Компоненты хроматографической системы

Адениловые нуклеотиды переходят в раствор при обработке тканей хлорной или трихлоруксусной кислотой. Белки при этом денатурируют. В безбелковом экстракте компоненты адениловой системы разделяют хроматографическими и электрофоретическими методами. [c.183]

Следует подчеркнуть, что разделение веществ в любой хроматографической системе основано на распределении компонентов между подвижной и неподвижной фазами на всем протяжении системы. Поэтому скорость перемещения подвижной фазы должна быть не слишком большой. Ясно, что при очень высокой скорости перемещения жидкости или газа относительно сорбента большая часть компонентов вообще не успеет сорбироваться и разделения не получится. [c.342]

Качественно новые свойства могут приобретать хроматографические системы, в состав которых введен динамический модификатор. Под этим термином мы понимаем такое соединение (К), которое постоянно поступает в колонку вместе с подвижной фазой и, находясь в динамическом равновесии с другими компонентами системы, радикальным образом изменяет механизм сорбции, а также ведет к качественному изменению селективности системы. [c.168]

КОМПОНЕНТЫ ХРОМАТОГРАФИЧЕСКОЙ СИСТЕМЫ ИОНООБМЕННИКИ Материалы матриц [c.250]

Предположим, что относительное удерживание двух соседних компонентов равно 1. Это может быть в том случае, когда Гд J =, т. е. компоненты не разделены. Таким образом, если о = 1, то использованная для разделения данных компонентов хроматографическая система не селективна и в этих условиях компоненты не могут быть разделены. Чем вьппе селективность (чем а больше 1) колонки, тем лучше разделение двух компонентов. Однако принято считать, что не следует добиваться а> 10, так как такая высокая селективность требует значительного времени для разделения. [c.8]

По окончании процесса ТСХ разделения полосы анализируемых веществ не выводятся из хроматографической системы (слоя), поэтому после удаления растворителя можно осуществить дополнительное разделение, применив растворитель с иными свойствами [144, 146, 149 и др. ]. Специфической особенностью ТСХ является возможность дифференциации соединений в двух направлениях поочередно (двумерная ТСХ). При этом, используя соответствующие системы растворителей, можно достичь значительно более полного разделения компонентов смеси, реализуя различия в свойствах различных адсорбентов (например, силикагеля в одном и алюмогеля — в другом направлении [138]) или даже различных механизмов сорбции (например, проводя адсорбционное разделение в одном и эксклюзионное в другом направлении [153-155]). [c.20]

В газожидкостных системах основным фактором, определяющим удерживание компонента в колонке, является энтальпия растворения, а н газоадсорбционных системах — энтальпия адсорбции. Фазовое равновесие в данных системах описывается изотермой сорбции (адсорбции или растворения). Для приготовления высокоэффективных колонок выбор хроматографической системы [c.225]

Поглощение компонентов смеси неподвижной фазой часто называют собирательным термином — сорбция, а саму неподвижную фазу — сорбентом. Сорбент, равно как и состав подвижной фазы при жидкостной хроматографии, подбирается для каждой задачи таким образом, чтобы все разделяемые компоненты достаточно сильно различались по скорости перемещения и используемой хроматографической системе. [c.340]

Хроматография — это метод разделения и анализа смесей веществ, основанный на различном распределении их между двумя несмешивающимися фазами — подвижной и неподвижной. При контакте с поверхностью неподвижной фазы (НФ) компоненты смеси распределяются между подвижной (ПФ) и неподвижной фазами в соответствии с их свойствами (адсорби-руемостью, растворимостью или др.). Устанавливается динамическое равновесие, вследствие чего молекулы разделяемой смеси часть времени находятся в НФ, а часть — в ПФ. Вдоль хроматографической системы движутся только те молекулы, которые находятся в ПФ. Разные вещества обладают различным сродством к подвижной и неподвижной фазам. Вещество, сильнее взаимодействующее с НФ, будет медленнее двигаться через хроматографическую систему по сравнению с веществом, слабее взаимодействующим с этой фазой. [c.580]

Количественной характеристикой поведения компонента в хроматографической системе может служить время пребывания его в системе от момента начала элюции до момента выхода из колонки, называемое временем удерживания. Эта величина для некоторого вещества зависит как от химической природы используемой системы, так и от размеров колонки и скорости тока элюента. В то же время в стандартизированных условиях оно является количественной характеристикой компонента и может использоваться для его обнаружения в анализируемой смеси. [c.342]

Препаративная хроматография имеет своей целью получить некоторые или все компоненты разделяемой смеси в очищенном виде для дальнейшего исследования или использования. В этом случае каждая из разделенных зон после выхода из хроматографической системы должна попасть в отдельный приемник. При наличии непрерывного контроля за выходящей из системы подвижной фазой можно менять приемники после окончания выхода из системы каждой зоны. При жидкостной хроматографии, особенно при разделении очень сложных смесей биополимеров, для обнаружения компонентов приходится проводить специальный анализ проб выходящего из колонки элюата. В этом случае целесообразно собирать элюат в отдельные небольшие фракции и после анализа содержимого каждой из фракций объединять те, которые содержат интересующие экспериментатора вещества, и подвергать их последующей обработке. [c.343]

Использование химического вычитания в одном из звеньев хроматографической системы для селективного удаления растворителя, основного вещества или мешающих компонентов, маскирующих зоны определяемых соединений, давно уже нашло широкое распространение в газохроматографическом анализе примесей. На рис. JII.10, например, представлены хроматограммы раствора ароматических углеводородов в уксусной кислоте, зарегистрированные без использования и с использованием приема вычитания растворителя (уксусной кислоты) щелочью в фор-колонке. [c.193]

По механизму разделения хроматографии на бумаге является распределительной. Метод основан на различии в коэффициентах распределения между двумя несмешивающимися фазами. Неподвижная фаза в этом случае удерживается в порах специальной хроматографической бумаги, которая служит носителем. Подвижная фаза продвигается вдоль листа бумаги, главным образом благодаря капиллярным силам. Для количественной оценки подвижности веществ в хроматографической системе используют параметр равный отношению скорости движения зоны определенного компонента к скорости движения фронта подвижной фазы. Значения определяют как и в ТСХ. На подвижность веществ в условиях хроматографии на бумаге влияет не только коэффициент распределения, но и взаимодействие их с волокнами, условия проведения эксперимента и характеристика бумаги. Мето- [c.614]

Наиболее ярко процессы структурообразования проявляются при изучении механических свойств битумов, например пр1. сдвиге тонкого слоя битума, заключенного между двумя плоско-парал-лельными пластинками, одна из которых закреплена неподвижно, а другая сдвигается под действием приложенного напряжения [134], При этом исследования целесообразно проводить не на реальных битумах, а на специально приготовленных модельных системах [43, 45, 46], в которых влияние каждого компонента битума можно изучить в чистом виде. Каждый компонент модельной системы получают путем адсорбционно-хроматографического разделения битумов на силикагеле. [c.49]

Для получения наиболее эффективной хроматографической системы необходимо разумно выбрать отдельные компоненты и их сочетание (см. гл. 8), и соединить их в соответствии с блок-схемой прибора (см. рис. 8.1). Ниже описаны особенности [c.180]

Наиболее типичные ошибки при сборке хроматографической системы чаще всего обусловлены неверным выбором ее узлов, и соединителей. Неожиданно низкая эффективность колонки при проверке в стандартных условиях почти всегда указывает на наличие большого мертвого объема какого-нибудь из компонентов в критической области. [c.188]

Хроматограмма - наглядное изображение результатов разделения компонентов исходной смеси в планарной хроматографической системе (в тонком слое сорбента, на бумаг с и т.д.). [c.13]

Чистота меченого соединения доказывается обнаружением только одного максимума в различных хроматографических системах. Величина площади, ограничиваемой кривой графика, соответствует величине активности соответствующих веществ. Непосредственно из графика можно определить соотношение активностей отдельных компонентов. Если известна общая активность нанесенного образца или применен стандарт, то можно определить и абсолютную активность отдельных компонентов. [c.675]

Протекание процесса обмена определяют посредством планиметрического расчета радиохроматограмм проб, отобранных из реакционной смеси через соответствующие интервалы времени. При использовании соответствующей хроматографической системы можно с очень небольшим количеством вещества в одном опыте количественно изучить протекание обмена и деструкции изучаемого вещества в данных условиях. Хроматографическую систему выбирают таким образом, чтобы происходило полное разделение исходных веществ и продуктов реакции. После хроматографирования пробы, отобранной из реакционной смеси, хроматограмма просчитывается на соответствующем приборе с автоматической регистрацией. Планиметром находят площади, описанные кривыми изучаемого вещества и источника обмениваемого радиоизотопа. Отношение этих площадей соответствует отношению общих активностей компонентов. Таким образом можно непосредственно установить, какая доля исходной радиоактивности вступила в изучаемое вещество, что достаточно для определения степени обмена [57]. [c.688]

При проявительной хроматографии в колонку, заполненную адсорбентом и продуваемую неадсорбируемым газом-носителем, вводят образец исследуемого адсорбтива. Скорость перемещения адсорбированного компонента по колонке зависит от равновесных и кинетических показателей системы. Спустя некоторое время после ввода пробы детектор, установленный на выходе газа из колонки, зарегистрирует нарастание концентрации адсорбтива, характеризуемое хроматограммой или, если проба состоит из одного компонента, хроматографическим пиком. [c.40]

Неподвижная фаза — в газовой хроматографии это фаза, определяющая селективные взаимодействия между компонентами пробы и хроматографической системой. Неподвижная фаза представляет собой полимерную жидкость или твердый адсорбент. [c.134]

Степень разделения R — способность хроматографической системы разделять "критическую пару" (т. е. два наиболее трудно разделяемых компонента). [c.134]

Хроматография позволяет не только разделять компоненты смеси, но и определять ее качественный и количественный составы, поскольку положение хроматографического пика на хроматограмме (удерживаемый объем, время удерживания) дпя данной хроматографической системы характеризует природу вещества, а площадь, ограниченная этой кривой и нулевой линией детектора (хроматографический пик) пропорциональна количеству данного вещества, прошедшего через детектор. [c.288]

Важнейшей частью хроматографической системы является хроматографическая колонка, заполненная неподвижной фазой, через которую протекает подвижная фаза и в которой происходит разделение смеси на индивидуальные компоненты. Пробу вводят в колонку при помоши специального устройства ввода, а разделенные [c.46]

Коэффициенты к (От) и а рассчитывают на основе хроматограммы, как показано на рис. Л. Пик неудерживаемого вещества служит маркером, который проходит через хроматографическую систему без какого-либо существенного взаимодействия с неподвижной фазой. Объем подвижной фазы, необходимый для элюирования этого компонента в колонке Ум, или мертвый объем, равен объему подвижной фазы, содержащейся в хроматографической системе, начиная от точки ввода пробы до точки детектирования, причем учитываются объем дозатора, насадки колонки (между и внутри частиц), конца колонки, соединительных трубок и объем ячейки детектора. Объемы удерживания VI и Уа соответствуют объемам подвижной фазы, требуемым для элюирования компонентов 1 и 2 из колонки, измеренным от точки ввода до максимума соответствующего пика. Каждый пик на хроматограмме представляет непосредственно или опосредованно концентрацию растворенного вещества подвижной фазы в точке детектирования на небольшом (но иногда важном) расстоянии от выхода из хроматографического слоя (см. разд. 1.7). [c.21]

На линейную емкость адсор нта оказьшают влияние и другие компоненты хроматографической системы, т. е. элюент и разделяемый образец. При наличии гетерогенности поверхности адсорбента линейная емкость зависит от адсорбируемости компонента чем ошьнее он адсорбируется, тем меньше линейная емкость(чем больше к, тем меньше 0о,1)-Использование более сильного элюента уменьшает Л образца и, следовательно, увеличивает линейную емкость адсорбента по отношению к разделяемому образцу. Увеличение температуры разделения уменьшает гетерогенность адсорбента й тем самым также повышает линейную емкость. [c.16]

Так же, как и в примере с метиловым эфиром (разд. 12.1), в результате замещения активного атома водорода триметилсилильной группой снижается полярность соединения и ослабевает его тенденция к образованию водородных связей. Поэтому соединения, проявляющие сильную тенденцию к образованию водородных связей, имеют обычно более летучее силиль-ное производное. Снижается и реакционная способность соединения, благодаря чему оно становится менее склонным вступать в реакции с другими веществами или с компонентами хроматографической системы. [c.155]

Аналитическая реакционная газовая хроматография (АРГХ) предусматривает совместное использование химических и хроматографических методов исследования, причем химические превращения могут быть выполнены в одном из звеньев хроматографической системы [301. Типичными химическими реакциями, осуществляемыми в АРГХ, являются гидрирование и дегидрирование, гидрогенолиз, дегидратация и дегидрогалогенирование. этерификация и декарбоксилирование, обмен функциональными группами между реактантом и реагентом и другие реакции, приводящие к образованию соединений, заметно отличающихся по летучести и параметрам удерживания от веществ, присутствующих в исходной пробе. Использование этих реакций для целенаправленного химического тестирования индивидуальных соединений или компонентов сложных смесей позволяет расшифровывать структуры весьма сложных объектов анализа (например, природных веществ), представленных в микрограммовых количествах. В связи с этим методы АРГХ особенно ценны при исследовании природы микропримесей и в функциональном анализе органических соединений [c.189]

В этом варианте в колонку или па стартовую линию хроматографической пластинки наносят определенную порцию раствора исходной смеси веществ, а затем ведут элюцию раствором вещества, обладающего заведомо большим сродством к неподвижной фазе хроматографической системы, чем любой из компонентов смеси. Происходит вытеснение их пз неподвижной фазы, причем в первую очередь тех, которые обладают меньшнм сродством к сорбенту, а затем и всех остальных. Элюеит выталкивает все компоненты смеси впереди себя наподобие поршня. Так как они выходят в подвижную фазу концентрированными, то между ними также идет конкуренция за связь с неподвижной фазой. Компоненты, уступающие другим в силе сродства к этой фазе, оттесняются еще вперед, где сорбируются, но только до тех пор, пока их опять не вытеснят компоненты, обладающие большим сродством к сорбенту. В результате такого чередования сорбции и вытеснения компоненты смеси будут выходить из колонки один за другим в порядке возрастания силы их связи с неподвижной фазой. Ясно, что при этом зоны соседних компонентов будут соприкасаться или даже немного перекрываться друг с другом. Для аналитического фракционирования метод непригоден, но хорош для препаративного или полупромышленного разделения веществ, поскольку емкость колонки здесь используется очень эффективно. [c.12]

В большинстве случаев перед хроматографическим процессом стоит задача надежного разделенпя двух илп более заранее известных компонентов исходной смеси. Еслп хроматографическая система j e определена, то в распоряжении экспериментатора етце остается возможность выбора целого ряда физических параметров процесса с целью оптимизации условий разрешения зон (пиков) в этой снстеме. Краткое знакомство с основами теории хроматографии имело целью дать обоснования для такого выбора. Теперь можно подвести итоги. Последовательно рассмотрим следующий ряд параметров геометрия колонки, размер гранул, набивка колонки, скорость элюции, физические свойства элюента (вязкость, температура) и, наконец, загрузка колонки. Рассмотрение будем вести с позиции улучшенпя разрешения и одновременно уменьшения продолжительности хроматографического процесса. Но сначала надо привести еще одну зависимость — скорости ЭоЛюции и от разности давлений иа входе и выходе колонкп Д/ ( перепад давления ) и от размера гранул. Ее описывает уравнение Дарси [c.36]

Эффективность хроматографической системы - количесгво ступеней устапоатения равновесия между подвижной и неподвижной фазой в выбранных условиях для данного сорбата, способность к образовании) узкой концентрационной зоны индивидуального компонента разделяемой смеси. Эффективность в численном выражении определясгся 1начеииями числа теоретических тарелок и высотой, эквивалентной теоретической тарелке. [c.17]

При обработке результатов физико-химических анализов (хроматографических, спектральных и т.п.) необходимо проведение большого объема расчетно-графических действий с диаграммами, являющимися результатами анализов. При этом, например, при исследовании хроматограмм необходимо по пикал xpoMarorpaiviMbi идентифицировать компоненты анализируемой системы и их концентрации в пробе продукта, введенной в хроматограф. Эти трудоемкие операции легко выполняются при помощи компьютера, подключенного через аналогочисловой преобразователь непосредственно к хроматографу (рис. 8.1). Аналого-числовой преобразователь через короткие промежутки времени Ат передает на компьютер пробразованные в числа величины сигналов, поступающие с детектора хроматографа. Обработка опытных данных выполняется непосредственно в ходе анализа и через несколько секунд по завершении анализа компьютер выдает распечатку с исчерпывающими результатами анализа. [c.86]

Установка нуля Установку нуля выходного сигнала детектора или системы обработки сигнала следует проводить тогда, когда вещества не эдюируются из колонки, а следовательно, сигнал соответствует хроматографической нулевой линии. Если установка нуля проводится во время элюирования компонентов предыдущей анализируемой пробы, то при проведении текущего анализа на нулевой линии может наблюдаться дрейф в отрицательном направлении или отрицательные пики. При необходимости следует периодически проводить кондиционирование хроматографической системы при повышенной температуре с тем, чтобы "выжечь" накопившиеся в ней сильно удерживаемые компоненты. [c.104]

КОЛОНКИ и последующее ее уменьщение. Время появления максимума пика на хроматограмме называется временем удерживания ta,, где I — индекс, соответствующий -му компоненту разделяемой смеси. При постоянных условиях работы и составе фаз хроматографической системы время удерживания является величиной, постоянной для данного вещества. Иногда в начальной части хроматограммы регистрируется небольшой пик, природа которого связана с кратковременным нарущением равновесия в колонке при вводе пробы. Этому пику соответствует время удерживания несорбирующегося вещества to и свободный объем системы. Свободный объем системы Уде — это объем, занимаемый подвижной фазой от устройства для ввода пробы до детектора. Часть свободного объема системы, находящаяся в пределах колонки, называется свободным объемом колонки Vm (рис. 1.3). В идеале свободный объем системы не должен превышать свободный объем колонки. В современных жидкостных хроматографах внеколоночные объемы сведены к минимуму, и измеряемую экспериментально величину /о в первом приближении можно считать отвечающей свободному объему колонки. Свободный объем колонки — ее важная характеристика, для его определения в изучаемую смесь иногда специально вводят несорбирующееся соединение для измерения Iq. Однако, как показано многими исследованиями последних лет, корректное определение свободного объема — весьма нелегкая, если вообще разрешимая задача. В противоположность свободному объему различают объем неподвижной фазы в колонке Vs. Отношение этих величин называют фазовым отношением колонки ф [c.17]

Во всех рассмотренных выше вариантах хроматографии удерживание в конечном счете определялось сродством молекул хроматографируемых соединений с поверхностью сорбента. Последняя, как правило, сольватирована более сильным компонентом подвижной фазы. Однако молекулы этого более сильного растворителя (В) оказывают лишь количественное влияние иа распределение сорбата X между подвижной и неподвижной фазами. Несмотря на то что разные по химической природе растворители В могут придавать хроматографической системе различную селективность, качественная картина распределения в первую очередь зависит от способности молекул X вступать в ассоциацию с молекулами или функциональными груииамн поверхности 5. Этот процесс чаще всего может описываться уравнением [c.168]

Разделение в последних системах происходит за счет комбинации механизмов разделения и адсорбции, хотя до конца они не поняты. Даже шривитые фазы, такие, как is, хорошо адсорбируют некоторые количества органических растворителей из водно-органической подвижной фазы, образуя жидкую неподвижную фазу in situ [40, 54, ПО, 111]. Природа таких адсорбированных слоев может изменяться с изменением концентрации органического растворителя в подвижной фазе. Так, компоненты смеси стероидов, предварительно разделенные традиционной распределительной жидко-жидкостной хроматографией после введения в колонку, заполненную фазой is, элюируются в нормально-фазном порядке при использовании элюента метанол—вода (60 40), но р обращенно-фазном порядке, если отношение метанол —вода меняется на 40 60 [115]. Такое обращение порядка элюирования было бы маловероятным, если бы единственным механизмом, действующим в этой хроматографической системе, была твердофазная адсорбция (гидрофобное взаимодействие). [c.74]