Растворяющее действие на белок

Свойства коллоидных растворов зависят не только от степени их дисперсности, но также и от их природы. Различные коллоиды аналогично кристаллоидам могут сильно различаться по химическим свойствам. В качестве примера можно взять коллоидные растворы золота, белка и гидроксида железа (III). Как показывает опыт, химические свойства этих трех коллоидных растворов совершенно различны даже в случае одинакового размера частиц. Так, белок оседает под действием высокой температуры, но выдерживает (т. е. выпадает в осадок) значительные концентрации электролитов. Коллоидное золото хорошо выдерживает нагревание, не осаждается кипячением, но очень чувствительно к действию электролитов. Коллоидный гидроксид железа (III), приготовленный при соблюдении определенных условий, хорошо выдерживает и нагревание, и действие электролитов. [c.310]

Некоторые белки растворимы в воде и в разбавленных растворах щелочей, кислот и солей. Растворы многих белков нестойки против действия тепла нагревание денатурирует многие белки и переводит их в нерастворимую форму (например, яичный белок). Белки осаждаются из растворов электролитами, спиртом и ацетоном. [c.180]

Если взять в качестве подопытных животных мышей, у которых половой цикл занимает всего 4—6 дней, то результат можно узнать очен > скоро. То минимально необходимое количество вещества (или экстракта), которое у 70% мышей вызывает явления эструса, получило название мышиной единицы (соответственно—крысиной единицы, если испытания проводятся на крысах). Правда, сразу же было отмечено, что этот тест не отличается такой точностью, как аналитическое определение, Очень много зависит от того, как вводится вещество или вытяжка. Так, если вещество ввести в масляном растворе, то действие окажется слабее, че.м если вводить его, например, в двухпроцентном растворе яичного белка. Результаты зависят также от вида подопытных животных. Поэтому в литературе очень часто приходится сталкиваться с тем, [c.303]

Тепловая коагуляция. Регенерация растворимых белков посредством изоэлектрического осаждения не является полной. В частности, альбумины могут оставаться в растворе. Для белков, которые от природы растворимы (преимущественно белки листьев и клубней у растений, белки крови у животных), один из способов регенерации состоит в коагуляции под действием тепла. Действительно, за пределами определенного порога температуры белки денатурируются (они теряют свои функциональные свойства растворимости, ферментативную активность и т. п.) и образуют осадок. Это осаждение позволяет выделять их из водной среды, в которой остаются в растворенном состоянии растворимые продукты (углеводы, минеральные соединения). Как и при применении осаждений, следует уточнить оптимальное значение рн, которое необходимо обеспечить, помимо тепловой обработки. [c.427]

Белковые осадки, полученные при действии солей тяжелых металлов, нерастворимы в первоначальном растворителе (в воде и слабых растворах солей), т. е. реакция необратима. Соли тяжелых металлов полностью осаждают и денатурируют белки. Этими реакциями пользуются для освобождения растворов от белков. Соли тяжелых металлов одновременно с белками осаждают и другие азотистые вещества. Доказано, например, что ряд аминокислот (лейцин, фенилаланин метионин, триптофан, цистеин) образуют с медью труднорастворимые соли. [c.41]

Сорбция белков на ионитах основана ка образовании электростатических связей между заряженными группировками белка и ионообменными центрами матрицы, имеющими противоположный заряд., Сродство ионита к молекуле белка, а также его емкость зависят от ионной силы и pH буферного раствора. Фракционирование белков основано на изменении заряда под действием pH или на введении в элюент веществ, конкурирующих за ионогенные группировки матрицы. Для достижения высокого разрешения приходится очень тщательно подбирать ионную силу, величину pH и в особенности концентрацию противоионов. [c.430]

Заполняют капиллярные трубки погружением в жидкую реакционную смесь, приготовленную для получения ПААГ. Под действием капиллярных сил жидкость заполняет трубки. При достижении специальной отметки капилляр сверху плотно закрывают и переносят в емкость с раствором смеси белков, подвергаемых электрофоретическому анализу. После погружения нижнего. конца капилляра в раствор и открытия верхнего конца происходит полное заполнение капилляра. Заполненные таким образом капиллярные трубки помещают в аппарат для микроэлектрофореза. При создании электрического поля в аппарате происходит разделение белков в соответствии с величиной заряда, размером и формой макромолекул. [c.66]

Несмотря на внешнее несходство, различные представители белков обладают некоторыми общими свойствами. Так, растворы всех белков имеют коллоидный характер. При повышении температуры, действии УФ-излучения или радиации, под влиянием кислот, щелочей и других реагентов происходят изменения физико-химических свойств белков, называемые денатурацией. При этом уменьшается растворимость, теряется биологическая активность. Денатурацию в настоящее время связывают с изменениями конформации белковых молекул. [c.425]

Из сказанного выше ясно, что в любом случае сухой препарат фермента обладает гораздо большей устойчивостью, чем препарат, выпускаемый в виде сиропа, раствора и т. п. Кроме того, в растворах ферментные белки больше подвержены действию микроорганизмов. Известно также, что большинство белков более устойчиво в концентрированных растворах, чем в разбавленных. Существует много методов концентрирования белковых растворов. Для повышения стабильности, удобства транспортировки и т. д. эти методы желательно использовать, если, разумеется, это не противоречит данным общего экономического расчета. [c.168]

Во многих технологических схемах для получения очищенных технических препаратов производят осаждение ферментных белков из растворов действием органических растворителей. Осаждение выполняют в специальных аппаратах-осадителях. Пример конструкции такого прибора показан на рис. 29. [c.195]

Нельзя больше сомневаться в том, что процессы образования эфирных масел миндаля и горчицы принадлежат к одному роду явлений, совершаются по одним законам почти равная степень подобия замечается между этими двумя процессами и процессом брожения Азотистое вещество, легко изменяющееся при посредстве воды и атмосферного воздуха, разлагает другое, постоянное в подобных случаях, тело, которое находится с ним в прикосновении. В процессе спиртового брожения сахаристых веществ, который более прочих исследован, разлагающим телом может быть растительный белок и всякое азотсодержащее органическое тело, в котором от действия особенных причин начался уже процесс разложения — гниение. В смеси растворов сахара с растительным белком или вообще в растительных соках, содержащих сахар, брожение начинается только при содействии воздуха потом может продолжаться уже без посредства его, причем образуется, кроме продуктов разложения сахара, еще особенное вещество, называемое дрожжами, которое содержит весь азот растительного белка и растворимой части, которого способность производить брожение и в растворе чистого сахара. Образование дрожжей из белка прекращается, коль скоро весь сахар уже разрушен брожением в растворе чистого белка, не содержащем сахара, дрожжей вовсе не образуется. При разложении чистого белка, без содействия воздуха, отделяется углеродная кислота и водород.— Это явление объясняет некоторым образом, откуда происходят вещества, содержащие много водорода, во время брожения различных тел. Способность дрожжей приводить в брожение сахаристые растворы сохраняется только до тех пор, пока не прекратился в них самих процесс разложения, который, если не устранена вода, совершается медленно, но беспрерывно. При этом разложении кислород прикосновенного воздуха превращается в углеродную кислоту и, сверх того, отделяется еще определенное количество углеродной кислоты из самого тела, образуясь на счет его углерода и кислорода или кислорода находящейся в прикосновении с ним воды. По окончании этого процесса дрожжи уже совершенно нерастворимы и не действуют на сахаристые растворы. Настой дрожжей, сделанный с горячею водою, не действует при устранении атмосферного воздуха на сахар, по если остудить его в воздухе, причем часть его углерода соединится с кислородом и образуется углеродная кислота,— следовательно, на- [c.18]

Защитное действие белков раньше объяснялось тем, что частицы их в кислой среде заряжены положительно вследствие ионизации солей, образуемых аминогруппами с кислотой. Такие положительно заряженные частицы должны особенно интенсивно адсорбироваться на катодных участках поверхности металла, препятствуя разряжению на них ионов водорода, а следовательно, и выделению водорода из раствора. [c.62]

Притяжение или отталкивание полипептидных цепей может быть обусловлено и электростатическими силами, действующими между положительно и отрицательно заряженными группами молекулы белка (кулоновское взаимодействие). Величина таких сил зависит от ионной силы раствора. Однако для растворов глобулярных белков не обнаружено существенной зависимости электростатических сил от ионной силы, если эффективный заряд белка не слишком велик. Это говорит о том, что электростатические силы, вероятно, не играют важной роли в формировании глобулярной структуры. Для некоторых удлиненных белковых молекул эти силы, возможно, и имеют влияние на форму молекулы, поскольку они способны обеспечить взаимодействие на относительно больших расстояниях. [c.94]

Обе эти стадии возможно отделить одну от другой. Например если альбумин кипятить некоторое время в разбавленной кислоте, то белок денатурируется, но не выпадает из раствора (не коагулирует). Однако если этот золь действие.м щелочи или при по.мощи диализа довести до изоэлектрического состояния, то наступает явная коагуляция его. Аналогично этому, растворы многих белков, не содержащие солей, могут быть на- [c.436]

Экспериментальное исследование явлений высаливания показало, что высаливающее действие различных электролитов по отношению к одному и тому же веществу неодинаково. Разница в высаливающем действии сильнее выражена у анионов, чем у катионов. В качестве примера рассмотрим опытные данные, характеризующие высаливающее действие натриевых солей различных кислот по отношению к щелочному раствору яичного белка [c.225]

При попадании на кожу концентрированные растворы или порошкообразные едкие щелочи вызывают химические ожоги, а слабые растворы — контактные дерматиты. Спорным и не разрешенным до конца вопросом является утверждение о сенсибилизирующих свойствах щелочей. В производственных условиях химические ожоги наблюдаются чаще всего при воздействии на кожу едкого награ и кали, негашеной извести, каустической соды и ряда других веществ. Щелочи действуют на ткани более разрушающе, чем кислоты. Они растворяют тканевые белки, в том числе кератин, превращая их в щелочные альбуминаты. Если при попадании на кожу кислоты вызывают коагуляционный некроз, ограниченный местом контакта с образованием сухого и хрупкого струпа, то щелочи, наоборот, приводят к колликвационному некрозу тканей с мягким рыхлым струпом, без четкой демаркации, с распространением распада по периферии. По отпадении струпа, вначале беловатого, а затем постепенно чернеющего, обнаруживается легко кровоточащая язва, которая заживает рубцом в среднем через 2 месяца. Обширные щелочные ожоги сопровождаются общими нарушениями организма, наблюдаемыми при [c.103]

Для ступенчатого расщепления ФТК-производных высших пептидов и белков, по-видимому, лучше применять безводные кислотные реагенты, так как при этом снижается вероятность разрыва связей внутри пептидной цепи при многократном последовательном отщеплении концевых остатков. Ступенчатое расщепление ФТК-инсулина в водной среде в присутствии хлоргидрата гуанидина, который удерживает белок в растворе, действием 1 н. НС1 при 36° [112] или 0,1 н. НС1 при 75° [60] на начальных стадиях происходит нормально. Однако при использовании разбавленных кислот помимо ожидаемых ФТГ-прокзводных на последующих стадиях отщепления образуются все возрастающие количества других фенилтиогидан-тоннов, что свидетельствует о расщеплении других пептидных связей. [c.243]

Результаты исследования каталитического выделения водорода под действием белков и некоторых других серусодержащих соединений в присутствии солей кобальта показали, что каталитическая активность обусловлена сульфгидрильными группами, водород которых под влиянием солей кобальта разряжается на электроде со значительным снижением перенапряжения. Одним из необходимых условий возникновения каталитической волны следует считать образование комплекса вещества, содержащего сульфгидрильные группы, с ионами кобальта. Для объяснения того, что каталитическая волна появляется при потенциалах, при которых кобальт уже должен быть полностью выделен на электроде, можно было бы предположить, что координационная связь лиганда, вероятнее всего ЗН-группы, сохраняется и после выделения кобальта. Бржезина [60] с помощью стационарного капельного электрода показал, что выделенный на электроде атомарный кобальт не вызывает каталитическую активность. Влчек [61] тем не менее доказал возможность существования нульвалентных комплексов для данного случая связь 5Н-групп с атомами кобальта на поверхности электрода может, по-видимому, способствовать облегчению восстановления водорода. Протоны, отбираемые от 5Н-группы в результате электрохимической реакции, заменяются новыми при их последующей реакции с донорами протонов, находящимися в растворе, например —S- + NHi i —5Н + ЫНз, вследствие чего возникает каталитический ток. [c.398]

Реакция почвенного раствора действует на углеводный и белковый обмен в растениях. При кислой реакции ослабляется синтез белковых веществ, содержание белка и общего азота в растениях зшеньшается, а количество небелковых форм азота возрастает подавляется процесс превращения моносахаров в другие более сложные органические соединения. [c.138]

Отталкивание и притяжение между координированным лигандом и окружающими аминокислотами могут влиять на величину константы равновесия, хотя довольно трудно количественно оценить этот эффект. К сожалению, в нашем распоряжении нет небелковых комплексов с пятью лигандами вокруг центрального атома Ре(П), которые позволили бы сравнить соответствующие константы равновесия (разд. 7.3). Константы равновесия связывания N комплексами Ее" гемоглобина и миоглобина, по-видимому, не превышают 10 [121]. Это значение представляется очень низким (ср. сданными, приведенными в работе [77]) и, по всей вероятности, отражает упомянутые, выше пространственные затруднения, а также невыгодность переноса заряженной частицы — аниона — в более гидрофобное окружение внутри белка из-за ослабления сольватации. Гемоглобин в 5 раз сильнее связывает СО, чем железопротопорфирин в водном растворе в присутствии 5 10" М пиридина [155], что, по-видимому, определяется стабилизацией связи Ее—С белком. Однако это отношение следут, конечно, разделить на константу равновесия (которая неизвестна) связывания шестого лиганда (вода или пиридин) пентакоординационным комплексом Ее(И). Полученное отношение будет, вероятно, отражать существенное дестабилизирующее действие белка. Однако нас в основном интересует координация кислорода. Из рентгеноструктурных данных, по-видимому, следует, что аминокислотные остатки вокруг дистального координационного положения размещены таким образом, чтобы свести к минимуму всякие силы отталкивания и перегруппировки белка, которые могли бы уменьшить константу равновесия связывания кислорода, разумеется, в предположении, что кислород связывается, образуя структуру V. С другой стороны, не получено никаких данных о значительном увеличении константы равновесия, например вследствие образования водородной связи. В ероятно, этот фрагмент белка, рассматриваемый вне связи с остальной частью белковой глобулы, не влияет или оказывает лишь не- [c.162]

Предохранение от постденатурационной агрегации, кажущуюся, или внешнюю , стабилизацию, когда растворы денатурированных белков сохраняются прозрачными и как бы неизменными, можно вызвать действием а) анионов жирных кислот и детергентов (при больших их концентрациях) б) формальдегида в) сульфгидрильных реагентов, йодуксусной кислоты г) солей тимонуклеиновой кислоты. Кроме того, предохранение от последенатурационных явлений (агрегации, коагуляции, но, естественно, не денатурации ) можно получить при действии ряда денатурирующих веществ мочевины, солей гуанидина, ацетилтриптофана, фенилацетата, уретана, солей миндальной кислоты или щелочи. [c.163]

Для определения того, какая из фосфорных кислот — орто-, пирс- или мета- присутствует в растворе, пользуются реакцией с AgNOз, а также с водным раствором яичного белка. Ортофосфорная кислота и ее соли образуют с А МОз желтый осадок AgзP04, в то время как пиро- и eтaки лoты дают белые осадки соответствующих серебряных солей. Отличить пирокислоту от метакислоты можно по их разному действию на белок метакислота свертывает белок, пирокислота — нет. [c.181]

При описании свойств едкого натра указывалось, что он как в твердом виде, так и в водных растворах действует прижигающе на ткани. Содержащиеся в животных тканях белки растворяются в результате взаимодействия со щелочью с образованием щелочных альбуминатов. При действии едкого натра на кожу и слизистые оболочки получаются струпья, не препятствующие дальнейшему проникновению щелочи в более глубокие ткани. [c.210]

Было замечено, что спектры поглощения раствора железосодержащих белков цитохрома с и гемоглобина в. жидком фтористом водороде и в воде похожи друг на друга. Установление этого факта способствовало изучению свойств других координационных соединений металлов в жидком фтористом водороде. Способность комплексов металлов противостоять действию фтористого водорода, по-видимому, характерна для фталоцианинов металлов, аминов кобаль-та(1П) и многих других координационных соединений, растворяющихся без разрушения комплжса. Особый интерес представляют биологически важные координационные соединения металлов — хлорофилл и витамин В 5 3. Спектры поглощения растворов хлорофилла в жидком фтористом водороде аналогичны его спектрам в более обычных растворителях. Раствор витамина В з в жидком НГ имеет яркий оливково-зеленый цвет, а цвет самого витамина В з ярко-красный. Витамин В а, представляющий собой координационное соединение кобальта(П1), пе разрушается при растворении в жидком фтористом водороде, несмотря на сложную структуру и наличие многочисленных функциональных групп. Он может быть легко выделен из раствора Н Г и при этом не теряет своих свойств. [c.77]

Первоначально электрофорезом пользовались для определения изоэлектрической точки белков и их подвижности при различных значениях pH. Аппарат состоял из простой и-образной трубки, в которую помещали раствор испытуемого белка, забу-ференного до определенного pH. Безбелковый раствор того же буфера осторожно наслаивали на белковый раствор. Оба колена и-образной трубки соединяли с неполяризующимися электродами и наблюдали за движением границы белок—буфер под действием постоянного тока при напряжении около 100 в (фиг. 12) [c.89]

Многие исследователи полагают, что денатурация подчиняется закону все или ничего , т. е. что денатурация всегда протекает полностью и никогда частично [190]. Это лшение трудно проверить экспериментально, поскольку лишь немногие свойства денатурированных белков поддаются количественному измерению. Нерастворимость денатурированного белка не может быть использована как критерий денатурации, так как коагулят нерастворимого денатурированного белка может адсорбировать молекулы нативного белка и, наоборот, само свертывание денатурированного белка может тормозиться благодаря защитному действию остающегося в растворе нативного белка. Поскольку мы не имеем в своем распоряжении достаточно надежных и доступных методов для решения вопроса о том, содержит ли денатурированный раствор белка частично денатурированные молекулы или же он содержит смесь нативных и полностью денатурированных молекул, весь вопрос остается открытым [130]. [c.157]

Обе указанные стадии возможно отделить одну от другой. Например, если альбум ин кипятить некоторое вр мя в разбавленной кислоте, то белок денатурируется, но не выпадает из раствора (не коагулирует). Однако, если этот золь действием щелочи или при помощи диализа довести до изоэлектрического состояния, то наступает явная коагуляция его. Аналогично этому, растворы многих белков, не содержащие солей, могут быть нагреты достаточно сильно, и выпадения денатурированного белка в осадок наблюдаться не будет. [c.374]

Макромолекулы белков стойки к действию кислот, но обладают малой стойкостью к действию даже разбавленных растворов щелочи. Белки, растворенные в 0,5—1%-ном растворе NaOH, сравнительно быстро деструктируются, и молекулярный вес их снижается. Это необходимо учитывать при разработке условий растворения белков и выборе растворителя для приготовления прядильных растворов. [c.623]

Большие количества нейтральных растворимых солей, например (ЫН4)2504 и N325 0 4, высаливают белок из раствора. Очевидно, ионы солей забирают воду, необходимую для дисперсии белка, и нарушают гидратацию его молекул. В щелочных растворах молекулы белка ведут себя как анионы и реагируют с ионами тяжелых металлов (Ag , 2п +, Hg Си + или РЬ +) с образованием нерастворимых солей — протеинатов металлов. В кислых растворах молекулы белка ведут себя как катионы. Они реагируют с таннином, фосфорновольфрамовой и пикриновой кислотами с образованием таннатов, фосфовольфраматов и пикратов соответственно. Некоторые красители, действующие как положительные (метиленовый голубой) или отрицательные (нафтиламин коричневый) ионы, также способны осаждать белки. 291 [c.291]

Приобретенный иммунитет может представлять собой более сложное явление, чем первоначально предполагали это было показано работами Бриггса [249] и Стефенса [1962], которые поставили под сомнение существование некоторых антител у насекомых. Работая с 11 видами бабочек, Бриггс использовал в качестве антигенов для инъекции или скармливания насркомым живые и ослабленные бактерии (патогенные и непатогенные) и растворы яичного белка.-Ему не удалось обнаружить природные или приобретенные иммунные свойства гемолимфы такими серологическими методами, как реакции агглютинации, преципитации и связывания комплемента. Он установил, однако, что в сыворотке вакцинированных насекомых содержится крайне термостабильное бактерицидное начало, которое можно демонстрировать in vitro. Это специфическое бактерицидное начало сохраняется на протяжении всей жизни гусеницы, оно устойчиво к кислотам и щелочам, но переходит в форму суспензии под действием пепсина. Эта иммунологическая реакция появляется только при инъекции, но не при скармливании антигена. Термостабильность искусственно приобретенного бактерицидного начала отличает его от антител позвоночных. Стефенсу [1962] не удалось обнаружить никаких настоящих ан- [c.428]

Выше было уже упомянуто об образовании слабо растворимых солей (например, хлоридов и сульфатов) белковых катионов з кислой по отношению к изоэлектрической точке области [195, 202] и об использовании этого явления, например, для выделёнйя кристаллического сульфата альбумина плазмы [106]. Было получено также несколько кристаллических солей лизоцима [204]. Белковые соли, содержащие тяжелые комплексные анионы, например воль-фрамат-, фосфовольфрамат-, трихлорацетат- или метафосфатионы, а также соли, содержащие катионы тяжелых металлов — цинка, меди или ртути, — известны уже давно и применялись для освобождения раствора от белков перед некоторыми анализами [10, 78]. Предполагалось, что эти реагенты при их применений действуют на белки сильно денатурирующим образом. Вслед з-а кристаллизацией цинковой соли инсулина [205, 206] и метафос-фата яичного альбумина [207] недавно последовало приготовление серии кристаллических производных инсулина [208] и сывороточных альбуминов человека [209, 210]. Последние были получены в присутствии ионов, концентрация которых была недостаточна для высаливания (если не добавлять в количестве 5—30% органического растворителя и во избежание денатурации не вести процесс при низких температурах). В этих условиях многие из указанных солей менее растворимы, чем свободный белок или соли с такими катионами, как натрий или калий, и, следовательно, могут найти применение при выделении белков [51] (4). Были получены также кристаллические додецилсульфатпроизводные Р-лактоглобулина [211]. [c.51]

Для испытания нингидрина готовят раствор 30 мг нингидрина в 3. ил воды и разливают его в 3 пробирки (13X100 мм). В каждую пз пробирок добавляют по 1 мл 1%-ных растворов глицина, /./-аланина и с/,/-аспарагиновой кислоты. Растворы нагревают 5. мин. на водяной бане и отмечают различия во времени появления окраски. Разбавляют 1. ил раствора глицина Д11 100 м.г, отмечают оттенок и интенсивность окраски и проверяют действие соляной кислоты и щелочи на отдельные порции раствора. Действие нингидрина на белки может быть продемонстрировано добавлением нескольких капель раствора нингидрина в свежевскрытое куриное яйцо. [c.159]

Первый этап денатурационного процесса не вызывает глубоких изменений в структуре белковых молекул и является обратимым. Однако при дальнейшем своем развитии денатурационный процесс приводит к необратимым изменениям. К денатурирующим факторам относится повышение температуры (нагревание до 70—100° С) белкового раствора, действие на белок сильных кислот и щелочей, тяжелых металлов и ряда химических реактивов (так называемых алкалоидных осадителей). Под влиянием перечисленных факторов белки теряют свои гидрофильные и приобретают гидрофобные свойства. При дек мурации белки обычно выпадают в осадок. [c.37]

Необычное действие инъекции свежих яичных белков крысам (0,5— 1,5 мл на взрослую крысу), впервые отмеченное Паркером и Паркером [74], было детально описано Сели [75]. Этот синдром (который также вызывается инъекцией декстрана с молекулярным весом 100 ООО) характеризуется общим зудом, за которым следует выраженный отек конечностей, увеличение гема-токрита и понижение температуры тела. Действие более резко выражено у крыс с удаленными надпочечниками или после введения крысам тироксина яичные белки в этом случае вызывают сильный шок с сосудистым коллапсом [76, 77]. Действие белка на здоровых крыс было обусловлено главным образом увеличением капиллярной проницаемости, что можно установить непосредственно очень чувствительным кожным тестом с использованием синего Эванса. В этом случае было достаточно 0,05 мл раствора белка, содержащего [c.37]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология