Колонка метод заполнения

В гель-хроматографии особое значение имеет заполнение колонки гелем. Метод заполнения зависит от типа применяемого геля. Если используются мягкие гели, то гель предварительно набухает в растворителе, применяемом для разделения. Набухший гель помещают в колонку, частично заполненную растворителем. Гель оседает в колонке до тех пор, пока не образуется слой требуемой длины. Затем избыток растворителя медленно сливают, открыв нижний кран на колонке. Если высота слоя геля недостаточна, а колонка не вмещает следующие порции геля, то растворитель сливают через кран и в колонку вносят следующую порцию геля. Так повторяют до достижения требуемой высоты слоя геля. [c.232]

Из двух известных методов заполнения капиллярных колонок неподвижной фазой — статического и динамического [13—15 предпочтение, по-видимому, следует отдать первому как обеспечивающему наибольшую воспроизводимость, хотя и более трудоемкому. [c.34]

Фронтальный метод впервые был описан Тизелиусом (1940) для жидкостной хроматографии, а Джеймсом и Филлипсом (1953) был внедрен в газовую хроматографию. Проба непрерывно подается в колонку. После заполнения колонки сначала из нее выходит наименее прочно связанный с неподвижной фазой компонент данной смеси. При дальнейшем пропускании пробы из колонки выходит также второй компонент, ближайший к первому по своему сродству с неподвижной фазой, так что из колонки выходит двухкомпонентная смесь. Постепенно к ней присоединяются другие компоненты, пока, наконец, через колонку не будет протекать задаваемая смесь первоначального состава. Этот метод успешно используется для очистки больших количеств смесей от следов сильно адсорбируемых примесей. [c.17]

Процесс разделения смеси осуществляется в разделительной колонке, которая является основным элементом хроматографа. Кроме правильного выбора неподвижной фазы, которой заполняется разделительная колонка, важными факторами, определяющими эффективность анализа, являются геометрические размеры колонки, материал, из которого она изготовлена, форма и метод заполнения. [c.112]

Методы заполнения колонок. Для заполнения препаративных ЖХ-колонок пригодны два метода заполнение сухими частицами и суспензией. Первый способ используют в случае, когда размеры частиц больше 25—30 мкм. Суспензионный метод предпочтителен для частиц, имеющих размер меньше 20— 25 мкм. Суспензионный метод заполнения при низком давлении может также потребоваться при использовании неподвижной фазы, имеющей частицы большего диаметра, когда колонка должна быть заполнена предварительной набухшей смоченной насадкой, например полимерным ионообменником. [c.111]

Принцип метода (фиг. 35). Анализируемый материал фракционируется на колонке К, заполненной смолой типа дауэкс 50 х 8. Подача буферных растворов (Б , Б , Б ) осуществляется насосом Н1 и регулируется краном/Ср. Выходящая из колонки жидкость поступает в смеситель С, содержащий раствор нингидрина (Нг), который подается насосом Яг. [c.173]

Помимо ухудшения эффективности, проницаемости и симметрии пиков имеется еще и визуально контролируемый признак нестабильности—усадка слоя сорбента ниже верхнего обреза колонки. Основная причина проседания сорбента в колонке и потери эффективности — растворение самого силикагеля, даже привитого. Соответственно, предлагаются и разные способы предотвращения нестабильности и проседания, например особый метод заполнения ( вязкостная консолидация ), который позволяет получать высокоэффективные колонки, не проседающие длительное время и сохраняющие при этом нормальную проницаемость. [c.252]

По нашему мнению [2261, более удобным для "практического применения является вариант метода [324], предусматривающий подачу разделяемой пробы в. колонку, уже заполненную смесью карбамид — инертный разбавитель. Хроматографирование проводят, как описано в разд. 1.3.1.2.4. Необходимое для элюирования количество метанола, насыщенного карбамидом, а также количество исходной пробы и температуру колонки подбирают в зависимости от состава разделяемой смеси метиловых эфиров кислот. [c.151]

Процесс разделения смеси осуществляется в колонке, заполненной насадкой. Важными факторами, определяющими качество разделения, являются твердый носитель, тип и количество жидкой фазы, метод заполнения, длина и температура колонки. Аналитические колонки обычно изготовляются из стеклянных трубок с внутренним диаметром 2—6 мм или металлических трубок с наружным диаметром 3—10 мм различной длины. Размерами колонки определяется общее количество газа и жидкости, которое будет в ней содержаться, и, следовательно, согласно уравнению (П. 1), — время удерживания и удерживаемый объем для любого вещества. Число теоретических тарелок для колонок с небольшой площадью сечения приблизительно пропорционально длине и не зависит от площади сечения. Разделение согласно уравнению (II. 6) увеличивается с увеличением ос [c.61]

ВЛИЯНИЕ МЕТОДА ЗАПОЛНЕНИЯ И ВЕЛИЧИНЫ ЗЕРЕН НАСАДКИ НА ЭФФЕКТИВНОСТЬ БОЛЬШИХ КОЛОНОК [14] [c.371]

Метод заполнения колонок определяется типом, формой и размером частиц материала носителя [17]. В общем, как правило, используют два метода сухой и мокрый суспензионный. [c.79]

Суспензионный метод заполнения колонки носителем более универсален по сравнению с методом упаковки сухим материалом и поэтому используется для приготовления большинства экстракционных колонок. [c.80]

Описанный метод заполнения колонок можно использовать при работе с такими носителями, как гидрофобизированный кизельгур, стеклянный порошок и продажные полимерные материалы. Другие методы заполнения колонок применялись только при работе с набухающими макропористыми материалами на основе стирола и дивинилбензола [25—38]. В этом случае носитель в течение 24 ч встряхивали с раствором дитизона в четыреххлори-стом углероде, избыток раствора удаляли, а затем заполняли колонку набухшим гелем. [c.398]

Новый метод заполнения колонки в хроматографии с обращенными фазами. [c.531]

За колонкой, заполненной силикагелем, имеется ири ставка — колонка 6, заполненная 60 г активированного угля АГ. При помощи этой приставки можно методом газо-адсорбционной хроматографии определять содержание в смеси водорода, окиси углерода, кислорода, азота, метана, гелия и аргона. На рис. XV. 25 приведена хроматограмма смеси. [c.303]

Часто уплотнение насадки в колонке производят, постукивая колонку об пол. Используют также различные сложные методы заполнения колонок, например, путем псевдоожижения сорбента. [c.256]

Толщина и равномерность покрытия играют весьма важную роль при заполнении колонки. Из ряда исследованных методов заполнения некоторые дали хорошие результаты. Во всех случаях для первоначального заполнения колонки оказалось необходимым разбавлять жидкую фазу эфиром или другим подходящим растворителем. [c.141]

Решение задачи по разделению зависит не только от выбора рабочих условий хроматографической колонки, но и от ее характеристик. Методы заполнения высокоэффективной хроматографической колонки будут изложены в следующих главах. Рассмотрим влияние длины колонки на разделение. [c.61]

Для обеспечения более плотной и равномерной набивки обычно колонку заполняют сорбентом при легком постукивании. Байер [16] для этой же цели предложил применять вибратор, с помощью которого осуществляется поперечная вибрация с регулируемой амплитудой. Это обеспечивает наибольшую равномерность набивки. Значение ВЭТТ колонки внутренним диаметром 10 мм при заполнении указанным способом равнялось 0,9 мм. Используют также метод заполнения в кипящем слое [17], когда сверху в колонку подают сорбент, а снизу — поток азота. Эффективность заполненной таким образом колонки (длина 1 м, внутренний диаметр 60 мм) составляет 300—330 теоретических тарелок при воспроизводимости около 92%. В препаративных колонках обычно через каждый метр устанавливают перемычки меньшего сечения [18], пластины с отверстиями или конические переходы. При этом увеличивается длина пути для той части потока, которая примыкает к стенке и движется вдоль колонки с большей скоростью. Установкой таких перемычек и тщательным заполнением колонки можно обеспечить эффективность, соответствующую ВЭТТ 2 2,5 3 мм для трубок диаметром 75, 85 и 100 мм [19, 20]. Следует отметить, что в проведенных опытах на колонке диаметром 100 мм, заполненной 20% цианэтилового эфира этилен-гликоля на кизельгуре, проба (смесь бензола с циклогексаном) достигала 480 г. [c.274]

Мы рассмотрим различные хроматографические методы в разд. У-В, а здесь лишь продемонстрируем их возможности на нескольких примерах. В жидкостной хроматографии раствор смеси веществ пропускают через колонку, заполненную подходящим измельченным носителем. Например, при медленном пропускании водного раствора пигментов (содержащихся в соке моркови) через колонку — трубку, заполненную мелкими кусочками смолы, различные пигменты проходят через нее с разными скоростями. Те из них, которые слабее связываются со смолой, продвигаются по колонке быстрее, а те, что связываются со смолой прочно, перемещаются по колонке очень медленно. Такой пример очень нагляден, поскольку после завершения разделения мы действительно видим зоны различных пигментов, окрашенные в различные цвета. Конечно, этот метод пригоден для разделения всех типов веществ, как окрашенных, так и бесцветных. При наилучшим образом подобранных условиях с помощью жидкостной хроматографии можно разделить и зафиксировать присутствие всего 10 г вещества в смеси. С помощью этого метода можно разделять газообразные смеси, содержащие буквально тысячи компонентов. Примерами могут служить душистые вещества, феромоны насекомых, а также образцы нефтей. Этот метод позволяет разделять даже такие вещества, которые отличаются лишь изотопным составом, например содержат дейтерий вместо легкого водорода [c.194]

В вытеснительном методе десорбция компонентов смеси осуществляется потоком сильно сорбирующегося вещества-вытеснителя. При работе по этому методу заполненную сорбентом колонку предварительно промывают несорбирующимся веществом, а затем вводят порцию анализируемой смеси. Продвижение компонентов смеси и их вымывание из колонки происходит под действием потока вытеснителя. Компоненты анализируемой смеси перемещаются впереди фронта вытеснителя и разделяются на зоны в соответствии с их сорбционным сродством. [c.12]

Схема устройства цельнометаллических колонок дана на рис. 5.11,а. Эта конструкция получила наибольшее распространение в период становления ВЭЖХ и свое значение сохраняет по сей день. Формирование слоя сорбента в таких колонках происходит в момент их упаковки. При использовании колонок промышленного заполнения пришедшие в негодность, как правило, выбрасывают вместе с наиболее сложными и дорогими деталями — наконечниками. Естественно, потенциальный срок службы металлических деталей колонки значительно превышает срок службы сорбента, поэтому такая практика значительно удорожает использование метода ВЭЖХ, [c.197]

В случаях когда размер образца очень мал (аналитические нагрузки), определяют собственную, врожденную эффективность колонки ( число тарелок или высота тарелки), которая определяется не размером образца, а механическими параметрами, такими, как размер частиц, метод заполнения, конструкция колонки (см. разд. 1.4.3.2). Но в препаративной ЖХ размер тарелки (длина или высота, которая для данного диаметра цилиндра определяет объем) принципиально определяется количеством и концентрацией образца, введенного в слой. Чем меньше различие между силами притяжения каждой из фаз к молекулам двух видов, тем труднее разделение и тем большее число раз должен происходить процесс адсорбции и десорбции для достижения разделения. Чтобы обеспечить достаточное взаимодействие трудноразделяемого образца с поверхностью силикагеля, размер образца нужно соответственно уменьшить. Если желаемое разделение не может быть достигнуто даже при уменьшении таким образом эффективного объема тарелки, то, чтобы сделать время удерживания достаточным для требуемого количества молекулярных переходов между подвижной и неподвижной фазами, следует увеличить число тарелок (собственную эффективность колонки). Это можно сделать одним из следующих путей а) уменьшить размер частиц в колонке тех же размеров (что резко ограничивает размер образца) б) увеличить эффективную длину колонки (что позволяет производить загрузку больших образцов, но увеличивает время разделения и затраты растворителей) следующим путем [c.32]

Более ранние методы заполнения колонок для препаративной ЖХ часто основывались на комбинации процессов заполнения трубки с применением силы для придания слою плотноупа-кованной конфигурации. Вероятно, наилучшим из методов сухого заполнения является процедура, предложенная в работах [186, 187]. При медленном вращении колонки и непрерывной подаче сухой насадки в центр олонки ло стенке трубки постукивают только на верхнем уровне насадки. На поверхности частицы насадки ведут себя как жидкость, тогда как частицы ниже оседают в плотноупакованную конфигурацию так же, как уплотняется песок на берегу под влиянием волн. Если заполнение не происходит непрерывно, появляются видимые разрывы в слое, влияющие на эффективность. Постукивание или вибрация ко- [c.111]

Хотя методы сухого заполнения более дешевы, более удобны и менее опасны для больших колонок, обычно сухое заполненпе не позволяет получать слои, отвечающие по плотности и эффективности насадки, получаемым с использованием суспензионного метода при прочих равных условиях [186]. Обычно суспензионный метод заполнения комбинируют с осаждением частиц с применением давления в аксиальном направлении, параллельном направлению потока через слой. Давление может быть создано с помощью внешнего насоса (см. [42] и цитированные там ссылки) или поршня, являющегося составной частью колонки [189, 190]. [c.112]

Заполнение колонки при одноколоночном методе. При одноколоночном методе анализа в системе двух растворов эти растворы отличаются по концентрации Na" B 4 раза. В системе трех буферных растворов первый и третий растворы отличаются по концентрации Na" в 8 раз. Столь большие различия могут влиять на объем смолы в колонке, если заполнение ее вести обычным способом. Чем выше молярность раствора, тем меньше набухание и соответственно объем смолы в колонке. Поэтому если при заполнении колонки был использован первый низкомолярный буфер, а при последующей обработке применялся буферный раствор более высокой молярности, то объем смолы в колонке может заметно уменьшиться, что при повторном цикле пропускания растворов приведет к очень сильному спрессовыванию. Во избежание этого заполнение колонки проводят следующим образом. [c.177]

Большинство производителей колонок пользуются очень сходной аппаратурой для -аполнения колонок. Но зачастую даже при чисто внешнем сходстве методов заполнения производители пользуются большим разнообразием приемов. В последнее время потребители ВЭЖХ на 90% используют готовые колонки, в подавляющем большинстве случаев обеспечивающие воспроизводимые результаты анализа. [c.250]

Скорости подвижной фазы в традиционной колоночной жидкостной хроматографии обычно. цовольно низки по сравнению, например, со скоростями в газовой хроматографии, так как диффузия молекул разделяемых веществ в стационарной фазе жидкостной хроматографии происходит относительно медленно. Это связано с тем, что в традиционной жидкостной хроматографии стационарная фаза применяется в форме довольно крупных частиц относительно большого размера (примерно той же величины, что и в газовой хроматографии). Для того чтобы увеличить скорость диффузии молекул пробы в неподвижной фазе, в жидкостной хроматографии высокого разрешения применяются частицы очень малого размера. Малые размеры таких мелких частиц создают определенные затруднения для того чтобы продавить подвижную фазу через колонку, плотно заполненную очень мелкими частицами, требуется давление, намного превышающее атмосферное. Начиная с 1968 г. это направление хроматографии развивалось очень быстро. Для нагнетания подвижной жидкой фазы в колонки, заполненные очень мелкими частицами, применяются насосы, развивающие давление в сотни килограммов на квадратный сантиметр. Величина частиц современных адсорбентов составляет всего несколько микрометров. Разработаны специальные неподвижные фазы, имеющие непроницаемую для жидкости твердую сердцевину, что ограничивает диффузию органических соединений только поверхностным слоем адсорбента. Это облегчает элюирование разделяемых веществ. Обычно в жидкостной хроматографии высокого давления применяют детекторы, регистрирующие элюируемые из колонки вещества по изменению показателя преломления, по поглощению УФ-света и по возникновению флуоресценции. Это экспериментальное направление развивалось очень быстро, и сейчас этот высокоэффективный метод разделения стал доступен химикам-органикам. [c.447]

Хьютея и другие [14] изучили влияние различных насадок и методов заполнения на эффективность колонок с большим диаметром. Их работа показала, что 1) насадка с узкими пределами крупности зерен (узкого гранулометрического состава) дает мак- [c.370]

Скорость химической реакции очень сильно зависит от строения реагирующих соединений, что может быть использовано для идентификации хроматографируемых соединений. Так Е. Гил-Ав и Дж. Герцберг-Минцли [20] предложили метод частичного вычитания , в котором для идентификации соединений использовали совместно как данные по объемам удерживания (хроматографическая характеристика), так и по скоростям химических реакций (кинетическая характеристика). В этой работе для идентификации изомеров диеновых соединений была применена колонка-реактор, заполненная сорбентом — реагентом с хлормалеиновым ангидридом. Идентификация изомеров была основана на различной реакционной способности изомеров тракс-изомер легко вступает в реакцию с хлормалеиновым ангидридом, а г цс-изомер реагирует значительно медленнее или вообще не реагирует. Поэтому относительная площадь трамс-изомера при увеличении продолжительности анализа (реакции) будет уменьшаться. Таким образом в этой работе были идентифицированы трамс-и г мс-изомеры 1,3-пентадиена 2, 4-гексадиена и других диеновых соединений. [c.13]

Нанесение неподвижной фазы на носитель в колонке. Силани-зированную колонку тщательно заполняют гидрофобизированным, если это необходимо, носителем, используя сухой метод заполнения колонок (см. разд. 4.3). Затем в колонку прибавляют большое количество экстрагента и пропускают его через колонку до тех пор, пока полностью не исчезнут пузырьки воздуха. Можно также заполнение колонки и нанесение неподвижной фазы на носитель осуществить в одну операцию, для этого колонку загружают смесью носителя с избытком неподвижной фазы (см. разд. 4.3). [c.74]

Метод заполнения колонок сухим материалом (сухой метод) можно использовать для набивки узких колонок носителями низкой плотности, частицы которого имеют несферическую форму и размер приблизительно до 50 мкм, т. е. прежде всего силикагелем и диатомнтовой землей. Если такая методика применяется для заполнения колонок носителями с частицами меньшего размера, не удается получить колонки с высоким разрешением. Напротив, в случае носителей высокой плотности со сферическими частицами методика заполнения сухим материалом пригодна для набивки, если размер частиц носителя не превышает 50 мкм [17]. [c.79]

Получение высокоэффективной колонки требует также применения специальных методов заполнения колонки. Если при размере частиц адсорбента 0,05 м и более прямые колонки заполняют в основном сухим способом при вибрации, то дня адсорбентов с меньшим размером зерен используют суспензионный метод. Лучшие результаты получаются при использовании дисперсионной среды с плотностью, близкой к плотности частиц адсорбента. В этом случае получается более стойкая суспензия. При использовании растворителей с низкой плотностью суспензию постоянно перемешивают с помощью ультразвука. Заполнеше колонок частицами малого размера требует применения высокого давления, что при- [c.25]

Хорвитц и Блумквист подробно изучили факторы, влияюшйе на проведение процесса и ширину пиков актиноидных элементов, разделяемых на высокоэффективных экстракционно-хроматографических колонках [16]. Высокоэффективные колонки были получены при заполнении их суспензионным методом заполнение колонок сухим порошком носителя не использовалось. Для заполнения колонок к смеси Д2ЭГФК и целита добавляли небольшое количество водного раствора и образовавшаяся суспензия уплотнялась под давлением газа (азота). Такой метод позволяет получать равномерный по плотности слой сорбента и равномерный поток подвижной фазы даже при разделении элементов с высокой а-активностью, когда существует возможность радиационного разрушения материалов. [c.262]

Дениг (И сотр. [14, 17] разработали схему последовательного выделения нептуния, урана и продуктов деления, В этой схеме на первой экстракционно-хроматографической колонке с ТБФ происходит. извлечение циркония, урана и нептуния из раствора НаСЮз в 8 М НМОз. На второй колонке с Д23ГФ(К из раствора МаСЮз в 9 М НС1 извлекаются ниобий, сурьма и иод. На третьей колонке, также заполненной Д2ЭГФК, из 0,1 М раствора НСГ извлекаются редкозем ельные элементы я молибден. Далее в каждой колонке производят разделение на отдельные компоненты с помощью избирательного элюирования. Полный процесс разделения, проводимый при повышенной температуре, требует менее 12 ч (включая радиохимическое определение) [14]. Некоторые из наиболее важных продуктов деления определялись рентгенофлуоресцентным методом [17]. [c.341]

Длина и диаметр колонок влияют на достижимую степень разрешения и проницаемость. В то же время размеры колонок определяют и методы заполнения. Например, набивая колонки очень маленькохю диаметра (с внутренним диаметром 2 мм), трудно достичь хорошего уплотнения слоя. Очень длинные колонки, как правило удобнее согнуть [c.203]

Разделение асфальтенов с помощью гель-фильтрацйи было исследовано Альтгельтом [83]. Согласно разработанному им методу, бензольный раствор асфальтенов пропускался через медленно вращающуюся хроматографическую колонку, плотно заполненную полистирольным гелем. Для подавления адсорбции асфальтенов к гелю в бензольный раствор добавлялось 10% метанола. Гель получался сополимеризацией стирола, ди-винилбензола, винилэтилбензола, диэтилбензола в присутствии додекана, количеством которого регулировался размер пор в геле. Фракции, в которых размеры молекул позволяли проникнуть внутрь пор геля, двигались вдоль колонки с меньшей скоростью, чем молекулы, не способные проникать в поры. Так как желательно было собрать самые высокомолекулярные фракции, то в нижней части колонки помещался гель с меньшим размером пор, а в верхней — гель с большим размером пор. Альтгельт установил, что молекулярные массы асфальтенов могут составлять 700, а мальтенов 2400. Последующими исследованиями [79] было показано, что при фракционировании гель-фильтрацией получаются фракции асфальтенов, имеющие молекулярные массы от 500 до 4040. Такое перекрывание наглядно иллюстрирует невозможность разделения асфальтенов на фракции только с помощью осаждения растворителями из-за конкурирующего влияния молекулярной массы и химического состава. [c.32]

Используют также метод заполнения в кипящем слое8, когда сверху в колонку подается сорбент, а снизу — поток азота. Эффективность заполненной таким образом колонки (длина 1 м, внутренний диаметр 60 мм) составляет 303—330 теоретических тарелок при воспроизводимости около 92%. [c.306]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология