Элюат анализ

Продолжая промывание колонки растворителем, достигают выхода из нее разделяющихся веществ, которые обнаруживают путем анализа последовательных порций вытекающего из колонки раствора (элюата). Если построить выходную кривую, т. е. график зависимости концентрации элюата (С) от объема пропущенного через колонку раствора (V), то на этой кривой выходу компонентов исходной смеси из колонки соответствуют хроматографические пики (рис. 98, б). Часто не происходит полного разделения компонентов и отдельные пики взаимно перекрываются. Построение выходных кривых является наиболее распространенной [c.327]

Контроль за хроматографическим разделением анализируемых смесей можно осуществлять различными способами. Если разделяемые вещества окрашены, то анализ веществ можно проводить непосредственно (визуально) на колонке в слое адсорбента появляются окрашенные зоны (слои). Если же вещества не-окрашены, но люминесцируют (при освещении их УФ излучением) или вызывают флюоресценцию некоторых индикаторов, вводимых предварительно в адсорбент, то идентификация таких веществ также не представляет особого затруднения. Можно регистрировать разделяемые вещества непосредственно после выхода из колонки. Например, для веществ, обладающих кислыми свойствами, можно использовать цветную реак- цию с индикатором. Иногда проводят анализ каждой порции элюата с помощью различных физико-химических методов (спектрофотометрического, потенциометрического, рефрактометрического и др.). [c.158]

Характер аналитических задач, решаемых с помощью важнейшего из этих методов — инструментальной или регистрационной колоночной ЖХ,— определяется природой используемых стационарной и подвижной фаз, а также принципом детектирования элюатов. Универсальные детекторы (рефрактометрический, диэлькометрический, транспортные и др. [109, 111, 2541) использовались для количественного анализа самых различных ГАС (аминов [255, 256], порфиринов [257], жирных кислот [258, 259], фенолов [260], сернистых соединений [261 ]) в условиях адсорбционной или координационной хроматографии, а также для определения молекулярно-массового распределения высокомолекулярных веществ [69, 109, 262, 2631 при эксклюзионном фракционировании или разделении на адсорбентах с неполярной поверхностью, например, на графитирован-ных углях. Качественная идентификация элюируемых веществ в этих случаях проводится по заранее установленным параметрам удерживания стандартных соединений и при изучении смесей неизвестного состава часто затруднена из-за отсутствия таких стандартов. Групповая идентификация ГАС отдельных типов существенно облегчается при использовании специфических селективных детекторов спектрофотометрических (УФ или ИК), флю-орометрического [109, 111, 254 и др.], пламенно-эмиссионного [264], полярографического [111], электронозахватного [265] и др. [c.33]

Ионный обмен можно применять для проведения макро- и микроопределений. Для разделения небольших количеств веществ используют ионообменную бумагу или проводят ионный обмен в тонких слоях. Количество анализируемой пробы выбирают в зависимости от последующего метода обнаружения или определения ионов. Для определения ионов после ионного обмена применяют кондуктометрические, полярографические, потенциометрические и радиохимические методы анализа. При проведении ионообменных разделений исследование фракций элюата часто проводят классическими методами анализа. При помощи ионного обмена можно проводить определение различных электролитов. Едва ли можно назвать сочетание элементов, для разделения которых нельзя использовать какой-либо метод ионного обмена [43]. Метод ионного обмена можно применять и для разделения неионогенных веществ после перевода их в ионогенные соединения. В качестве примера можно назвать разделение фруктозы, глюкозы и других сахаров в виде боратных комплексов. [c.381]

Рис. 513. Непрерывный анализ элюата (анализ в потоке).

Для регистрации вещества в момент выхода из колонки существует несколько способов. Для веществ кислого характера можно использовать цветную реакцию с индикатором. Более эффективен и пе вызывает загрязнения элюата метод, при котором элюат по выходе из колонки направляют в микрокювету. Там его непрерывно анализируют потенциометрическим, рефрактометрическим, спектрофотометрическим или колориметрическим методами. Наиболее распространен метод обнаружения веществ анализом каждой из точно отмеренных фракций элюата. Чаще всего хроматографируют каждую фракцию элюата или используют химические превращения с последующим исследованием продуктов реакции. [c.74]

Элюентный анализ. В методе элюентного анализа адсорбированные соединения вымывают избытком растворителя с меньшим коэффициентом распределения, чем у адсорбата. При этом в элюате образуются раздельные зоны (рис. Д.80,г). [c.243]

Продолжая промывание колонки растворителем, достигают выхода из нее разделяющихся веществ, которые обнаруживают путем анализа последовательных порций вытекающего из колонки раствора (элюата). Если построить выходную кривую, т. е. график зависимости концентрации элюата (С) от объема пропущенного через ко-понку раствора (V), то на этой кривой выходу компонентов исходной смеси из колонки соответствуют хроматографические пики (рис. [c.305]

Препаративная хроматография имеет своей целью получить некоторые или все компоненты разделяемой смеси в очищенном виде для дальнейшего исследования или использования. В этом случае каждая из разделенных зон после выхода из хроматографической системы должна попасть в отдельный приемник. При наличии непрерывного контроля за выходящей из системы подвижной фазой можно менять приемники после окончания выхода из системы каждой зоны. При жидкостной хроматографии, особенно при разделении очень сложных смесей биополимеров, для обнаружения компонентов приходится проводить специальный анализ проб выходящего из колонки элюата. В этом случае целесообразно собирать элюат в отдельные небольшие фракции и после анализа содержимого каждой из фракций объединять те, которые содержат интересующие экспериментатора вещества, и подвергать их последующей обработке. [c.343]

Затем колонку промывают - 15—20 мл 6 н. раствора хлористоводородной кислоты со скоростью протекания 1—2 капли в секунду и 40—50 мл воды, собирая элюат и промывные воды в стакан. Полученный раствор содержит катионы. Раствор выпаривают почти досуха и смачивают I—2 каплями 6 н. раствора уксусной кислоты, затем разбавляют водой до 2 мл и приступают к систематическому анализу катионов (см. гл. V, 8). [c.200]

Определение свободной кислоты в растворах различных солей. Содержание свободной кислоты вычисляют по разности между суммарной кислотностью элюата, полученного пропусканием раствора соли через катионит в Н-форме, и кислотностью, соответствующей расчетному содержанию катиона в растворе соли, определяемому заранее путем обычного анализа. [c.143]

Хроматографический анализ также осуществляется в определенной последовательности. В качестве примера рассмотрим разделение смеси катионов I— III аналитических групп (классификация по сероводородному методу) на катионите КУ-2 в Н+ форме, схема которого дана в приложении (схема IV). Разделение основано на различных свойствах фосфатов катионов. Обнаружение проводят в отдельных порциях элюата селективными реакциями. [c.202]

Так называется вариант хроматографического процесса, когда раствор смеси компонентов непрерывно подается на вход хроматографической колонки. На выходе ее в этом случае появляются один за другим несколько фронтов элюата. За первым из них следует чистый, быстрее других мигрирующий в данной системе компонент смеси, отличающийся, очевидно, наименьшим сродством к неподвижной фазе. Второй фронт отмечает добавление к нему следующего по подвижности компонента. За третьим фронтом следует уже смесь трех компонентов. В настоящее время по вполне понятным причинам фронтальный анализ почти вышел из употребления и применяется лишь в отдельных, специальных случаях. На нем мы более подробно останавливаться пе будем. [c.11]

Для извлечения вещества из какой-либо фракции после ТСХ с целью дальнейшего анализа или использования выскребают и отсасывают порошок сорбента из соответствующего пятна или вырезают само пятно и элюируют материал в малом объеме растворителя. Для пятен, вырезанных из пластиковых пластинок, объем элюента можно свести к минимуму, воспользовавшись хроматографической элюцией (рис. 159). Один конец пластмассовой полоски, на которой находится пятно вещества, срезают углом, а к противоположному концу скрепкой прикрепляют полоску фильтровальной бумаги. Последнюю закладывают между двумя предметными стеклами и погружают в чашечку с элюентом так, чтобы отогнутый вниз выступающий из стекол конец полоски с пятном направлял скапывающий с вершины угла элюат в микропробирку. [c.481]

Фронтальный анализ. По этому способу активным носителем заполняют колонку. Раствор полимера пропускают через колонку сверху вниз и собирают его на выходе из колонки (рис. 4.5),. Концентрация в элюате меняется в соответствии с собранным объемом и представляет собой последовательные фронты, что обусловлено различной адсорбцией молекулярных частиц на активном носителе (см. также гл. 23). [c.82]

Если требуется дальнейший анализ поступающего из газового хроматографа элюата, то возникает необходимость разделения его на отдельные компоненты. Это можно осуществить путем ис- [c.26]

Детальное описание оборудования для фронтального анализа выходит за рамки настоящей книги. Хроматографирование проводят в металлических колонках различной величины, наполненных очень мелкозернистым (но не порошкообразным) активированным углем. Разделяемый раствор продавливается через колонку под избыточным давлением. Для того чтобы под избыточным давлением газ не растворялся в растворителях и его пузырьки не нарушали ход хроматографии, действие сжатого воздуха или другого газа, как правило, передается на раствор через металлический поршень. Элюат поступает в прибор (так называемый интерферометр), позволяющий автоматически регистрировать небольшие изменения концентрации на основе измерения показателя преломления. Результаты измерения получают непосредственно в виде графика (см., например, рис. 342). [c.370]

Если ход хроматографии контролировать определением концентрации веществ в элюате, то результат анализа графически представляет ступенчатую кривую (рис. 343), каждая ступень которой соответствует индивидуальному компоненту хроматографируемой смеси, а последняя ступень — чистому вытеснителю. Высота отдельных ступенек в известной степени [c.371]

Чаще других селективных детектирующих устройств при изучении ГАС применяются, по-видимому, микрокулонометрические детекторы (1У1КД), основанные на титровании элюируемых веществ или продуктов их деструкции. Так, ]У[КД с прямым титрованием ионами Ag+ использован. при анализе состава меркаптанов, содержащихся в бензине [294]. Распределение индивидуальных меркаптанов, сульфидов, тиофенов в нефтяных дистиллятах исследовалось путем непрерывного сожжения элюата в токе инертного газа-носителя и микрокулонометрического титрования образующейся ЗОа иодом [295, 296]. При изучении состава азотистых компонентов фракции 200—400°С элюа.ты каталитически восстанавливались, и генерирующийся аммиак также определялся с помощью МКД 140]. [c.35]

Идентификация отдельных групп соединений возможна с помощью специальных детекторов, имеющих повыщенную чувствительность к данным соединениям. Так, кулонометрический детектор, действие которого основано на титровании продуктов сгорания элюата электролитическим бромом, может использоваться для анализа сернистых соединений. Электронозахватыый детектор имеет высокую чувствительность к фосфорным, галогенсодержащим соединеииям, обладающим бо/ ьшим сродством к электрону. [c.86]

Для проведения анализа 10 мл элюата переносят в мерную колбу емкостью 25 мл и добавляют к нему 5 мл этанола. Колбу помещают в лед и охлаждают 5 мин. Затем в нее наливают 1,0 мл раствора ферроцианида калия, хорошо перемешивают и охлаждают еще 5 мин. В конце этого периода добавляют 5 мл диазоти-рованного раствора и-нитроанилина и еще через 3 мин добавляют 1,0 мл 1 н. NaOH. Содержимое колбы встряхивают в течение 5 мин, ждут появления голубовато-зеленого окрашивания. [c.201]

Более совершенна с этих позиций классификация, разработанная в [ 24]. Здесь угловодородный состав нефти определяется по результатам разделения с помощью элюентной хроматографии после адсорбции нефти на активированном силикагеле группы углеводородов выделяются десорбцией последовательно изооктаном, бензолом и ацетоном. По выходу элюата нефти делятся на три класса, а каждый класс — на три группы по данным анализа и выходу бензина (табл. 3). [c.10]

Внутренние и внешние хроматограммы. Вопрос получения внутренних или внешних хроматограмм при разделении веществ имеет важное значение для последующего качественного и количественного определения веществ. Внутренние хроматограммы получают в случае разделения или идентификации веществ непосредственно на стационарной фазе. В этом случае прояви ление хроматограммы заканчивается прежде, чем подвижная фаза доходит до конца слоя сорбента. Если же элюирование продолжают до тех пор, пока вещество вместе с подвижной фазой не достигнет конца стационарной фазы, и исследуют затем небольшие порции элюата, то получают внешнюю хроматограмму при построении зависимости концентрации элюата от его объема, (мл). В случае окрашенных компонентов или при отличии свойств компонентов (различной радиоактивности, способности абсорбировать УФ- или ИК-излучение) от свойств стационарной фазы внутреннюю хроматограмму можно определить визуально или зарегистрировать на стационарной фазе. Хроматограммы такого типа получают в бумажной и тонкослойной хроматографии, отчасти и в колоночной. Бесцветные соединения можно проявлять, химическим путем. Качественный анализ веществ проводят, оценивая за медление передвижения анализируемого вещества относительно движения фронта растворителя. Для этого сравнивают путь, пройденный веществом, с путем, пройденным фронтом растворителя, и отношение между ними обозначают через [c.345]

При невозможности полностью идентифицировать элюат его делят на фракции и исследуют отдельно каждую фракцию. Такой же метод применяют при необходимости выделения отдельных компонентов смеси. Процессы разделения и идентификации фракций можно объединить. Фракции собирают в пробирки, расположенные обычно (а в серийных анализах обязатель- [c.353]

В простейшем варианте хроматографирование осуществляют на колонках, в которые помещают сорбент, служащий стационарной фазой. Раствор, содержащий смесь веществ, которые надо разделить, пропускают через колонку. Компоненты анализируемой смеси перемещаются через стационарную фазу вместе с подвижной фазой под действием силы тяжести или под давлением. Разделение осуществляется благодаря перемещению компонентов смеси с различной скоростью вследствие их взаимодействия с сорбентом. В результате вещества распределяются на сорбенте, образуя адсорбционные слои, называемые зонами. В зависимости от целей разделения или анализа могут быть разные варианты последующей обработки. Наиболее распространенный способ — элюирование. Через колонку с адсорбированными на ней веществами пропускают подходящий растворитель — элюент, который вымывает из колонки один или несколько сорбированных компонентов их затем можно определить в полученном растворе — элюате. Можно пропустить через колонку реагент-проявитель, благодаря которому сорбированные вещества становятся видимыми, т. е. слой сорбен- [c.107]

В колоночной (в том числе газовой) хроматографии по достижении положения, показанного на рис. 61, б, подачу подвижной фазы не прегфащают. Хроматографирование продолжают до тех пор, пока подвижная фаза выносит из колонки разделяемые вещества. Этот процесс называют элюированием, а выходящую из колонки подвижную фазу, содержащую разделяемые вещества, — элюатом. Элюат обычно контролируют на содержание разделяемых веществ с помощью датчиков, которые называют детекторами. Сигналы детекторов принимаются измерительными приборами и передаются к самописцам. Получают хроматограммы, подобные той, которая показана на рис. 61, в. Если на оси абсцисс отложено время, по хроматограмме можно определять время удерживания вещества в колонке. Для 81 это 1, а для 83 — 2 (отсчет времени ведется с момента ввода смеси разделяемых веществ). Часто все же по оси абсцисс откладывают не время, а объем элюата. Нулевая точка тогда соответствует выходу той порции подвижной фазы, в которую была введена смесь разделяемых веществ. Потом в элюате меняются концентрации разделяемых веществ в соответствии с различными степенями их удерживания. По полученной хроматограмме определяют объем удерживания. Для 81 это v , а для 83 = а-Время (объем) удерживания при постоянных условиях хроматографирования представляет собой величину, характерную для данного вещества. Поэтому наряду с другими методами обнаружения для идентификации веществ можно использовать значения времени (объема) удерживания. Количества же разделенных веществ пропорциональны площадям их пиков. Это используют для проведения количественных определений. Можно также собрать отдельные порции элюата и определить содержание в них разделяемых веществ с помощью подходящих методов количественного анализа. [c.258]

Вытекающий из колонки буферный раствор собирают в пробирки порциями по 1—3 мл. Регистрацию объема элюата, прошедшего через колонку, начинают с момента нанесения образца на колонку. Содержание белка во фракциях определяют спектрофотометрически при 280 нм. Оптическую плотность растворов, содержащих рибонуклеазу, определяют при 230 нм, голубой декстран — при 650 нм, цитохром с — при 412 нм. После окончания анализа колонку промывают несколькими объемами буферного раствора. Строят профиль элюирования отдельных белковых фракций. Для этого вычерчивают график, на горизонтальной оси которого откладывают номера пробирок (фракций) или объем прошедшей через колонку жидкости, а на вертикальной оси — величины оптической плотности фракций. [c.108]

Химический анализ элюатов с разных участков фореграмм показывает, что хром связан с подвижной фракцией. Передвижение его с макроанионами гуминовых кислот свидетельствует о прочной связи с ними и о том, что хром не несет функций катиона. Это заставляет предполагать о координировании хрома лигандами гуматных комплексов. Комплексный характер образующихся соединений доказывает также высокая устойчивость к действию кислот. Полного разложения можно достичь, лишь применяя сильные окислители. [c.117]

Хроматография является физико-химическим методом анализа, в процессе которого разделяемые компоненты исследуемой смеся распределяются между подвижной и неподвижной фазами. Смесь анализируемого газа с элюатом (газом-носителем) фильтруется через стационарный слой вещества, обладающего развитой поверхностью. [c.186]

Для решення первой из вышеперечисленных задач элюаты (воздух и аргон) подаются одновременно в соответствующие тракты. Расход элюатов поддерживается одинаковым (около 80 см мин). Анализ производится введением пробы анализируемых продуктов сгорания при помощи дозатора (шприца) пооче- [c.187]

В другой работе того же автора [538] для отделения алюминия от железа и титана анализируемый раствор с pH 1,5—2 после нагревания до 50—60° С и добавления нескольких капель HjOj титруют комплексоном III с индикатором сульфосалициловой кислотой. Оттитрованный раствор пропускают через катионит КУ-2 нли вофатит KPS-200. Титан н железо элюируют водой, затем алюминий десорбируют ЗЛ НС и в элюате определяют его титрованием избытка комплексона III раствором цинка в присутствии индикатора ксиленолового оранжевого прн pH 4,6. Метод использован для анализа цемента, глин, шлаков. [c.184]

Для анализа электрофореграммы разрезают на отрезки по 2 см, полисахариды с полученных отрезков элюируют водой, элюаты гидролизуют и углеводный состав гидролизатов определяют хроматографией на бумаге с растворителем пиридин— этилацетат—вода (1 5 5). Состав углеводов на хроматограммах, соответствующих отрезкам —6 электрофореграмм (рис. 26), дает возможность представитв распределение на электрофореграммах 4-0-метилглюкуроноарабоксилана и галактуроноарабогалактана. Наличие только двух пиков на электрофореграмме свидетельствует об однородности разделенных полисахаридов. [c.177]

Ряд количественных определений разделяемых веществ (аминокислот, сахаров, пуринов, красителей и т. д.) основан на элюировании пятна соответствующего вещества с бумаги с последующим анализом элюата колориметрически, спектрофотометрически и т. д. Иногда элюированное вещество подвергается ряду последующих операций для идентификации или установления его структуры. [c.476]

Для анализа фракций элюата можно использовать любые достаточно чувствительные аналитические методы, пригодные для серийной работы. В основном с этой целью в настоящее время используют колориметрию в видимой и ультрафиолетовой областях, измерение радиоактивности, хроматографию на бумаге или электрофорез, тонкослойную хроматографию и биологические испытания. Одним из наиболее быстрых способов анализа фракций является отбор аликвотов (5—20 мкл), которые наносят на бумагу и затем обнаруживают соответствующим реактивом (см., например, [85]). [c.563]

По первой схеме (рис. 513, а) аналитическая ячейка монтируется непосредственно в месте выхода элюата из колонки. В случае окрашенных веществ ячейка представляет собой фотоэлемент, в случае веществ с характеристической абсорбцией в ультрафиолетовом свете — монохроматор с фотоумножителем (например, шведский прибор Увикорд ), а в случае меченых веществ — счетчик Гейгера — Мюллера. Так как весь поток элюата проходит через ячейку, то некоторые неустойчивые вещества при этом могут разлагаться (в особенности при облучении ультрафиолетовым светом). По другой схеме (рис, 513, б) анализируемые бесцветные вещества Должны сначала прореагировать с соответствующим колориметрическим реагентом, который впускают в элюат при помощи насоса. На этом принципе был разработан метод для полного автоматического анализа аминокислот в микроколичествах [121]. В большинстве случаев эта схема непригодна для препаративной работы. [c.564]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология