Гаптены структура

Таким образом, специфичность комплексных антигенов обусловлена, как правило, всей структурой гаптенной группы, которая, следовательно, должна входить в [c.40]

Если размер гаптенной группы меньше, чем размер антигенной детерминанты, то участие конформационных изменений носителя в структуре доминанты более значи- [c.42]

Зависимость сенсибилизирующего действия полимеров от их состава и структуры дает основание для понимания механизма индукции иммунного ответа. В отличие от замкнутых инертных целей макромолекулы гаптенными свойствами обладают отдельные низкомолекулярные ингредиенты и активные радикалы, которые способны конъюгировать с белками организма с образованием комплексного антигена. Именно более высоким содержанием гаптенов можно объяснить, в частности, более выраженное сенсибилизирующее действие" поликонденса-ционных полимеров по сравнению с полимеризационны-ми. Тем не менее попытки распределения отдельных [c.139]

Еще более убедительные данные были получены при изучении реакций с конъюгированными антигенами, содержащими комплексные гаптены. На основании количественных исследований подавления реакции антител к простым гаптенам Хукер и Бойд [13, 14] сделали вывод, что на специфичность антител в некоторой степени влияют остатки тирозина или гистидина в белке, с которыми соединялись диазотиро-ванные амины. Это наводит на мысль, что антигенная детерминанта в конъюгированных антигенах не такая простая структура, как гаптен (фиг, 13). Ланд- [c.52]

В ряде случаев для определения частоты соматического мутагенеза необходимо исследовать огромное число клеток, экспрессирующих один и тот же V-ren. Практический подход для идентификации такой группы состоит в характеристике иммуноглобулинов, получаемых от серии клеточных линий, осуществляющих иммунный ответ на одинаковый антиген. (Используемые для этой цели антигены представляют собой маленькие молекулы, имеющие дискретную структуру, которая, по-видимому, обусловливает стойкий иммунный ответ. Они отличаются от больших белков, отдельные части которых могут стимулировать образование разных антител. Эти маленькие молекулы получили название гаптенов. Для того чтобы придать им свойства антигена, их соединяют с инертным белковым носителем. Иммунизируя таким антигеном мышь, получают реактивные лимфоциты, которые соединяют путем слияния с миеломными клетками для получения гибридом. Такие гибридные клетки продолжают независимый синтез желаемого антитела.) [c.515]

На примере таких белков, как лизоцим или миоглобин, было показано, что антигенные детерминанты представляют собой выпуклые части молекулы, которые могут входить внутрь активного центра антител. В случае бактериальных клеток в качестве антигенных детерминант часто выступают короткие цепочки из 3—5 остатков сахаров, образующие стенку бактерий. Низкомолекулярные соединения, например некоторые лекарства, сами по себе не могут вызывать образование антител. Их называют гаптенами. Однако после присоединения гаптенов к поверхности той или иной макромолекулы организм начинает вырабатывать на них антитела. Очевидно, что размеры гаптена могут быть меньше объема полости активного центра антитела, в результате чего происходит связывание гаптена только с частью специфических участков активного центра. Тем не менее, как показывает опыт, и в этих случаях антитела являются высокоспецифичными. В качестве примера можно привести структуру молекул двух гормонов — тироксина и тиро-нина [c.102]

Полисахариды. Полисахариды — весьма сложная по своему составу и строению группа антигенов, входящая в структуру стенок микроорганизмов и многих других клеток (например, эритроцитов) и определяющая их специфичность. Полисахариды входят в состав многих белков (гликопротеидов) и также играют роль антигенных детерминант. В большинстве случаев полисахаридные антигены представляют собой длинную цепь, к которой присоединены боковые короткие олигосахариды, содержащие 4—6 остатков сахаров, фактически являющиеся антигенными детерминантами. В одних случаях олигосахаридные группировки идентичны и тогда весь полисахаридный комплекс представляет собой чередующиеся антигенные детерминанты (аналогично гаптенам, присоединенным к белковой глобуле). В других случаях боковые цепи могут сильно различаться между собой. Как правило, в антигенную детерминанту входят остатки сахаров, расположенные на конце боковых цепей, содержащие заряженную группу (например, Ы-ацетил-глюкозамин), которая является иммунодоминантной группой. [c.15]

Структура н антигенная специфичность гаптенов определяется целым рядом факторов. В качестве гаптенов могут выступать са- [c.15]

Сильное влияние различных факторов на антигенную структуру и специфичность гаптенов, по-видимому, объясняется их ограниченными размерами и особенностями структуры активных центров антител. [c.17]

Знание антигенной структуры и специфичности гаптенов имеет важное значение для создания методов иммунохимического определения различных физиологически активных соединений, так как многие из них претерпевают различные биохимические превращения, в результате чего образуется группа близкородственных метаболитов. [c.17]

Подобного рода проблемы очень часто возникают, например, при разработке методов иммуноферментного анализа лекарственных препаратов, стероидных и белковых гормонов. В зависимости от способа получения антисыворотки антитела могут быть специфичны либо только к одному лекарственному препарату (гап-тену), либо к целой группе близких по структуре химических соединений. В этих случаях распространен способ оценки специфичности, основанный на сравнении связывания антител в данной концентрации (или в определенном разведении иммунной сыворотки) одного и того же количества гомологичного и гетерологичного гаптена. При этом концентрация образовавшегося иммунного комплекса для гомологичного гаптена принимается равной единице, а связывание всех гетерологичных гаптенов оценивается как доля от соответствующего связывания гомологичного гаптена. [c.37]

Как для белковых антигенов, так и для гаптенов установлены достаточно высокие значения констант скоростей ассоциации, приближающиеся к диффузионно контролируемому пределу (10 —10 М -с ). В случае белковых антигенов их значения приблизительно на 2 порядка меньше и колеблются от 5-10 до 5 10 М -с , что объясняется более сложной структурой антигенной детерминанты белковых антигенов. [c.51]

Эффект стерического исключения кофактора наблюдается не только для низкомолекулярных гаптенов, но и для более сложных по структуре молекул, например белкового гормона инсулина. [c.127]

Получение конъюгатов ферментов с гаптенами, содержащими углеводные остатки. Такие гаптены, как дигоксин, аденозин и другие, имеющие в своей структуре углеводные группировки, могут быть легко конъюгированы с ферментами путем их окисления перйодатом натрия до производных с альдегидной группой и последующим взаимодействием с ЫНг-группами фермента [c.196]

Рис. 15.17. Схематическое изображение растворимого комплекса двухвалентного антитела с двумя гаптенами и структуры предипитата, образованного антителом и дига1птеновы1М веществом.

Л. дают ряд характерных иммунологич. р-ций агглютинацию (склеивание) клеток, в т. ч, эритроцитов (отсюда синоним Л.-фитогемагглютинины, к-рый используют обычно применительно к Л. фасоли), преципитацию (осаждение) гликопротеинов и полисахаридов, подавление активности Л. гаптенами (углеводами). Нек-рые Л. вызывают избирательную агглютинацию злокачеств. опухолевых клеток, что указывает на различие в структуре пов-стей последних и нормальных клеток. [c.585]

Устройство ввода на основе решетки позволяет завести свет в световод. Решетка —это периодическая структура (например, треугольная, пилообразная, синусоидальная) (рис. 7.8-21), которая нанесена на поверхность световода. Когда свет падает на решетку он возбуждает в световоде проходящую моду в зависимости от периода решетки. Чтобы усилить эффект изменения показателя преломления на границе раздела, изменения, происходящие на поверхности решетки, надо перенести на световод. Например, на рис. 7.8-21 свет, падающий вблизи устройств ввода, будет возбуждать проходящие моды, зависящие от показателя преломления окружающей среды. В этом варианте поверхность становится чувствительной к тонким изменениям показателя преломления. Этот вариант, следовательно, подходит для проведения безметочного иммунного анализа, поскольку связывание между иммобилизованным антителом и антителом пробы дает большую плотность этих молекул на расстоянии порядка длины волны вглубь от поверхности (заметьте, что глубина проникновения света составляет величину порядка длины волны, уравнение 7.8-34) и, таким образом, приводит к изменению показателя преломления. Например, конкурентный иммунный анализ можно применить для определения пестицидов, при этом на модифицированной аминосиланом поверхности устройства связи ковалентно иммобилизован триазиновый гаптен, а связывание антитела детектируют за счет измерения угла несвязывания [7.8-53, 7.8-54]. Чтобы детектировать присутствие триазиновых пестицидов, пробу следует предварительно выдержать с антителами, а затем — перенести к иммобилизованному гаптену. Очевидно, чтобы обеспечить невмешательство пользователя в эту процедуру анализа, в устройстве должен быть предусмотрен этап выдержки. [c.559]

Методом электронной микроскопии была изучена структура комплекса АТ с соответствующим бифункциональным динйтрофе-нильным гаптеном (ДНФ) [c.124]

Результаты рентгеноструктурного анализа кристаллов с антигенной детерминантой (гаптеном), присоединенной к антиген-связывающим участкам, позволили установить, как именно (в ряде конкретных случаев) гипервариабельные петли Ь- и Н-вариабельных доменов кооперируются и образуют одну обширную антиген-связывающую поверхность. Размеры и форма каждого отдельного участка варьируют в зависимости от конформации полипептидной цепи в гипервариабельных петлях, которая в свою очередь зависит от последовательности боковых цепей аминокислот, содержащихся в этих петлях. Таким образом, хотя общие принципы структуры антител сейчас уже понятны и даже определена детальная структура нескольких антиген-связывающих участков, мы, вероятно, никогда не будем зиать конкретных деталей в миллионах других случаев. [c.36]

Антигенами обычно являются высокомолекулярные соединения — белки и полисахариды, однако и многие низкомолекулярные соединения ( г а н т е н ы ), присоединенные к белкам, становятся антигенами. Классич. исследования К. Ландштейнера таких конъюгированных антигенов показали, что антигенные свойства гаптенов в сильной мере определяются природой и положением полярных радикалов в их структуре. Например, в исследовании, приведенном в таблице, для реакции была взята сыворотка, в к-рой присутствуют антитела, образовавшиеся при введении животным комплекса, содержащего j№-H2N jH4 OOH и ж-Н.21ЧСбН480зН. При добавлении к этой сыворотке различных аминов были получены след, результаты [c.111]

В книге обобщены материалы по изучению аллергии к промышленным химическим соединениям. На основании данных современной литературы и собственного многолетнего опыта авторы высказывают оригинальное суждение по ряду теоретических и прикладных аспектов проблемы. В книге дано представление оо иммунных механизмах различных типов аллергических реакций, о химической структуре и конкуренции гаптенов и полных комплексных антигенов, об иммунологической толерантности и гипосенсибилнзации к химическим аллергенам. Освещены приемы выявления сенсибилизирующего действия промышленных химических соединений, сложных и полимерных продуктов, методы определения опасности контакта с ними в условиях производства и в повседневной жизни, принципы установления их гигиенического норматива. Представлены методы специфической диагностики аллерго-зов химической этиологии и методы применення промышленных химических аллергенов при постановке кожных, провокационных, клеточных и серологических тестов. Рассмотрены возможные всходы сенсибилизации к промышленным химическим аллергенам. [c.2]

Это центральное положение клонально-селекционной теории иммунитета долгие годы вызывало большие дискуссии. Была понятна предтерминированность к антигенам, с которыми организм встречался в процессе филогенеза, но возникали сомнения действительно ли есть Т-лимфоциты с рецепторами к новым (синтетическим и химическим) антигенам, возникновение которых в природе связано с развитием технического прогресса в XX веке. Однако специальные исследования, проведенные с помощью наиболее чувствительных серологических методов, выявили у человека и более чем у 10 видов млекопитающих нормальные антитела к ряду химических гаптенов — динитрофенилу, З-йод-4-оксифенилуксусной кислоте и т. д. [118]. По-видимому, трехмерные структуры рецепторов действительно весьма разнообразны, и в организме всегда может найтись несколько клеток, рецепторы которых достаточно близки к новой детерминанте. Возможно, что окончательная притирка рецептора к детерминанте может происходить после их соединения в процессе дифференцировки Трлимфоцитов в Тг-лимфоциты после встречи со своим антигеном Тр клетка путем одного — двух делений превращается в ан-тигенраспознающую и активированную (коммитирован-ную, примированную по терминологии разных авторов) антигеном долгоживущую Тг-клетку. Тг-лимфоциты способны к рециркуляции, могут повторно попадать в тимус, чувствительны к действию анти-0-, антитимоцитарных и антилимфоцитарных сывороток. Эти лимфоциты составляют центральное звено иммунной системы. После образования клона, т. е. размножения путем деления в морфологически идентичные, но функционально неоднородные клетки, Т-лимфоциты активно участвуют в формировании иммунного ответа. [c.8]

В табл. 1 приведены данные об отвечаемости морских свинок разных линий на некоторые детерминанты используемых в экспериментах разными авторами конъюгатов и гаптенов. Следует заметить, что для развития иммунного ответа достаточно, чтобы конъюгат имел хотя бы одну детерминанту, не запрещенную генетическим контролем. При этом не имеет значения, будет ли эта детерминанта входить в структуру гаптена или носителя. Так, например, на конъюгат динитрофенила с сополимером 1-глутамина и 1-лизина (ДНФ-1-Глу-1-Лиз) отвечают животные как линии 13 (ответ на ДНФ), так и линии 2 (ответ на Лиз). Этот факт интересен также тем, что подтверждает относительность роли носителя в распознавании Т-лимфоцитами комплексного антигена. Для животных линии 13 безответность на детерминанту носителя обусловлена генетическим контролем, вследствие чего какой-либо внутримолекулярной конкуренции не происходит и распознается гаптенная детерминанта. [c.18]

Поскольку конформация антигенной детерминанты стабильна, гаптен, тем более если он входит в иммунодоминанту, должен также иметь стабильное, т. е. жесткое, строение. Действительно, в молекулу многих химических аллергенов входят жесткие кольцевые структуры. Алифатические же цепи, не обладающие жесткой структурой, оказывают соответственно меньшее влияние на специфичность химических гаптенов и их комплексных антигенов и в химических аллергенах обычно составляют лишь часть молекулы. [c.33]

Из приведенных в табл. 4 данных видно, что включение в параположение к реакционноспособному атому I радикала, усиливающего способность вещества конъюгировать с белком, приводило к усилению и его аллергенной активности. Важно, что такой эффект можно было наблюдать не только при включении радикалов, самих по себе обладающих гаптенными свойствами — фенила и гексила, но и при включении инертного в аллергенном плане — метильного радикала. В то же время изменения в структуре молекулы, приводящие к понижению способности соединяться с белком (замена атомов хлора бромом или метоксигрупнами), способствовали уменьшению сенсибилизирующей активности вплоть до полной ее потери при исключении реакционноспособных радикалов (в ФДМП). [c.36]

Если химический аллерген не обладает жесткой структурой (алифатические цепи, эпоксидные и альдегидные группы и т. д.), то он вряд ли может сам по себе обеспечить стабильность гаптенной иммунодоминанты. По-видимому, в этом случае стабильность конформации имму-нодоминанты и всей детерминанты обеспечивается носителем и специфичность их обусловлена присоединением гаптена в строго определенном участке молекул различных белков (рис. 4, г). При этом довольно вероятно, что новая детерминанта замещает детерминанту носителя. Так, хорошо известно, что формалинизация белков приводит к потере их видовой специфичности (см. главу 4). Формально такие нестабильные гаптены являются дена-тураторами белка. Однако денатурированный под влиянием химического соединения белок достаточно строго специфичен, и, следовательно, вполне правомерны такие термины, как ГЗТ или антитела к формальдегиду, эпоксидным соединениям и т. д., хотя, безусловно, их специфичность менее строгая, чем специфичность гаптенов, обладающих жесткой структурой. [c.46]

Способность таких своеобразных денатураторов белка индуцировать образование специфичной только для них детерминанты отличает их от неспецифичных денатураторов, вызывающих образование аутоантигенов. Аутоаллергические реакции развиваются при действии солей тяжелых металлов, перекисей, растворителей, щелочей, кислот и т. д. Эти соединения считать гаптенами неправомерно, так как специфичность денатурационных детерминант будет определяться не включением в ее структуру действующего химического соединения, а сте- [c.46]

В заключение остановимся на реакции химических гаптенов и комплексных антигенов с химической детерминантой с антителами. Известно, что взаимодействие антигена с антителом обусловливается силами, действующими только на очень близком расстоянии. Так, например, активный центр антитела превосходит по своим размерам гаптенную детерминанту всего на 0,3—0,5 нм. На таком расстоянии связь мож т быть обусловлена гидрофобным взаимодействием, электростатическими силами, силами ван дер Ваальса, водородными связями или диполь-дипольным взаимодействием. Каждому гаптену в зависимости от его структуры свойственны те или иные типы связей (табл. 8). При взаимодействии антител против р-азобензойной кислоты со специфичными антителами константа связывания равна 1,0. Если уменьшить (замена гексилом) или полностью исключить (замена ме-тильной группой) гидрофобные взаимодействия, обусловленные бензольным кольцом, то константа связывания уменьшается в 500—1000 раз. Если ослабить электростатические силы, связанные с отрицательным зарядом карбоксильной группы, введением добавочных радикалов в бензольное кольцо или заменой карбоксила на АзОз, то константа связывания также уменьшается в 7—1000 раз. [c.47]

Аллергенная активность полимеров зависит не только от взаимоотношения содержащихся в них свободных аллергенных ингредиентов, но и от структуры полимерных композиций и, в частности, от распределения активных групп по поверхности макромолекулы. Так, по данным экспериментальных исследований Ш. 3. Загидуллина (1970), выполненных в нашей лаборатории, установлена определенная зависимость аллергенной активности эпоксидных соединений от количества свободных эпоксидных групп, т. е. гаптенных детерминант. Так, эпихлоргидрин — моноэпоксидное соединение — явился более слабым аллергеном по сравнению с диэпоксидными смолами ДЕГ-1 и ЭД-5 (1,8 и 0,7 балла), а различная аллергенная активность последних связана с количеством свободных эпоксидных групп (134,8 и 66,6 мкмоля). Эпок-сифурфуриловый эфир, хотя и является моноэпоксидным соединением, содержит довольно много свободных эпоксидных групп (148-мкмоль) и, кроме того, активное фурановое кольцо, что и определило его выраженное сенсибилизирующее действие (2,2 балла). В отношении сложного эпоксидного компаунда ЭПМ отчетливо проявляется синергизм действия содержащихся в нем моно- и диопоксидных соединений (ЭФ, ДЕГ и ЭД-5), в связи с чем его сенсибилизирующее действие достигало по результатам тестирования кожи 3,2 балла. В то же время компаунд ЭПМ с отсутствием свободных эпоксидных групп за счет их полного включения в структуру макромолекулы вообще не является аллергеном. [c.139]

Весьма характерно, что молекулы антител, содержащихся в антисыворотках, не отличаются абсолютным подобием. Они различны по силе реакции с данным гаптеном и по специфичности. Это легко показать в нашем случае, если вначале добавлять к ан-тиметаниловой сыворотке белок, к которому присоединен один из перекрестно реагирующих гаптенов, до тех пор, пока не прекратится реа1 ,ия, а затем прибавить к обработанной сыворотке гомологичный или другой родственный гаптен. Для того чтобы в смеси не осталось растворимых комплексов антиген — антитело, сыворотку можно обработать гаптенами, присоединенными к нерастворимым структурам (строме), остающимся после лизиса эритроцитов и удаления гемоглобина. Сыворотка, обработанная с целью удаления всех антител, способных реагировать с данным антигеном, называется адсорбированной (истощенной). Вот результаты таких опытов [23] (схема IV) [c.22]

Основные результаты по изучению термодинамических констант для реакции Ат—Аг и Ат—Г (гаптен) приведены в табл. 34. Структура некоторых гаптенов приведена на схеме XXXIII. [c.169]

Мы будем интересоваться только одной стороной иммунологической реакции — синтезом -глобулина в организме животного. В стороне останутся многие важные вопросы этого явления. Так, мы не коснемся проблем химии иммунитета. В настоящее время известно множество химических соединений, главным образом ароматических и гетероциклических, которые, будучи химически присоединены к белкам посредством реакционноспособных функциональных групп, вызывают образование в организме животного специфических антител, настроенных на структуру им.енно тех соединений,- с помощью которых образованы антигены. Те соединения, которые способны образовывать с белками-носителями антигены, носят название гаптенов. Типичньши гаптенами являются полисахариды, входящие в состав оболочки бактерий. После образования антител к белкам, несущим на себе гаптенные группы, антитела могут реагировать уже не с исходными антигенами, а с чистыми гаптенами, т. е. с низкомоле-кулярными веществами. Гаптенные вещества, их химизм и специфичность — все это составляет существенную часть иммунологии, которо мы не будем касаться. Другой аспект иммунологии — физиологический. В число реакции иммунитета входят острые физиолюгические реакции организма как целого, нанример анафилактический шок, или сложные реакции ряда белков крови, [c.502]

Для получения информации о связи химического строения с иммунологической специфичностью в системах углевод — антиуглевод применяют следующие типы иммунологических исследований а) количественное осаждение близкородственных полисахаридов гомологичными антисыворотками с последующим построением кривых осаждения [9, 10] б) количественное осаждение гетерологичными или перекрестно реагирующими антисыворотками [11 — 13] в) ингибирование осаждения в гомологичных или перекрестно реагирующих системах олигосахаридами или простыми сахарами [6—8, 11] г) специфическое связывание олигосахаридов с антителом, определяемое методом равновесного диализа [14] д) связывание комплемента и ингибирование связывания комплемента [15, 16] е) получение искусственных антигенов с углеводными детер-минантными группами конденсацией простых сахаров известного строения с белками через азофенильную группу и сравнение специфичности появляющихся антител с известными изменениями в структуре введенных групп [17, 18] или использование, гаптенного ингибирования для выяснения специфичности антисыворотки [19—22]. [c.431]

Гаптенное ингибирование представляет собой достаточно простой метод определения относительной стабильности приципитатов, образованных конканавалином А и рядом полисахаридов. Мерой стабильности служит число микромолей метил-а-в-маннопиранозида, вызывающее 50%-ное ингибирование реакции преципитации с данным полисахаридом. Стабильность преципитатов, несомненно, связана с такими особенностями структуры молекулы полисахарида, как природа и относительное количество терминальных невосстанавливающих гликозильных остатков, а также длина боковых цепей. Если боковые цепи полисахарида содержат по одному моносахаридному остатку, комплекс конканавалина А с этим полисахаридом очень легко диссоциирует под действием метил-а-о-маннопиранозида. [c.96]

Антигенная специфичность гаптенов сильно зависит от их химической структуры. Так, введение дополнительных групп может сильно исказить антигенный портрет того или иного соединения. Например, тироксин и трийодтиронин отличаются только одним остатком I, чего вполне достаточно, чтобы антитела против этих гормонов сильно различались перекрестной реактивностью. Классическими примерами стали исследования с пара-, орто- и мета-аминобензойной кислотами, которые практически не дают перекрестных реакций при сопоставимых концентрациях. [c.16]

На антигенную специфичность сильное влияние оказывают аминокислотный остаток белка носителя, к которому пришит гап-тен, а также молекулярные размеры гаптена. Так, в длинных оли-гопептидных гаптенах замена аминокислотных остатков, которые расположены близко к белку-носителю, оказывает меньшее влияние, чем в коротких. Напротив, замены в удаленных от носителя аминокислотных остатках оказываются драматическими для антигенной структуры независимо от размеров гаптена. Аналогичны [c.16]

Антигенная специфичность гаптенов зависит не только от их химической структуры, но и от способа пришивки к белку-носителю, в частности от того, какая функциональная группа гаптена была использована для конъюгирования. Часто, при получении конъюгатов для иммунизации гаптены пришивают не непосредственно к молекуле белка-носителя, а через пространственную ножку , содержащую обычно 4—6 углеродных атомов. В этом случае сама ножка в комплексе с гаптеном выступает в качестве составной антигенной детерминанты и образующиеся антитела могут обладать меньшей эффективностью связывания с нативным гаптеном, чем с таким связанным через ножку гаптеном. [c.16]

В некоторых видах иммуноферментного анализа в качестве одного из реагентов используют гаптен, меченный ферментом. Если связывание в таком конъюгате аналогично способу пришивки в конъюгате гаптена с белком-иосителем для получения антител, то говорят, что в анализе используют гомологичные антитела. Если же структура ножки и способ пришивки гаптена в обоих случаях различны, то говорят о гетерологичных антителах. Применение того или иного вида антител или конъюгатов в нммунофер- [c.16]

Весьма существенным фактором для специфичности является химическая структура <иножки , в частности ее длина и ближайшее окружение гаптена. Все эти моменты крайне важно учитывать при разработке методов иммунохимического анализа гаптенов. [c.17]

На практике данный подход был реализован на примере многих низкомолекулярных антигенов и других ферментов — малатдегидрогеназы печени свиньи и глюкозо-6-фосфатдегидрогеназы, и также известен под названием EMIT . Используют конъюгаты ферментов с гаптенами, которые незначительно отличаются по активности от нативного фермента. При взаимодействии с антителами против гаптена в молекуле фермента происходят конформационные изменения, затрагивающие структуру активного центра, в результате чего ферментативная активность сильно падает. Введение в реакционную систему свободного антигена приводит к уменьшению концентрации комплексов конъюгат—антитело, а сдедовательно, измеряемая активность при увеличении концентрации анализируемого соединения также возрастает. [c.117]

Различия в молекулярной структуре чистых химичеошх соединений могут быть обусловлены присутствием изомеров, связывание которых с белками плазмы может происходить иначе, чем у гаптенов, обладающих только нативной пространственной конфигурацией. В этом случае при приготовлении стандартов не помогает и добавление экзогенного стероида к сыворотке. Кроме того, отношение связанного с белком и свободного определяемого вещества может изменяться в зависимости от условий анализа, например pH или ионной силы. Наконец, небольшие различия в методах выделения определяемого вещества из физиологических жидкостей могут быть источниками разброса и систематической ошибки результатов анализа. [c.27]

Приведенные в разд. 3.2 данные о сходстве антигенного строения активных центров ряда изученных к настоящему времени рецепторов, с одной стороны, и антител к тем же лигандам — с другой, согласуются с изложенной выще гипотезой. Однако оставался вопрос, на который еще не было получено ответа. Как известно, гормоны белковой природы (например, инсулин) и еще более сложные по строению белки, каким является lq-компо-нент комплемента, имеют различные по строению антигенные детерминанты. При изучении рецепторов нелимфоидных клеток, распознающих такие сложные по строению лиганды, как перечисленные белки, невозможно достаточно простыми средствами строго доказать, действительно ли одни и те же структуры в молекуле лиганда распознаются клеточным рецептором и антителами к тому же лиганду, так как к каждой антигенной детерминанте этого лиганда образуется особое по специфичности антитело. При сравнении строения активных центров рецептора сложного по строению лиганда, с одной стороны, и антитела к одной из детерминант этого лиганда — с другой, недостаточно установить факт конкуренции за лиганд рецепторного белка и антиидиотипического антитела. Следует считаться с тем, что рецептор через свой активный центр может распознать значительно больший по величине участок молекулы лиганда, нежели активный центр сравниваемого антитела. Антиидиотипическое антитело и в этом случае может создать стерическое препятствие для связывания рецептором лиганда. Вот почему для более строгого доказательства обсуждаемой гипотезы необходимо обнаружить на нелимфоидных клетках рецепторы, способные распознавать простые по строению гаптены, и изучить строение активных центров таких рецепторов, сопоставив его со строением активных центров антитела к тому же простому гаптену. [c.53]

Другие эксперименты указывают на существование в -бел-ках, распознающих гаптены, антигенных детерминант, которые взаимодействуют с антителами против антител к соответствующим гаптенам, т. е. с антиидиотипическими антителами. Эти данные хорошо согласуются с результатами изучения рецепторов к таким белковым лигандам, как инсулин и lq. В своей совокупности они могут означать, что антитела и рецепторы нелимфоидных клеток, распознающие идентичные структуры в лигандах, сходны по идиотипу, т. е. по строению гипервариабельных участков вариабельных районов их полипептидных цепей. Кроме [c.56]

Для точной оценки структуры детерминантной группы синтезируют гаптены. В рассматриваемом примере гаптеном послужит конъюгат тирозина с сульфаниловой кислотой Такой гаптен не преципитирует антител, но, соединяясь с ними, блокирует активные центры. В результате антитела утратят способность взаимодействовать с тест-антигеном. Реакция ингибирования — эффективный метод тестирования антител против простых по химическому строению гаптенов. [c.24]

Реакцию низкомолекулярного гаптена с антителами можно оценить с помощью прямых реакций, сргди которых наибольшее применение получил метод равновесного диализа (см. гл. 12). Полученные в эксперименте данные позволяют рассчитать константу равновесия (Д) в системе гаптен-антитело (см. гл. 4 и 12). Если определять величины константы равновесия при реакции антител к определенному конъюгированному антигену с рядом сходных по строению гаптенов, можно оценить вклад каждого радикала в структуру детерминантной группы. При этом удобно сопоставлять сродство к антителу какого-то аналога детерминантной группы со сродством наиболее близкого к ней по строению гаптена ре-ференс-гаптен). Таким способом получают относительную величину константы связывания Кот) Дотн= = Кх/Кр.г, где Кх — константа связывания исследуемого аналога, Кр.г — константа связывания референс-гаптена. [c.24]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология