Фильтрование белковых веществ

Нормальное функционирование клетки, т. е. обмен веществ, рост и размножение может происходить только тогда, когда в ней имеется достаточное количество воды и если клетки погружены в водную среду с растворенными в ней питательными веществами. При отделении клеток от питательной среды, например путем центрифугирования или фильтрования, обмен веществ продолжается до тех пор, пока в межклеточном пространстве имеется вода и в ней растворены питательные вещества. После их использования обмен веществ в клетках продолжается за счет клеточных резервов (углеводы, липиды) в том случае, есл 1 сохраняются оптимальные температура и реакция среды. Когда использованы и резервные вещества, начинается автолиз клеток— саморазрушение, в результате которого белки распадаются на аминокислоты и углерод аминокислот идет для энергетических нужд. [c.24]

Эти примеси находятся в виноматериале в растворенном состоянии или имеют очень мелкие размеры (муть), что исключает или затрудняет возможность их удаления механическими способами. Поэтому виноматериалы обрабатывают реактивами (сернистый ангидрит, танин, желтая кровяная соль), чтобы растворимые примеси (соли тяжелых металлов, белки, алкалоиды и др.) преобразовать в нерастворимые частицы. Затем виноматериал смешивают с липкими веществами (рыбий клей) и адсорбирующими средствами (отбеливающая глина — бентонит). В результате такой обработки (оклейки) происходит коагуляция примесей и образование осадка в виде хлопьев. Далее виноматериал очищают (осветляют) от этих хлопьев методами осаждения или фильтрования. [c.142]

Очистка хлороформного извлечения. Хлороформное извлечение из щелочного раствора часто бывает загрязнено жиром, продуктами распада белков, красящими, дубильными и другими веществами. Поэтому в случаях, когда остаток, полученный испарением хлороформа из щелочной хлороформной вытяжки, большой по объему, маслянистый и окрашен в буроватый или бурый цвет, его необходимо подвергнуть очистке. Однако очистку следует производить чрезвычайно осторожно, так как каждая лишняя операция, например извлечение или фильтрование, ведет к потере части вещества. [c.164]

Кровь является полидисперсной системой, имеющей сложный химический состав и своеобразные физико-химические свойства. Кровь позвоночных, как известно, имеет устойчивую величину pH, равную 7,4 0,05. Постоянная величина концентрации водородных ионов в крови поддерживается различными буферными системами бикарбонатной, фосфатной, гемоглобиновой, белками плазмы. Осмотическое давление крови меньше, чем мочи. Белки и углекислота, присутствующие в крови, облегчают растворение в ней различных веществ. Будучи гетерогенной системой, кровь при прохождении через хроматографическую колонку или через толщу бумаги подвергается одновременно процессам фильтрования, сорбции, ионного обмена и распределения, т. е. физико-механическому, физико-химическому и чисто химическому разделению. [c.342]

Мышечную ткань (1 г) тщательно растирают в течение 3—5 минут в ступке с 10 каплями дистиллированной воды до получения гомогенной кашицы, затем добавляют 4 мл воды и тщательно растирают еще несколько минут. Содержимое ступки переносят в широкую пробирку и нагревают на голом огне до кипения. Выпавший осадок белка отделяют фильтрованием, а полученный фильтрат используют для обнаружения экстрактивных веществ креатина, карнозина и молочной кислоты. [c.255]

В полученную взвесь вводят определенный объем исследуемой крови и осаждают ее белки нагреванием, при этом сахар остается в растворе. Осадок белков отделяют фильтрованием, а к фильтрату добавляют определенный объем титрованного раствора красной кровяной соли и нагревают. При нагревании редуцирующие вещества крови восстанавливают эквивалентное количество красной кровяной соли в желтую кровяную соль. [c.162]

В нашей стране сахарозу добывают исключительно из свеклы. Технология свеклосахарного производства довольно проста. Корни свеклы мелко разрезают на тонкие пластинки и в особых аппаратах — диффузорах — подвергают выщелачиванию водой. Наряду с сахаром в раствор переходит ряд веществ, содержавшихся в корнях свеклы (азотистые соединения, белки, органические кислоты, пигменты и т. д.). Чтобы освободить раствор от примесей, его обрабатывают известью, осаждающей эти примеси. При этом сахароза образует с известью сахарат кальция, остающийся в растворе. Для разложения сахарата кальция и удаления избытка извести пропускают в раствор углекислый газ. После фильтрации раствор упаривают в вакуум-аппаратах и отделяют выпавшие из раствора кристаллы (сахарный песок) на центрифугах. Маточный раствор (патока) находит применение в. кондитерском производстве, а также используется для переработки на спирт. Для окончательной очистки рафинирования) сахарный песок растворяют в воде, очищают фильтрованием через костяной уголь и упаривают до консистенции густой каши. Затем выливают в формы и высушивают в камерах под уменьшенным давлением. [c.291]

Большинство купажей перед их отгрузкой для физического осветления и осаждения полифенольных соединений подвергают осветлению (традиционно его проводили яичным белком, но в настоящее время чаще применяют казеин, желатин или рыбий клей). Затем осуществляют фильтрование, перед которым иногда используют центрифугирование для ускорения разделения сухих веществ. Для удаления из вина нестабильных белково-полисахаридных комплексов может также проводиться осветление бентонитом. Проведение таких предваряющие охлаждение процедур желательно для удаления ингибиторов кристаллизации битартрата калия (иначе в процессе обработки холодом не будет должной степени кристаллизации). [c.227]

В первую очередь необходимо удалить примеси в виде взвесей — пыль и т.д., присутствующие в любом жире. Это осуществляется отстаиванием или лучше фильтрованием. Собственно рафинирование состоит из следующих операций а. удаления коллоидно растворенных веществ белков, слизистых веществ и фосфатидов в большинстве случаев неопределенного состава, известных под названием слизистых материалов б. удаления свободных жирных кислот (нейтрализация) в. отделения красящих веществ (обесцвечивание, отбелка) г. удаления летучих веществ с малыми молекулами — углеводородов, альдегидов или кетонов, придающих жиру неприятный запах и вкус (дезодорация). [c.780]

Определение кальция, содержащегося в той части крови, которая не задерживается ультрафильтром, явилось предметом подробных исследований. Соответствующие методы применяются при проведении некоторых клинических анализов. Известно, что часть кальция, содержащегося в крови, соединяется с белками, крови и может быть выделена с помощью непроницаемого для белков ультрафильтра. Другие физиологические жидкости, например спинномозговая жидкость, также были исследованы с помощью этого метода, хотя и не так подробно. При исследовании крови, особенно у маленьких детей, очень трудно получить ее-в таком количестве, которое было бы достаточно для проведения анализа с помощью обычных методов. В еще большей степени это относится к работам, связанным с исследованием крови небольших лабораторных животных. При использовании ультрамикрометодов можно определять как количество кальция, проходящее через ультрафильтр, так и количество его, содержащееся в веществах, задерживаемых ультрафильтром, причем количества крови, требуемое для анализа, может быть легко снижено до 0,1 мл.. Кроме того, фильтрование таких маленьких количеств может быть осуществлено проще и быстрее, чем фильтрование больших количеств. [c.178]

Очень важно не смешивать понятия самопоглощения и туше-лия. Корректировка тушения, обсуждавшаяся выше, вносит поправку только на изменения р-спектра, связанные со свойствами сцинтилляционного раствора, и не дает информации о степени самопоглощения. При работе с нерастворимыми образцами или частицами, собираемыми на фильтре, потери будут вызываться физическими свойствами самого образца . Вообще самопоглощение является сложной проблемой и часто служит главной причиной низкой эффективности счета. Это относится в особенности к изучению таких макромолекул, как белки и нуклеиновые кислоты, поскольку наиболее общей методикой приготовления образцов является осаждение макромолекулы кислотой (соляной, хлорной или трихлоруксусной) и отделение осадка на фильтре. При наличии самопоглощения некоторого увеличения эффективности счета удается добиться с помощью уменьшения размеров образца, если образец очень велик, и при фильтровании, так как осадок может образовывать толстый слой. Однако разбавление не всегда устраняет самопоглощение вследствие того, что большинство веществ и без того имеет минимальный размер частиц, который не уменьшается при разбавлении. К сожалению, в случае р-частиц с низкой энергией, таких, как у Н, самопоглощение, обусловленное такими микрочастицами, всегда вносит некоторый вклад. Вообще самопоглощение не может быть устранено никаким другим методом, кроме переведения исследуемого вещества в раствор. [c.119]

Очистка соков. В диффузионный сок из свеклы переходит до 98 % сахарозы, 80 % растворимых несахаристых веществ (белков, пектинов, сапонинов, органических кислот и минеральных элементов), до 1 г/л мезги. Несахаристые вещества и мезгу максимально удаляют, что повышает выход и качество сахара. Для этого сок 2—4 раза обрабатывают раствором гидроксида кальция (известковым молоком), 2—4 раза — диоксидом углерода (сатурируют), удаляют осадок углекислого кальция фильтрованием [41], [c.52]

Нерастворимые примеси (белки — 0,3—0,7%, жир — 0,2—0,4, мелкая мезга — 0,05 и другие взвешенные вещества— всего до 1,5%) удаляются фильтрованием с предварительным нанесением на фильтрующую ткань присадки (перлит, кизельгур, бентонит). Расход фильтрующего порошка обычно 0,8—0,9 % к массе перерабатываемого крахмала. Температура фильтрования 75—80 °С. При избыточном давлении 0,05—0,15 МПа можно достичь скорости фильтрования 160—200 л/м -ч. Для фильтрования применяют барабанные вакуум-фильтры с микросъемом осадка. [c.103]

Обычно для фильтрования через сефадекс используют колонки с впаянным фильтром из пористого стекла, причем мертвое пространство под фильтром должно быть возможно меньшим. Наполнение колонки проводят так же, как при подготовке колонок для хроматографирования через иониты (см. гл. XX). Сефадекс наливают в колонку в виде суспензии и дают ему осесть. Вещество наносят в виде максимально концентрированного раствора, избегая взмучивание верхнего слоя сефадекса. Скорость вымывания может быть значительна по сравнению с ионитами, так как равновесие устанавливается очень быстро. Контроль фракций может быть осуществлен спектрофотометрически (для белков и нуклеиновых кислот) или измерением электропроводности (для неорганических солей). На рис. 222 изображен [c.204]

Ступенчатое наращивание пептида с применением второй фазы впервые проведено Меррифилдом на примере твердофазного пептидного синтеза (разд. 2.2.7.1). При реакциях в гетерогенной фазе вероятность встречи реагирующих партнеров гораздо ниже, чем в гомогенном растворе. Для получения высокой степени превращения требуется значительный избыток ацилирующего средства. Преимуществом этой стратегии является простота технических операций и связанная с этим возможность автоматизации. Трудные операции очистки промежуточных веществ традиционного синтеза заменяются простыми процессами фильтрования и промывания. Однако на этом пути однородный продукт синтеза получается только в том случае, если каждая реакция в гетерогенной фазе протекает практически количественно. Несмотря на большие избытки карбоксикомпонента, использование которых чревато опасностью N-ацилирования пептидной связи, полное превращение на каждой стадии в настоящее время недостижимо. На практике средний выход на одну стадию 95—99%, что недостаточно для синтеза длинных пептидов или белков. Средние выходы на одну стадию и полные выходы (в зависимости от длины цепи) приведены в табл. 2-10. Как показывает практика, короткоцепочечные пептиды или их аналоги длиной до -15 аминокислотных остатков могут быть получены твердофазным методом. Трудности при синтезе небольших белков наглядно демонстрируются данными табл. 2-10. Еще хуже сказывается накопление не- [c.214]

Очистка остатка, исследуемого на алкалоиды, после их изолирования по методу В. Ф. Крамаренко. На основании данных литературы и собственных исследо-ван1п 1 В. Ф. Крамаренко рекомендует для очистки применять высаливание белков и продуктов их распада безводным сульфатом аммония, центрифугирование и экстрагирование этиловым эфиром веществ, сопровождающих алкалоиды. Методика очистки описана на стр. 129. Этим способом очистки устраняются процессы фильтрования, приводящего к потере алкалоидов за счет адсорбции фильтром и образования стойких эмульсий. Потери алкалоидов при этом способе очистки, по данным В. Ф. Крамаренко, не превышают 1—3%. [c.165]

Большое значение при некоторых заболеваниях имеет определение остаточного азота. Под остаточным азотом подразумевается азот всех небелковых азотистых веществ крови (азот мочевины, мочевой кислоты, креа тина, креатинина, индикана и т. д.). Для определения остаточного азота надо осадить белки и отделить от них фильтрованием небелковые части, [c.233]

В последние годы для разделения белков с различными молекулярными весами широко применяется метод хроматографии на сефадексе (гельфильтрация). Сефадекс представляет собой мелкозернистый порошок, изготовленный из полисахарида декстрана, углеводные цепочки которого дополнительно соединены мостиками глицерина. В результате каждое зерно сефадекса представляет собой клубок из полисахаридных цепей, внутрь которого могут проходить вещества с определенным для каждого типа сефадекса молекулярным весом. При фильтровании раствора, содержащего смесь бел- [c.55]

Ксантогенат целлюлозы растворяется в разбавленных растворах щелочи, образуя молекулярные растворы (по данным Штаудингера с сотрудниками). В этих растворах происходят гидролитические и окислительные процессы. Растворы ксантогената целлюлозы, содержащие около 8% целлюлозы и 6—7% едкого натра, после фильтрования подвергаются процессу созревания (при 18° в течение 60—70 час.). При этом наряду с деструкцией целлюлозы ) протекает ряд химических реакций, на которых мы не будем останавливаться. Во время созревания проводят удаление из вискозного раствора содержащихся в нем пузырьков воздуха, обусловливающих значительные трудности при формовании волокна. На этой стадии процесса к вискозному раствору добавляют матирующие вещества (обычно ТЮ2) и другие добавки (казеин и другие белки, различные амины и их производные). [c.119]

Существуют разнообразные способы для очистки жиров и масел. Посторонние твердые вещества могут быть удалены фильтрованием или декантацией, свободные жирные кислоты — взбалтыванием с водным раствором щелочи. Если присутствуют белки, их можно в некоторых случаях коагулировать пропусканием пара и отде.тить фильтрованием. Окрашенные жиры и масла могут быть обесцвечены воздухом, озоном или такими окис.иителями, как двухромо в о к и с л и г г к а л и й. [c.310]

В литературе отмечается ряд закономерностей, обусловленных дополнительным введением в культуральную жидкость флокулянтов перед процессом фильтрования. Предварительная обработка флокулянтом позволяет а) существенно увеличить размеры и прочность клеточных агрегатов б) вследствие связывания полиэлектролитами компонентов культуральной жидкости (белков, полисахаридов) снизить вязкость раствора и, как следствие, повысить скорость и производительность фильтрования в) улучшить прилипаемость флокул на зернах вспомогательных фильтрующих веществ. Образующийся на фильтре осадок становится более прочным и устойчивым к действию разрушающих сил потока фильтруемой жидкости. Образование в присутствии флокулянта более прочных осадков обеспечивает меньший вьшос хлопьев из загрузки, что повышает качество фильтрования, избавляет от необходимости рефильтрации либо другой дополнительной обработки культуральной жидкости. Особенности процесса фильтрования дисперсий, обработанных флокулянтом, позволяют рассматривать его как особый вид контактной флокуляции-фильтрования. [c.112]

При более тщательном исследовании Флодин [19] установил следующие моменты. Действие колонки можно повысить наиболее эффективно путем уменьшения размера частиц декстранового геля. Вязкость исследуемого образца ставит некоторый предел применимости метода фильтрования через гели, однако эффекты разделения не зависят от концентрации растворенных веществ. Из раствора белка можно полностью удалить соли, используя для элюирования воду, но так как в этих условиях некоторые белки склонны выпадать в осадок, элюирование, видимо, лучше проводить при помощи летучего буферного раствора. Декстраны, помимо эффекта молекулярного сита, слабо адсорбируют ароматические и гетероциклические соединения кроме того, в зависимости от ионной силы и pH геля [20] может наблюдаться сильная адсорбция некоторых основных веществ. [c.219]

Конденсационные способы, иногда неправильно называемьш химическим диспергированием, применяются чащ всего на последней стадии синтеза — выделении исходных пигментов. При этом возникает проблема фильтрования суспензии тонкодисперсных пигментов [73], отгонки растворителей, отмывки от кислот солей и т. п., а также утилизации или обезвреживания стотаых вод. Улучшение фильтрования должно осуществляться на основе исполь-зования коллоидно-химических приемов, позволяющих временно укрупнить дисперсную фазу для ее отделения от дисперсионной среды. Для этого рекомендуют применять белковые вещества в присутствии Продуктов типа ДНФ в кислой среде [74] при оптимальном значении pH — ниже изо электрической точки белка затем комплекс белок — ДНФ разрушают добавкой щелочей для этой же цели иногда вводят коагулянты типа полиакриламида [75]. [c.55]

Фильтрование через гели. Разделение веществ по молекулярному весу было впервые обнаружено при фильтровании через слои набухших зерен крахмала и агар-агара белков. Оказалось, что низкомолекулярные соединения достаточно глубоко диффундируют в объем зерен геля и по этой причине труднее вымываются носителем. Высокомолекулярные соединения, чья диффундирующая способность ниже, остаются в токе носителя и быстрее выходят из колонки. В настоящее время в качестве гелеобразующих веществ широко применяют декстраны с поперечными связями, известные под фирменным названием сефадексы . [c.89]

Из вина необходимо удалить растворенный кислород или уменьшить его содержание до значений менее 0,5 ррш путем введения перед розливом азота. Вина со стойкой склонностью к потемнению можно обрабатывать веществами, удаляющими фенольные соединения, — например, ПВПП. Тем не менее следует заметить, что такие вещества зачастую сказываются на вкусо-ароматических характеристиках вина. Менее сильным осветлителем, также способным удалять избыточное потемнение, является казеин (фракция молочного белка, денатурирующая и флокулирующая в кислой среде вина). Хлопья казеина вместе с темным фенольным пигментом выпадают в осадок, который можно удалить путем фильтрования. [c.141]

Обработка портвейна после его созревания производится обычно согласно принятой энологической практике. Осветление осуществляют, как правило, с помощью белоксодержащих веществ — желатина, яичного белка или казеина. Для удаления нестабильных белковых фракций из светлых портвейнов может применяться бентонит. На некоторых винзаводах для уменьшения выпадения осадка при созревании молодых виноматериалов используют центрифугирование. Большинство рубиновых и относительно молодых золотистых портвейнов для удаления нестабильных тартратов, красящих и коллоидных веществ подвергают стабилизации холодом. Чаще всего применяют две технологии 1) пропускание вина через теплоообменник и ультра-кулер для понижения его температуры до примерно -8 °С с последующей стабилизацией в хорошо изолированных или охлаждаемых танках, и 2) применение системы охлаждения непрерывного действия, в которых вино охлаждается и непрерывно пропускается через кристаллизатор, где суспендируются кристаллы битартрата калия (они служат своего рода затравочными кристаллами для дальнейшей кристаллизации) [ 130]. И в том и в другом случае вино после стабилизации фильтруют через диатомитовые фильтры, а затем через пластинчатые и при необходимости патронные мембранные или погружные фильтры. Известны эксперименты по применению тангенциально-поточного фильтрования [75] до или после стабилизации, но в промышленном масштабе оно еще не применяется. Для предотвращения последующего осаждения макромолекул рекомендуется применять после стабилизации холодом ускоренную пастеризацию [9], и некоторые виноделы до сих пор ее применяют при обработке молодых вин, несмотря на возможное увеличение содержания этилкарбамата [22] (см. также подраздел Этилкарбамат ). Недавние эксперименты по электродиализу для стабилизации портвейна по сравнению с традиционными методами дали лучшие результаты относительно вкуса и аромата, энергозатрат и расходов на фильтрование. [c.239]

В этих случаях предварительно приходится удалять белки, пектиновые вещества, жиры и т. п. Водную суспензию исследуемого материала, обработанную винной или (осторожно) серной кислотой, нагревают с обратным холодильником на водяной бане в течение 15 мин., затем дают охладиться, смесь фильтруют и остаток на фильтре промывают спиртом. Кислый фильтрат выпаривают в чашке на водяной бане до сиропообразного состояния и затем перемешивают его с 100 мл холодной воды. При этом выделяется часть примесей (жиры и смолы). Раствор фильтруют через увлажненный фильтр и снова выпаривают до получения жидкого сиропа. Последний перемешивают с абсолютным спиртом, причем белки, альбумозы, пептоны, декстриноподобные вещества и неорганические соли оседают в виде вязкой массы, со временем превращающейся в твердый порошкообразный остаток. После фильтрования получают раствор, в котором алкалоид присутствует в виде виннокислой или сернокислой соли. Спирт упаривают, остаток растворяют в воде и из этого раствора извлекают, как упоминалось выше, алкалоиды. [c.391]

Процесс химического анализа известен с незапамятных времен. Согласно историческим данным, еще император Вавилона (VI век до н. э.) писал об оценке содержания золота. Древнеримский писатель, ученый и государственный деятель Плиний Старший (I век н. э.) упоминает об использовании экстракта дубильных орешков в качестве реактива на железо в растворе сульфата железа папирус чернел. Венгерский химик Ф. Сабадвари в своей книге указывает на то, что в древности были известны несколько способов определения чистоты олова. В одном из них расплавленное олово лили на папирус. Если папирус прогорал, то олово чистое, если нет, значит, в олове есть примеси. В то время людям еще не была понятна химическая сущность вещества. Тем не менее, изготовление папируса и чернил было иллюстрацией применения на практике знаний химических свойств различных веществ. Также было уже известно о выделении примесей из воды (для этого воду нагревали в котлах), об очистке воды фильтрованием и об ее осветлении при помощи яичного белка. [c.17]

Метод анализа белков, использующий влияние концентрации белка на показатель преломления раствора, был введен в 1903 г. Рейссом 1152] и позже развит Робертсоном [153]. Когда в 1925 г. физические методы анализа белков были рассмотрены Штарлингером и Гартлем [154], уже было известно, что рефрактометрический метод имеет серьезные ограничения 1 г белка, растворенный в 100 мл водного раствора, повышает показатель преломления растворителя приблизительно на 0,0018. Так как предельная чувствительность рефрактометров Пульфриха или Аббе равна 0,0001, ясно, что при пользовании этими приборами чувствительность метода меньше, чем метода удельного веса. Погружательный рефрактометр, который несколько более чувствителен, требует значительно большего количества вещества. Влияние на показатель преломления 1 г минеральной соли, растворенной в том же количестве раствора, имеет тот же порядок величины, что и для 1 г белка, и может даже быть значительно больше. Поэтому для обычных анализов обсужденные ранее предположения могут оказаться несправедливыми. При надлежащей осторожности метод применим в той же степени, что и другие методы определения физических констант. Критический анализ условий приложения метода к анализу казеина в сливках молока дал удовлетворительные результаты [155]. Казеин сперва осаждался и промывался, а затем снова растворялся для определения. Аналогичная методика была осуществлена для серума крови Зибенма-ном[156], который измерил различие в преломлении дон после тепловой коагуляции белков при pH 4,6, и для сока картофеля Вольфом [157], который применял интерферометр, дающий большую точность, чем рефрактометр, и удалял белок кипячением и фильтрованием. См. также работы по применению метода показателя преломления для анализа белков серума [158, 159]. [c.31]

Для адсорбции следует выбрать такой стартовый буфер, который обеспечил бы максимальное связывание, например, белка с лигандом и минимальное взаимодействие между молекулами белка. Таким образом, необходимо учитывать pH и присутствие в реакционной смеси специфических ионов или каких-либо веществ, а буфер должен иметь высокую ионную силу, например содержать 0,5 М Na l. Пробу вводят в стартовый буфер, и при необходимости ион, содержащийся в пробе, замещают ионом буфера с помощью диализа, мембранного фильтрования или гель-фильтрации. [c.220]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология