Подвижная влияние на удерживание

В жидкостной хроматографии имеются исключительно большие возможности управления селективностью разделения. В газовой хроматографии с практически неадсорбирующимся газом-носителем вещества разделяются за счет различий только неспецифических (в основном дисперсионных) межмолекулярных взаимодействий или суммы специфических и неспецифических межмолекулярных взаимодействий адсорбат — адсорбент. В жидкостной же хроматографии за счет влияния подвижной фазы удерживание веществ и селективность разделения может определяться значительно большим разнообразием различных видов межмолекулярных взаимодействий. Здесь можно реализовать случай, когда удерживание определяется преимущественно специфическим взаимодействием с адсорбентом при применении неполярного или слабополярного элюента (так называемый прямой вариант жидкостной хроматографии) или преимущественно неспецифическим взаимодействием с адсорбентом при применении полярного элюента (так называемый обращенно-фазовый вариант жидкостной хроматографии), а также их различными комбинациями. [c.217]

Прежде чем обсудить возможности разделения веществ в газовой фазе, рассмотрим факторы, определяющие удерживание в газовой хроматографии. Чтобы учесть влияние давления и температуры, вместо времени удерживания используют объем удерживания. Общий объем удерживания и объем подвижной фазы Ум получают умножением соответствующих времен удерживания на объемную скорость потока газа-носителя Р (в мл газа-носителя в минуту) [c.246]

Для характеристики влияния подвижной фазы на удерживание используют понятие элюирующей силы. [c.32]

Зависимость величин удерживания от количественного состава подвижной фазы следует уже из основополагающих работ по теории обращенно-фазовой хроматографии [202, 203]. Так, для оценки влияния концентрации органического растворителя в принципе могло бы быть использовано уравнение (4.5). Однако это математическое описание достаточно сложно и требует знания физико-химических параметров системы, которые нелегко найти в литературе либо определить экспериментально. Поэтому чаще всего пользуются упрощенными моделями, приводящими к вполне удовлетворительным результатам. [c.91]

Интерпретация зависимости величин удерживания от концентрации органического растворителя в подвижной фазе, приведенная в 4.1.2.4, позволяет, используя основные представления сольвофобной теории обращенно-фазовой хроматографии, получить единую модель, описывающую влияние строения сорбатов и состава подвижной фазы на коэффициенты емкости. [c.122]

СОВМЕСТНОЕ ВЛИЯНИЕ СОСТАВА ПОДВИЖНОЙ ФАЗЫ И ТЕМПЕРАТУРЫ НА УДЕРЖИВАНИЕ [c.125]

Совместное влияние структуры полиядерных ароматических углеводородов, температуры разделения и состава подвижной фазы на величины удерживания рассмотрено в работе [247] и положено в основу прогнозирования удерживания веществ этого класса с помощью ЭВМ. Погрешность априорного расчета к почти для всех изученных веществ оказалась меньше Ш%. [c.126]

Лекарственные вещества, как правило, высокополярны, и при их хроматографии на силикагеле применяют элюенты, содержащие значительные количества полярных компонентов поэтому влиянием влажности подвижных фаз на удерживание можно пренебречь. Именно такой подход использован во множестве экспериментальных исследований, целью которых была систематизация величин удерживания и выбор оптимального состава подвижной фазы. Общим правилом в нормально-фазовой хроматографии является уменьшение удерживания прн увеличении концентрации полярного компонента подвижной фазы. Этот эффект описывается разными авторами с помощью уравнений (4.88) — (4.90). [c.133]

Оптимизация режима хроматографии [113] на силикагеле Методика определения в плазме крови [157 Влияние 15 различных аминов — доба- [257 вок к подвижной фазе на величины удерживания и симметрию пиков Роль состава неподвижной и подвиж- [380] ной фаз в симметрии хроматографических пиков Влияние добавок амина в элюент при [210] обращенно-фазовой хроматографии Механизм удерживания Выбор подвижных фаз для разделения [414] на силикагеле, способ экстракции нз плазмы [c.298]

Выбор оптимальных условий разделения [22] Выделение в режиме ионообменной и 229] обращенно-фазовой хроматографии Повыщение чувствительности анализа [93 [ Межлабораторная воспроизводимость [149] величин удерживания. Способы представления данных Сравнительное исследование индексов [364] удерживания и коэффициентов емкости как параметров для качественного анализа. Влияние подвижной фазы [c.298]

Большое влияние на энантиоселективность оказывает состав подвижной фазы. В обшем случае и и а уменьшаются с увеличением содержания органического модификатора в элюенте. В большинстве случаев метанол как модификатор приводит к меньшему снижению значения а, чем ацетонитрил. Удерживание на колонках с ЦД заметно зависит и от температуры, быстро снижаясь до нуля в пределах от 60 до 80°С. [c.113]

Как и при разделении на ранее описанных полимерных ХНФ, механизм хирального распознавания в данной системе является сложным и до конца не выяснен. Однако основные причины удерживания сорбата были выявлены в ходе систематических исследований влияния его структуры и состава подвижной фазы на коэффициент емкости. Во многих отношениях альбумин-силикагелевый сорбент ведет себя подобно обращенно-фазовым материалам на основе алкилированного силикагеля. Спирты, преимущественно пропанол-1, помогают регулировать время удерживания, поскольку вызывают его быстрое уменьшение вследствие ослабления гидрофобных взаимодействий с сорбентом. Оптимизировать состав подвижной фазы можно, варьируя тремя основными параметрами, а именно pH, ионной силой и органическим растворителем-модификатором [90]. Вероятно, в любой хроматографической системе одновременно наблюдается влияние диполь-ионных и гидрофобных взаимодействий. Кроме того, возможно образование водородных связей и комплексов с переносом заряда. Большое влияние свойств подвижной фазы на значения к разделяемых энантиомеров можно объяснить зависимостью свойств белков от распределения заряда и его конформации. БСА состоит как минимум из 581 остатка аминокислот, связанных в единую цепь (мол. масса 6,6-10 ), и его надмолекулярная структура в значительной мере определяется присутствием в молекуле 17 дисульфидных мостиков. При рН7,0 полный заряд молекулы равен - 18, а изоэлектрическая точка равна 4,7. Как это хорошо известно из химии ферментов, смена растворителя способна вызывать изменения в структуре связывающего центра белка в результате изменения его заряда и конформации. [c.133]

В то время как амины и аминокислоты, несущие положительный заряд, более прочно удерживаются при более высоких значениях pH, для отрицательно заряженных сорбатов справедливо обратное. Систематические исследования, проведенные на серии N-бензоил-о, L-аминокислот, позволили глубже понять механизм взаимодействия сорбата с белком. Влияние изменения свойств подвижной фазы на величины к VI а демонстрирует рис. 7.10. Во-первых, удерживание в значительной степени возрастает с усилением гидрофобного характера аминокислоты (Ser > А1а> Phe). Во-вторых, увеличение суммарного отрицательного заряда белка с увеличением pH вызывает уменьшение к для всех шести соединений (вследствие ионного взаимодействия). Далее, влияние концентрации буфера можно объяснить усилением адсорбции вследствие ионных взаимодействий при низкой ионной силе. Небольшое, но вполне заметное возрастание к для наиболее сильно удерживаемых сорбатов при высоких концентрациях буфера вероятнее всего является результатом усиления гидрофобных взаимодействий. Поскольку ионные (кулоновские) и гидрофобные взаимодействия по-разному подвержены влиянию ионной силы, то оба эффекта приводят к возникновению минимума в адсорбции сорбата (к ) в определенной точке. И наконец, совершенно очевидно влияние органического растворителя-модификатора он всегда приводит к понижению удерживания сорбата и тем сильнее, чем более гидрофобен сорбат. Влияние pH и ионной силы на удерживание незаряженных соединений невелико, но выражено вполне отчетливо. Оно связано исключительно с изменениями в связывающем центре ХНФ. Добавление пропанола-1 вызывает уменьшение удерживания по сравнению с наблюдаемым у заряженных сорбатов, что свидетельствует о преимущественном вкладе в удерживание гидрофобных взаимодействий. Это подтверждает также наблюдаемое очень большое влияние на удерживание длины цепи алканола-1. Высшие спирты являются значительно более эффективными конкурентами за связывающий центр, а потому вызывают более быстрое элюирование сорбата. Возможность регулирования удерживания путем изменения подвижной фазы, которую демонстрирует схема 7.6, говорит о том, что эту особенность данных хроматографических систем можно использовать в целях оптимизации разделения. [c.135]

Содержание воды в подвижной фазе. Этот параметр также является исключительно важным вследствие сильного влияния на удерживание и разделение. Рекомендуемое содержание воды в подвижной фазе (80—90)-10 % [222]. При более высоком содержании воды разделение не происходит. В то же время небольшие коли- [c.165]

Важность образования водородных связей для процессов удерживания и разделения энантиомеров следует из того факта, что добавление 6% метанола в подвижную фазу отрицательно сказывается и на а, и на/с и что аналогичное влияние оказывает замещение водорода в сульфонамидной группе на метильную группу. Значения/ на фазе 16 [c.192]

Рациональные приемы выбора условий разделения основываются на закономерностях, связывающих величины удерживания со строением разделяемых веществ (структурными факторами) и составом фаз хроматографической системы (композиционными факторами). Влияние строения сорбатов обычно анализируют на основе различных модификаций аддитивных схем, исходящих из того, что вклад структурных фрагментов в величину 1д к является более или менее постоянной величиной, не зависящей от строения остальной части молекулы. Так, введение в молекулу органического соединения дополнительной метиленовой группы приводит к увеличению сродства к неполярным средам. Следовательно, при этом возрастают коэффициенты емкости на алкил-силикагелях. При постоянных условиях хроматографирования в гомологических рядах наблюдается линейная зависимость к от числа атомов углерода. Удерживание в зависимости от условий разделения возрастает в 1,3—2,2 раза на каждую метиленовую группу. В случае хроматографии на силикагелях увеличение углеродного скелета приводит к увеличению сродства- к подвижной фазе и, следовательно, уменьшению удерживания. Этот эффект, однако, выражен не столь явно и не отличается таким постоянством, как при обращенно-фазовой хроматографии. Величины [c.301]

Ионы металлов, входящие в состав проявителя, могут адсорбироваться на поверхности подложки и при последующей термодиффузин примесей в подложку вызывать дефекты полупроводниковых структур. Для сверхбольших интегральных схем отрицательное влияние удерживания подвижных нонов металлов особенно велико и повышается с ростом плотности элементов схемы. Поэтому необходнмо, чтобы максимальное содержание ионов Na+ и К в резисте составляло 0,2—5 млн . Поскольку проявление позитивных резистов проводится растворами щелочей, требуется хорошая промывка подложки после проявления. Заметна тенденция использовать растворители, не содержащие ионов металлов, и для проявления позитивных резистов, так как прн этом меньше вносится всевозможных загрязнений. Примером таких проявителей могут служить MF-314 Shipley, а также системы на основе водных растворов аминов [2] и смесей этаноламинов с глицерином [79]. [c.51]

Влияние повышения температуры на время удерживания в отсутствие подвижного температурного поля и градиента температуры вдоль колонки также исследовали Жуховицкий и Туркельтауб (1951, 1953, 1954, 1961), однако только после работы Даль Ногаре и Беннета (1958) хроматография с программированием температуры получила признание . В противоположность вариантам хроматермографии, которые следует рассматривать как новые методы, в случае газовой хроматографии с программированием температуры речь идет лишь о модифицированном проявительном методе, прп котором по определенной программе температура колонки в продолжение анализа непрерывно повышается. При этом каждый компонент достигает конца колонки при благоприятной для него температуре, так что сглаживания концентрационного профиля высококипящих компонентов (рис. 4) [c.19]

Простое и удобное уравнение для описания совмесгного влияния температуры и состава подвижной фазы на удерживание предложено M jiaiwepoM и др. [551 [c.414]

Филимонов В.И, За.муруев О.В., Балятипская Л.Н.. Колосова И.Ф. Влияние природы модификаторов бинарных подвижных фаз на удерживание синтетических жирорастворимых витаминов силикагелем в условиях ВЭЖХ. Модификаторы II и V групп селективности по классификации Снайдера// Теория и практика сорбционных процессов. 2000. вып.26. с.73 81, [c.521]

Приемлемые величины удерживания достигаемы только в таких случаях, когда полярность сорбата является промежуточной по сравнению с полярностью ПФ и НФ. Поэтому осповпой способ влияния на удерживание на данном сорбенте - изменение нолярности подвижной фазы. [c.34]

В работе [74] показано, что влияние газа-носителя (СО2, SFe, Н2О) на удерживание и энергию адсорбции компонентов проявляется тем больше, чем сильнее газ-носитель способен адсорбироваться на пористом полимерном сорбенте. Наиболее сильное уменьшение удерживаемых объемов наблюдалось при использовании в качестве подвижной фазы водяного пара, а в качестве неподвижной — хромосор-ба 104. Использование в качестве газа-носителя водяного пара, вызывающего снижение энергии адсорбции компонентов, расширяет возможности применения пористых полимерных сорбентов в хроматографии для разделения веществ с числом атомов углерода более десяти [74]. [c.16]

Приступая к обсуждению влияния концентрации органического компонента иодвнжной фазы на величины удерживания, целесообразно более подробно остановиться на состоянии ал-кнлсиликагеля, находящегося в равновесии с бинарным водноорганическим растворителем. Уже из самых общих представлений ясно, что молекулы органического растворителя обладают больщим сродством к алкильным лигандам, чем вода. Поэтому следует ожидать их преимущественного концентрирования в приповерхностном слое, адсорбции на органических лигандах неподвижной фазы. При этом в зависимости от состава подвижной фазы и строения сорбента, вероятно, возможно образование как мономолекулярного слоя органического растворителя, так и более толстых слоев неподвижной фазы, состоящих из цепей органического лиганда, пропитанных молекулами органического компонента подвижной фазы. С другой стороны, если концентрация органического растворителя в подвижной фазе мала, сорбент ею не смачивается [350]. В этом легко может убедиться каждый, насыпав на поверхность воды щепотку сорбента. Ряд авторов высказали иредиоложение, что в таком случае радикалы органических лигандов плотно прижимаются к поверхности силикагелевой матрицы или даже образуют своего рода переплетения, микроскопические капельки на поверхности силикагеля. При увеличении концентрации органического компонента цепи алкильных лигандов постепенно распрямляются, слой их становится более рыхлым, пока, наконец, не достигается полное смачивание подвижной фазой. [c.90]

Большинство сорбатов, исследуемых на силикагеле, представляют собой вещества значительной полярности. Для пх хроматографирования, а иногда даже просто для растворения необходимы элюенты, содержащие заметные количества полярных растворителей. Такие элюенты всегда содержат также и воду в количествах, вполне достаточных для формирования устойчивых адсорбированных слоев, полного насыщения поверхности. В работе [393] исследовано влияние воды, растворенной в подвижных фазах — хлороформе и щхдорэтане, на удерживание ацетофенона, диметилфталата, диэтилфталата. При содержании воды около 600 частей на 1 млн достигается почти полное насыщение сорбента, и при дальнейшем увеличении концентрации воды удерживание больше почти не меняется. [c.130]

Модель, количественно описывающая роль воды в хроматографии на силикагеле, представлена в работе [381]. По данным работы [180], с увеличением концентрации полярных растворителей в подвижной фазе влияние воды становится все менее ощутимым (рис. 4.22). При концентрациях полярных растворителей и более влиянием воды на удерживание можно пренебречь, если работа носит прикладной, аналитический характер и не ставит целью строгое измерение физико-химических параметров. Насыщение элюента водой положительно влияет "На—хроматографическое поведение полярных соединений. Так, отмечается улучшение эффективности и формы хроматографических пиков, увеличение максимально допустимой нагрузки на колонку в области линейной изотермы адсорбции Ленгмюра [375, с. 374]. Показано, что добавка к подвщщюй фазе 0,45% воды существенно улучшает форму пиков таких трудных для хроматографии соединений, как производные дезоксирибонукле-отидов [186]. [c.131]

Неводные ионогенные растворители также могут быть применены при хроматографии на силикагеле. В работе [134] изучено влияние ионной силы, pH элюента и основности сорбатов на величины удерживания. Роль этих факторов указывает на то, что основным процессом, определяющим сорбцию, является катионный обмен с силанольными группами поверхности. Подвижные фазы состояли из метанола с добавками хлорной кислоты, перхлората аммония, гидроксида калия. Сопоставление хроматограмм, полученных на различных силикагелях (Пар-тисил-5. Гиперсил, Силоид, Сферисорб), свидетельствует о том, что абсолютные величины удерживания на последних трех сорбентах воспроизводятся хорощо. Партисил удерживает изученные лекарственные соединения слабее, хотя селективность сорбента по отнощению к ним примерно такая же, как у других материалов. В отличие от нормально-фазовой и обращенно-фазовой хроматографии, селективность разделения несколько улучшается при малом удерживании. На рис. 4.35 представлена [c.159]

Во всех рассмотренных выше вариантах хроматографии удерживание в конечном счете определялось сродством молекул хроматографируемых соединений с поверхностью сорбента. Последняя, как правило, сольватирована более сильным компонентом подвижной фазы. Однако молекулы этого более сильного растворителя (В) оказывают лишь количественное влияние иа распределение сорбата X между подвижной и неподвижной фазами. Несмотря на то что разные по химической природе растворители В могут придавать хроматографической системе различную селективность, качественная картина распределения в первую очередь зависит от способности молекул X вступать в ассоциацию с молекулами или функциональными груииамн поверхности 5. Этот процесс чаще всего может описываться уравнением [c.168]

На проявление модифицирующего эффекта существённое влияние оказывает pH подвижной фазы. Ассоциация модификатора с сорбатом, где бы она ни происходила, будет наиболее прочной, если оба они ионизированы. Поэтому pH подвижной фазы выбирают в зависимости от свойств сорбата и модификатора. На рис. 4.43 изображена типичная зависимость коэффициентов емкости слабой кислоты от pH подвижной фазы и концентрации модификатора. Нижняя кривая, соответствующая обычному обращенно-фазовому режиму, совпадает по форме с кривыми рис. 4.4. При добавлении в подвижную фазу динамического модификатора удерживание увеличивается. Более всего этот эффект выражен при pH около 6, где в достаточной степени ионизированы и сорбат, и модификатор. Рекомендуемые значения pH для ион-парной хроматографии приведены в табл. 4.38. [c.173]

В настоящее время выбор концентрации органичеекого растворителя в подвижной фазе осуществляется главным образом методом проб и ошибок с учетом самых общих качественных представлений о влиянии полярности сорбатов на их удерживание. [c.274]

ВЭЖХ на полимерных сорбентах, пре- [326 имущества этого варианта при количественном анализе Использование силикагеля и окиси алю- [281] миния в качестве катионообменников Влияние состава подвижной фазы на [313] величины удерживания. Обсуждение механизма удерживания Исследование селективности разделения [48] в зависимости от состава подвижной фазы [c.297]

Влияние состава подвижной фазы на [407] удерживание и селективность разделения на метилсиликагеле. Условия анализа в плазме крови и моче [c.298]

Механизм удерживания сорбата этой ХНФ очень сложен и до конца не выяснен. На разделение, как было показано, сильное влияние оказывают очень многие факторы, например средняя молекулярная масса полимера, молекулярно-массовое распределение, природа растворителя, использованного для нанесения полимера на подложку, и природа самой подложки [51]. Тем не менее вполне очевидно значительное улучшение разделения вследствие применения жесткой матрицы и широкого выбора подвижных фаз. Это, в частности, демонстрирует рис. 7.5, на котором приведены хроматограммы разделения рацемического оксида мрснс-стильбена, полученные в четырех различных условиях. Влияние силикагелевой подложки на эффективность колонки, а так-же влияние подвижной фазы на (X достаточно очевидно. Степень кристалличности МТАЦ, [c.116]

Теоретические исследования в области оптимизации условий хроматографического разделения в бинарных подвижных фазах позволили получить линейное уравнение, связывающее значение Ят двух хроматографируемых веществ ири изменении количественных соотношений одних и тех же растворителей, и выяснить области и границы при.мене-ния этого уравнения. Был сформулирован критерий выбора растворителей для трехкомпонентных фаз и введено ионятие "функция устойчивости", которое отражает влияние изменения состава подвижной фазы на воспроизводимость параметров удерживания. Выводы теоретических исследований подтвердились многочисленными экспериментальными данными (20). [c.22]

OчeHЬ часто за стандарт принимают один из компонентов смеси. Относительные объемы удерживания позволяют прн этом наглядно представить себе относительное расположение пиков на хроматограмме. Для определения относительных объемов удерживания не требуется точного измерения многих параметров, в том числе и массы адсорбента или неподвижной фазы в колонке эти массы, поправки на перепад давления, расходы подвижной фазы входят в выражение для Vв виде сомножителей и при вычислении отношения приведенных объемов удерживания сокращаются. Влияние температуры на это отношение значительно слабее, чем на абсолютные объемы удерживания. [c.52]

В газовой хроматографии подвижную фазу рассматривают как инертную считается, что она не вступает во взаимодействие ни с веществом, ни с неподвижной фазой. Следовательно, природа подвижной фазы — газа не оказывает влияния на процессы распределения или адсорбции — десорбции и газ-носитель не влияет на селективность. Его влияние на хроматографический процесс сказывается через эффективность колонки, котофая зависит от разницы в скоростях диффузии веществ в газах [член В уравнения Ван-Деемтера (1.53)]. Природа газа-носителя влияет на продолжительность анализа, поскольку оптимум скорости потока различен для разных газов и время удерживания уменьшается с уменьшением коэффициентов диффузии, вещества. Оказывает влияние также и определенное ограничение давления, обусловленное разницей вязкости газов. Принимаются во внимание и такие обстоятельства, как стоимость газа, его чистота, безопасность и обеспечение максимальной чувствительности используемых детекторов. Исходя из этого в газовой хроматографии используют ограниченный набор газов азот, водород, аргон и гелий. [c.114]

Аналогично газовой хроматографии в жидкостной наиболее важны следующие типы межмолекулярных взаимодействий дисперсионное, диполь-дипольное, образование водородной связи, а кроме того, электростатическое взаимодействие между разно-именнф заряженными ионами. Для характеристики влияния подвижной фазы на удерживание используют понятие элюирующей силы. [c.290]