуоресценции порядка 10- с, то флуоресцентные методы обычно применяют для изучения кинетики быстрых реакций возбужденных молекул, протекающих за время 10 °— 10- с. [c.49]

Метод импульсного фотолиза может быть использован для изучения флуоресценции (интенсивности, тушения флуоресценции). При помощи импульсного фотолиза очень удобно исследовать замедленную флуоресценцию. Для изучения флуоресценции в установке импульсного фотолиза в самом простом варианте исключается зондирующий свет. Если для измерения флуоресценции использовать дополнительную отражающую полупрозрачную пластинку, расположенную на пути зондирующего луча, то в одном эксперименте одновременно можно измерять оптическую плотность короткоживущих продуктов, например триплет — триплетного поглощения, и интенсивность флуоресценции. [c.169]

Тушение флуоресценции тяжелыми атомами приводит к образованию молекул в триплетном состоянии. На этом основан метод определения квантового выхода триплет — триплетного поглощения Фг. В присутствии соединений с тяжелыми атомами в системе могут протекать следующие процессы [c.164]

НИИ зависимости кинетики интенсивности излучения (или квантового выхода) от концентрации излучающих и тушащих частиц. В этом разделе мы сначала ознакомимся с применением стационарных методов исследования тушения флуоресценции (или фосфоресценции), а затем дадим определение излучательного времени жизни люминесцирующего уровня, существенного при нестационарных условиях. [c.85]

На предел обнаружения натрия влияют дробовой и фликкер-шумы пламени и рассеяние света лазера с непрерывным спектром. В этом методе предел обнаружения приближается к пределу обнаружения в атомно-эмиссионном методе. Для резонансной флуоресценции отношение сигнал/шум не возрастает при повышении мощности лазера до 1 кВт. Для нерезонансной флуоресценции высокая мощность приводит к снижению тушения флуоресценции. [c.134]

После электрофореза бумагу следует тщательно высушить в сушильном шкафу при 100°С. Даже небольшое количество влаги или пиридина может вызвать сильное тушение флуоресценции, что заметно снизит чувствительность метода. Рекомендуется также установить за ультрафиолетовой лампой фен и обдувать теплым воздухом бумагу в ходе определения. [c.277]

Среди известных люминофоров — фталевый альдегид, 1 -диметиламино-5 нафталинсульфохлорид (дансилхлорид), фенилизотиоцианат. Метод отличается высокой селективностью, а его чувствительность на 2-3 порядка превышает возможности УФ-детектирования. Часть капилляра облучается УФ-светом соответствующей длины волны, а испускаемый свет регистрируется перпендикулярно направлению входящего излучения. Простые модификации приборов обеспечивают фиксированные длины волн возбуждения и регистрации флуоресценции, те, что сложнее, позволяют варьировать длину волны возбуждения [122]. Более дорогие приборы с этим видом детектирования имеют монохроматоры как для возбуждающего, так и для флуоресцентного света, благодаря чему детектирование становится высоко специфичным. Необходимо обращать внимание на явление тушения флуоресценции и предотвращать его возникновение (если детектирование не проводят по косвенному варианту, в основе которого лежит тушение люминесценции ведущего электролита) [130]. Флуоресцентное детектирование требует применения импульсных источников света, в качестве которых использу- [c.352]

При использовании метода добавок определение проводят также по измерениям относительной интенсивности. При этом исследуемый образец сравнивают не с растворами чистого соединения, а с исследуемым образцом, в который введены добавки 3,4-бензпирена. Этим обеспечивается одинаковый состав примесей в стандартах и изучаемом образце, что приводит к компенсации эффектов реабсорбции и возможного тушения флуоресценции посторонними примесями. [c.291]

Этого недостатка лишены в значительной степени методы, основанные на измерении флуоресценции комплексов в растворах. При этом не должны образовываться смешанные комплексы, содержащие в молекуле несколько атомов р. 3. э., в которых гашение возможно вследствие дезактивации триплетного состояния ионом р. 3. э. с многочисленными часто расположенными уровнями. Кроме того, в растворах остается также некоторое тушение вследствие поглощения света посторонними ионами (внутреннее экранирование). [c.101]

Флуоресценцию хлорофилла сильно тушат кислород, хиноны и различные другие вещества. Механизм точно не известен. Константы скорости тушения близки к 10 л-моль -сек и находятся в соответствии с величинами, рассчитанными для процессов, лимитируемых диффузией. Они приблизительно в 10 раз больше, чем константы скорости тушения триплетного состояния, установленные методом флеш-фотолиза (стр. 126). Аналогичное различие наблюдается для антрацена и большее — для тионина (см. ниже). Эти результаты интересны для изучения фотосинтеза. [c.164]

Ранее было замечено (стр. 121), что фосфоресценция, обусловленная триплет-синглетными переходами, обычно не наблюдается в жидких растворах, так как триплетное состояние имеет сравнительно большое естественное радиационное время жизни, и дезактивация в результате столкновений происходит чаш е, чем эмиссия. Оказалось возможным, однако, наблюдать фосфоресценцию эозина в глицерине или этаноле и измерить отношение ее интенсивности к интенсивности флуоресценции [44]. Это было сделано при помощи спектрофлуориметра и двух вращающихся секторов, один из которых служил для прерывания пучка возбуждающего света, другой — для прерывания пучка излученного света. Когда оба прерывателя находятся в одинаковой фазе, измеренная интенсивность обусловлена фосфоресценцией плюс флуоресценцией если они в разных фазах — то только фосфоресценцией. Это очень перспективный метод для определения скоростей перехода между триплетным и синглетным состояниями. По сравнению с флеш-методом он имеет то преимущество, что для облучения можно использовать монохроматический свет с различной частотой, кроме того, можно точно измерить квантовые выходы наконец, стационарная концентрация молекул в триплетном состоянии мала, и поэтому можно пренебречь триплет-триплетным тушением. С другой стороны, если естественное время жизни велико или тз шение сильно, эмиссия будет очень слабой [c.165]

Оказалось, что там, где была проведена проверка, эти предсказания выполнялись по крайней мере качественно, например в исследованиях тушения флуоресценции антрацена (стр. 162), рекомбинации атомов иода фотохимическим и флеш-методами (стр. 146,117) и времени жизни триплетных состояний (стр. 121) . [c.280]

Здесь — константа скорости тушения флуоресценции, обратно пропорциональная среднему времени жизни возбужденных молекул г. Это время можно определить различными методами, рассмотрение которых не входит в нашу задачу. Характерные значения т приведены в табл. 5.2. Постулируется, что возбужденные молекулы могут терять энергию также и в безызлучательных переходах при двойных столкновениях с молекулами этого же типа или с молекулами других типов [c.108]

Адсорбционные индикаторы представляют собой специальный тип индикаторов для титрования методом осаждения. Это — органические вещества, ионы которых адсорбируются на осадке в зависимости от заряда на поверхности его решетки. Адсорбированный индикатор поляризуется в результате взаимодействия поверхностного заряда осадка и электронной системы индикатора. Возникающее при этом смещение электронных энергетических уровней в большей или меньшей степени изменяет спектр поглощения индикатора или может приводить к тушению флуоресценции. Установлено, что некоторые индикаторы образуют соединения с ионами осадка. Действие большинства адсорбционных индикаторов зависит только от поляризационных эффектов, возникающих после соосаждения (адсорбции). Известно, однако, небольшое число окислительно-восстановительных и комплексонометрических индикаторов, которые изменяют окраску в результате адсорбции одного из своих собственных ионов на осадке, так как локальная концентрация этого иона на поверхности осадка оказывается значительно большей, чем в растворе, и, таким образом, изменение окислительно-восстановительного потенциала или значения рМ, как это может иметь место в данном случае, будет достаточным для начала реакции индикатора. [c.341]

Эффект тушения флуоресценции примесными компонентами в некоторых случаях может быть скомпенсирован с помощью метода стандартной добавки, при этом калибровочная кривая строится таким образом, что к раствору добавляются известные количества определяемого компонента. Этим способом можно измерить тушащее действие посторонних веществ (то есть матрицы) и затем вносить необходимые поправки. [c.379]

Первый член уравнения (252) соответствует стационарному решению уравнения диффузии [т. е. оно равноценно уравнению (80)]. Второй, или переходный, член имеет малое значение для жидких растворов при комнатной температуре. Дюбуа и Ван Хе-мерт [200] измерили кд%о для нафталина, бензола и 12 алкилбензолов при тушении диацетилом, а затем вычислили то из обычного уравнения диффузии, и из уравнения (252), т. е. включая переходный член. Уравнение (252) дало несколько меньшие значения, согласующиеся со значениями то, полученными на фазовом флуорометре Ивановой и сотр. [201]. Поэтому, используя диацетил и принимая, что тушение лимитируется диффузией, из констант Штерна — Фольмера можно определить время жизни флуоресценции. Этот метод в аппаратурном отношении проще, чем измерения с помощью фазового и импульсного флуоромет-ров . [c.256]

Измерение абсолютных концентраций при помощи метода резонансной флуоресценции тр( бует знания вероятности возбуждения изучаемых частиц, тушения их флуоресценции и радиационного времени жизни т. Измерение интенсивности резонансной флюоресценции нри известном т позволяет определить концентрацию возбужденных частиц, которая всегда значительно меньше концентра 1,ин мевозбужденных частиц. Нахождение же числа последних, представляюп1 пх основной интерес с точки зрения кинетики и механизма изучаемой реакции, требует донолиительпых исследований. В самом общем случае между концентрацией возбужденных п и невозбужденных п молекул данного вещества существует соотношение [c.25]

Внеш. магн. поле влияет на выход продуктов р-ции, скорость элементарных процессов взаимод. парамагнитных частиц (рекомбинации радикалов, аннигиляции триплетно-возбужденных молекул, тушения триплетных молекул радикалами и т.п.), интенсивность флуоресценции и хеми-люминесценции, темновую и фотопроводимость мол. кристаллов и орг. полупроводников. Магн. изотопный эффект сопровождается разделением магн. и немагн. изотопов (напр., С и С, о и О). Хим. поляризация электронов и ядер проявляется в спектрах ЭПР и ЯМР продуктов р-ций (радикалов и молекул), при этом положит, поляризация приводит к аномально сильным линиям поглощения, а отрицательная-к линиям эмиссии. В последнем случае создается инверсная населенность зеемановских уровней электронов или ядер (см. Зеемана эффект. Лазер). Когда химически индуцированная отрицат. поляризация ядер достигает значит, величины, превосходящей порог генерации, происходит самовозбуждение радиочастотного излучения и хим. система становится мол. квантовым генератором-хим. радиочастотным мазером. Внеш. высокочастотное резонансное поле стимулирует изменение спина и, следовательно, выхода продукта р-ции или интенсивности люминесценции. Это позволяет регистрировать спектры ЭПР короткоживущих пар парамагнитных частиц по изменению выхода электронов, дырок, возбужденных молекул. На этом принципе основан новый метод магн. резонанса-двойной магн. резонанс (ДМР). [c.624]

Тушение флуоресценции щелочных растворов 2,3-нафтотриа-зола [1629] позволяет определить 0,025—0,1 мкг1мл серебра. Максимумы возбуждения и флуоресценции находятся при 362 и 406 нм соответственно. Определению не мешает присутствие <1 мкг мл хлорид-, иодид- и бромид-ионов. Возможно также определение 0,1—2 мкг мл серебра методом флуориметрического титрования. [c.117]

Основные помехи в методе АФА. Основными помехами в методе АФА являются неселективно рассеянное излучение возбуждающего источника света и тушение флуоресценции при столкновениях возбужденного атома с окружающими его атомами и молекулами. Оба процесса происходят в атомизаторе. Неселективно рассеянное излучение, проникая вместе с полезным сигналом в систему спектральной фильтрации, завышает его величину. Наиболее сильно влияние рассеянного излучения проявляется в случае наблюдения резонансной флуоресцещии. Для учета рассеянного излучения применяются устройства, аналогичные зеемановскому корректору фона в атомно-абсорбционном методе, и различные способы временной селекции полезного сигнала и фона. Влияние рассеянного излучения резко снижается в случае наблюдения смещенных линий флуоресценции. Однако этот способ не всегда может бьггь реализован в силу специфики строения энергетических уровней атомов. [c.854]

Для определения анионов часто используют косвенный флуоримет-рический метод, основанный на тушении люминесценции. Примером такого метода может служить определение иодид-ионов по тушению флуоресценции флуоресцеина (IV). [c.514]

АТОМНО-ФЛУОРЕСЦЕНТНЫИ АНАЛИЗ (атомно-флуоресцентная спектрометрия), метод количеств, элементного анализа по атомным спектрам флуоресценции (см. Люминесценция). Для получения спектров атомный пар пробы облучают излучением, частота к-рого совпадает с частотой флуоресценция определяемых атомов (резонансная флуоресценция). Р-ры исследуемых в-в атомизируют чаще всего в пламенах, реже — в электротермич. атомизаторах, нагреваемых током графитовых тиглях и печах порошки — в тиглях и капсулах, помещенных в пламя. Хим. состав пламен и защитную атмосферу тиглей подбирают так, чтобы тушение флуоресценции было минимальным. Источниками возбуждения служат интенсивные импульсные лампы с полым катодом, лазеры и др. Спектр флуоресценции регистрируют с помощью простых светосильных спектрофотометров. Интенсивность линий флуоресценции — мера конц. элементов в пробе. Для градуировки прибора примен. стандартные образцы известного хим. состава, соответствующего составу пробы. Осн. достоинства метода большая селективность, низкие пределы обнаружения (в р-рах — 10- нг/мл, в порошюх — до 10- —10- % для таких летучих элементов, как d и Ag), большой интервал конц., в к-ром градуировочный график прямолинеен (обычно 1—2 порядка величины концентрации, а с применением лазеров — до 5), простота автоматизации. А.-ф. а, использ. для определения приблизительно 50 элементов в сплавах, горных породах, лунном грунте, растениях, почвах, водах, нефтях, пищ. продуктах и т. д. [c.59]

В 30-е годы появилось несколько работ по тушению флуоресценции и по фотостационарному состоянию. Использование этих явлений позволяло измерять очень большие скорости. Имелось также несколько исследований скорости реакций при низких температурах. Этим к 1939 г. ограничивались специальные методы, разработанные для быстрых реакций в растворе. Однако к 1954 г., когда Фарадеевское общество провело дискуссию по исследованию быстрых реакций, уже существовал целый ряд методов . Часть из них явилась развитием струевых методов. [c.11]

Флуоресцентные методы применяют для изучения быстрых реакций с участием фотохимически возбужденных молекул, обычно при этом добавляют вещества, которые уменьшают интенсивность флуоресценции. Эта реакция тушения конкурирует с дезактивацией, протекающей по другим механизмам и происходящей даже в отсутствие реакции (например, передача энергии растворителю). В результате устанавливается стационарное состояние, зависящее от относительных скоростей этих процессов за результирующей интенсивностью флуоресценции можно наблюдать без быстро регистрирующей аппаратуры. Из соотношения между интенсивностью и концентрацией реагента можно определить константу скорости реакции. Метод применим только к возбужденным молекулам и только к очень быстрым реакциям (стр. 160). Флуоресцентные и флеш-методы часто дают взаимодополняющую информацию о данной системе тушение флуоресценции можно использовать для изучения синглетно-возбужденных состояний в системе, триплетные состояния в которой изучают флеш-методом (ср. стр. 162, 164, 165). [c.150]

В случае антрацена тушение флуоресценции сопровождается необратимым окислением до трансаннулярной перекиси, но эти два процесса неносредственно не связаны. Результаты можно описать при помош и кинетической схемы, в которой тушение включает удаление энергии от синглетно-возбуяеденной молекулы, в то время как фотоокисление включает триплетное состояние с энергией ниже энергии синглетного состояния. Это подтверждается флеш-методами (стр. 123). Константы скорости тушения флуоресценции рассмотрены ниже. [c.162]

Флуоресценцию тионина в кислом водном растворе изучали в тесной связи с исследованием его фотовосстановления [43]. Эта связь возникает вследствие того, что синглетно-возбужден-ное состояние Т, которое ответственно за флуоресценцию, может переходить в низшее возбужденное триплетное состояние поведение которого можно изучить флеш-методом. Это одна из форм внутреннего тушения. Таким образом, константа /с (стр. 151) представляет собой сумму двух величин, одна из которых (к ) относится к тушению растворителем, другая ( з) — к реакции Т т. [c.164]

Реакции, лимитируемые диффузией. Скорость ряда других быстрых реакций с переносом протона между атомами кислорода или азота определили методом тушения флуоресценции (стр. 167) или методом ЯМР (стр. 247). Некоторые результаты приведены в табл. 31, где реакции расположены в порядке уменьшения константы равновесия К для сравнения добавлены также данные по реакциям флуоресцирующих молекул с ионами водорода и гидроксила . В конце таблицы указаны некоторые результаты по реакциям большого трехзарядного аниона ВН " (3-ацетиламино-пиреп-5,8,10-трисул ьфонат). [c.270]

Результаты, полученные методом тушения флуоресценции, взяты из работы [12] ср. [13]. Результаты, полученные методом ЯМР, взяты из статей Мейбума, Левенштейна и др. (см. стр. 245). [c.270]

Мощность флуоресцентного и фосфоресцентного излучения, испускаемая пробой, является прямой функцией квантового выхода. Поэтому квантовый выход интересующего процесса люминесценции должен быть постоянным и воспроизводимым, если необходимо разработать успешный флуориметрический или фосфориметрический метод анализа. Когда квантовый выход значительно уменьшается, то говорят, что люминесценция затухает. К сожалению, многие посторонние вещества могут оказывать влияние на квантовый выход и тушить люминесценцию. В частности, тяжелые атомы или парамагнитные частицы сильно влияют на скорость интеркомбинационной конверсии, которая, в свою очередь, изменяет квантовый выход флуоресценции или фосфоресценции, тем самым приводя к погрешности в анализе. В фосфориметрии, конечно, желательно увеличить скорость интеркомбинационной конверсии, в то время как в флуориметрии — уменьшить. Поэтому, для того чтобы предотвратить тушение в большинстве флуориметрических методик, тяжелые атомы и парамагнитные частицы должны быть удалены из раствора пробы. Кислород, будучи парамагнитным, является особенно серьезной помехой, и его также удаляют, пропуская азот через анализируемые растворы. [c.660]

Как мы видели, интенсивность свечеиия пропорциональна концентрации флуоресцирующего вещества только при очень малом его содержании начиная с некоторой критической концентрации порядка 10 г мл, имеет место тушение флуоресценции молекулами самого флуоресцирующего вещества. Поэтому ясно, что поскольку количественные определения флуоресцентным методом сводятся, в конечном счете, к нахождению концентрации но ннтеисивности свечения, необходимо вести соответствующие опыты в чрезвычатпи) разбавленных растворах. Однако, как ясно из вышесказанного, и для целен качественного флуоресцентного ана,пиза концентрации наблюдаемого растпора является далеко пе безразличной. [c.48]

К люминесцентному титрованию примыкают предложенные разными авторами методы, основанные на наблюдении тушения флуоресценции растворов ири прибав-тении к ним определенных количеств реагентов. Следует помнить, что подобного рода количественные методы не могут быть надежными, если не выяснена природа наблюдаемого процесса тушения или если процесс не укладывается в стехиометрическое уравнение соответствующей химической реакции. [c.70]

Предложен хемилюминесцентный метод обнаружения меди при разбавлении 1 100 ООО с помощью люминольной бумаги [14]. Имеется указание, что медь при разбавлении 1 100 ООО в присутствии йодистого калия приводит к тушению флуоресценции а-нафтофлавопа. Тушение обусловливается выделением йода [15, 16]. [c.166]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология