Хроматограмма тонкослойная, количественный

Количественный анализ тонкослойных хроматограмм можно осуществлять, исходя из размера пятен, так как площадь пятна зависит от количества элемента, нанесенного на слой носителя. Площадь пятна зависит также от активности сорбента-носителя, толщины его слоя и объема наносимого раствора. Для сравнения на ту же пластинку наносят контрольные количества этого вещества с известной концентрацией. Площадь пятна определяют так же, как в хроматографии на бумаге (стр. 182). [c.187]

В НИИнефтеотдаче группой авторов разработана методика определения химической стабильности НПАВ ОП-7, ОП-10 и АФд-12. С ее помощью можно определить качественно и даже количественно наличие не только молекул ПАВ, но и продуктов их деструкции. Контроль за химической стабильностью НПАВ осуществляется методом тонкослойной хроматографии. Сравнение хроматограмм исходного Неонола АФд-12 и продуктов деструкции, полученных в результате эксперимента, позволяет качественно оценить процесс химической деструкции для условий конкретного месторождения. Появление на хроматограмме зон, отличных от зоны исходного ПАВ, свидетельствует о нестабильности последнего исчезновение зоны, характерной для исходного ПАВ,— о химическом превращении всего ПАВ. Продукты химической деструкции и исходный НПАВ выделяли методом колоночной хроматографии. Для количественного определения Неонола и продуктов деструкции использовали растворители, имеющие различную элюирующую способность. [c.99]

Отражено современное состояние работ в области тонкослойной хроматографии (ТСХ) - распространенного и эффективного метода исследования органических и неорганических соединений. Рассмотрена теория хроматографического процесса в тонком слое. Описаны подходы к эффективности метода в зависимости от влияния различных факторов, подходы к оптимизации процесса, новые приемы в технике работы, аппаратура, сорбенты, растворители и их свойства. Большое внимание уделено градиентным методам и переносу условий разделения смесей в ТСХ на колоночный вариант хроматографии, а также количественной оценке тонкослойных хроматограмм. [c.2]

По результатам двух недавно проведенных статистических исследований вероятности перекрывания пиков в хроматограммах, получаемых при разделении более или менее неизвестных многокомпонентных образцов, можно прийти к выводу, что случаи слившихся пиков оказываются обескураживающе более частыми, чем можно было предполагать. Дэвис и Гиддингс [125] подсчитали хроматограмма разделения сложной смеси должна характеризоваться отсутствием пиков на участке, занимающем (примерно) 95% от общей протяженности хроматограммы, для обеспечения 90%-й вероятности, что с пиком конкретного вещества не сливаются пики других компонентов образца. Число потенциально перекрывающихся зон почти линейно возрастает со снижением концентрации анализируемого вещества (рис. 79) [87]. Чаще всего довольно простые образцы подвергаются количественному анализу с помощью тонкослойной хроматографии. В такой ситуации вероятность перекрывания пиков оказывается сниженной (поскольку увеличивается пропорция "свободного места" на хроматограмме). Однако все еще остается возможным "загрязнение" интересующего пика. [c.228]

Однако из-за несовершенного детектирования границ пятна эта зависимость не всегда выполняется. Поэтому количественная оценка может быть проведена только прямым сравнением с серией эталонных растворов, которые обычно наносят на одну пластину с исследуемыми образцами. Строят графическую зависимость в координатах л/ —Я по эталонным образцам и по ней определяют количество неизвестного образца. Было показано, что формула справедлива только при небольшой разнице в количестве вещества в исследуемых зонах (при значительном различии коэффициенты пир перестают быть постоянными). Для более точного определения границ зоны целесообразно использовать фотографии тонкослойных хроматограмм на сверхконтрастных фотоматериалах с последовательной многократной фотопечатью (поскольку при этом для фотографического процесса контрастность изображения резко увеличивается). [c.369]

Оптические методы. В связи с быстрым развитием ВЭТСХ, которая позволила стандартизировать многие стадии хроматографического процесса и привела к получению воспроизводимых результатов, стало возможным использовать точные количественные методы оценки разделенных веществ на тонкослойных хроматограммах. Этому также способствовали создание и выпуск рядом фирм специальных приборов для количественных определений в ТСХ. Оптические сканирующие методы основаны на измерении исходного излучения, прошедшего через слой сорбента (поглощение), отраженного от него (отражение), сочетании поглощения и отражения, флуоресценции, гашении флуоресценции. Возможно измерение пропускания света с длиной волны только больше 325 нм, так как стекло (подложка) и слой адсорбента поглощают УФ-излучение. Измерение по методу отражения можно проводить по всей области спектра от 196 до 2500 нм (ив области УФ-излучения). [c.370]

Существенный недостаток количественных методов анализа тонкослойных хроматограмм, основанных на измерении пропускания света, был связан с нелинейной зависимостью сигнала оптического детектора от количества вещества в хроматографическом пятне. Эта нелинейность обусловлена специфическим законом прохождения света в рассеивающей среде, описываемым уравнением Кубелки — Мунка, и неоднородностью пластины по толщине слоя адсорбента. Последнюю можно учесть, измеряя оптические свойства подложки непосредственно в хроматографическом пятне. Использование двухволнового метода спектрофотометрического детектирования, когда излучение одной волны Л поглощается и веществом, и адсорбентом, а другой волны Лг — только адсорбентом, позволяет выделить сигнал, связанный с поглощением излучения только анализируемым веществом. Дальнейшая обработка сигнала детектора в соответствии с уравнением Кубелки — Мунка позволяет линеаризовать зависимость оптического сигнала от количества вещества в ТСХ. Поглощение света адсорбентом может быть учтено также при спектрофотометрическом сканировании пластины на просвет и отражение. Эти принципы реализованы в лучших современных зарубежных денситометрах — флуориметрах. Менее точным, но более простым решением является линеаризация зависимости сигнал — вещество с помощью двойного логарифмирования (с использованием ЭВМ). В результате этих усовершенствований воспроизводимость результатов в современной количественной ВЭТСХ приближается к 1%. Использование двухкоординатного сканирования в случае эллипсовидных пятен (двумерное размывание зон в ТСХ) и многошагового сканирования пятен неправильной формы (дву- [c.370]

Другие методы. Электрохимические методы (ЭХМ) пока не нашли широкого применения для количественной оценки тонкослойных хроматограмм, хотя могут значительно расширить возможности ТСХ при анализе неорганических и органических электролитов. ЭХМ отличаются высокой селективностью и быстротой. Чувствительность этих методов сильно зависит от природы анализируемых соединений и возможностей детектора. ЭХМ позволяют детектировать анализируемые вещества непосредственно в слое сорбента на пластине, после выделения зоны вещества с сорбентом без его жидкостного извлечения или после него. Используют также варианты количественной проточной ТСХ. [c.372]

Классическая, наиболее простая и широко используемая методика тонкослойной хроматографии включает проведение следующих основных операций 1) нанесение анализируемой пробы на слой сорбента 2) разделение компонентов пробы на отдельные зоны в потоке подвижной фазы 3) обнаружение зон на слое сорбента (часто реагентом, образующим с разделенными веществами окрашенные соединения) 4) количественная оценка полученного разделения, включая определение величины удерживания и определение содержания вещества в зонах на хроматограмме. [c.5]

Следует отметить, что в последние годы были разработаны варианты тонкослойной хроматографии, свободные от указанных недостатков. Так, развитие высокоэффективной тонкослойной хроматографии позволило уменьшить продолжительность разделения и стимулировало разработку методов оптического сканирования хроматограмм с целью количественного автоматического определения содерл<ания веществ в разделенных зонах. Сканирование проводят в видимой и ультрафиолетовой областях спектра. Эти методы подробно изложены в книге Высокоэффективная тонкослойная хроматография [3]. Совсем недавно венгерские авторы [4] предложили метод ускоренного разделения анализируемой смеси на обычных пластинках для ТСХ. В этом методе элюат подается под давлением на пластинку, адсорбционный слой которой ограничен подложкой и полимерной пленкой разделение заканчивается в течение нескольких минут. [c.6]

Основное различие методов ГХ и ТСХ заключается в способе детектирования разделенных веществ. В газовой хроматографии разделение и детектирование происходят одновременно и составляют динамическое единство, тогда как в случае ТСХ перед обнаружением необходимо прекратить процесс разделения. Отдельные компоненты после разделения методом ТСХ сохраняются на хроматограмме, что позволяет продолжать их исследование другими методами. С этой точки зрения тонкослойную хроматографию удобнее использовать для проведения качественного анализа, а газовую хроматографию — для количественного определения. [c.143]

Еще более просты и доступны в применении методы бумажной и тонкослойной хроматографии (ТСХ). Несмотря на то, что оба эти метода долгое время относили больше к качественным или полуколичественным методам анализа, до сих пор они очень широко используются для разделения сложных смесей веществ благодаря своей экспрессности и исключительной простоте выполнения, не требующей практически никакой аппаратуры. Применение в последнее время для количественной оценки интенсивности пятен на хроматограмме специальных сканирующих устройств (денситометров) и сочетание их с другими, особенно спектрофотометрическими методами анализа, переводят ТСХ в разряд достаточно точных методов количественного анализа. Оба метода продолжают широко использоваться в фармацевтическом анализе для [c.210]

На тонкослойных хроматограммах получают четкие пятна оранжево-красного цвета на желтом фоне, характеризующие степень оксиэтилирования каждой из полученных фракций жидкостного хроматографирования. Причем компоненты с наиболее низкой степенью оксиэтилирования имеют максимальные Bf и извлекаются главным образом из нижних секций (7—10). При наличии в исходной пробе свободного полиэтиленгликоля сумма выхода экстрактов из всех секций (с учетом поправок на испарение и на вымывание силикагеля) становится меньше 100 %, так как количественно вымывание из секций 1 свободного полиэтиленгликоля 25 мл метанола не происходит. Кроме того, самая высокомолекулярная часть оксиэтилированных алкилфенолов исходной пробы (с 30—50 оксиэтильными группами) также полностью не вымывается этим способом из секций [c.237]

У П. 6. Методы количественного анализа тонкослойных хроматограмм, основанные на измерении распределения вещества в хроматографическом пятне [c.269]

УИ. 6.3. Количественный анализ тонкослойных хроматограмм по размерам пятен [c.275]

VII. 6.3.1. Количественный анализ тонкослойных хроматограмм по размерам пятна при наличии эталонов анализируемых веществ [c.275]

Сводка экспериментальных данных по использованию методов тонкослойной хроматографии представлена в табл. 37. Длительность разделения этим методом приводит к появлению вторичных реакций между компонентами на хроматограмме [8]. Поэтому метод применим при низких концентрациях компонентов. В некоторых случаях возможен и количественный анализ больших концентраций компонентов методом хроматографии на бумаге, [c.510]

Проведение микробиологического количественного определения по хроматограмме. Тонкослойные пластинки помещают в специально изготовленный сосуд из плексигласа. 50 мл стерильного питательного раствора агара (при применении 5агсша lutea pH 5,9, [c.319]

Для объективной оценки эффективности применения НПАВ в процессах повышения нефтеотдачи пластов был разработан метод определения химической стабильности НПАВ типа ОП-7, ОП-10 и АФ9-12 в условиях, приближенных к пластовым [32]. Метод позволяет судить о количественном и качественном присутствии НПАВ и продуктов их деструкции. Лабораторные испытания НПАВ на химическую стабильность проводились в присутствии пластовой воды и породы продуктивного пласта в герметических сосудах -автоклавах - в термобарических условиях конкретного месторождения при постоянном, контроле за температурой и давлением. Контроль за химической стабильностью НПАВ осуществлялся методом тонкослойной хроматографии. Сравнение хроматограмм исходного неонола и продуктов его деструкции, полученных в результате эксперимента, позволяет оценить процесс химической деструкции для условий конкретного месторождения. Появление на хроматограмме зон, отличных от исходного ПАВ, свидетельствует о возникновении продуктов деструкции НПАВ, а исчезновение зоны, характерной для исходной НПАВ - о полной химической деструкции последнего. Продукты химической деструкции и исходный НПАВ выделяли методом колоночной хроматографии с использованием растворителей, имеющих различную элюирующую способность, что позволило количественно разделить реакционную массу на фракции, содержащие отдельные продукты деструкции и исходный неонол. Выделенные индивидуальные продукты химической деструкции НПАВ идентифицировались методами ИК-, ЯМР-Н - и С - спектроскопии и элементного анализа. Степень химической деструкции рассчитывали по формуле [c.19]

Внутренние и внешние хроматограммы. Вопрос получения внутренних или внешних хроматограмм при разделении веществ имеет важное значение для последующего качественного и количественного определения веществ. Внутренние хроматограммы получают в случае разделения или идентификации веществ непосредственно на стационарной фазе. В этом случае прояви ление хроматограммы заканчивается прежде, чем подвижная фаза доходит до конца слоя сорбента. Если же элюирование продолжают до тех пор, пока вещество вместе с подвижной фазой не достигнет конца стационарной фазы, и исследуют затем небольшие порции элюата, то получают внешнюю хроматограмму при построении зависимости концентрации элюата от его объема, (мл). В случае окрашенных компонентов или при отличии свойств компонентов (различной радиоактивности, способности абсорбировать УФ- или ИК-излучение) от свойств стационарной фазы внутреннюю хроматограмму можно определить визуально или зарегистрировать на стационарной фазе. Хроматограммы такого типа получают в бумажной и тонкослойной хроматографии, отчасти и в колоночной. Бесцветные соединения можно проявлять, химическим путем. Качественный анализ веществ проводят, оценивая за медление передвижения анализируемого вещества относительно движения фронта растворителя. Для этого сравнивают путь, пройденный веществом, с путем, пройденным фронтом растворителя, и отношение между ними обозначают через [c.345]

Количественное определение ионов методом осадочной хроматографии основано на прямолинейной зависимости между количеством хроматографируемого вещества и размером зоны. Характерным признаком осадочной хроматограммы являются четкие границы зон и одинаковая интенсивность окраски зон по длине, что свидетельствует об одинаковой плотности осадка, образующего зону (см. стр. 205). Этого не всегда можно достигнуть другими методами хроматографии. Это преимущество осадочной хроматографии (как колоночной, так и тонкослойной или бумажной) позволило достаточно эффективно использовать ее для количественного анализа разделяемых ионов. [c.210]

Бумажная и тонкослойная хроматография широко применяется как для качественной идентификации фенолов, фенолоспиртов и двухъядерных форполимеров, так и для приблизительной количественной оценки (погрешность 5—15% ) Раньше эти методы применяли для изучения кинетики реакций фенола с формальдегидом, для чего в одном направлении в качестве элюента пропускали смесь метанол — хлороформ, в другом — бензол — метнлэтилке-тон — днэтпламин. Проявляют хроматограммы, опрыскивая их диазотированным п-нитроанилином. В настоящее время эти задачи решают, используя автоматизированные хроматографы высокого давления. [c.99]

Нуклеотиды, как и многие другие поглощающие свет соединения, определяют количественно по их спектрам поглощения (рис. 13-11 и 13-12) 146]. Еще более чувствительным методом является флуоресцентный анализ. Например, он позволяет обнаружить на тонкослойной хроматограмме рибофлавин в количестве 3 пикомоль (1 нг) (рис. 2-34) [147]. Один из новых реагентов, флуорескамин, взаимодействует с любым первичным амином, образуя интенсивно флуоресцирующие продукты. С его помощью можно обнаружить очень малые количества аминокислот— менее 50 пикомолей (рис. 2-36) [148]. [c.180]

Посторонние примеси. Проводят испытание, как описано в разделе Тонкослойная хроматография (т. 1, с. 92), используя в качестве сорбента силикагель Р4 и готовя покрытие пластинки следующим образом к 8 г силикагеля Р4 добавляют 16 мл воды, содержащей 1 г формата натрия Р, и покрывают пластинки слоем 0,5 мм толи нной. В качестве подвижной фазы используют смесь 50 объемов хлороформа Р, 50 объемов этанола ( — 750 г/л) ИР и 7 объемов муравьинной кислоты (—1080 г/л) ИР. Наносят на пластинку (в форме полосы шириной 4 см) 20 мкл раствора в уксусной кислоте ( — 90 г/л) ИР, содержащего 72 мг испытуемого вещества в 1 мл (раствор А). После извлечения пластинки из хроматографической камеры дают ей высохнуть на возду хе и оценивают хроматограмму в ультрафиолетовом свете (254 нм). Отмечают прямоугольные участки вокруг каждой группы полос выше и ниже основной полосы, количественно переносят отмеченные участки силикагеля в пробирку с притертой пробкой, добавляют 5 мл метанола Р, встряхивают в течение 15 мин, центрифугируют и измеряют поглощение прозрачной надосадочной жидкости в кювете толщиной 1 см при максимуме около 256 нм. Для приготовления контрольного раствора аналогичным образом обрабатывают соответствующего размера участки силикагеля, соседствующие с ранее извлеченными участками. Готовят раствор Б следующим образом растворяют 0,14 г испытуемого вещества в достаточном для получения 100 мл количестве уксусной кислоты ( — 90 г/л) ИР и разводят 200 мкл этого раствора до 50 мл метанолом Р. Поглощение элюированного раствора А не должно быть больше поглощения раствора Б. [c.78]

На пластинке Фиксион 50x8 изомеры-трипептиды Гли-L-Ала-Ь-Лей и Гли-О-Ала-Ь-Лей разделяются довольно хорошо. По интенсивности пятен разделенных пептидов можно оценить степень рацемизации препарата. Хроматографию проводят на уравновешенных пластинках в буферном растворе Е (табл. 10), т. е. во втором буферном растворе одноколоночной системы анализатора. Для получения оптимального разделения на пластинку наносят 10 мкл раствора образца в 0,01 н. НС1 (концентрация пептида 10 мг/мл). Хроматографируют при комнатной температуре до высоты 12—15 см. Если требуется количественно определить степень рацемизации (с точностью 5—10%), применяют денситометрию тонкослойных хроматограмм. Для получения более точных результатов целесообразно воспользоваться автоматическим анализатором. [c.261]

Количественная оценка тонкослойных хроматограмм с помощью детекторов для ГХ (ДГХ) состоит из двух этапов перевод анализируемых веществ со слоя в газовую фазу и количественный анализ полученных смесей ДГХ (катарометр, ПИД, детектор электронного захвата, термоионный и др.). Наиболее широко пpимeняюt метод, реализованный в приборе Иатроскан ТН-10 (Япония) с применением ПИД. Вместо пластин для ТСХ при этом используют стеклянно-керамические стержни диаметром 0,9 мм, на которые нанесен слой силикагеля толщиной 50— 100 мкм по специальной технологии. [c.372]

Метод тонкослойной хроматографии применен для количественного определения конденсированных фосфатов [1051—1053]. При погружении проявленной хроматограммы в раствор коллодия в смеси спирта и эфира [1 i 2], содержащей глицерин, сорбционный слой покрывается пленкой и легко снимается с пластинки. Для количественного определения отдельных конденсированных фосфатов из снятого слоя вырезают зоны, содержащие пятна этих фосфатов," органическую фазу окисляют мокрым путем и содержаниеТфосфатов в отдельных фракциях находят фотометрическим методом. В качестве элюента применяют смесь GH3OH с диоксаном. [c.102]

В анализе сложных смесей органических веществ широко используют тонкослойную матографшо. Количественное определение разделенных веществ проводят либо непосредственно на хроматограмме методами люминесценции и денситометрии, либо косвенно после элюирования пятна, содержащего анализируемое вещество, со слоя сорбента. [c.475]

Кроме того, он использовал в качестве реактива для опрыскивания 1 %-ный раствор хлорида железа (III) 1 %-ный раствор гексацианоферрата калия (III) (1 -f 1) и добавлял к 10 мл этой смеси 10 капель концентрированной азотной кислоты. При этом получают темно-синие пятна. Синюю окраску дает также предложенный нами реактив Фолина — Чокальто (№ 122). В другой работе Шанц олисал возможность количественного расчета тонкослойной хроматограммы. Для этого зоны соскабливают и экстрагируют. Элюат обрабатывают раствором соли прочной голубой и образующийся окрашенный раствор фотометрируют [47. [c.384]

Разработан метод тонкослойной хроматографии (ТСХ) металлов в виде хелатов с использованием различных способов количественной оценки хроматограмм [1]. Металлы определяют после их группового экстракционного извлечения и концентрирования. Этот прием позволяет проводить многоэлементное определение микроколичеств металлов. В качестве хелатов для разделения и определения металлов экстракционно-хроматографическим методом выбраны диэтилдитиокарбаминаты, которые по доступ io-сти и совокупности экстракционных и -хроматографических свойств преь исходят многие другие комплексы [2]. [c.90]

Эстония. Работы по аналитической химии ведутся главным образом в Тартуском университете. Таллинском политехническом институте. Сельскохозяйственной академии. Институте химии АН ЭССР и Институте сланцев. Наибольшее количество работ посвящено различным видам хроматографии. В Эстонской ССР развивается сланцевая, пищевая, текстильная, химическая, электронная промышленности, что требует изыскания новых, быстрых, чувствительных и достаточно точных методов анализа. В этом направлении и ведутся исследования в области хроматографии. Разработаны методы анализа сланцевой смолы, текстильных волокон, биологических объектов и пищевых продуктов. Для анализа неорганических веществ предложены методики тонкослойного хроматографического разделения и непосредственного количественного определения на хроматограммах. Другое направление исследований — разработка новых методов определения микро- и субмикроколичеств элементов в веществах высокой чистоты, а также в биологических объектах, воздухе, воде и породах. [c.213]

Количественный анализ в ТСХ возник на ранних этапах развития метода. Первые попытки количественной оценки хроматограмм, основанные на измерении размеров пятен, были сделаны Фишером в 1948 г. [18]. В 1962 г. предложен [19] метод количественного анализа, основанный на использовании эмпирического соотношения между площадью пятна и количеством содержащегося в нем вещества. При последующем развитии количественной ТСХ с пластинки снимался слой адсорбента в области хроматографических пятен и из него вымывалось исследуемое вещество, которое затем анализировалось каким-либо физическим или физико-химическим методом. Начиная с 1967 г., намечается переход от методов извле-"чения вещества из тонкослойной пластинки (так называемых элюционных методов) к количественному анализу in situ, т. е. анализу непосредственно на слое путем сканирования пятен ж отыскания распределения вещества путем измерения свето-поглощения, флуоресценции, радиоактивности или каких-либо других свойств (например, электропроводности [20]). [c.267]

Описанный метод количественного анализа тонкослойных хроматограмм олигомеров отличается простотой, являясь вместе с тем достаточно точным a jq = 2—3%. С его помощью были определены, например, примеси моноола и диола в образцах полиоксипропиленполиола при содержании примесей 1—2% [69]. [c.329]

Разработан способ количественного определения ионов церия (IV) в тонком слое закрепленного сорбента — силикагеля в системе растворителей перекись водорода в аммиачной среде. Распределение зон в хроматограмме осуществляется в виде пиков, высота которых является функцией концентрации веществ в растворе. Способ назван пиковой тонкослойной редоксхроматографией [49]. В работах [7, 22, 26] приводятся методики и условия концентрирования неорганических веществ меди [50], свинца [52], хрома [51, 52], церия, ванадия [22, 26] и других элементов па окиси алюминия и модифицированных анионитах при содержании этих элементов Б растворе в количестве 10 —10 г-эт1л. [c.130]

Из динамической теории ТСХ вытекают два достаточно точных метода количественного анализа тонкослойных хроматограмм без извлечения веш,ества из пластинки по размерам хроматографических пятен и с помош.ью денситометрии (флюориметрии) точечным световым зондом. Для количественного анализа тонкослойных хроматограмм по размерам хроматографического пятна [23] необходимо иметь четкие границы исследуемых пятен, что достигается путем двойной последовательной контактной фотографии в проходящем свете на рефлексной фотобумаге с сверхкон-трастной характеристической кривой. Интегрируя уравнение (8 ) в пределах + оо, получаем количество вещества, содержащегося в хроматографическом пятне [c.143]

Количественный анализ тонкослойных хроматограмм при двухкоор-динатном сканировании точечным световым зондом [25] основан па формуле (7), из которой следует, что, используя значения с , и Оу, можно точно определить содержание вещества в хроматографическом пятне. Эти параметры легко определяются из денситограмм (флюорограмм) вещества при сканировании хроматографического пятна точечным световым зондом вдоль и поперек направления движения элюента по хроматографической пластинке. Очевидно, что д может быть такн е определено из площадей под денситограммами (флюорограммами) д. и Зу, поскольку [c.144]

Не оставляет сомнения, что денситометрия (флюориметрия) точечным световым зондом является наиболее прогрессивным методом количественного анализа тонкослойных хроматограмм. Дальнейшее развитие этого метода требует учета оптической неоднородности адсорбционного слоя, например, на основе двухволновой фотометрии. [c.145]