Хроматографирование для количественных методов

При хроматографировании воздушных проб на колонках, заполненных молекулярными ситами (цеолитами) ЫаХ или СаА в качестве адсорбента, содержащиеся в воздухе кислород и азот могут быть полностью разделены. Получаемые хроматограммы легко расшифровываются количественно методом внутренней нормализации плош,адей пиков. [c.255]

Хроматографирование для количественных методов [c.83]

В зависимости от задачи, поставленной перед аналитиком, выбирают нужные условия проведения хроматографирования и методы количественного определения. [c.84]

Важному методическому вопросу — количественным методам определения индивидуальных жирных кислот нормального строения, посвятила свою статью Л. К. Обухова. Ею были использованы методы хроматографирования на бумаге гидроксамовых производных кислот i— С4 и метод перегонки с носителем метиловых эфиров кислот от Се и выше. [c.7]

Бумажная хроматография. Описанные методы бу.мажной хроматографии разнообразны и отличаются способом хроматографирования, применяемыми элюэнтами и проявителями, а также способами количественного определения примесей. [c.186]

При электрофорезе с последующим хроматографированием на бумагу, пропитанную раствором электролита, наносят каплю анализируемого раствора и проводят электрофорез, подключая концы листа бумаги через электроды к источнику постоянного тока. После окончания электрофореза бумагу вынимают из прибора, сушат и переносят в камеру для хроматографирования по способу восходящей или нисходящей хроматографии. После окончания хроматографирования бумагу проявляют и проводят качественные и количественные определения. Метод раздельного электрофореза и хроматографирования позволяет проводить эти две операции при различных значениях pH, что улучшает возможности разделения. [c.220]

Ко второй группе методов количественного анализа относятся методы вымывания. При хроматографировании нисходящим способом зоны хроматографируемых веществ вымывают с бумаги растворителем, раствор собирают отдельными порциями, в которых содержание анализируемых компонентов определяют обычными аналитическими методами. [c.224]

Количественное определение ионов после хроматографического разделения на бумаге можно проводить несколькими методами 1) извлечением из пятен отдельных компонентов после разделения смеси и количественное их определение обычными микроаналитическими методами 2) измерением площади пятен на хроматограммах. Площадь 5 пятна на хроматограмме является функцией концентрации С компонента в анализируемой пробе 8 = a g + В, где а и й — постоянные, определяемые экспериментально. Однако первый метод трудоемкий, а при использовании второго приведенная зависимость площади пятна от логарифма концентрации соблюдается не строго и для получения более или менее надежных результатов необходимо проводить много параллельных определений. Одной из причин разброса результатов анализа является то, что при хроматографировании разделение происходит по нескольким механизмам протекающим одновременно — распределение ионов между двумя растворителями, ионный обмен, образование малорастворимых осадков, физическая адсорбция на бумаге. [c.341]

Более четкое разделение с лучшей воспроизводимостью результатов удается получить, если при разделении имеет местО какой-то один из механизмов. Очень удобен для количественного определения метод осадочной хроматографии на бумаге. В этом случае на бумаге происходит преимущественно образование малорастворимых соединений определенного состава. При равномерном нанесении осадителей на бумагу осадок, образующийся после хроматографирования, занимает площадь, пропорциональную количеству осаждаемого иона. Это используют для количественного определения ионов методом осадочной хроматографии. Для этого измеряют массу бумаги, вырезанной пО контурам зоны, площадь или длину зоны. [c.341]

В аналитической химии существуют методы разделения и методы определения. Основной задачей методов разделения является главным образом отделение мешающих компонентов или выделение определяемого компонента в виде, пригодном для количественного определения. Однако нередко определение интересующего компонента производится прямо в пробе без предварительного разделения. В некоторых случаях методы разделения и определения настолько тесно связаны между собой, что составили неразрывное целое. Представителем таких методов является газовая хроматография. В процессе хроматографирования смесь разделяется на компоненты, и количественно определяется содержание компонентов. Такие методы анализа иногда называют гибридными, подчеркивая тесную связь отделения и определения как характерную особенность. [c.13]

Во всех перечисленных случаях хроматографическому исследованию подвергают пробы, которые берут из реактора через определенные промежутки времени. Образующийся в реакционной смеси полимер не является препятствием для газохроматографического метода. Периодический отбор проб из реактора осуществляется шприцем с длинной иглой. Небольшой объем пробы (1,5—2 мкл) хроматографируют. На хроматограмме кроме пика мономера возможно появление пиков других веществ, образовавшихся при протекании процессов, сопутствующих полимеризации. По изменению состава можно оценить чистоту гомополимера. Для упрощения количественных расчетов применяют метод внутреннего стандарта. Внутренний стандарт — вещество, которое заранее в известной концентрации вводят в реакционную смесь оно не влияет на процесс полимеризации, растворимо в реакционной смеси и хорошо отделяется от всех компонентов при хроматографировании. [c.244]

Ко второй группе методов количественного анализа относится метод вымывания, заключающийся в том, что полученную хроматограмму разрезают на части так, чтобы в каждой находилось одно пятно. Затем вещество экстрагируют из бумаги и в экстракте определяют его количество любым из доступных методов. Предварительно определяют положение каждого пятна на хроматограмме, для чего проводят параллельное хроматографирование двух капель одного и того же раствора. После этого одну хроматограмму проявляют. Непроявленную вторую хроматограмму разрезают в соответствии с результатами проявления первой хроматограммы. [c.126]

Количественное определение аминокислот путем измерения интенсивности окраски пятен на хроматограмме денситометром. После определения концентрации аминокислоты визуальным методом проводят ее определение путем измерения интенсивности окраски пятен, полученных при хроматографировании растворов известных концентраций и растворов, концентрации которых неизвестны, с помощью денситометра (стр. 99). Из хроматограммы вырезают полоску с пятнами определенной аминокислоты и проводят измерение интенсивности ее окраски по всей длине. С помощью планиметра определяют площадь пиков для известных и неизвестных концентраций выбранной аминокислоты и строят калибровочный график, по которому определяют неизвестную концентрацию иС следуемой аминокислоты. [c.117]

Достоинство метода внутреннего стандарта состоит в том, что при его использовании сводятся к минимуму погрешности в результатах, вызванные случайными изменениями основных параметров хроматографического опыта (температуры и скорости газа-носителя и режима работы детектора), поскольку возможные отклонения от заданных условий должны равным образом влиять на количественные параметры хроматографических пиков как стандартного, так и анализируемого соединений. Отпадает необходимость дозирования строго заданных количеств пробы и соблюдения постоянства всех переменных параметров хроматографирования. [c.229]

Сущность работы.Хроматографирование керосина на силикагеле дает возможность количественно выделить только ароматические углеводороды, но не позволяет получить раздельно парафиновые и Нафтеновые. Поэтому парафино-нафтеновая фракция, выделенная из керосина в предыдущей работе, подвергается хроматографированию на активированном угле марки БАУ. Для увеличения четкости разделения следует применять колонки с восходящим потоком жидкости и достаточной высоты. Применяется проявительный метод, причем проявителем может служить петролейный эфир. [c.50]

Промежуточный связанный с полимером пептид после удаления растворимых реагентов и побочных продуктов не нуждается в очистке, что позволяет избежать традиционных процедур очистки (перекристаллизация, хроматографирование) и связанных с ними потерь. В принципе такой подход приемлем только в том случае, если все последовательные синтетические реакции идут количественно. Поскольку этого вряд ли можно достичь, метод синтеза на твердом носителе неизбежно приводит к окончательному продукту, загрязненному более короткими пептидами, в которых не-хватает одной или более аминокислот (дефект последовательности). Подобным же образом побочные реакции могут привести к загрязнению пептидами с искаженной и частично выполненной последовательностью. Поэтому успех синтеза на твердом носителе полностью зависит от того, возможно ли очистить конечный продукт от близких побочных продуктов. Для достижения даже умеренной чистоты продукта, получаемого на смоле, необходима очень высокая эффективность реакций образования пептидной связи. Так, для получения декапептида с правильной цепью с выходом 80% необходимо, чтобы выход на каждой стадии образования пептидной связи был около 98 % В случае пептида с 20 остатками аминокислот средний выход увеличивается до 99%. В обоих случаях остающиеся 20 % связанного со смолой пептида имеют более короткие пептидные цепи, в основном на одну или две аминокислоты меньше. Поэтому проблема очистки становится очень трудной. [c.407]

Значение этого метода определяется тем, что при умелом подборе адсорбента и растворителя удается легко и количественно разделить даже структурно близкие вещества. Существует три основных типа хроматографирования на колонках, которые различаются в зависимости от вида применяемого обменного процесса. [c.19]

Нами предложен весьма эффективный и экспрессный метод исследования строения олефинов как в индивидуальном состоянии, так и в смесях, основанный па использовании микрореактора гидрирования (Р1, Рс1), расположенного между колонкой газового хроматографа и масс-спектрометром [30]. Проведение хроматографирования в токе водорода приводит к количественному гидрированию олефинов до алканов, масс-спектры которых позволяют установить характер углеродного скелета. Если вести хроматографирование в токе дейтерия, то по масс-спектрам насыщенных дейтеропроизводных часто можно установить положение двойной связи в исходном олефине. [c.31]

Количественный анализ в ТСХ состоит из нескольких этапов подготовка и нанесение пробы на тонкослойную пластинку, разделение (хроматографирование) и проявление компонентов смеси на тонком слое сорбента, качественная и количественная оценка результатов анализа. Количественное определение вещества в пятне может быть одностадийным (по величине пятен с помощью оптических, электрохимических или ядерно-физических методов) и двухстадийным (вещества сначала отделяют от слоя сорбента извлечением растворителями или переводят в газовую фазу, а затем определяют инструментальными методами). [c.33]

Метод ТСХ позволяет разделять от нескольких десятков до сотых долей микрограммов бромсодержащих и других ионов с высокой эффективностью. После разделения смесей компоненты идентифицируют по величинам Rf, а при необходимости определяют количественно по площади пятна па хроматограмме, фотометрическим или радиометрическим методом, а иногда прибегают к анализу раствора, полученного после элюирования выделенного компонента. В качестве примера приведем описание методики хроматографирования одной смеси. [c.67]

Количественное определение массы индивидуальных моносахаридов производят с использованием внутреннего стандарта (сорбита). Масса сорбита, добавляемая в анализируемую смесь, должна обеспечить его концентрацию в растворе, примерно соответствующую концентрации индивидуальных моносахаридов. Расчет ведут по градуировочному графику. График получают, по данным хроматографирования эталонных растворов, содержащих индивидуальный моносахарид и сорбит. Градуировочный график строят в координатах по оси абсцисс — масса чистого моносахарида в эталонном растворе, по оси ординат — отношение площади характеристического пика этого же моносахарида к площади пика внутреннего стандарта. График имеет линейную форму. Прямую линию проводят с использованием метода наименьших квадратов. [c.140]

По способу для разделения примесей пробу раствора дифенилолпропана в этаноле наносили на лист ватмана № 1, пропитанный водой в качестве растворителя использовали четыреххлористый углерод, насыщенный муравьиной кислотой. Хроматографирование вели нисходящим способом для проявления хроматограммы использовали свежеприготовленную смесь водных растворов феррицианида калия и хлорного железа. Количественное определение проводили с помощью хроматометра Ланге (хроматограмму парафинировали, а затем измеряли интенсивность окраски пятен и сравнивали с калибровочным графиком). Применяли также и более простой метод, не требующий указанного прибора — метод сравнения интенсивности окраски в исследуемой и эталонной пробах. Помимо орто-пара-изомера дифенилолпропана, соединения Дианина и трис-фенола I удалось обнаружить 10 неидентифицированных примесей. На основании величины авторы предполагают, что три компонента из десяти являются фенолами с одной группой —ОН. [c.187]

Расчет количественного содержания компонентов смеси проводят по площадям пиков 5, по формуле (3.9) или (3.10) методом абсолютной калибровки. Для этого вводят поочередно в испаритель хроматографа микрошприцем 0,2 0,4 0,6 0,8 мкл воды, диметилформамида и этилацетата. Каждое хроматографирование повторяют три раза. Строят градуировочные графики зависимости площадей пиков воды, диметилформамида и этилацетата от хроматографируемого количества 5 = 1(д). Вычисляют площадь пика каждого компонента на хроматограмме смеси как среднеарифметическую из трех измерений и по графику 5 = 1(д) находят массу каждого компонента в хроматографируемом количестве смеси. Содержание компонентов Xi рассчитывают по формулам (3.11) и (3.12). [c.199]

По другому колориметрическому методу [177] содержание 24М6В определяют окислением присадки ферроцианидом калия, и. после сочетания полученного раствора с диазореактивом проводят колориметрирование. Предварительно присадку отделяют хроматографически на окиси алюминия с последующим вытеснением бензина хлороформом и пентаном. Пентан удаляет с адсорбента следы бензина и хлороформа. Присадку 24М6В удаляют этанолом. Перед хроматографированием бензин для удаления природных фенолов промывают 10%-ным водным раствором щелочи. При наличии в бензине аминных присадок его промывают 50%-ной соляной кислотой. Если бензин окрашен, его необходимо несколько раз пропустить через активированный уголь до полного удаления окраски. После хроматографирования от элюата с присадкой отгоняют пентан, охлаждают остаток до комнатной температуры, количественно переносят в мерную колбу емкостью 50 мл и добавляют до метки этанол. [c.201]

Для количественного анализа предварительно производят градуировку, для чего на бумагу наносят равные количества раствора, содержащего разные, но известные количества подлежащего определению вещества. После хроматографирования и проявления полученные пятна аккуратно очерчивают карандашом и измеряют их площадь планиметром или другими методами. По полученным дан-ны 1 для кал<дого анализируемого вещества строят калибровочный график в координатах lg С — Пбум, которым пользуются затем для количественных определений. [c.223]

Важнейщими требованиями к эксперименту при выполнении количественного анализа по методу абсолютной градуировки являются точность и воспроизводимость дозирования пробы строгое соблюдение постоянства (тождественности) условий хроматографирования при градуировке прибора и при определении содержания интересующего вещества в пробе неизвестного состава. Последнее условие особенно жестко должно выдерживаться при градуировке по высотам пиков. [c.223]

В колоночной (в том числе газовой) хроматографии по достижении положения, показанного на рис. 61, б, подачу подвижной фазы не прегфащают. Хроматографирование продолжают до тех пор, пока подвижная фаза выносит из колонки разделяемые вещества. Этот процесс называют элюированием, а выходящую из колонки подвижную фазу, содержащую разделяемые вещества, — элюатом. Элюат обычно контролируют на содержание разделяемых веществ с помощью датчиков, которые называют детекторами. Сигналы детекторов принимаются измерительными приборами и передаются к самописцам. Получают хроматограммы, подобные той, которая показана на рис. 61, в. Если на оси абсцисс отложено время, по хроматограмме можно определять время удерживания вещества в колонке. Для 81 это 1, а для 83 — 2 (отсчет времени ведется с момента ввода смеси разделяемых веществ). Часто все же по оси абсцисс откладывают не время, а объем элюата. Нулевая точка тогда соответствует выходу той порции подвижной фазы, в которую была введена смесь разделяемых веществ. Потом в элюате меняются концентрации разделяемых веществ в соответствии с различными степенями их удерживания. По полученной хроматограмме определяют объем удерживания. Для 81 это v , а для 83 = а-Время (объем) удерживания при постоянных условиях хроматографирования представляет собой величину, характерную для данного вещества. Поэтому наряду с другими методами обнаружения для идентификации веществ можно использовать значения времени (объема) удерживания. Количества же разделенных веществ пропорциональны площадям их пиков. Это используют для проведения количественных определений. Можно также собрать отдельные порции элюата и определить содержание в них разделяемых веществ с помощью подходящих методов количественного анализа. [c.258]

Смесь углеводов разделяют в слое силикагеля, который перед нанесением на пластинку (200X200 мм) смешивают с 0,1 н. раствором борной кислоты. Для хроматографирования применяют систему растворителей бензол—ледяная уксусная кислота—метанол (2 2 6). Углеводы в слое адсорбента проявляют раствором 1,3-диоксинафтолрезорцина в серной кислоте. Для количественного определения углеводов пятна вместе с адсорбентом снимают с пластинки в пробирки, смешивают с 0,05 н. раствором КгСггО в 10%-ной HjSO , нагревают в течение 60 мин при 90°С, охлаждают, прибавляют 20 мл воды и 5 мл 5%-ного раствора йодистого калия. Выделившийся йод титруют 0,01 н. раствором тиосульфата натрия. Точность метода 5%. [c.81]

Другой метод количественного анализа смеси моносахаридов газожидкостной хроматографией [82] состоит в том, что полученные после гидролиза полисахаридов моносахариды восстанавливают боргидридом натрия в соответствующие многоатомные спирты (альдитолы) и затем превращают их в ацетильные производные, которые затем разделяют в газожидкостном хроматографе. Условия хроматографирования позволяют разделить ацетаты альдитолов за 30—45 мин. [c.85]

В публикуемых в последние годы работах есть огромное количество свидетельств тому, что при проведении количественного анализа холодный ввод пробы непосредственно в колонку превосходит все другие варианты. Еще одной важной особенностью этого метода является постоянство состава пробы. Термически лабильные соединения не подвергаются тепловому воздействию хроматографирование этих веществ происходит при сравнительно низких температурах. Практически полностью исключена возможность протекания реакций разложения и перегрзшпировки. Это позволяет проводить анализы, неос тцествимые ранее методом газовой хроматографии, что прекрасно продемонстрировано в работе [30]. Показано, что только с использованием холодного ввода пробы непосредственно в колонку можно провести газохроматографическое количественное определение горчичных масел и их нитрильных производных в редисе. [c.55]

ФТГ-Производные можно идентифицировать хроматографированием на бумаге [92, 186, 288] и на распределительной колонке [290]. Последний метод пригоден для количественных определений, но можно выполнять также быстрые полуколи-чественные определения путем элюирования пятен хроматограмм на бумаге. Пятна проявляются иод-азидным реактивом, специфичным на двухвалентную серу, а при количественных определениях обнаруживаются по сильному поглощению в УФ-области ФТГ-производных [92]. [c.242]

Мендель [1] получил ацетил-1-С -салициловую кислоту с выходом 32% (в расчете на ацетат-1-С натрия) из бис-ацст-1-С " ангидрида и салициловой кислоты по методу Фогеля [2]. Образующаяся уксусная-1-С кислота почти количественно извлекалась из системы. Перекристаллизацией носителя из маточного раствора радиохимический выход повышался на 10%. Перекристаллизация из горячего разбавленного спирта приводит к дез-ацилированию. В результате хроматографирования на бумаге в системе вода—70%-ная азотная кислота (140 1, по объему) было показано, что в полученном препарате присутствует только одно радиоактивное вешество. [c.414]

Точность ВЭЖХ-анализа определяется качеством используемых для калибровки эталонных соединений, точностью подготовки пробы, правильным выбором способа количественной обработки, воспроизводимостью режима и результата хроматографирования. Корректный количественный анализ возможен только при наличии эталона определяемого вещества. Это, конечно, является ограничением метода ВЭЖХ, как, впрочем, и других физико-химических методов анализа. Потребители услуг хроматографистов-аналитиков часто задают вопрос Какова точность хроматографического анализа По нащему убеждению, на вопрос, поставленный таким образом, вообще нельзя дать ответа. Речь может идти только о точности той или иной хроматографической методики применительно к конкретным определяемым соединениям. Всегда необходимо помнить, что любая методика основана на каких-то предположениях, В ходе ее разработки допустимость этих предположений должна быть обоснована. Однако, даже если это сделано добросовестно, при [c.245]

Методика количественного анализа. Методы количественного хроматографического анализа на бумаге могут быть разделены на две группы методы, не требующие удаления анализируемого вещества с бумаги, и методы, основанные на вымывании анализируемых веществ. Методы, относящиеся к первой группе, основаны на том, что площадь пятна и интенсивность его окраски зависят от количества хроматографируемого вещества. Так, например, известно, что если на хроматографическую бумагу наносить постоянный объем анализируемого раствора, то площади пятен получающихся при хроматографировании и проявлении, пропорциональны логарифму концентрации анализируемых веществ с [И], т. е. [c.264]

В книге рассматриоается новый вариант метода тонкослойной хроматографии, отличающийся повышенной эффективностью разделения, улучшенной экс-прессностью, более высокой чувствительностью. Несмотря на небольшой объем книги, в ней достаточно полно обсуждаются теоретические основы метода, его особенности и аппаратура подробно рассматриваются практические вопросы хроматографирования образцов и получения количественных результатов. [c.4]

V NH4OH (2 1 2) [7571 ацетон—пиридин—вода (4 2 1) [380]. На бумаге Ватман № 3 последняя из названных ПФ обеспечивает высокую эффективность разделения. Как и в предыдущих случаях, разделение осуществляют методом восходящей хроматографии полоски бумаги длиной 60 см и шириной 2,6 см с нанесенной на них анализируемой смесью помещают в вертикальном положении в стеклянные цилиндры с ПФ. После 24 час. хроматографирования полоски бумаги сушат, кондиционируют 30 мин. в атмосфере с влажностью 90% и проявляют 1 %-ным раствором AgNOg, а после освещения дневным светом измеряют Rf. Для ионов F , СГ, Вг и значения Rf соответственно равны О, 0,20 + 0,03, 0,36 + 0,06 и 0,69 0,06. В случае необходимости количественного анализа каждую зону после проявления элюируют 25 мл воды и измеряют радиочастотное сопротивление полученного раствора. В других случаях количественный анализ выполняют после сухого или влажного сожжения проявленных пятен в этнх методах отпадают возможные погрешности за счет неполноты элюирования. [c.65]

Описаны методы количественного определения кальция после обогащения образца хроматографированием на бумаге в бронзах и цинковых сплявах [12741, доломитах, стронцитах, баритах и калъцигах [10231, биологических объектах [864]. [c.187]

По второму методу количественное определение массовой доли конкретного моносахарида в смеси производят по площади пика одного из его таутомеров, исходя из условия, что при синтезе ТМС-производных в строго постоянных условиях соотношение таутомеров сохраняется постоянным. Это позволяет для расчета выбрать наиболее разрешенный пик, называемый характеристическим. В качестве таких пиков обычно используют пики ТМС-производных Р-/,-арабинопиранозы, [3- )-кси-лопиранозы, а- )-маннопиранозы, а- )-галактопиранозы и -О-глюкопиранозы. Площади пиков остальных таутомеров непосредственно не измеряют, а находят расчетом. С учетом доли характеристического пика вычисляют общую площадь пиков всех таутомеров данного моносахарида. Количественное соотношение таутомерных форм необходимо устанавливать для данных условий хроматографирования и при их изменении определение следуют проводить вновь. Долю конкретного моносахарида находят отнесением площади всех пиков данного моносахарида к общей площади всех пиков. [c.140]