Хроматография стартовое пятно

В одной из таких разработок за основу взят имеющийся в продаже автоматический пробоотборник, используемый в газовой хроматографии. Диаметр стартового пятна Ьд при нанесении проб малого объема не превышает 1 дмм, а диаметры пятен после разделения не превышают 1 — 3 мм в зависимости от длины пути. [c.220]

Для диагностики блоксополимеров ПС-ПЭО сравнивалась хроматографическая подвижность их и соответствующих гомополимеров большого МБ, кроме того для диагностики использовалось также двойное окрашивание хроматографического пятна реактивом Драгендорфа, который окрашивает ПЭО-блоки в оранжевый цвет, и 3 % -ным раствором КМпО в 112804, который окрашивает полимер в черный цвет. При двумерной хроматографии (рис. 24), когда в системе, содерн ащей ацетон, с фронтом растворителя движется ПС с МВ до 2-10 , а в водно-пиридиновой системе с фронтом растворителя движется ПЭО с МВ 3 -10 , двойное окрашивание стартового пятна могло быть связано только с присутствием в нем блок-сополимера ПС-ПЭО. [c.158]

Рис. 17. Пластинка для канальной тонкослойной хроматографии / — стартовая линия 2—фронт растворителя 3 —царапины в тонком слое, доходящие до стекла пятно уг.те-водородов после проявления иодом.

Хроматография на бумаге. Небольшое количество исследуемой смеси наносят на лист бумаги, высушивают (образуется стартовое пятно), помещают лист в герметическую камеру и один конец погружают, например, в воду.. Вода движется к противоположному краю листа бумаги и увлекает за собой компоненты стартового пятна. Затем лист высушивают и отмечают положение пятен, которые-обнаруживаются по цвету, флуоресценции, радиоактивности. Идентифицируют пятна путем сравнения с образцом, а затем элюируют. В данном приеме распределительной хроматографии носителем служит целлюлоза, сорбентом — связанная целлюлозой вода, а растворителем — чаще тоже вода. [c.107]

Тонкослойная хроматография [20— 22]. Разделение проводят на стеклянных пластинках, равномерно покрытых слоем активированного твердого адсорбента. На нижнюю (стартовую) линию пластины наносят капли исследуемой смеси, после чего пластину под определенным углом погружают в ванну с десорбентом так, чтобы уровень его был ниже стартовой линии. При движении фронта растворителя происходит разделение компонентов смеси. Для идентифицирования образовавшихся пятен хроматограмму проявляют с помощью тех или иных реагентов или рассматривают пластину в ультрафиолетовых лучах. Затем измеряют площадь образовавшегося пятна и Л/. Обычно величина характерна для индивидуальных соединений или групп однотипных соединений. [c.83]

Гораздо меньшие затраты на аппаратуру требуются для гель-хроматографии в тонком слое (см. гл. П). В этом случае в конце опыта вместо объема выхода необходимо измерить расстояние от стартовой линии до пятна вещества — длину пробега ]56]. При стандартизации результатов хроматографии на бумаге длину пробега относят к пути, пройденному растворителями (определяют величину / /) в тонкослойной гель-хроматографии длину пробега исследуемого вещества относят к пути, пройденному хорошо идентифицированным веществом [72]. Для белков (а только для них тонкослойная гель-хроматография и применялась до настоящего времени) удается таким образом определять молекулярный вес, имея в распоряжении всего несколько микрограммов вещества [56, 72, 73]. В качестве стандартов здесь также используются белки, приведенные в табл. 22. Из фиг..36 видно, что отношение длины пробега ряда белков к пути, пройденному цитохромом с, является линейной функцией от логарифма молекулярного веса. Как показывает опыт, эту калибровочную линию нельзя считать достаточно универсальной, поскольку ее наклон довольно сильно изменяется от одной серии экспериментов к другой. Результаты определения молекулярного веса становятся более точными, если соответствующие стандартные белки наносят на каждую пластинку. Это вполне возможно, так как на пластинку шириной 20 см свободно можно одновременно нанести по меньшей мере 10 образцов. Благодаря несложному оборудованию и небольшим затратам вещества точность определения молекулярного веса этим методом можно повысить. [c.167]

Результаты хроматографии на обычной или ионообменной бумаге выражаются величиной Эту величину определяют как расстояние, пройденное пятном мигрирующего вещества, поделенное на расстояние, пройденное проявителем (или растворителем). Оба расстояния замеряют от стартовой линии, т. е. от того места на бумаге, куда наносят образец. Во многих случаях чаще используют параметр который определяется следующим уравнением [c.315]

При хроматографическом разделении готовят пластины для тонкослойной хроматографии. Для этого оксид алюминия наносят на поверхность стеклянной пластины, отмечают линию старта на расстоянии 15 мм от нижнего края. Вдоль пластины с правой стороны отделяют полосу шириной 20 мм. Наносят 0,5 мл бензольного экстракта на стартовую линию широкой (левой) части пластины. На стартовую линию узкой части наносят свидетель — 0,1 мл стандартного раствора бенз[а]пирена с концентрацией 10 мкг/мл. После испарения бензола пластину нижним концом помещают в чашку Петри со смешанным раствором -гексана и бензола (2 1). Верхний конец пластины опускают на край чашки и чашку с пластиной помещают в эксикатор для хроматографического разделения. После достижения растворителем верхнего края пластину вынимают и просматривают в ультрафиолетовом свете, отмечая зону бенз[а] пирена в пробе на уровне флуоресцирующего пятна свидетеля . Ширина люминесцирующей зоны бенз[а] пирена в пробе на уровне свидетеля должна быть не менее. 30 мм. Оксид алюминия с бенз[а]пиреном переносят в воронку с беззольным фильтром и добавляют 50—100 мл бензола, который затем упаривают на водяной бане до 5 мл. [c.293]

Важной характеристикой в бумажной распределительной хроматографии, так же как и в ТСХ, является К =х1х, где х — смещение зоны компонента х/ — смещение фронта растворителя. Методика определения в бумажной хроматографии не отличается от соответствующей методики в ТСХ, основанной на измерениях в соответствии с рис. 17.8. В начальный момент времени хроматографируемая проба наносится на начальную (стартовую) линию бумажной полоски и подвергается действию подвижной фазы (растворителя). Если компоненты окрашены, через некоторое время на хроматограмме можно будет видеть отдельные цветные пятна. Первый компонент будет иметь Я/,=х1/х1, второй — Я 2=Х2/Х1 и т. д. [c.348]

Из рис. 26 и табл. 3 видно, что эффективность разделения, определяемая числом теоретических тарелок, также резко отличается для хорошо и плохо сорбируемых компонентов. С уменьшением сорбируемости эффективность разделения возрастает. Такая же закономерность отмечена для разделения методом газовой хроматографии, однако, в случае ТСХ числа теоретических тарелок для крайних пятен хроматограмм отличаются в 10 и более раз. Столь существенная разница, в известной мере, объясняется тем, что при расчете не вводится поправки на диаметр пятна на стартовой линии. В целом же это свидетельствует о большей эффективности метода ТСХ. [c.228]

Вместо величины Rf иногда используют величину Ях, где X — какое-то известное вещество, применяемое в качестве стандарта. Значение Ях данного вещества выражает отношение расстояния от стартовой линии до пятна данного вещества к расстоянию, пройденному стандартным веществом X от стартовой линии. Эту величину используют преимущественно в проточной хроматографии, где растворитель, достигнув края бумаги, стекает с него, так что расстояние между фронтом растворителя и стартовой линией измерить нельзя, но можно определить расстояние, пройденное стандартным веществом. Поэтому стандартное вещество не должно перемещаться по хроматограмме слишком быстро, так как иначе оно тоже может стечь с бумаги. [c.79]

Даже несколько пятен в средней части хроматограмм (также, как и на стартовой линии) не всегда доказывает независимое существование различных веществ в исследуемом препарате. Для того чтобы определить, действительно ли произошло разделение, можно использовать два метода. Во-первых, провести препаративное разделение и повторное хроматографирование и, во-вторых, использовать метод так называемой диагональной хроматографии , т. е. двумерной хроматографии в одной и той же системе растворителей. При повторном хроматографировании независимо существующие вещества продвинутся на такое же расстояние, как и при первом, и расположатся на диагональной линии, проходящей через стартовую точку. Если же одно из веществ переходит в процессе хроматографирования в другое, то на хроматограмме выявятся пятна, которые не лежат на диагональной линии. [c.29]

На бумагу наносят образец в виде пятна диаметром около 5 мм, содержаи1,его от 0,01 до 0,3 мг веи1,ества, или полосы шириной около 5 мм, содержащей около 0,2—0,5 мг на 1 см длины. Прн нисходящей хроматографии стартовую полосу следует наносить на вертикальный участок бумаги >(ни в коем случае не на участок между лодочкой и направляюи ей планкой). [c.468]

При восходящей хроматографии стартовая линия должна быть на расстоянии 15—20 мм от поверхности жидкости. На двумерную хроматограмму наносят пятно диаметром около 5—8 мм, содержаи1,ее от 0,3 до 1 мг вещества. Схема одномерной хроматограммы приведена на рнс. 435. [c.468]

Смесь 5 г 1,2-0-циклогексилиден-3-0-бензнл-а-Д-ксило-пентадиальдо-1,4-фуранозы [2] и 2,2 г р-нафтиламина растворяют в 100 мл эфира и выдерживают в течение суток при комнатной температуре. Затем добавляют 1,2 г свеже-перегнанной пировиноградной кислоты и смесь выдерживают 30 суток при комнатной температуре. Растворитель затем отгоняют и сухой остаток растворяют в этилацетате и хроматографируют на колонке с окисью алюминия в хлороформе, периодически проверяя отбираемые фракции при помощи тонкослойной хроматографии на окиси алюминия на наличие стартового пятна, после появления которого вводят в колонку смесь этилацетат—этанол—вода 5 3 1 и продолжают элюирование до полного выхода вещества из колонки. Фракции, содержащие стартовый материал, объединяют, промывают 5%-ной серной кислотой и водой, органический слой сушат сульфатом натрия, чистят активированным углем, затем растворитель отгоняют. Сухой остаток растворяют в бензоле при нагревании, упаривают бензольный раствор до 50 мл, охлаждают, выпавшие кристаллы отделяют и сушат. Повторная обработка маточного раствора активированным углем с последующим частичным упариванием дает дополнительные количества вещества, общий выход которого составляет 2,2 г. После перекристаллизации из этилацетата получают бесцветные кристаллы т.пл. 198° (с разложением) [а]д —70° (хлороформ). [c.156]

Все три способа разделения, колоночная, линейная ТСХ и круговая ТСХ, характеризуются продольной диффузией, не мешающей разделению, одпако колоночная хроматография характеризуется еще диффузией в двух поперечных направлениях, которая мешает разделению. В линейной ТСХ диффузия протекает в двух взаимно перпендикулярных направлениях (условное допущение), причем поперечная диффузия не мешает разделению. В круговой ТСХ продольная диффузия ухудшает разделение, тогда как поперечная диффузия его улучшает в связи с тем, что радиусы сфер диффузии, в которых происходит движение молекул, суммируются в поперечном направлении. Исследования, посвященные установлению подлинности чисел разделений, не превышающих 100, нашли положительное подтверждение (см. табл. 2.3). Здесь следует рассмотреть тот факт, что число разделений (модель III) получено при ширине пика о = 0,03 и bj = 0,06. Величина — й., = 0,03 соответствует числу тарелок Л эфф = 1500 для даггной конкретной системы. Необходимо также выполнение ряда других условий ширина стартового пятна (например, после фокусировки, как это описано в гл. 3 и 5) и величина молекулярной диффузии вместе не должны превышать 3% длины пути разделения, температура и длительность разделения должны быть достаточно низкими. Величину = 0,03 трудно получить. [c.59]

Так называемая высокоэффективная микротонкослойная хроматография (ВМТСХ) [253, 256, 257, 261, 266, 267] проводится на фирменных слоях силикагеля толщиной 12 мкм. Вещества, поглощающие в видимой и ультрафиолетовой частях спектра, на таких пластинках можно определять в количествах от 100 пг до 100 нг. Интервал определения флуоресцирующих веществ составляет от 10 пг до 100 нг. Анализируемые образцы наносят с помощью специального микрокапилляра таким образом, чтобы диаметр стартового пятна не превышал 1 мм [239]. [c.114]

Интересный результат получается при ТСХ ПММА в камере, насыщенной парами растворителя, при использовании системы хлороформ — метанол (4,5 16) (рис. VIII.14). Здесь верхние пятна полимера располагаются под углом к линии фронта растворителя, что свидетельствует об отсутствии на пластинке градиентных условий. Таким образом, в растворителе одного состава часть полимера остается на старте, в то время как другая часть движется на пластинке по законам элютивной хроматографии. Описанная ситуация может наблюдаться в том случае, если концентрация метанола в элюенте, обеспечивающая осадительную ТСХ ПММА, выше, чем концентрация, при которой происходит растворение этого полимера в области стартового пятна. Переход полимера из адсорбированной на пластинке твердой фазы в раствор происходит через образование гель-фазы. При этом для осуществления первой стадии растворения полимера необходим растворитель лучшего термодинамического качества (содержащий меньшее количество метанола), чем для второй, соответствующей элементарному акту осадительной ТСХ. Это согласуется [c.303]

При работе с сульфидами и их производными целесообразно проверить устойчивость органического соединения серы в предполагаемых условиях хроматографии. Одним из методов, позволяющих во многих случаях получить на это ответ, является двухмерная ТСХ. На несколько стеклянных пластинок размером 13X13 см наносят слои адсорбента толщиной 0,5 мм. На один из углов каждой пластинки одновременно впитывают исследуемый образец органического соединения серы и также одновременно элюируют все пластины (в условиях движения образца). После этого одну из пластин тотчас же подвергают элюированию в направлении, перпендикулярном первому. Остальные пластины перед повторным (двухмерным) хроматографированием выдерживают в течение различных промежутков времени. Если изменений вещества за время контакта не произошло, то, после проявления хроматограммы, пятна находятся на диагонали при изменениях образца пятна сходят с диагонали (часто появляются стартовые пятна). [c.86]

Целесообразность разделительных систем ТСХ с многокомпонентными проявителями, полярность которых сильно различается, намного более проблематична хотя бы только из-за фронтального разделения проявляющей жидкости. В этом случае состав проявляющей жидкости и состав фаз, необходимый для элюирования пятен, можно определить только очень приближенно. Чем больше компонентов содержит проявляющая жидкость в ТСХ, тем меньше имеет смысл переносить результаты разделения, проведенного этим методом, на колоночную хроматографию. Данные колоночной хроматографии следует дополнять данными ТСХ. Так, основываясь на результатах разделения ТСХ, очень просто установить, можно ли элюировать все компоненты с помощью выбранного элюента (в стартовом пятне не остается никакой пробы ). Благодаря разнообразию реагентов для обнаружения такое решение можно принять относительно просто. При использовании селективных реагентов по меньшей мере получают дополнительную информахщю о составе пробы. [c.222]

Нанесение пробы вещества на неподвижную фазу до насто-шцего времени все еще является наиболее критической и длительной по времени процедурой. Анализируемый образец вносят на поверхность слоя сорбента в виде пятна или полосы на небольщом расстоянии от нижнего края пластинки при линейной хроматографии, либо по окружности на периферии пластинки при антикруговой [366] хроматографии. Стартовые зоны должны быть минимальны по размерам диаметр нанесенного пятна 2-4 мм для слоев сорбентов, используемых в ВЭТСХ, оптимальный размер пятен составляет около 1,0 мм. Размер стартового пятна сильно зависит от выбранного растворителя. Центры пятен должны отстоять друг от друга на расстоянии 10-15 мм. Слой сорбента не должен повреждаться при нанесении пробы. Используемый растворитель должен иметь минимальную элюирующую силу (неполярные растворители умень-щают размывание пятна в точке нанесения образца), быть низ-кокипящим, дешевым, нереакционноспособным. Кроме того, он должен хорошо растворять пробу, смачивать слой сорбента и быть достаточно летучим, чтобы его можно было легко удалить с пластины по окончании элюирования. Сорбенты с химически связанными слоями плохо смачиваются некоторыми растворителями, что в значительной степени препятствует проникновению пробы в слой. Это особенно проявляется при работе с обращенно-фазными сорбентами и анализируемыми пробами, растворенными в водно-органических системах. В таких случаях в качестве растворителей рекомендованы метанол, ацетон, ацетонитрил, хлористый метилен. [c.384]

Сочетание ТСХ с газовой хроматографией полезно также в том случае, когда требуется установить, происходят ли в колонке химические изменения в процессе хроматографирования. На стартовую линию наносят исходную смесь и продукты хроматографирования этой смеси в колонке. Полученные результаты сопоставляют. По форме пятен, полученных на пластинке, можно судить о том, где произошло химическое превращение хроматографируемого вещества. Так, если оно произошло в испарителе, пятна получаются небольшими (рис. 1У.21, а). Если же превращение произошло в колонке, пятна имеют значительную длину, так как время взаи- [c.156]

Если при помощи подвижной фазы выбранного состава не удается разделить анализируемую смесь, прибегают к способу двумерной хроматограммы. Для получения двумерной хроматограммы применяют квадратные листы бумаги размером 20X20, 30X30 или 40X40 см. В начале опыта каплю исследуемого раствора наносят на бумагу в ее левом углу на расстоянии 5 см от краев (рис. 11.5, а). После высушивания образовавшегося пятна бумагу помещают в сосуд для хроматографирования, опускают нижний край бумаги в один из выбранных растворителей и производят хроматографирование восходящим способом. После того как фронт подвижной фазы достигнет заданного предела в верхней части бумаги, хроматографирование прекращают, бумагу высушивают и поворачивают ее на 90° против часовой стрелки. При этом место нанесения капли исследуемого раствора окажется справа, а линия, по которой происходил подъем зон анализируемых веществ, образует новую стартовую линию (рис. 11.5,6). В таком положении бумагу помещают снова в сосуд для хроматографирования и опускают ее нижний край в подвижную фазу иного состава и хроматографируют по восходяще.му методу. По достижении фронтом новой подвижной фазы заданной высоты хроматографирование прекращают, бумагу высушивают и проявляют. Получают двумерную хроматограмму такого типа, как изображено на рис. 11,5, в. Двумерная хроматография значительно расширяет возможности распределительной ЖЖХ. [c.219]

Тонкослойная хроматография. Тонкослойная хроматография — эффективный метод анализа сложных смесей веществ различных классов — углеводородов, спиртов, кислот, белков, углеводородов, стероидов II т. д. Она заключается в следующем. На одну сторону небольшой стеклянной пластинки с помощью специального валика наносят тонкий слой сорбента. На стартовую линию слоя сорбента наносят пробы веществ и их смесей край пластинкн ниже стартовой линии погружают в систему растворителей, налитую в широкий сосуд с пришлифованной крышкой. За счет капиллярных сил растворитель продвигается по пластинке. По мере продвижения жидкости по пластинке смесь веществ разделяется. Границу подъема жидкости, илп линию фронта, отмечают, пластинку сушат и проявляют. Отмечают, как указано па рнс. 77, положение пятен, соответствующих исследуемым веществам и находящихся между линией старта и линией фронта жидкости. Для этого измеряют расстояние от центра пятна до стартовой линии (отрезок а). Далее определяют расстояние от линии фронта жидкости до стартовой точки (отрезок Ь). Отношение отрезка а к отрезку Ь обозначают через константу / /, характеризующую положение вен1ества на данной хроматограмме. [c.70]

Подставку помещают в камеру-эксикатор, на дно которого налит раствор кислоты. Следят, чтобы уровень кислоты был ниже нанесенных на стартовую линию пятен хроматографИ руемого соединения. Через 20 мин хроматограмму вынимают иа эксикатора, карандашом отмечают фронт растворителя и переносят на фарфоровый вкладыш эксикатора с концентрированным раствором аммиака. Проявляются пятна 4-нитрофенолятз аммония лимонно-желтого цвета. [c.221]

Метод гель-фильтрации в топком слое (ТСГФ) имеет ряд преимуществ перед колоночной хроматографией. Во-первых, на стартовую линию пластинки шириной, например, 20 см можно нанести 10—15 препаратов в виде пятен диаметром 3—5 мм, что позволяет сопоставлять результаты фракционирования многих препаратов в одном опыте, в идентичных условиях. Во-вторых, благодаря малой толщине слоя геля (0,4—1 мм) объем препарата может быть уменьшен до 5—20 мкл. Соответственно можно сильно уменьшить и количество фракционируемого материала, тем более что для его детектирования в этом случае можно использовать высокочувствительные методы окраски (см. ниже). Нет проблем и с обеспечением ровного слоя препарата — он мигрирует в виде пятна, как обычно при ТСХ. Наконец, нет необходимости ожидать, пока все компоненты фракционируемой смеси один за другим достигнут конца пластинки. Процесс разделения прекращают, как только наиболее быстрый компонент приблизится к нижнему краю геля. В этот момент регистрируют [c.162]

Посторонние примеси. Проводят определение, как описано в разделе Тонкослойная хроматография (т. 1, с. 92), используя в качестве адсорбента силикагель Р4, а в качестве подвижной фазы смесь 5 объемов 1-бутанола Р, 4 объемов воды и 1 объема уксусной кислоты ( 300 г/л) ИР. Наносят отдельно на пластинку по 5 мкл каждого из трех растворов в метаноле Р, содержащих (А) 40 мг испытуемого вещества в 1 мл, (Б) 0,40 мг испытуемого вещества в 1 мл и (В) 0,40 мг бефения оксинафтоата СО в 1 мл. Вынимают пластинку из хроматографической камеры, дают ей высохнуть на воздухе и оценивают хроматограмму в ультрафиолетовом свете (254 и 365 нм). При 254 нм видны два основных пятна на хроматограммах растворов А, Б и В, в то время как при 365 нм флуоресцируют только пятна, близкие к фронту растворителя. Любое дополнительное пятно, видимое на хроматограмме, полученной с раствором А, кроме двух основных пятен, не должно быть более интенсивным при рассмотрении при двух длинах волн, чем пятно, расположенное ближе к стартовой линии при хроматографировании раствора Б. [c.56]

В табл. 6.1 сравниваются различные объел1ы растворов проб, наносимых на пластинку, и плош,ади образую-ш,ихся при этом зон в зависимости от толщины слоя. Для упрощения при расчете не учитывались сферическое расширение пятна и дополнительные адсорбционные эффекты. В то время как в классической тонкослойной хроматографии объем наносимой пробы обычно составляет несколько микролитров, в высокоэффективной тонкослойной хроматографии он должен быть значительно ниже и измеряться в нанолитрах. Объем 100 нл соответствует кубу с длиной ребра 464 мкм, таким образом, объемы 20, 10 и 5 нл соответствуют кубу с длиной ребра 271, 215 и 171 мкм. Из таблицы следует, что площадь пятна расширяется с уменьшением толщины слоя. При толщине слоя 10 мкм проба объемом 10 нл должна занять площадь 1 мм , что означает крайне нежелательное размывание стартовой точки. В соответствии с таблицей до сих пор используемую в ТСХ толщину слоя, равную приблизительно 200 мкм, можно считать оптимальной и для ВЭТСХ. [c.121]

Ход анализа. Навеску дипина-С растворяют в хлороформе и наносят на стартовые линии полосок хроматографической бумаги Шириною 15 мм. Высушивают на воздухе 10 мин и хроматографируют в бутаноле , насыщенном 1,5 н. NH4OH, в течение 18—20 ч методом восходящей хроматографии. Затем полоску высушивают при 130 С в Сушильном шкафу, опрыскивают раствором нингидрина (2,0 г нингидрина + 2 ял ледяной уксусной кислоты в 100 мл ацетона). Хроматограмму после опрыскивания. помещают в сушильный шка(р при 120-130° С при этом проявляется пятно дипина с Rf = 0,5—0,55. [c.66]

Попытки применить описанный выше метод для идентификации аминокислот мелассы не дали положительных результатов. Последнее объясняется не только сложностью мелассы, но и искажением простой распределительной хроматографии рядом побочных явлений. При хроматографировании водного раствора мелассы (4 1) и (9 1) па проявленных листах обнаружена сплошная полоса неразделившихся аминокислот или одно пятно глютаминовой кислоты и длинный до старта хвост . На стартовой линии остается расплывшееся пятно неизвестного [c.214]

Метод ТОНКОСЛОЙНО хроматографии заключается в следующем на одну сторону небольшой стеклянной пластинки наносят тонкий слой сорбента. На такой слой, так же как на бумагу в бумажно хроматографии, на стартовую линию наносят пробы веществ и их смесей и край пластинки, ш же стартовой линии, погружают в систему растворителей. По мере продвижения жид- ости по пластин <е происходит разделение смеси веществ. Гранхщу подъема жидкости или Л Н 1Ю фронта отмечают, пластинку сушат и проявляют подобно бумажной хроматограмме, для обнаружения веществ в виде окрашенных пятен. Отмечают, как указано на рис. 1, положение пятен, отвечающих исследуемым веществам и находящихся между линией старта и линией фронта ж д-кости. Для этого измеряют расстояние от центра пятна до стартовой линии (отрезок АБ). Далее определя от расстояние от линии фронта жидкости до стартово точ и (отрезок АВ). Отношение расстояния от стартовой линии до центра пятна (отрезок АБ) к расстоянию от стартово линии до линии фронта (отрезок АВ) обозначается через константу характеризующую положение вещества на данной хроматограмме. Таким образом, величина 7 / = = АБ1АВ характерна для данного соединения на данном сорбенте и в данной системе и зависит от ряда условий способа работы, качества и активности сорбента, толщины слоя, качества растворителей, количества нанесенного вещества, длины пробега растворителей, положения стартовой линии и почти не зависит от температуры [28]. Для [c.7]

Отмечалось [52], что для получения воспроизводимых результатов при хроматографии в тонких слоях при описании экспериментов желательно указывать вид и тип хроматографических камер, материал, из которого эти камеры сделаны, способ приготовления адсорбционных слоев, тип и качество адсорбента, вид и размер подложки (стекло, пластик и т. п.), толщину слоя сорбента, способ его активации, условия сушки сорбционного слоя, количество хроматографируемых пластинок в камере, способ и метод нанесения на пластинку с сорбентом анализируемого вещества (пятно, полоса), количество испытуемого вещества и положение стартовой линии, способ хроматографирования (восходящая, нисходящая или горизонтальная хроматография), состав применяемых растворителей, степень насыщения камеры растворителем, температуру и влажность, при которых проводится разделение, способ идентификации анализируемых веществ на пластинке (погружение, опрыскивание или др.), использованные для этой цели реагенты, цвет и усто1 чивость окрашенных пятен, чистоту и квалификацию химических реактивов, а также другие детали эксперимента. [c.38]

Хроматографическое разделение экстракта на бумаге. Для хроматографического разделения эндогенных гиббереллиноподобных веществ используют бумагу быстрая или средняя Ленинградская № 2, промытую 20%-ным раствором химически чистой муравьиной кислоты, разрезанную на полосы размером 15 X 40 см, с продольным расположением волокон по длине полосы. Разделение проводят нисходящим током растворителя в цилиндрических камерах (высотой в 60 см) с притертой крышкой, стеклянной подставкой и хроматографической лодочкой (объемом 50 мл) для помещения растворителя. Спиртовой экстракт наносят на стартовую линию пипеткой сплошной полосой в объеме 1 мл на специальном станке в токе холодного воздуха. При хроматографии используют растворитель изопропиловый спирт (С3Н7ОН) — вода (5 2), для насыщения атмосферы хроматографической камеры на дно наливают ту же смесь растворителя в другом соотношении (2 5). В системе растворителей с нейтральной реакцией, в отличие от системы с кислой реакцией изопропиловый спирт — уксусная кислота — вода (4 1 5) и системы со щелочной реакцией изопропиловый спирт — МН40Н — вода (10 1 1), гиббереллиноподобные вещества располагаются компактным пятном с хорошо очерченными краями. [c.52]

Нанесение пробы является одной из наиболее критических стадий в тонкослойной или бумажной хроматографии. При проведении анализа проба обычно наносится в виде маленького пятна правильной формы, в препаративной хроматографии на стартовую линию пластинки или бумаги наносится тонкая полоска. Важно, чтобы поверхность абсорбирующей среды не имела повреждений и чтобы размеры пятна или полоски были не слишком велики. При использовании разбавленных растворов предпочтительно наносить пробу несколькими небольшими порциями, а не одной большой дозой, дающей бoJ Iьшoe пятно неправильной формы. Нанесение пробы требует довольно высокого мастерства и для получения надежных результатов должно проводиться с предельной тщатачьностью. [c.272]

Устройства для нанесения полосок используют прежде вс.его для очистки образцов в микропрепаративном масштабе. Существуют два способа нанесения полосок нанесение слитной цепочки пятен и непрерывное нанесение вещества вдоль движущейся пластинки. Вайденхью-вель [7] описал полуавтоматическое устройство, которое позволяет получить достаточно чистые материалы для последующего анализа либо методом инфракрасной спектроскопии, либо с помощью газовой хроматографии. Чтобы получить четкое разделение, отдельные пятна должны содержать не более 1 мкг вещества. Нанесение пятен через определенные интервалы вдоль стартовой линии обеспечивает высококачественное разделение и позволяет увеличить объем материала при микропрепаративном разделении. Для успешной работы важно, чтобы исходная плотность пробы на стартовой линии была низкой. При разделении На пластинке должна получиться серия четко разделенных полос, однако неравномерное шнесение пятен, ке влияя на разделение, приводит к появлению искаженных полос, которые трудно индивидуально удалить с пластинки. [c.275]

В том случае, если при определении микропримесей макрокомпонент продвигается первым вслед за фронтом растворителя, иногда используют метод повторной хроматографии или метод с размыванием хроматографического пятна в поперечном направлении, которое достигается применением слоя сорбента в виде треугольника с вершиной в стартовой точке. При движении по такому слою поток подвижной фазы направлен под углом к направлению движения разделяемых компонентов, что приводит к образованию узких поперечных зон и к их резкому разграничению в области широкой части слоя. Такой способ проведения хроматографиро- [c.18]

Метод (ХТС) заключается в следующем на стеклянную пластинку с нанесенным тонким слоем носителя (окись алюминия, кизельгур, силикагель и др.), так же, как и на бумагу в бумажной хроматографии, на стартовую линию наносят микропипеткой анализируемые растворы. Пластинку погружают в элюент так, чтобы уровень элюента на 9— 10 мм был ниже стартовой линии. По мере продвижения элюента по пластинке происходит разделение отдельных компонентов анализируемых веществ. Хроматографируют до тех пор, пока элюент поднимается на желательную высоту (обычно не выше 100 мм) от стартовой линии. Пластинку сушат и проявляют соответствующим реагентом, чтобы получить окрашенные пятна. [c.308]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология