Поджелудочная железа, выделение ферментов

Крахмал первоначально подвергается воздействию находящегося в слюне фермента, птиалина, но в основном гидролиз крахмала происходит в тонком кишечнике, где под действием ферментов поджелудочной железы и других высокоактивных ферментов крахмал превращается в глюкозу. Часть простых сахаров, к числу которых относится глюкоза, переносится кровью в печень, где происходит их отложение в составе гликогена. Другая часть сахаров поступает непосредственно в общий кровоток, где они сгорают с выделением энергии, превращаются в жиры либо накапливаются в мышцах в виде гликогена. Гликоген может высвобождаться при первой же необходимости и служит источником энергии. Метаболизм углеводов регулируется таким гормоном, как инсулин. Механизмы превращения углеводов в СО2 и Н2О очень сложны и не будут рассматриваться в данной книге. [c.486]

Термолабильность ферментов т. е. инактивация их, связанная с разрывом полипептидных связей при повышении температуры,— денатурация белков, приводит к появлению оптимума температурного действия. С ростом температуры увеличивается скорость ферментативной реакции, но увеличивается и инактивация фермента. Поскольку белки являются амфотер-ными электролитами, для ферментов характерен также оптимум pH. Так, например, оптимум действия пепсина лежит в зоне pH = 1,5 —2,5, трипсина —8—11, сахаразы, выделенной из. дрожжей, — 4,6—5,0, сахаразы из кишечника — 6,2, амилазы из слюны или поджелудочной железы — 6,7—6,8 и т. д. Некоторые ферменты могут иметь различную величину оптимума pH для разных субстратов. Так, оптимум pH пепсина несколько меняется для разных белковых субстратов, тогда как карбогидразы [c.249]

Рибонуклеаза — фермент, выделенный из поджелудочной железы, печени, селезенки и т. д. Вызывает деполимеризацию рибонуклеиновой кислоты. Молекулярный вес 13 500. Содержит 124 аминокислотных остатка. Строение изучалось в основном двумя группами исследователей — Муром с сотрудниками и Аффинсеном с сотрудниками. Представляет одну полипептидную цепь. Восемь цистеиновых остатков образуют [c.528]

ГЛЮКОЗЫ в крови и появлением в моче сахара и ацетоновых тел, являющихся продуктами неполного окисления углеводов (ацетоуксусная и р-оксимасляная кислоты, ацетон). Бантинг и Мак-Леод предложили в 1921 г. метод выделения из поджелудочной железы быка концентрированного активного экстракта, пригодного для лечения диабета. При выделении были использованы специальные приемы для защиты гормона от расщепления ферментом, присутствующим в железе. В 1926 г. Абель выделил кристаллический инсулин методом осаждения в изоэлектрической точке и показал, что в нем содержится 0,52% цинка. [c.698]

Так, метаболизм высших животных, включая человека, обеспечивается сложной системой органов. Усвоение пищи происходит в системе пищеварительных органов, которая включает в себя ротовую полость, пищевод, желудок и кишечник. В процессе пищеварения участвуют поджелудочная железа, которая обеспечивает систему рядом пищеварительных ферментов, и печень, которая продуцирует желчь, необходимую для переваривания жиров. В этой системе все полимерные и, другие сложные химические соединения превращаются в более простые вещества, которые могут поступать в кровь для того, чтобы быть доставленными ко всем другим органам. Кровеносная система, кроме того, доставляет кислород, сорбированный эритроцитами в легких. Кишечник, почки и легкие участвуют также в выделении побочны-ч продуктов (продуктов жизнедеятельности). Так, СОа, образовавшийся при окислении ряда органических соединений, может быть либо выдохнут через легкие, либо, превратившись в мочевину, выделиться с [c.26]

При выделении протеолитических ферментов совместно с другими следует помнить, что они могут расщеплять любые сопутствующие белки и в том числе любые ферменты, находящиеся вместе с ними в системе. В нашей стране сравнительно недавно разработаны технологические схемы, позволяющие одновременно выделять из поджелудочной железы животных (свиней, крупного рогатого скота и др.) ряд ферментов и гормонов. [c.214]

Трипсин. Этот фермент получен в виде кристаллов из поджелудочной железы [72]. Лучший метод получения кристаллического трипсина сводится к получению кристаллического его предшественника — трипсиногена — и к превращению последнего в кристаллический трипсин. Для этого размельченную железу смешивают с разбавленной серной кислотой и полученную смесь фракционируют сернокислым аммонием первые фракции содержат химотрипсиноген, трипсиноген же выпадает при дальнейшем добавлении сернокислого аммония [73]. При стоянии раствора трипсиногена в течение нескольких дней с сернокислым магнием или с энтерокиназой происходит превращение трипсиногена в трипсин. В поджелудочной железе содержится также специфический ингибитор, препятствующий действию трипсина. Этот ингибитор был получен в кристаллическом виде [74]. Другой ингибитор трипсина, выделенный из яичного белка, оказался идентичным с овомукоидом [75]. [c.292]

Вызывает сокращение желчного пузыря и выделение желчи Стимулирует выделение ферментов поджелудочной железой [c.319]

Проферменты протеаз и нуклеаз и ферменты поджелудочной железы быка были выделены, очищены и выкристаллизованы почти исключительно путем высаливания с помощью сульфата магния [14, 248]. На рис. 8 [248] схематически представлены условия, необходимые для разделения восьми белков, содержащихся в кислой вытяжке поджелудочной железы. Так как несколькими методами [14] было показано, что большинство выделенных белков" является гомогенным, становится очевидным, что высали-ваиие может служить превосходным (методом фракционирования. [c.56]

Нарушения могут происходить на разных стадиях обмена липидов. Ухудшение переваривания и всасывания жиров наблюдается в случаях, когда в кишечник не поступает желчь в достаточных количествах, а также при недостаточной секреции липолитических ферментов. Выделение желчи может тормозиться при многих заболеваниях печени (гепатите, циррозе) и желчного пузыря, в том числе при закупорке выводных протоков желчными камнями. Количество липазы значительно уменьшается в кишечнике при опухолях поджелудочной железы и других заболеваниях. Вса- [c.205]

В 1863 г. А. Я. Данилевский впервые разработал метод адсорбционного разделения и очистки ферментов поджелудочной железы. Этот метод нашел позже широкое применение в исследованиях Вильштеттера и его учеников по выделению ферментов и изучению их химии. [c.12]

С. регулирует внешнесекреторную ф-цию поджелудочной железы. Он усиливает секрецию воды и электролитов, преим. H OJ, не влияя на выделение поджелудочной железой пищеварит. ферментов. [c.309]

Из поджелудочной железы выделен также фермент, названный к а р б о к с и и е и т и д а з о й В, гидролизующий белки и пептиды с двухосновными С-концевыми аминокислотпыми остатками лизином или аргинином. [c.219]

Ферменты, обладающие амилазным действием, широко распространены в природе. Они находятся в зернах злаковых растений, клубнях картофеля, в печени, выделениях поджелудочной железы, слюне. С помощью амилаз крахмал подвергается в растительных и животных организмах превращению в растворимые углеводы — мальтозу и глюкозу, которые соками растений или кровью животных доставляются к местам потребления и при своем сгорании дают организму необходимую энергию. [c.310]

Ввиду того что трипсин богат цистеином, этот синтез вызывает большой расход серосодержащих аминокислот, возникающих в реакциях метаболизма. Кроме того, инъекции ПЗ или ХК-ПЗ приводят к увеличению размеров поджелудочной железы и секреции ферментов у крыс [74]. Эти явления сопровождаются потерями экзогенного азота за счет ослабления протеолиза в кишечнике [86] и эндогенного азота вследствие выделения комплексированного трипсина [63]. Между тем ингибиторы протеаз бобовых, как это отметил Безансон [6], не являются единственной причиной гипертрофии поджелудочной железы помимо этого, трипсин человека, видимо, менее чувствителен к ингибиторам, содержащимся в сое, чем трипсин крыс или крупного рогатого скота. [c.334]

Этот фермент может быть выделен из экстрактов поджелудочной железы в чистом виде [128], но до использования для определения последовательности аминокислот его рекомендуется инкубировать с диизопропилфторфосфатом, чтабы инактивировать возможные примеси химотрипсина, трипсина и субтилизина [122, 267, 300]. Основные свойства и специфич-кость действия карбоксипептидазы подробно рассмотрены в ряде работ [228 293]. В Других работах [114, 136, 226, 320] приводятся данные об использовании фермента для определения последовательности аминокислот в белках. Карбоксн-Пептйдаза специфична в отношении С-концевых аминокислот [c.232]

Из ферментов, катализирующих гидролитический распад РНК, наиболее изучены рибонуклеазы I. Они гидролизуют фосфодиэфирные связи внутри молекулы РНК. Выделенная из поджелудочной железы многих животных РНКаза состоит из 124 аминокислотных остатков во всех случаях, хотя ферменты несколько различаются последовательностью аминокислотных остатков выяснена также третичная структура ряда РНКаз (см. главу 4). Получен в гомогенном состоянии из плесневого гриба рода Aspergillus фермент гуанилрибонуклеаза, катализирующая эндонуклеолитическое расщепление РНК. [c.499]

Природные ингибиторы липаз в настоящее время выделены из растений. По своей химической природе они являются белками или липидами и обладают высокой активностью в отношении липазы, выделенной из поджелудочной железы. Имеются сведения, что липиды являются аллостерическими эффекторами и определяют конформаци-онное состояние ферментов [82]. [c.214]

Холецистокинин-панкреозимии (ХЦК-ПЗ) имеет двойное название, поскольку даа основных вызываемых им физиологических эффекта — сокращение желчного пузыря и стимуляция секреции пищеварительных ферментов поджелудочной железой — первоначально приписывались двум разным гормонам. Лишь в 1964 г. был выделен 33-членный пептид, обладающий этими двумя видами физиологической активности. Интересно отметить, [c.274]

Фермент рибонуклеаза из поджелудочной н<елезы быка — хорошо охарактеризованный белок, полная структура которого теперь уже известна (см. стр. 94)— расщепляет нолинуклеотидную цепь аналогичным способом. Этот фермент представляет собой эндонуклеазу, т. е. он атакует внутри-нуклеотидные связи. При этом для действия его необходимо, чтобы фосфатная группа, участвующая в образовании чувствительной к расщеплению Р — 0-связи, была присоединена в положении 3 пиримидинового нуклеозида. Первая стадия расщепления, т. е. образование циклических фосфатов из полинуклеотидов, по-видимому, обратима. Того же типа расщепление (по положению Ь) вызывают фосфодиэстеразы, выделенные из различных источников растительного происхождения (например, из растений гороха, табака или райграса). Все эти фосфодиэстеразы относительно неспецифичны в том смысле, что для их действия безразлична природа оснований, входящих в состав чувствительных нуклеотидов. Известен, однако, фермент, выделенный из Ba illus subtilis, который, по-видимому, обладает специфичностью, дополняющей специфичность панкреатического фермента (т. е. рибонуклеазы, выделенной из поджелудочной железы). Он катализирует по преимуществу гидролитическое отщепление остатков, соседних с З -пурино-выми остатками. Еще более высокой специфичностью обладают ферменты, выделенные из неочищенных препаратов такадиастазы. Один из них — рибонуклеаза Т1 — катализирует расщепление только тех межнуклеотидных связей, в образовании которых участвуют З -гуаниловые нуклеотиды, а второй — рибонуклеаза Т2 — расщепляет только связи, образованные с участием З -адениловых нуклеотидов. [c.129]

Для мягчения (тендеризации) мясных продуктов раньше использовали животные ферменты (из поджелудочной железы), а в последнее время протеиназы растительного происхождения — папаин, бромелаин, фицин. Несмотря на то что протеиназы растений имеют ряд преимуществ, даже их препараты постепенно заменяются микробными. Это происходит по различным причинам. Например, в СССР источники для выделения растительных протеаз (дынное дерево, ананас или деревья рода Fi us) практически отсутствуют. [c.8]

Используются в медицине ингибиторы протеиназ, в частности плазмина и трипсина. Если плазминоген крови активируется слишком интенсивно и в ней возникает слишком много плазмина, то при этом сильнодействующий фермент разрушит и фибриноген, и другие факторы из системы свертывания крови. При этом свертываемость крови сильно снижается и это часто является причиной обескровливания больных. Синтетический ингибитор — е-аминокапроновая кислота — тормозит активацию плазминогена в плазмин, а при более высоких концентрациях — и действие плаз.мина, предотвращая этим опасные изменения. Так называемый фактор Кунитца и Нортропа (инипрол) тормозит действие трипсина и химотрипсина. Он представляет собой полипептид (М = 6000) и используется при избыточном выделении ферментов, которое встречается при острых панкреатитах (заболеваниях поджелудочной железы, вырабатывающей целый ряд ферментов). Ингибиторы подобного рода защищают организм от ферментной интоксикации. [c.321]

ЗИМОГЕНЫ (проферменты) — неактивные предшественники ферментов, превращающиеся в активные ферменты в результате структурных изменений. 3. чаще всего встречаются среди протеиназ (пепсин, ренин, трипсин, химотрипсин и карбоксипептидаза А), гидролитически расщепляющих белковые вещества в пищеварительном тракте животных. Эти ферменты вырабатываются клетками слизистой желудка, кишечника или поджелудочной железой и выделяются в желудочно-кишечный тракт в виде 3. (пепсиногона, прореннина, трипсиногена, химотрип-синогена и прокарбоксипептидазы). Такой способ образования и выделения протеиназ является приспособлением, защищающим клетки и ткани организма от самопереваривания их ферментами, вырабатываемыми в этих клетках. [c.54]

РИБОНУКЛЕАЗЫ (РНК-азы) — ферменты, катализирующие гидролитич. расщепление рибонуклеиновых к-т на олиго- и мононуклеотиды. Р. широко распространены в природе и присутствуют во всех исследованных тканях. Наиболее изучена панкреатическая Р., секретируемая поджелудочной железой [систематич. название полирибонуклеотид — 2-олиго-нуклеотидо-трансфераза (циклизующая) шифр 2.7.7.16 — см. Номенклатура и классификация ферментов]. Р., выделенная в кристаллич. виде из поджелудочной железы быка экстракцией разведенной серной к-той с последующим фракционированием (NH4)2S04 — белок основного характера (р/ 7,8) с мол. в. 13 ООО. Установлена природа и последовательность аминокислотных остатков, входящих в состав Р., и выяснены существенные детали ее пространственной структуры, что дало возможность воссоздать трехмерную модель этого белка. Молекула панкреатич. Р. представляет собой одинарную полипептидиую цепь, состоящую из 124 аминокислотных остатков N-концевой аминокислотой в молекуле Р. является лизин, С-концевой — валин. [c.337]

Возможность применения флокулянтов в процессах очистки ферментсодержащих культуральных жидкостей от биомассы реализуется благодаря селективному и более быстрому процессу адсорбции полиэлектролитов на клеточной поверхности. Подбирая флокулянт и условия осаждения (pH, ионная сила), можно добиться преимущественного удаления примесей, в том числе и белковой природы, без заметной потери целевого фермента. Использование биофлокулянта катионного типа Sumiflo F -250 упрощает процедуру выделения и значительно повышает чистоту фермента медицинского назначения — калидогеназы (пат. 60—248180, 1985 Япония). Добавки флокулянта приводят к агрегации примесей автолизатов свиной поджелудочной железы, легко удаляемых фильтрованием. [c.131]

Химотрипсин представляет собой второй протеолитический фермент поджелудочной железы. Он обладает также и способностью створаживать молоко. Свежая поджелудочная железа содержит химотрипсиноген, который был выделен в кристаллическом виде [78]. Химотрипсиноген превращается в активный фермент — химотрипсин — под действием небольших количеств трипсина 1 мг трипсина способен активировать 3 г химотрипсиногена, причем активность последнего возрастает при этом примерно в 1 ООО раз. Превращение химотрипсиногена в химотрипсин является, повидимому, очень сложным процессом, при котором образуются несколько промежуточных продуктов. Так, например, установлено, что химотрипсиноген переходит сначала в Tt-химотрипсин, затем в 8-химотрипсин. В конечном итоге из химотрипсиногена получается смесь химотрипсинов, обозначаемых буквами а, р и Y [79, 80]. Сущность процесса активации заключается, повидимому, в освобождении 4— 6 аминогрупп в каждой молекуле химотрипсиногена [82]. В результате стояния водного раствора а-химотрипсина при pH 7,6 происходит необратимое превращение его в и у-химотрипсины, которые отличаются от а-химотрипсина по форме кристаллов и по растворимости [80]. Y-Химотрипсин является димером а-химотрипсина [81]. Химотрипсин расщепляет пептидные связи, образованные карбоксильной группой тирозгша, фенилаланина, триптофана или метионина [20, 83], а также эфиры тирозина [84]. [c.293]

Гормоны, образующиеся в эндокринных железах, поступают из этих желез непосредственно в кровоток, который доставляет их к месту действия. В течение последних нескольких лет выяснено химическое строение тех гормонов, которые являются производными стеринов, формула же адреналина — гормона мозгового вещества надпочечников — известна умге давно. Указанные гормоны представляют собой соединения со сравнительно небольшим молекулярным весом, гормоны же щитовидной, пара-щитовидной и поджелудочной желез, а также гормоны гипофиза представляют собой белки или производные белков с высоким молекулярным весом. Они отличаются от гормонов с низким молекулярным весом не только величиной своих молекул, но также своей термолабильностью и самим механизмом действия. Изучение строения этих гормонов, выделенных при помощи обычных методов химии белка, показало, что они построены из хорошо известных аминокислот. До сих пор, однако, не удалось установить, какие именно молекулярные группы определяют высокую физиологическую активность этих гормонов. В этой области дело обстоит так же, как и в области изучения гидролитических ферментов, относительно строения функциональных групп которых мы также знаем очень мало, несмотря на многочисленные теории, выдвинутые в последнее время для объяснения механизма ферментативного действия. В химии гормонов положение еще менее удовлетворительно, так как мы не имеем даже возможности выдвинуть какую-либо более или менее обоснованную теорию механизма их действия и должны ограничиваться простым описанием их свойств. При дальнейшем изложении особое внимание будет уделено описанию тех свойств, которые отличают один гормон от другого и всю группу белковых гормонов от других белков. [c.312]

После открытия К. Кирхгофа появились многочисленные данные о том, что ферменты распространены чрезвычайно широко — в желудочном соке был обнаружен пепсин, в соке поджелудочной железы было доказано наличие трипсина, в горьком миндале — фермента эмульсина и т. п. Однако прод1йо почти целое столетие, прежде чем удалось выделить ферменты в индивидуальном состоянии. На развитие работ по выделению и очистке ферментов в тот период роковое влияние оказала неудачная попытка такого всемирно признанного авторитета, как Луи Пастер, выделить из живых дрожжевых клеток фермент брожения. Отсюда родилось мнение, что ферменты как самостоятельные химические вещества вообще не существуют и ферментативная активность является каким-то особым атрибутом живой клетки. [c.32]

В своей диссертации О специфически действуюших телах натурального и искусственного соков поджелудочной железы (12), в которой им впервые было описано применение метода адсорбции для выделения и очистки ферментов панкреатического сока, он выразил наиболее распространенную в те годы среди ученых,исследовавших природу ферментов, точку зрения. В выводах он писал Натуральный и искусственный поджелудочные соки обнаруживают вне организма, нормальным образом, три специфические физиологические реакции а) они превращают крахмал в сахар б) растворяют характерным образом створоженное белковое тело (фибрин) в) разлагают нейтральные жиры (на соответствующие жирную кислоту и глицерин). Каждая из этих реакций зависит от особенного специфического вещества (12, стр.61). В данном случае речь идет об амилазе, трипсине и липазе сока поджелудочной железы. Относительно их химической природы Данилевский делает вывод Оба специфические тела, [c.124]

В опытах in vitro показано, что ферментная система, выделенная из митохондрий и микросом печени, катализирует этерификацию холестерина с помощью ацильных производных KoASH (фермент ацил-КоА-хо-лестерол-ацилтрансфераза) (путь 1). Холестерол-эстераза (3.1.1.13) из поджелудочной железы катализирует непосредственную этерификацию холестерина высшими жирными кислотами (путь 2), причем наряду с синтетической активностью проявляет гидролитическую, т. е. расщепляет эфиры холестерина. [c.354]

Ферменты, гидролизующие белки или действующие на небелковые компоненты сложных белков, могут выделяться или активироваться во время подготовки белковой смеси к фракционированию. При действии этих ферментов многие из соединений, которые должны быть получены, могут оказаться измененными или разрушенными. Хорошо известно, как важно быстро инактивиро-вать протеолитические ферменты поджелудочной железы при выделении из нее инсулина [22]. Даже если в начале опыта фермент присутствовал в небольших концентрациях, то по мере фракционирования его концентрация может увеличиваться в какой-либо отдельной фракции и нанести большой ущерб. Примером непро-теолитич"еского фермента может служить так называемый ПР-фер-мент Кори и Грина [23]. Этот фермент изменяет свойства фосфо-рилазы мышц таким образом, что ее трудно затем выделить [c.10]

Крахмал составляет по весу главную составную часть пищи человека (хлеб, картофель, крупы, овощи) —главный энергетический ресурс его организма. Содержание крахмала в некоторых видах богатых им пищевых продуктов таково мука — 74%, рис — 78%, хлеб белый — 51%, картофель— 16%. Уже во рту, под действием слюны, содержащей гидролитический фермент амилазу, начинается гидролиз крахмала. В кислой среде желудка гидролиз завершается расщеплением до глюкозы, которая из кишечника поступает в кровь и разносится током крови до каждой клетки, подвергаясь там ряду превращений (стр. 434), обусловливающих теплоту тела, энергию мускульной и мозговой работы человека и животного. В крови поддерживается довольно строго определенная концентрация глюкозы как значительный избыток, так и, особенно, недостаток ее гибельны для организма . Концентрация глюкозы регулируется действием гормонов. При повышении содержания глюкозы в крови избыток ее за счет специфического действия выделяемого поджелудочной железой гормона инсулина (белок, см. кн. 11) откладывается в печени и частично в мышцах в виде животного крахмала -глы/со-гена. Цечень может содержать до 20 вес.% гликогена. При недостатке глюкозы в крови часть гликогена печени гидролизуется в глюкозу и поступает в кровь (гормон глюкагон). Если деятельность поджелудочной железы нарушена и она не продуцирует инсулина, наступает сахарная болезнь —диабет, характеризующаяся повышенным содержанием глюкозы в крови. Организм вынужден тогда сбрасывать избыток глюкозы с мочой. Систематическое введение в кровь инсулина, выделенного из [c.447]

Последовательность нуклеотидов в транспортной РНК аланина, выделенной из дрожжей и очищенной, устанавливалась путем ее гидролиза двумя разными ферментами — рибонуклеазой поджелудочной железы и рибонуклеазой Т1 такадиастазы. Гидролиз обоими ферментами проводился до предела. Сумма полученных в каждом случае коротких полинуклеотидов и мононуклеотидов разделялась хроматографически эти полинуклеотиды (по большей части ди- и три-, но не более окта-) пдентифици- [c.718]

Кристаллическая карбоксипептидаза А, выделенная из поджелудочной железы, представляет собой одиночную полипептидную цепь, построенную из 310 аминокислотных остатков и имеющую мол. в. 34 300. N-Koh-цевая последовательность карбоксипептидазы Asp—Ser—Thr. С-Концевой аминокислотой является аспарагин рН-Оптимум для карбоксипен-тидазы А из поджелудочной железы 7,3. Молекула карбоксипептидазы А содержит один атом цинка, необходимый для проявления каталитической активности фермента. Удаление цинка с помощью комплексо-образующих средств приводит к потере протеолитической активности . Специфическими ингибиторами карбоксипептидазы А являются ароматические и гетероциклические кислоты [c.303]

Применение метода хронической фистулы протока поджелудочной железы позволило И. П. Павлову и его ученикам изучить влияние различных факторов на секрецию сока и иа его состав. Оказалось, что в отсутствие специальных раздражителей, связанных с едой, сок поджелудочной железо11 ие выделяется. Обильное выделение сока начинается через, две-три минуты после начала приема пищи, затем оно на время затихает и через несколько минут снова увеличивается. На каждый род пищи поджелудочная железа реагирует выделением определенного количества сока. Наибольшее количество сока выделяется при приеме углеводной пищи, мясная пища вызывает меньшее выделение сока и еще меньшее пища, богатая жиро.м. Род пищи влияет не только на пнтенсив]юсть выделения сока, поджелудочной железы, но и на активность содержащихся в нем ферментов. Так, например, по данным И. П. Павлова, при продолжительном кормлении собаки мясом способность сока переваривать мясо все больше возрастает, а способность его переваривать крахмал падает. При кормлении преимущественно молоком в соке усиливается активность липазы, при кормлении хлебом — активность амилазы. [c.338]

Овомукоид ингибирует протеолитическую и эстеразную активность трипсина, измеренную, например, с такими субстратами, как денатурированный гемоглобин или этиловый эфир бензоиларгинина. Поскольку ингибируется приблизительно равный вес трипсина, то это при учете относительных молекулярных весов наводит на мысль о эквимолярном взаимодействии. В этом отношении овомукоид напоминает ряд других белков, которые обладают общим свойством ингибирования трипсина (см. обзоры [7, 60]). Выделение неактивного кристаллического вещества, содержащего эквимо-лярные количества фермента и ингибитора, при взаимодействии трипсина и ингибиторов из поджелудочной железы, соевых бобов и молозива коровы свидетельствует об образовании во всех этих случаях комплекса между ингибитором и трипсином. Образование подобного комплекса при взаимодействии овомукоида и трипсина подтверждается следующими фактами а) при электрофорезе смесь овомукоида и трипсина движется как один компонент, подвижность которого является промежуточной между подвижностью ингибитора и фермента (рис. 2) б) ультрацентрифугирование смеси дает один седиментационный пик с коэффициентом седиментации 3,8 по сравнению с величиной 2,6, которую получают при центрифугировании любого из двух компонентов комплекса [61, 12]. Однако молярное отношение 1 1 является лишь приблизительным, поскольку имеется доказательство существования комплексов, включающих более одной молекулы трипсина на молекулу [c.35]

Мартин и Портер [611, используя метод распределительной хроматографии, первыми показали, что экстракты поджелудочной железы быка содержат две белковые фракции с рибонуклеазпой активностью. С помощью хроматографии на амберлите ШС-50 [62] было установлено, что эти два компонента, рибонуклеаза А и рибонуклеаза В, содержатся в соотношении 10 1. Из двух форм фермента в настоящее время наиболее полно изучена рибонуклеаза А. Однако недавно Плуммер и Хирс [63] описали метод выделения и охарактеризовали рибонуклеазу В. Интересен тот факт, что рибонуклеаза В является гликопротеином, тогда как рибонуклеаза А не содержит углеводов. [c.243]

Для выделения рибонуклеазы В из сока поджелудочной железы быка была использована хроматография на амберлите 1НС-50 в 0,2 М натрийфосфатном буфере при pH 6,02. В этих условиях рибонуклеаза В выходит из колонки значительно раньше рибонуклеазы А. Выход рибонуклеазы В был равен 1,25 ме/г белка поджелудочной железы. Было показано, что выделенный фермент гомогенен при хроматографировании на карбоксиметилцеллюлозе. Когда фермент- исследовался с помощью электрофореза па полиакриламидном геле при pH 4,5, он мигрировал как одна фракция. [c.243]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология