анализ аминокислот гидролизаты

Аминокислотный состав белков. — Анализ гидролизата белков, содержащего до двадцати различных аминокислот (см. табл. 39), является чрезвычайно сложной задачей. Риттенберг (1940) разработал метод изотопного разбавления, согласно которому радиоактивную кислоту определенной удельной активности, например меченую глутаминовую кислоту, добавляют в известном количестве к анализируемой смеси, после чего выделяют глутаминовую кислоту обычным образом. Так как химические свойства природной и меченой кислоты одинаковы, то выделяемое вещество является смесью добавленной аминокислоты и первоначально присутствовавшей в пробе. Количество кислоты в гидролизате вычисляют по изотопному составу выделенной кислоты. Если добавляется рацемическая меченая кислота, то аминокислоты гидролизата перед выделением рацемизуют или же из выделенного рацемата отделяют чистую -форму. Точность анализа не зависит от метода выделения, выхода кислоты или концентрации ее в гидролизате. [c.655]

С момента создания метод количественного анализа аминокислот использовали для анализа других природных соединений, дающих положительную реакцию с нингидрином. По сравнению с анализом белковых гидролизатов в этом случае предъявляются гораздо более высокие требования к эффективности разделения, поскольку приходится анализировать смеси очень сложного состава. Наряду с аминокислотами такие смеси включают вещества самой разной природы их единственным общим свойством является способность давать положительную реакцию с нингидрином. С целью повышения эффективности анализ в данном случае проводят на более длинной колонке. Естественно, что такой анализ требует большего времени, чем анализ белковых гидролизатов, и особой системы буферных растворов. Источники свободных аминокислот существенно различаются в количественном и качественном отношении, и, следовательно, каждую конкретную смесь приходится анализировать в особых, нестандартных условиях. [c.307]

Для анализа редких аминокислот из некоторых источников разработаны специальные условия элюирования. Системы, предназначенные для анализа аминокислот из животных тканей, приходится модифицировать при анализе аминокислот растительного происхождения, что связано с разным количественным и качественным составом экстрактов [44—46]. Разработаны также таблицы для идентификации компонентов, содержащихся в экстрактах из насекомых [47]. Для контрольных анализов изделий пищевой промышленности разработан специальный метод аминокислотного анализа гидролизатов пищевых продуктов и муки [48, 49], пива и солода [50]. Метод определения аминокислотного состава травы и силоса разработан с целью определения их кормовой ценности [51]. Для промышленных целей раз- [c.348]

Существует два основных метода, пригодных для хроматографического анализа аминокислот. Один метод предназначен для анализа аминокислот белковых гидролизатов, другой — для анализа физиологических жидкостей. Описание этих методов приведено ниже. [c.33]

Для разделения и количественного анализа аминокислот и родственных соединений в белковых гидролизатах и физиологических жидкостях предназначены автоматические аминокислотные анализаторы, выпускаемые многими фирмами. [c.91]

Анализ белковых гидролизатов проводят следующим образом. Утром включают анализатор, нагревают до рабочей температуры термостат и баню реактора, готовят буферные растворы и реагенты. Образец растворяют в 0,2 н. буферном растворе цитрата натрия с pH 2,2 и аликвотную часть в 2 мл полученного раствора вводят в короткую колонку. При этом вначале удаляют из колонки избыток буферного раствора, а затем пипеткой с тонким концом осторожно (по стенке) вводят раствор образца. Впитывание образца проводят при избыточном давлении газа (азот или воздух) 0,3 атм. Стенки колонки ополаскивают тремя порциями по 0,5 мл 0,2 н. буферного раствора цитрата натрия, заполняют элюирующим буфером верхнюю часть колонки, плотно закрывают, включают микронасос и реле времени. По установлении рабочего давления определяют скорость потока в системе. Через час включают насос подачи нингидринового реагента. К этому времени все кислые и нейтральные аминокислоты уже элюированы из колонки. После установления рабочего давления определяют скорость потока и включают самописец. Анализ основных аминокислот заканчивается через 5 ч. После запуска короткой колонки вторую половину раствора образца (в 2 мл буфера) вводят в колонку длиной 150 см. По окончании анализа основных аминокислот включают подачу элюента на длинную колонку (150 см). Одновременно включают реле отсчета времени анализа, реле смены буфера (установленное на 8 ч 20 мин) и реле окончания [c.319]

Для определения аминокислотной последовательности применяют частичный гидролиз, используя ферменты (такие, как пепсин, трипсин, химотрипсин) или химические реагенты, достаточно специфичные по их расщепляющей способности. Однако анализ таких гидролизатов дает неполную информацию относительно последовательности аминокислот. Дополнительная информация может быть получена путем анализа С- и К-концевых аминокислот. Большая часть последовательности может быть установлена путем получения различной величины пептидов с перекрывающимися аминокислотными остатками при использовании целого ряда ферментативных и химических методов. [c.8]

Рис. 32.15. Одноколоночный анализ стандартной смеси аминокислот (гидролизата белка) на анализаторе фирмы Te hni on.

Для устранения указанных выше недостатков оказалось выгодным производить смолы с определенными характеристиками. Так, сферическая смола типа АА-15 позволяет анализировать все кислые и нейтральные аминокислоты белковых гидролизатов за 4 ч при высоте столбика смолы 56 см основные аминокислоты анализируются на колонке высотой 5 см, заполненной смолой типа РА-35 [130]. Позднее была получена смола типа РА-28, применяемая для анализа аминокислот, обычно обнаруживаемых в таких пробах, как плазма крови или моча. Кислые и нейтральные аминокислоты определяются по методу анализа физиологических жидкостей на этой смоле за 5 с лишним часов основные аминокислоты анализируются в этом случае почти за 6 ч на упомянутой выше смоле типа РА-35 [88]. Названные смолы дают очень сильное увеличение высоты пиков, свидетельствующее о том, что аминокислоты элюируются из сферической смолы в виде более узких зон, улучшая разделение пиков. Несколько позднее появилась смола типа иК-ЗО, с помощью которой можно анализировать кислые и нейтральные аминокислоты как белковых гидролизатов, так и физиологических жидкостей. Преимуществом этой смолы является также и то, что на ней [c.35]

Сравнительно недавно синтезирована смола типа UR-40, которая позволяет определять кислые и нейтральные аминокислоты по методике анализа физиологических жидкостей за 170 мин на колонке высотой 26 см. Основные аминокислоты физиологических жидкостей также могут быть определены на этой же колонке за 210 мин. Одноколоночный метод анализа белковых гидролизатов на этой смоле описан в разд. 1.6. Использование более коротких колонок и улучшение разделения пиков аминокислот стало возможным благодаря устранению специфических перемешивающих узлов (таких, как реактор, подводящие трубки, краны и кюветы), имеющихся в большинстве приборов. [c.36]

Обсуждение. По этой простой методике анализа белковых гидролизатов можно определять 23 соединения, включая обычные аминокислоты. Однако если эти аминокислоты содержатся в физиологических жидкостях, таких, как плазма крови, моча, гомогенаты тканей, то для полного анализа требуется более сложная методика. При одноколоночном методе анализа отпадает необходимость регенерации колонки и уравновешивания смолы буфером. [c.70]

Для анализа белковых гидролизатов разработаны очень удобные хроматографические методы. Тем не менее электрофорез, особенно электрофорез на бумаге, очень часто применяют, когда смеси не очень сложны и когда имеющиеся в смеси аминокислоты значительно отличаются по кислотно-основным свойствам. Пример успешного разделения довольно сложной смеси приведен на рис. 16. Электрофоретическое разделение аминокислот можно провести очень быстро, особенно если применить высоковольтный электрофорез. Проявление электрофореграмм осуществляют с помощью нингидрина. [c.105]

В настоящее время метод газо-хроматографического разделения и анализа аминокислот не представляет еще законченного и универсального способа аминокислотного анализа белковых гидролизатов. Разработанные методики конверсии аминокислот в летучие производные, особенно количественной конверсии в К-ТФА-метиловые, и в значительной степени их успешное разделение на колонках с низким содержанием полиэфирных полярных стационарных фаз позволяют уже сейчас в ряде случаев использовать метод газо-жидкостной хроматографии для определения абсолютных количеств аминокислот в смесях. Но требуется дальнейшая доработка метода, и в особенности его аппаратурного оформления, прежде чем он займет должное место при изучении аминокислотного состава белков. [c.267]

В пятидесятых годах, в период бурного развития БХ, был опубликован ряд статей с описанием методик и систем растворителей, предназначенных для разделения белковых гидролизатов или аминокислот, полученных из различных физиологических жидкостей (см. [51, 77]). Эти системы использовались для разделения сложных смесей аминокислот и пептидов и смесей аминокислот, с трудом поддающихся идентификации, например лейцин, изолейцин. С появлением автоматических аминокислотных анализаторов [120], а также новых ионообменников (см. гл. 5) БХ все реже и реже используют для анализа аминокислот и пептидов. В настоящее время в лабораториях, ведущих исследование белков, методом БХ проводят главным образом окончательную очистку простых смесей пептидов, полученных с помощью других методов разделения, кроме того, БХ служит одним из критериев однородности вещества (часто в сочетании с электрофорезом на бумаге), и только в считанных случаях ее применяют для идентификации отдельных аминокислот. [c.121]

Иониты нашли разнообразное применение для синтеза многих веществ, препаративного разделения, анализа сложных смесей. Используются для разделения аминокислот, гидролизатов белков, для очистки витаминов, алкалоидов, для тонкого хроматографического разделения трудно анализируемых смесей, для извлечения и улавливания ценных веществ из разбавленных растворов, для улавливания вредных примесей из промышленных вод перед спуском их в водоемы и т. д. [c.202]

Предположим, что мы определили аминокислотный состав белкового гидролизата и хотим установить количество содержащегося в нем валина. С этой целью к смеси добавляют небольшое точно взвешенное количество меченого С-валина известной удельной радиоактивности, после чего смесь тщательно перемешивают. Затем с помощью заранее отработанного метода выделяют из гидролизата чистый валин, измеряют удельную радиоактивность разбавленного валина и вычисляют коэффициент разбавления. Предположим, он оказался равным 75. Зная вес меченого валина, первоначально добавленного к гидролизату, можно легко вычислить вес валина, содержащегося в исходном гидролизате. До изобретения аминокислотного анализатора ]Мура и Штейна метод изотопного разбавления широко применялся для анализа аминокислот в белковых гидролизатах. Этот метод и сейчас довольно часто используется в тех случаях, когда необходимо установить, является ли данное соединение предшественником другого соединения в процессе его биосинтеза. Так, например, в последовательности реакций [c.476]

Для установления количественного состава входящих в гликопротеин моносахаридов и аминокислот биополимер подвергают полному кислотному гидролизу, и состав гидролизата определяют обычными методами количественного анализа. Пептидные связи устойчивее гликозидных по отношению к кислотам, поэтому для полного расщепления на мономеры гликопротеины приходится гидролизовать в более жестких условиях, чем обычные полисахариды (6 н. НС1, 100—ПО °С, 24 ч) . Нужно иметь в виду, что как сахара, так и аминокислоты могут частично распадаться в условиях кислотного гидролиза, причем в ряде случаев можно с помощью ХОЛОСТЫХ опытов внести соответствующие поправки при анализе. Специфической для гликопептидов побочной реакцией в условиях кислотного гидролиза является возможная конденсация сахаров с аминокислотами, приводящая к окрашенной сложной смеси различных веществ, в том числе простейших карбонильных соединений (так называемая реакция Майяоа). Например, по данным Готшалка , потеря аминокислот при кислотном гидролизе богатых сахарами гликопротеинов может составлять до 30 %. Количественное определение моносахаридов проводят с использованием хроматографии, спектрофотометрической и колориметрической техники (см. гл. 14). Для анализа аминокислот применяют обычно методы, хорошо известные из химии белка. Так, количественный анализ аминокислотного состава проводят в автоматических анализаторах или с помощью газо-жидкостной хроматографии . [c.567]

Поиски органических веществ в гидролизатах лунных частиц, (Анализ аминокислот и др. соединений методом ГЖХ 1 [c.218]

Условия разделения гидролизатов почвы при анализе аминокислот методом хроматографии на бумаге представлены в табл. 8.2. [c.319]

Многие усовершенствования за последнее время, несомненно, были вызваны желанием подтвердить или опровергнуть гипотезу строения белка Бергманна и Нимана в той части, в какой она касалась полного аминокислотного состава. Современные аналитические методы едва ли способны разрешить эту задачу даже для отдельных аминокислот. Однако имеются серьезные основания полагать, что через несколько лет проблема анализа белковых гидролизатов или аминокислот будет разрешена в такой мере, что центр тяжести проблемы будет заключаться в соответствии состава гидролизата составу белка, из которого он получен. [c.46]

С. Мур и У. Стейн в результате длительной кропотливой работы по усовершенствованию методов аналитической химии аминокислот сконструировали первый так называемый автоматический анализатор аминокислот — очень совершенный прибор, выполняющий в течение считанных часов работу по определению содержания аминокислот в гидролизате белка. Усовершенствование одного из автоматических регистрирующих устройств, созданных С. Муром, У. Стейном и Д. Спекманом, позволило автоматизировать не только процесс анализа аминокислот гидролизата, но и процедуру расщепления пептидов по методу К- Эдмана. Это разрешило основные трудности анализов белков, так как для проведения этих анализов, которые раньше могли выполнять только химики-аналитики высшей квалификации, затрачивая при этом огромный труд и годы работы, теперь могли привлекаться лаборанты, специализирующиеся на обслуживании автоматических устройств, причем стандартизация определений значительно уменьшила вероятность ошибок [412]. [c.137]

Ионообменная хроматография. Мор и Штейн [35] разработали метод хроматографии пептидов и аминокислот на И. с., который стал мощным средством анализа бетковых гидролизатов. Однако этот метод не всегда пригоден для белков и полинуклеотидов в связи с тем, что большие полимерные молекулы построены не по принципу плотнейшей упаковки, а И. с. имеют малую емкость. В таких случаях рекомендуют применять сорбенты на основе целлюлозы (см. следуюш,ий раздел). [c.70]

Можно отщеплять остатки аминокислот не с К-конца макромолекулы, как это делалось в описанном методе, а с С-конца с применением радиоактивной тритиевой метки. По количеству найденных концевых звеньев определяют еще число полипептидных цепей в молекуле белка, В настоящее время вся работа по анализу белковых гидролизатов полностью автоматизирована (на гидролиз и анализ требуется всего 2—4 ч) П. Эдманом создан сиквенатор, работающий по заданной программе и намного облегчающий установление порядка чередования аминокислотных остатков в макромолекуле. [c.329]

Имеется ряд детальных обзоров, охватывающих применение хроматографии для анализа аминокислот, извлеченных из белков гидролитическими методами [89, 127, 134]. Читатель может найти в этих обзорах сведения об анализе отдельных белков. Достаточно указать на то, что в настоящее время количественно наиболее точным является метод, разработанный Муром и Стейном [93]. В этом методе применен градиентный проявительный анализ на ионообменных колонках из сульфированного полистирола. На рис. 165 показан типичный пример [62] превосходного разделения, осуществленного этим методом. Если применение сложной аппаратуры нецелесообразно, то хроматография на бумаге вполне применима для анализа белковых гидролизатов [7, 10, 30, 80]. [c.336]

В обычном аминокислотном анализаторе N -2 сохранен блочный принцип. Прибор снабжают одной или несколькими колонками (0,5X75 см). Анализ белковых гидролизатов может занять 2 ч 30 мин анализ образцов более сложного состава может длиться более 36 ч. Прибор имеет два колориметра, с полосами пропускания при 570 и 440 нм в случае необходимости можно использовать один колориметр с полосой при 410 нм. Полагают, что потерю чувствительности можно многократно перекрыть благодаря непрерывному 10-кратному расширению шкалы, что вообше является конструктивной особенностью этих колориметров. Для достижения максимального разрешения используют также рассечение потока пузырьками азота (что является характерной особенностью анализатора Te ni-соп), хотя новый состав нингидринового реагента, с использованием гидразинсульфата, делает излишним хранение его под азотом. Предел детектирования аминокислот составляет 1 нмоль. [c.325]

В последнее время наряду с детектированием по реакции с нингидрином широкое распространение получило детектирование по флуоресценции продуктов реакции с флуорескамином [93]. Реакция идет при комнатной температуре, а в остальном анализ напоминает обычную схему с использованием нингидрина [94]. Анализируемые вещества разделяются по колонке с ионообменной смолой, затем проходят через реакционную спираль (реактор), а флуоресценция регистрируется с помощью флуориметра. Показано, что эту систему можно использовать для анализа белковых гидролизатов [95, 96]. Схема модифицированного анализатора аминокислот приведена на рис. 32.11. Для работы на одной колонке необходимо три микронасоса первый — для подачи буферного раствора на колонку второй — чтобы довести величину pH элюата до значения 9 и третий предназначен для смешивания элюата с реагентом, представляющим собой раствор флуорескамина в ацетоне. Скорость реакции достаточно высока, что позволяет использовать короткую реакционную спираль. Далее смесь проходит через проточную кювету флуориметра, и интенсивность флуоресценции регистрируется самописцем. Одновременно много внимания было уделено выделению продуктов реакции аминов с флуорескамином, обладающих низкой полярностью, для анализа которых могла оказаться пригодной высокоскоростная хроматография. Более того, в этом случае можно было бы обойтись без реакционной спирали. Такой путь оказался приемлемым для анализа первичных аминов [97—99]. Что касается аминокислот, то большинство из них, вопреки ожиданиям, давали с флуорескамином два продукта реакции, соотношение которых определялось природой аминокислоты. [c.340]

Анализ аминокислот белковых гидролизатов, физиологических жидкостей и биологических экстрактов проводят на колонке длиной 133 см в одной системе буферных растворов [61-Элюирование ведут в плавном градиенте концентраций и значений pH, которые определяются составом исходных буферных растворов (табл. 32.1) и способом построения градиента в девятикамерном смесителе Varigrad (рис. 32.3). Для построения градиента используют два буферных раствора цитрата натрия [c.347]

Наряду с одноколоночным анализом в непрерывном градиенте был разработан одноколоночный анализ в ступенчатом градиенте [8]. Вначале этот метод сильно уступал по эффективности двухколоночной схеме анализа время анализа белкового гидролизата составляло 38 ч. Разделение проводили на колонке (0,63X100 см) с амберлитом Щ-120 (20—40 мкм) в трех буферных растворах с pH 2,95 4,15 и 5,0 при 40 и 50 °С. Удовлетворительное разделение этим методом достигалось при правильном выборе градиента и тщательном подборе прочих условий анализа. Дальнейшее развитие этой схемы шло по линии сокращения времени анализа, т. е. повышения эффективности, а также повышения хроматографического разрешения при анализе нингидринположительных компонентов из биологических материалов. В результате продолжительность анализа белковых гидролизатов была доведена до 260 мин [40]. При анализе физиологических жидкостей основная задача состоит в том, чтобы разделить все имеющиеся компоненты на одной колонке и определить объемы их выхода в идентичных условиях. В связи с этим следует отметить работу Гамильтона [41], в которой указаны объемы выхода 180 веществ. Эти данные можно использовать для идентификации компонентов физиологических жидкостей, а также для выбора условий анализа нингидринположительных веществ природных смесей. Для повышения разрешения смесей амидов и других трудноразделяемых пар аминокислот также используют буферные растворы на основе солей лития [42, 43]. [c.348]

Примечания. 1. Смола рекомендована для хроматографии на длинных колонках с применением небольшого давления (6—7 кгс/см ). 3. Для хроматографии на длинных колонках с давлением до 21—28 кгс/см . 4—6. Для ВСЖХ. Смола А-9 отличается повышенной жесткостью и улучшенной филь трационной способностью при высоком давлении. 7,8. Для препаративных работ. 18. Для работ с давлением до 28—35 кгс/см. 20—28. Предназначены для анализа аминокислот в гидролизатах (№ 20—22) и физиологических жидкостях (№ 23, 24), а также для препаративных работ (№ 25—28). 31, 32. Универсальные высокоэффективные смолы. 41. Однородность зернения 2 мкм. 42—54. На основе смолы Amberlite IR-120 Влажность (в %) 10—15 (№ 42—44), 44—48 (№45), 49—55 (№ 46), 50—55 (№ 47—52). Смолы № 50—52 соответствуют смолам № 42—44, дополнительно очищены (АС). 55—61. Сорта смолы Zerolit 225. 62—69. АС, поставляются во влажном состоянии. Сорт смолы № 66 — с добавкой индикатора, смола № 67—69 — макропористая. 77, 78. Предназначены для анализа аминокислот в гидролизатах (№ 77) и в физиологических жидкостях (№ 78). 80. Для использования в аминокислотном анализаторе, работающем по методу лигандной хроматографии. 87, 88. Рекомендованы для работы на малых (№ 87) и больших (№ 88) колонках с давлением соответственно до 3 или до 17 кгс/см . [c.101]

Определение аминокислотной последовательности — задача очень трудоемкая. Однако ее можно было бы значительно облегчить, если бы удалось выработать приемы для фрагментации длинных пептидных цепей на относительно небольшие пептиды, содержащие от 10 до 15 аминокислотных остатков, и на другой ряд более длинных пептидов, с тем чтобы можно было установить места перекрывания небольших пептидов. Такая идеальная возможность редко встречается. Практически проблема решалась несколькими путями. История изучения инсулина, рибонуклеазы и гемоглобина отражает три различных подхода. В первых исследованиях, проведенных на инсулине, изучали частичные кислотные гидролизаты динитрофепилированных пептидов (см. гл. 6), а ферменты были использованы на второй стадии работы для получения более крупных пептидов. Быстрое установление структуры рибонуклеазы оказалось возможным благодаря усовершенствованию анализа аминокислот. Аминокислотный состав пептидов, полученных [c.113]

Анализ кислых и нейтральных аминокислот с использованием натрийцитратных буферов. Для этой цели можно использовать ту же колонку длиной 56 см, которая применяется для анализа белковых гидролизатов. Заполнение колонки описано в разд. 1.6.4. Режим анализа следующий скорость подачи буфера 50 мл/ч, нингидринового реагента — 25 мл/ч стартовый буфер — 0,2 н. натрийцитратный буфер с pH 3,20 + 0,01, не содержащий детергента (табл. За) начальная температура 32,3°С. Через 90 мин после начала анализа температуру колонки повышают до 62,0°С (постепенно, в течение 55—60 мин). Через 158 мин после начала анализа стартовый буфер заменяют 0,2 н. натрийцитратным буфером с pH 4,26+0,02. Нормальное давление на колонке при 32,3 °С составляет 12,7 атм весь анализ проходит за 320 мин. Типичная кривая показана на рис. 2. [c.61]

Для одноколоночного хроматографического анализа кислых, нейтральных и основных аминокислот белковых гидролизатов используется такая же колонка высотой 26 см, которая была описана применительно к более сложному анализу физиологических жидкостей (см. разд. 1.6.5). При использовании трех натрийцитратных буферов весь анализ занимает 170 мин. Описанный ниже метод с применением трех буферов позволяет проводить весь анализ при одной температуре. Однако можно осуществить анализ белковых гидролизатов, используя вначале методику анализа для кислых и нейтральных аминокислот физиологических жидкостей (см. разд. 1.6.5.2) и вводя затем третий буфер (сходный с тем, который описан ниже) для элюирования основных аминокислот. Эта методика дает возможность определять не только обычные аминокислоты, содержащиеся в белковых гидролизатах, но также и необычные или неизвестные аминокислоты при минимальном перекрывании пиков. [c.72]

Анализ проводят при температуре 50°. В верхнюю часть колонки вносят пробу, содержащую 0,1—2,5 мкмолей аминокислот (гидролизат 1—2 мг белка) и растворенную в 2 лелО,1 н. НС1 или буферного раствора pH 2,2 (при этом стараются не возмутить поверхностный слой смолы и не оставить его сухим). Объем наносимой пробы имеет существенное значение, так как при элютивной хроматографии разделяемая смесь должна занимать перед началом опыта минимальный слой сорбента в колонке. Через колонку пропускают деаэрированный буферный раствор pH 3,25 со скоростью 30 мл/час в количестве, в 2,15 раз превышающем удерживаемый объем аспарагиновой кислоты (около 260—280 мл). После этого производят смену буферных растворов, начиная пропускать буфер 4,25, с тем чтобы валин вышел с новым [c.133]

Открытие в 1944 г. метода бумажной хроматографии (БХ), чрезвычайно расширившего возможности обнаружения, идентификации и разделения малых количеств веществ, означало подлинную революцию в химии, особенно в биохимии. Этот метод был открыт Консденом, Гордоном, Мартином и Синджем, которые разработали и применили его для анализа белковых гидролизатов, т. е. смесей аминокислот. Последние два из перечисленных авторов были удостоены Нобелевской премии за открытие распределительной хроматографии. В последующие 10 лет метод БХ был значительно усовершенствован и получил такое распространение, что нельзя было представить без него работу какой-либо химической или биохимической лаборатории. Однако с 1952 г. БХ начала постепенно вытеснять ее младшая сестра — тонкослойная хроматография (ТСХ), которая оказалась эффективнее благодаря возможности более быстрого проведения эксперимента, большей пригодности для препаративных работ и более широким возможностям обнаружения (включая применение коррозионно-активных реагентов). В настоящее время ТСХ используется чаще, чем БХ, в примерно 5 и более раз. [c.58]

Этот процесс был описан в многочисленных статьях и патентах [19, 20, 22 — 27]. При этом процессе применяется метод, названный Тизелиусом [10] и Елессоном [28] вытеснительным про-яв.зением и фронтальным анализом . Протеиновый гидролизат фильтруется сверху вниз через колонну, снаряженную катионитом в И- или МП -форме, до тех пор, пока в фильтрате не обнаруживаются основные аминокислоты. Хотя в начальной стадии на Н-ка- j HOHHTe адсорбируются все аминокислоты, а на NH4-KaTHonnTe — многие из них, в процессе дальнейшего фильтрования они постепенно вытесняются аминокислотами основного характера, которые адсорбируются ионитом более прочно в конце фильтрования 70—80% всего связанного ионитом азота содержится в виде аргинина, гистидина и лизина. [c.305]

Разрыв глюкозидной связи (тип Б]), распад с миграцией Н (тип Л) или двух Н (тип О) указывают на тип основания в выделенном объекте. Для структурного и количественного анализов аминокислот, полученных гидролизом протеинов, перспективны Мез5 -производные, получаемые непосредственно из гидролизата. [c.245]

Газовая хроматография аминокислот в виде метиловых эфиров N-трифторацетиламино-кислот. (НФ НПГС детектор ионизационный. Метод пригоден для анализа белковых гидролизатов.) [c.81]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология