Флуоресценция чувствительность измерения

Люминесцентный метод характеризуется исключительно ВЫСОКОЙ чувствительностью и специфичностью. Для веществ с высоким коэффициентом экстинкции (е 10 ) и большим квантовым выходом флуоресценции (около 1) можно обнаружить до 10 ° М этих веществ, Поскольку часто спектры флуоресценции растворов органических веществ представляют собой размытые широкие полосы, то для увеличения информации, получаемой из спектров флуоресценции, проводят измерения в парах. В этом случае спектры имеют определенную структуру, т. е. содержат узкие характерные полосы. [c.161]

Измерения флуоресценции чувствительны к присутствию в испытуемом растворе твердых частиц. Такие частицы могут снижать интенсивность возбуждающего луча или давать ошибочно высокие показания вследствие множественного отражения в кювете. Поэтому целесообразно удалять твердые частицы центрифугированием можно применять и фильтрование, но некоторые виды фильтровальной бумаги могут содержать флуоресцирующие примеси. [c.55]

Известен количественный метод определения урана, основанный на измерении флуоресценции растворов в 5—50%-ной фосфорной кислоте при освещении ультрафиолетовым светом с длиной волны 253 ммк. Однако с аналитической точки зрения наибольший интерес представляет люминесценция урана в перлах из фторида натрия " . При концентрации урана в плаве меньше 15—20 мкг/г наблюдается линейная зависимость между концентрацией и интенсивностью флуоресценции. Чувствительность метода ограничивается наличием остаточного свечения плава, не содержащего преднамеренно введенного урана в зависимости от чистоты применяемых реактивов и условий эксперимента она может быть равна от 0,0001 до 0,02 мкг урана на 1 г фторида натрия . При приготовлении перлов массой 50 мг этим методом можно обнаружить 0,000005 мкг урана. [c.369]

Чувствительность измерения флуоресценции в принципе очень высока. Способные флуоресцировать молекулы поглощают свет, который переводит их из основного электронного состояния S(, в электронно-возбужденные состояния Sj, S2 и т.д. Молекулы могут терять полученную избыточную энергию несколькими путями [c.138]

Больщинство описанных в литературе оптических кислородных сенсоров основано на тущении флуоресценции. Поскольку измерения проводят в состоянии равновесия, эти устройства менее чувствительны к колебаниям температуры и параметрам потока, чем щироко применяемый полярографический кислородный электрод. Флуоресцирующий реагент может находиться в растворе, отделенном от анализируемого раствора гидрофобной проницаемой для кислорода мембраной, либо внедряться в твердую фазу или на ее поверхность. В общем случае восприимчивость реагента к тушению его флуоресценции кислородом зависит как от самого флуорофора, так и от среды. Графики зависимостей от парциального давления кислорода (где 1, [c.484]

Для выяснения тонкой структуры спектров флуоресценции их исследуют при низких температурах (например, при температуре жидкого азота 77 К), при этом подбирают растворители, в которых наиболее отчетливо проявляется структура спектров. Этот метод измерения квазилинейчатых спектров в твердой матрице при низких температурах был предложен Э. В. Шпольским. Особенно успешно он был применен к исследованию полициклических ароматических углеводородов. Получаемые квазилинейчатые спектры флуоресценции ароматических углеводородов в растворах алифатических углеводородов являются очень характерными и позволяют получать информацию о колебательной структуре основного электронного состояния ароматических углеводородов. Квазилинейчатые спектры флуоресценции обладают рядом важнейших свойств. Прежде всего квазилинейчатые спектры в каждом случае носят ярко выраженный индивидуальный характер (специфичность). В отличие от обычных размытых спектров поглощения и флуоресценции они существенно различаются даже у близких по строению молекул. Это отличие оказывается значительным и для изомерных молекул. Другая важная особенность квазилинейчатых спектров заключается в очень высокой селективности таких измерений. Благодаря малой ширине и высокой интенсивности линий квазилинейчатые спектры позволяют определять индивидуальные соединения в сложной смеси даже тогда, когда они входят в многокомпонентную смесь в ничтожно малых концентрациях. Третьей характерной особенностью квазилинейчатых спектров флуоресценции является чрезвычайно высокая чувствительность методов, основанных на их применении. Измерение квазилинейчатых спектров позволяет при прочих равных условиях увеличить чувствительность люминесцентных измерений примерно в 100 раз. [c.72]

Флуориметрический метод является наиболее чувствительным методом анализа в ТСХ. Определение количества вещества в пятне этим методом можно проводить двояко во-первых, измерением флуоресценции комплексных соединений, образующихся при взаи- [c.151]

Абсолютные значения квантовых выходов флуоресценции или фосфоресценции можно рассчитывать по данным измерений в одних и тех же произвольных единицах интенсивности поглощаемого и испускаемого света. Должны быть сделаны поправки на различия в пространственном и спектральном распределениях возбуждающего света и испускаемого излучения, необходимо также знать кривую спектральной чувствительности фотоприемника. Направленный возбуждающий пучок можно рассеять для сравнения с изотропным испускаемым излучением с помощью матовой поверхности или, лучше, с помощью белкового раствора, рассеивающую силу которого можно рассчитать. Процедура коррекции спектрального распределения испускаемого излучения может быть упрощена. Для этого испускаемое излучение образца и рассеянный возбуждающий свет надо последовательно направить на подходящее флуоресцирующее вещество, которое преобразует все падающее излучение в свой собственный спектр флуоресценции с постоянным [c.192]

Третьей характерной особенностью квазилинейчатых спектров флуоресценции является чрезвычайно высокая чувствительность методов, основанных на их применении. Измерение квазилинейчатых спектров позволяет при пробе [c.56]

Достоинство метода отношения Р/В в применении к биологическим материалам заключается в том, что различные поправки, используемые в методе трех поправок, играют значительно менее важную роль. Поскольку предполагается, что процентная доза характеристического рентгеновского излучения, поглощенного в образце, такая же, как и для излучения фона, фактор поглощения (Л) отпадает. В биологическом материале эффект атомного номера (Z) мал, и в любом случае им пренебрегают, так как он по предположению оказывает одинаковое влияние на пик н непрерывное излучение. Поскольку у биологического материала низкий атомный номер, эффект вторичной флуоресценции (F) мал и его можно рассматривать как поправку второго порядка. Как в [165], так и в [166] показано, что результаты измерения Р/В нечувствительны к эффективности детектора, флуктуациям тока пучка и неточностям коррекции живого времени. Кроме того, результаты измерения Р/В менее чувствительны к изменениям геометрии поверхности, часто [c.75]

В методе ослабления флуоресценции применяют фотометр, снабженный только одной ртутной лампой и фильтром. Для возбуждения флуоресценции удобна спектральная линия при 254 нм (или также излучение с длиной волны 281—313 нм). Таким образом, для измерения поглощения в УФ-области, очень важной для анализа органических веществ, пригодны только несколько длин волн выше 254 нм. Метод ослабления флуоресценции проигрывает в селективности и чувствительности при определении веществ, максимум поглощения которых находится в УФ-области. Это связано с тем, что в описываемом методе возбуждающее излучение обычно пе подстраивают к максимуму поглощения определяемого вещества. На рис, 8.9 (I, II) показано, как получить оптимальную высоту пика, изменяя длину волны излучения спектрофотометра. [c.190]

Принцип действия флуориметрического детектора (ФМД) основан на измерении флуоресцентного излучения поглощенного света. Поглощение обычно проводят в УФ-области спектра при длине волны максимального поглощения для данной группы веществ, а излучение измеряют на выходе фильтра, не пропускающего лучи возбуждения. Длины волн флуоресцентного излучения всегда превышают длины волн поглощенного света. В связи с тем, что детектирование ведется от нулевой интенсивности флуоресценции, ФМД более чувствительны по сравнению с детекторами поглощения. [c.275]

Чувствительность реакции 0,01 мкг 3 в 10 мл 1%-ного раствора КОН. При содержании до 0,2 мкг 3 в 10 мл, концентрация реактива в этом объеме должна составлять 8 мкг (4 мл 1-10 N раствора). В этих условиях наблюдается пропорциональная зависимость между ослаблением флуоресценции и количеством сульфид-ионов в растворе. Измерение интенсивности флуоресценции проводят при 530 нм, сравнивая флуоресценцию испытуемого и стандартного растворов. [c.171]

Трудности измерения возбужденных состояний продуктов рекомбинации связаны с чувствительностью методов измерения возбужденных состояний в грубом окружении. Например, молекулы кислорода и азота не являются полярными молекулами, колебательные состояния которых сильны. Их возбужденные электронные состояния обладают длительным временем жизни и излучают не очень сильно. Следовательно, должны использоваться другие методы, такие как, например, индуцированная лазером флуоресценция или лазерная многофотонная ионизация. Для исследования рекомбинации на некоторых поверхностях очень эффективны молекулярные пучки. В частности, они могут быть использованы для изучения времени пребывания адсорбированных атомов или молекул на поверхности. Измерения позволяют определить функцию распределения по скоростям и скорость рекомбинации. Информация о распределении частиц на поверхности может дать основу для моделей, учитывающих возбужденное состояние частиц при гетерогенной рекомбинации. [c.35]

Большинство люминесцентных определений неорганических веществ основано на измерении интенсивности флуоресценции комплексных соединений катиона с органическими реагентами [8]. Однако интенсивность флуоресценции таких комплексов, а соответственно и чувствительность метода, часто недостаточно высоки. Повышение интенсивности флуоресценции комплексов неорганических веществ с органическими лигандами при замораживании растворов представляет поэтому существенный интерес для увеличения чувствительности люминесцентных реакций. [c.75]

Наибольшее распространение получили методы с использованием тетрартутьацетатфлуоресцеина. Щелочные растворы реагента флуоресцируют в УФ-овете ярким зеленым цветом. В присутствии сульфидной серы, а также тиофенола, метилмерксщтана, тиомочевины, тиоацетамида, диэтилдитиокар-баматов и других серусодержащих веществ флуоресценция раствора гасится вследствие взаимодействия реактива с серусодержа-щим остатком. При титровании раствором тетрартутьацетатфлуоресцеина растворов серусодержащих веществ в ультрафиолетовом свете в точке эквивалентности возникает яркая зеленая флуоресценция. Чувствительность реакции при измерении флуоресценции в области 530 нм составляет 0,01 мкг серы в 10 мл 1%-ного раствора КОН. [523]. Визуальная чувствительность титрования равна 0,002 мкг ъЪ мл раствора, относительная ошибка — 25% [501]. [c.121]

Максимальная чувствительность измерения достигается в случае, когда флуоресцирующие продукты образуются в ходе реакции. Поскольку исходные реагенты не флуоресцируют, чувствительность измерения определяется нтенсивностью поглощения возбуждающего света и квантовым выходом флуоресценции продуктов реакции и при использовании современных фотоэлектрических приборов составляет Ю — Ю- о М. [c.42]

Величина Sjjgjj/i p несколько уменьшается с возрастанием S , однако ее роль по сравнению с другими инструментальными погрешностями невелика порог чувствительности измерения световых потоков на несколько порядков ниже, чем интенсивность света, поступающего на вход фотоумножителя при практических измеренпях флуоресценции растворов. [c.92]

Чувствительность реакции флуоресценции выразить значительно сложнее, чем цветной реакции в абсорбциометрии, так как интенсивность возбуждающего излучения должна быть точно определена (и аппаратурная схема, если для измерения флуоресценции применяется фотоэлектрический элемент). Если это точно известно, чувствительность может быть установлена как минимальный вес у) флуоресцентного вещества в столбе раствора сечением 1 см (столб, расположенный в правом углу по направлению излучения, рис. 17), дающий заметно большие показания, чем холостые измерения на флуорофотометре На тех же приборах трудно определить объем лучеиспускающего раствора (может быть получен свет, сходящийся в одной точке) это может оказаться необходимым для выражения чувствительности в менее точной, но практически более удобной форме, а именно как граничная концентрация для данных приборов. Затем, зная минимальный объем требуемого раствора, можно определить чувствительность в микрограммах. По крайней мере для низких интенсивностей флуоресценции чувствительность точно определяется флуоресцентным измерением. [c.108]

Чувствительным методом обнаружения и измерения концентрации атомов, радикалов и насыщенных молекул, получившим нриме-нение в последнее время, является метод резонансной флуоресценции. Особенно высокая чувствительность этого метода получается при применении лазеров в качестве источников возбуждения [175, 234]. [c.25]

Для обнаружения анализируемых компонентов в ВЭЖХ широко применяются устройства, работа которых основана на измерении поглощения в ультрафиолетовой области, флуоресценции или электрохимических характеристик. Возможно также сочетание жидкостного хроматографа с масс-спектрометром (39). Несмотря на то, что наиболее универсальным детектором является рефрактометр, его невысокая чувствительность и селективность, несовместимость с градиентами давления привели [c.272]

Флуоресцентные измерения обладают рядом преимуществ в сравнении с абсорбционными. В частности, оптическое поглощение промежуточного продукта, содержащегося в низкой концентрации, вызывает незначительное изменение относительно большой интенсивности зондирующего пучка. Шум , получающийся вследствие случайных флуктуаций интенсивности света, а также из-за статистической природы пучка фотонов, ограничивает чувствительность, достижимую в абсорбционном эксперименте. В люминесцентном эксперименте, напротив, нет излучения кроме того, которое испускается возбужденными соединениями. Статистические ограничения продолжают лимитировать точность, с которой могут измеряться концентрации, но достижимая на практике предельная чувствительность люминесцентного эксперимента обычно значительно выше, чем абсорбционного. По этой причине люминесценция часто используется для изучения веществ, первоначально находящихся в основном состоянии, путем специального оптического возбуждения их в более высокое люминесцентное состояние. В отдельных случаях описанные ранее линейчатые газооазоядные. лям-пы могут использоваться для возбуждения резонансной флуоресценции атомов (например, Н, О, С1) и радикалов (например, ОН). Поскольку флуоресценция изотропна, ее можно регистрировать под углом к направлению возбуждающего пучка. С большим успехом в качестве источника возбуждения можно использовать перестраиваемые лазеры. Лазеры обеспечивают существенно большую гибкость эксперимента, чем газоразрядные лампы. В частности, с их помощью можно возбуждать значительно большее число разнообразных молекулярных частиц (например, ОН, КОз, СН3О, С2Н5О). Более высокая мощность возбуждающего излучения от лазеров обеспечивает высокую чувствительность. Индуцированная лазером флуоресценция (ИЛФ) стала наиболее ценной методикой изучения промежуточных продуктов реакций в газовой фазе. При этом по- [c.196]

Экспериментальное изучение подвижности ядер при фотодиссоциации представляет трудную, но очень престижную цель потому, что изменения структуры молекул происходят на межъядерных расстояниях порядка десятых долей нанометра на временных интервалах в фемтосекундном диапазоне. Интересный подход к этой проблеме связан с применением спектроскопических эффектов, обусловленных движением ядер, в качестве индикатора зависимости от времени. В сущности требование высокого временного разрешения трансформируется в необходимость измерения амплитуд сигналов в зависимости от частоты. Как конкретный пример рассмотрим молекулу О3. При поглощении фотона эта молекула предиссоциирует в течение примерно одного колебания. Она определенно не может рассматриваться как флуоресцирующая молекула (см. разд. 3.3 и 4.3). Однако очень малая часть молекул испускает излучение (около 1 на 10 ), и при интенсивном лазерном возбуждении и чувствительной системе регистрации спектр испускания может быть записан. Интересное свойство этой флуоресценции заключается в необычно длинных последовательностях колебательных полос. При распаде молекулы она проходит через все возможные молекулярные конфигурации так, что франк-кондонов-ские вероятности переходов на соответствующие этим конфигурациям уровни оказываются большими (см. разд. 2.7). С точки зрения динамики диссоциации более важно то, что интенсивности наблюдаемых линий в опосредованном виде представляют подвижность молекул в возбужденном состоянии и тем самым несут информацию о процессе диссоциации. Диссоциация О3 под действием УФ-излучения — очевидный пример того, как качественное понимание динамики может быть получено простым способом. Полосы деформационных колебаний не видны в спектре испускания, что прямо предполагает, что деформационные колебания не участвуют на ранних стадиях реакции. Более того, наблюдаются только переходы с участием четных уровней антисимметричных валентных колебаний. Этот результат интерпретируется в рамках симметрии процесса диссоциации. [c.207]

Для контроля чистоты веществ можно использовать методы классического химического анализа. Например, иодометрически можно определять медь примерно до 10 г/мл раствора. Вообще же для количественного определения примесей в ос. ч. веществах требуются новейшие методы, отличающиеся высокой чувствительностью и селективностью а) фотометрические (колориметрия, спектрофотометрия, пламенная фотометрия) б) флуоресцентные (фосфоресценция, флуоресценция , катодо- и хемилюминесценция и др.) в) электрометрические (полярография, особенно осциллографическая, по-тенциометрия, кондуктометрия, кулонометрия и др.) г) спектральные, обладающие высокой чувствительностью, но малой точностью д )масс-спектрографические , е) радиохимические (активационный анализ, изотопное разбавление и др.) ж) электрофизические (измерение-проводимости, эффекта Холла и др.) з) концентрирование микропримесей в малых объемах (экстракцией, со-осаждени-гм, хроматографически, ионным обменом, электролизом, зонной плавкой и т. д.) с последующим определением их разными способами. [c.319]

АНС — флуоресцентный зонд, нековалентно связывающийся с белками и неполярными областями мембран. При связывании АНС с бе,л-ками или мембранами его флуоресценция значительно возрастает, так как квантовый выход флуоресценции АНС зависит от полярности его окружения и увеличивается в гидрофобных средах. Максимум возбуждения АНС — 360 нм, максимум флуоресценции — 460—480 нм (в зависимости от полярности микроокружения). При работе с препаратами СР измерение флуоресценции проводят в среде, содержащей 100 мМ КС1, 0,5 мМ ЭГТА и 50 мМ имидазол, pH 7,0. Концентрация белка СР в кювете — 0,3—0,5 мг/мл, концентрация АНС — от 5 до 75 мкМ (в зависимости от чувствительности прибора и поставленной задачи). [c.366]

Интенсивная зеленовато-желтая флуоресценция хлороформного раствора оксихинолината алюминия при освещении ультрафиолетовым светом положена в основу одного из важнейших флуориметрических методов определения алюминия [451, 651, 767, 779, 785, 827а, 1016, 1082, 1106, 1125, 1233, 1272]. Метод высокочувствительный, позволяет опреде.-1ять до 10" % алюминия, влияние других металлов меньше, чем в фотометрическом методе. Оксихинолинат алюминия обычно экстрагируют хлороформом из растворов с pH 6—9. Интенсивность флуоресценции одинакова при измерении сразу и через 24 часа [767]. Наибольшая чувствительность метода — при использовании 2 мл 0,2%-ного раствора оксихинолина в 50 мл, [c.135]

ГИИ, с другой стороны, имеется ряд осложнений, которые могут привести ничего не подозревающего 0перат0 ра к затруднениям. Артефакты появляются на каждой стадии процесса спектральных измерений. Артефакты процесса обнаружения представляют собой ущирение и искажение формы пика, пики потерь кремния, поглощение и пик внутренней флуоресценции кремния. Артефакты, возникающие пря обработке импульсов, включают в себя наложение импульсов, суммарные пики и чувствительность к ошибкам при коррекции мертвого времени. Дополнительные артефакты появляются из-за окружения системы полупроводниковый детектор — микроскоп и включают микрофонные эффекты, наводки с земли и загрязнение маслом и льдом деталей детектора. Как в кристалл-дифракционном, так и в спектрометре с дисперсией по энб ргии может регистрироваться паразитное излучение (рентгеновское и электроны) от окружающих образец предметов, но из-за большего телесного угла сбора спектрометр с дисперсией по энергии более подвержен влиянию паразитного облучения. Однако из-за большого угла сбора такой спектрометр менее чувствителен к эффектам дефокусировки спектрометра при изменении положения образца. [c.265]

В качестве атомизаторов для ЗЬ наиболее часто используют пламена. Изучена [1251] возможность атомно-флуоресцентного определения ЗЬ в различных пламенах с применением в качестве источника света высокоинтенсивной лампы с полым катодом и атомно-абсорбционного спектрофотометра Вариан-Тектрон АА4, видоизмененного для атомно-флуоресцентных измерений. Исследованы пламена смесей На — воздух, — Аг, Н — Оа — Аг и СаНа — воздух. Наиболее эффектным оказалось пламя смеси На с Аг (диффузное) с расходом 0,95 л1мин На и 5,5 л мин Аг. Когда тушение флуоресценции мало, наибольшей чувствительностью характеризуются резонансные линии ЗЬ 206,83 217,58 и 231,15 нм, по которым пределы обнаружения ЗЬ найдены равными соответственно 0,1, 0,03 и 0,1 мкг мл. В пламени смеси На с Оа и Аг (1,15 л мин На, 0,2 л мин Оа и 5,5 л мин воздуха) пределы обнаружения ЗЬ по тем же линиям несколько хуже (соответственно 0,1, 0,05 и 0,1Ъ мкг мл). [c.94]

Относительно гасящего действия посторонних элементов на интенсивность свечения плавов нами приводятся данные, взятые из работ Гримальди, Мея и др. [560]. Гасящее действие примесей на свечение урана ими определялось в 2 г флюса (состава 45,5 г Na2 Oз 45,5 г К2СО3 и 9 г NaP) измерения проводились при помощи чувствительного флуориметра. Сильными гасителями считаются те элементы, которые в количествах от 1 до 10 мкг гасят урановую флуоресценцию на 10% и более. Это — Мп, Сг, Со, N1, Ьа, Р1 [513], Аи, РЬ, Се, Рг, N(1 и Н . Средние тушители — Ре, Си, 2п, 8п и ТЬ при их содержании от 10 до 50 мкг интенсивность свечения урана уменьшается на 10%. Слабые тушители — Т1 и присутствие их в количествах от 50 до 1000 J iкг уменьшает интенсивность свечения на 10%. Остальные элементы не являются заметными гасителями. Влияние железа начинает быть заметным, когда на [c.152]

В качестве детекторов на настоящей стадии разработки метода наиболее часто применяются устройства, основанные на ультрафиолетовой спектрофотометрии, на измерении показателя преломления или на измерениях флуоресценции. Для фармацевтических целей наиболее подходящим является ультрафиолетовый спектрофотометр, обладающий высокой чувствительностью (низший уровень обнаружения составляет 1—2 нг для материала, имеющего хорошие светопоглощающие свойства) и стабильностью (в частности он отличается низкой чувствительностью к контролируемым изменениям в составе растворителя и неравномерности потока) естественно, что такой детектор не может быть использован, если элюируется материал, не имеющий заметного поглощения в ультрафиолетовой области. Рефрактометр реагирует на разницу в показателе преломления чистой подвижной фазы и подвижной фазы, содержащей элюируемый материал этот метод имеет более широкое применение, чем адсорбционная опектрофото-метрия в ультрафиолетовой области, но он малочувствителен и в значительной степени зависит от небольших изменений в составе растворителя, от скорости потока и температуры. [c.104]

В качестве детекторов наиболее часто применяют устройства, основанные на ультрафиолетовой спектрофотометрии, на измерении показателя преломления или интенсивности флуоресценции. Для фармацевтических целей наиболее подходит ультрафиолетовый спектрофотометр вследствие его высокой чувствительности (нижний предел обнаружения составляет 1—2 нг для материала, имеющего хорошие светопоглощающие свойства) и стабильности (в частности, он отличается низкой чувствительностью к контролируемым изменениям в составе растворителя и неравномерности потока) естественно, что такой детектор не может быть использован, если элюируется материал, не имеющий заметного поглощения в ультрафиолетовой [c.420]

Определение при помощи койевой кислоты [451]. Максимум излучения раствора соединения находится при 470 нм, максимум светопоглощения — при 380 нм. Оптимальные условия определения pH 5,7—6,8 концентрация реагента 0,2—0,6% перед измерением интенсивности флуоресценции растворы выдерживают 30 мин. Метод позволяет определять 2—50 мкг Au в объеме 50 мл с чувствительностью 0,02 мкг1мл. Определению 40 мкг Au не мешают 10 мкг Pd(II), 50 мкг Fe(IH), 100 мкг Hg(H), Pt(II), 2 мг Te(IV), 200—300 мкг Ag, 400—500 мкг u, 10 мг Т1(1П). Сильно мешают NH4 I и NH4NO3. [c.164]

Установлено, что между концентрацией изучаемого вещества в растворе и измеренной интенсивностью флуоресценции существует прямая зависимость, что позволяет использовать данный метод в целях количественного определения производных кумарина, особенно учи-тьгаая возможность сочетатя данного метода с хроматографией на бумаге или в тех. Тем не менее, метод флуорометрии, несмотря на его высокую чувствительность, пока не нашел применения в количественном анализе кумаринов. Однако, флуоресцентные свойства производных бензо-а-пирона нашли широкое применение в качественном анализе, главным образом, при хроматографии на бумаге и в тонких слоях сорбентов. Следует отметить, что по характеру флу-оресце шии можно отличить фурокумарины от других представителей этого класса соединений. [c.76]

Флуорометрический метод определения витамина в пищевых продуктах (по К. А. Половолоцкой, Н. И. Зайцевой, Е.П. Скоробогатовой). Метод основан на измерении интенсивности флуоресценции раствора витамина В . В флуорометре световая энергия флуоресценции превращается при помощи фотоэлементов в электрическую, которая измеряется чувствительным гальванометром. Восстановленная форма рибофлавина утрачивает свою флуоресцирующую способность. Недостатком флуорометрического метода является то, что флуоресценция вытяжек может зависеть не только от содержания в них рибофлавина, но и от содержания других веществ. Это учитывают, дополнительно определяя в отдельной пробе флуоресценцию сопутствующих веществ после восстановления рибофлавина ( гашения флуоресценции восстановителями, например Na SaOi HjO). [c.142]

Было обнаружено, что нингидрин может образовывать сильно флуоресцирующие продукты с соединениями, содержащими аминогруппу [70, 71]. Чувствительность метода, основанного на измерении флуоресценции, выше в 10—100 раз. Фенилаланин в реакции с нингидрином образует фенилацетальдегид, который реагирует с избыточным нингидрином и первичным амином, образуя сильно флуоресцирующий продукт. Было установлено строение этого продукта [72] и на основе этого исследования был синтезирован новый реагент [73]. Это 4-фенилспиро [фуран-2(ЗН), Г-фталан]ДИОН-3,3, получивший название флуорескамина, зеагирует с первичными аминами непосредственно, образуя такие же флуоресцирующие соединения (возбуждение при 390 нм, излучение при 475 нм), как и при реакции нингидрина с фенилаце- [c.486]

Измерением флуоресценции удалось существенно повысить предел чувствительности количественного определения некоторых соединений (табл. 11.55). В каждом опыте реакцию проводили при оптимальном для данной реакции значении pH (см. табл. 11.54), затем водный раствор титровали 1 М фосфорной кислотой до pH = 5,0 и сразу же извлекали флуорофор 10 мл этилацетата и измеряли интенсивность его флуоресценции. [c.489]

Наиболее широко распространены флуориметрическпе методы, основанные на измерении флуоресценции. При поглощении ультрафиолетового или видимого излучения молекулы переходят в электронно-возбужденное состояние. Полученная энергия может полностью переходить в энергию теплового движения, а может с определенной вероятностью (квантовым выходом) испускаться в виде рассеянного электромагнитного излучения, как правило, с частотой, меньшей частоты возбуждающего излучения. Это рассеянное излучение называют флуоресценцией. Его интенсивность можно измерить с высокой чувствительностью в любом направлении, даже отличающемся от направления пучка возбуждающего излучения, лучше всего в перпендикулярном ему направлении. При использовании достаточно чувствительных фотоэлектронных умножителей это позволяет регистрировать концентрации флуорофоров, практически недоступные спектрофотометрическому методу. Для веществ с достаточно высоким квантовым выходом флуоресценции удается регистрировать концентрации флуорофора порядка 10" о М и ниже. [c.252]

Наблюдения Гартлея [36], а также Шеппарда и Геддеса [37], что флуоресценция некоторых красителей значительно изменяется в зависимости от того, находятся ли они в растворе или поглощены мицеллами, были успешно использованы в работах Кор-рина и Гаркинса [38], Кольтгофа и Стрикса [39]. Если при постоянной концентрации красителя (около 10 М) постепенно уменьшать концентрацию коллоидного электролита, то по достижении ККМ окраска раствора заметно изменяется вследствие изменения спектра поглощения красителя. Для определения ККМ анионных ПАВ можно использовать пинацианолхлорид и родамин С, в случае катионных ПАВ—небесно-голубой ГГ, эозин, флуоресцеин и дихлорфенолиндофенол. Описаны и другие красители, пригодные для этой цели [40, 41 ]. На ККМ влияет присутствие ионов красителя [42], но влияние это невелико из-за очень малого количества используемого красителя. Если тщательно определить ККМ (по изменению первоначальной окраски) в условиях постепенного уменьшения концентрации красителя до нулевого ее значения, получаемого экстраполяцией, то такие значения ККМ не отличаются от данных непосредственных ее определений. При этом точность оценки положения конечной (экстраполируемой) точки можно увеличить, если использовать серию растворов, концентрации которых близки к ККМ и лежат по обе стороны от нее. При этом конечные точки в течение получаса постепенно сдвигаются в область более концентрированных растворов [43, 44]. Недостатком этого метода является неопределенность результатов измерений, получаемых при значительном содержании в системе солей или спиртов. Преимущество же этого метода заключается в его большой чувствительности при оценке небольших изменений ККМ (например, в смесях ПАВ) [44]. [c.19]

Высокая чувствительность метода определения концентраций атомов с помощью резонансной флуоресценции позволяет расширить временную шкалу реакций с константами скоростей, приближающимися к частоте бимолекулярных столкновений, до области миллисекунд, доступной для измерений с помощью струевого разрядного метода. Таким путем при 298 К измерена константа скорости очень быстрой реакции С1 + Вгз -> ВгС1 Вг (й = 0,5 212 при 298 К [190]), а также константы скоростей следующих более медленных реакций [c.317]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология