Флуоресценции растворителем

Поляризация флуоресценции. Важной характеристикой фотолюминесценции является поляризация флуоресценции. Каждую молекулу можно рассматривать как колебательный контур — элементарный осциллятор, который способен поглощать и испускать излучение не только вполне определенной частоты, но и с определенной плоскостью колебания. Если на вещество падает поляризованный свет, то он преимущественно возбуждает те молекулы, в которых направление колебания осциллирующих диполей совпадает с направлением электрического вектора возбуждающего светового пучка. Поэтому несмотря на то что молекулы в растворе ориентированы хаотично, возбуждению подвергаются лишь те из них, которые обладают соответствующей ориентацией. Если.время жизни возбужденного состояния велико по сравнению со временем, необходимым для дезориентации молекул вследствие вращения, этот процесс дезориентации происходит еще до того, как появится заметная флуоресценция. Если же скорость вращательного движения мала по сравнению со временем жизни возбужденного состояния, то свет флуоресценции испускается до завершения дезориентации. При этом осцилляторы, ответственные за флуоресцентное излучение, ориентированы в той же плоскости, в которой они были ориентированы в момент поглощения, так что флуоресцентное излучение оказывается частично поляризованным. В очень вязких растворителях даже малые молекулы могут сохранять ориентацию за время испускания флуоресценции. Крупные молекулы, такие, как белки, сохраняют свою ориентацию в течение периода времени, который достаточно велик по сравнению со временем испускания флуоресценции, поэтому их флуоресценция частично поляризована. Степень поляризации флуоресценции определяется по формуле [c.56]

Учитывая широкую распространенность полициклических углеводородов в окружающей человека среде, следует остерегаться случайного занесения их в исследуемый объект в процессе анализа с реактивами н растворителями. Поэтому все реактивы, даже химически чистые, необходимо подвергать проверке и в случае необходимости очистке. Критерием чистоты растворителей является отсутствие флуоресценции при освещении их достаточно интенсивным ультрафиолетовым светом. При наличии флуоресценции растворитель необходимо перегнать. Реактивы и материалы могут считаться чистыми также только в том случае, если из них не экстрагируются флуоресцирующие соединения. [c.294]

В отличие от чистого растворителя, растворитель, загрязненный флуоресцирующими примесями, кажется под ультрафиолетовыми лучами непрозрачным цвет свечения голубоватый или фиолетовый. При перегонке и хранении растворителей не следует пользоваться резиновыми или корковыми пробками, так как они загрязняют растворители, вызывая заметную флуоресценцию растворители следует хранить только в склянках со стеклянными притертыми пробками. [c.265]

Можно ожидать, что физическое тушение флуоресценции растворителем будет менее значительным в растворителях с симметричными неполярными свойствами, например в циклогексане или четыреххлористом углероде. Однако последние данные говорят о том, что хлорофилл в растворителях этого типа флуоресцирует менее сильно, чем в более полярных или более поляризуемых растворителях. Это подтверждает ту мысль, что химические взаимодействия молекул пигмента могут часто иметь, по крайней мере, такое же значение, как и физические процессы рассеяния. Быстрое уменьшение флуоресценции со временем, обнаруженное во многих растворах хлорофилла (например, в бензольных растворах и в четыреххлористом углероде), также говорит о химическом взаимодействии связано ли это с самим растворителем или с какими-либо примесями к нему (например, растворенным кислородом), пока еще неясно. Не выяснено также, обусловлено ли быстрое уменьшение флуоресценции химическим превращением хлорофилла или образованием путем реакции, сенсибилизированной хлорофиллом, каких-то веществ с сильно тушащими свойствами. [c.174]

Из полученных показаний интенсивности люминесценции эталонных растворов вычесть флуоресценцию растворителя. Полученные результаты нанести на калибровочный график в координатах интенсивность флуоресценции // — концентрация определяемого вещества С в эталонных растворах. [c.141]

Как показано на рис. 6-5, спектрофлуориметр не является двухлучевым прибором в том смысле, в каком этот термин используется в абсорбционной спектроскопии. Второй фотоумножитель служит только для корректировки изменений режима лампы. Фон, возникающий из-за флуоресценции растворителя и реагентов или из-за рассеяния света частицами пыли и т. п., определяют путем измерения холостой пробы и затем вычитают эту операцию легко выполнить на современных приборах с микропроцессорной техникой. [c.158]

Применение фосфоресценции представляет особый интерес для аналитической химии. Применение фосфороскопов для регистрации спектров и интенсивности фосфоресценции дает возможность практически полностью исключить свечение холостой пробы, вызванное флуоресценцией растворителя, кюветы и отраженным светом источника возбуждения. При этом повышается чувствительность люминесцентного анализа. [c.156]

При хранении органических растворителей сосуды ни в коем случае нельзя закрывать резиновыми пробками. Это приводит к разбуханию и растворению резины и возникновению флуоресценции растворителей, от которой бывает трудно избавиться даже перегонкой. [c.226]

В детекторах, основанных на поглощении излучения, измеряемый сигнал представляет собой небольшое изменение на интенсивном фоне. При флуоресцентном детектировании, наоборот, сигнал, хотя и слабый, измеряется на темном фоне. Это позволяет применять в системе регистрации сигнала устройства с большим коэффициентом усиления, например фотоумножители. Основными источниками шума во флуоресцентном детекторе являются темновой ток фотоумножителя, шум предварительного усилителя, фоновая флуоресценция растворителя и паразитное излучение, связанное с рассеянием возбуждающего излучения на измерительной кювете. [c.102]

В методе флуориметрии измеряют не поглощение света веществом, а интенсивность длинноволновой эмиссии. Поэтому в отличие от АСР в этом методе с увеличением интенсивности облучения увеличивается чувствительность, что приводит также к значительному снижению предела обнаружения. В этом случае увеличивается также селективность. Метод модифицируют, меняя растворитель, pH и реагенты, а также длины волн флуоресценции и возбуждающего света. [c.415]

Заметим, что ф по нескольким причинам может отличаться от единицы. Одна из них заключается в том, что возбужденная частица может дезактивироваться путем тушения или флуоресценции. Вторая заключается в возможности рекомбинации двух образующихся свободных радикалов, прежде чем они инициируют цепь. Такой рекомбинации способствует низкая концентрация мономера (М) благодаря клеточному эффекту, т. е. благодаря тому, что образовавшиеся свободные радикалы долгое время будут находиться вблизи друг друга из-за окружающей их клетки растворителя. Наконец, в таких системах, где непрерывно происходит инициирование, радикалы могут исчезать по реакции обрыва с радикалами полимера. В принципе все эти случайности должны отражаться на общем законе скорости. [c.516]

Флуоресценция почти полностью уничтожается действием на нефть азотной кислоты, галоидов или просто солнечных лучей. Предполагали, что флуоресценция нефтей зависит от взвешенных коллоидных частей — субмикронов. Однако сильный электрический ток 30 тыс. б, пропущенный через флуоресцирующий нефтепродукт, нисколько не уменьшил этого свойства. Зато из кислых гудронов были выделены вещества типа многокольчатых ароматических соединений — хризен и флуорен, которые, по-видимому, являются носителями флуоресценции, так как выделение их из нефтепродуктов уничтожает флуоресценцию, и, наоборот, при прибавлении их к растворителям получаются сильно флуоресцирующие растворы. Флуоресцирующие вещества образуются вновь при перегонке. Установлено также, что при перегонке с некоторым разложением получаются дистилляты с большей флуоресценцией, чем при работах с большим вакуумом . [c.51]

Характер и интенсивность флуоресценции соединений урана зависят от состава соединения, свойств растворителя, внешних факторов. Для соединений уранила характерно медленное нарастание концентрационного тушения. [c.97]

Спектр излучения растворов остается постоянным при возбуждении любыми монохроматическими длинами воли (спектральной линией), лежащими в области поглощения. Эта независимость спектра флуоресценции раствора от длины возбуждающего света является следствием влияния растворителя на возбужденные молекулы. [c.483]

Для анализа полициклических ароматических углеводородов успешно применяют флуоресцентные датчики, высокая чувствительность и селективность которых определяется сильной естественной флуоресценцией этих веществ. В результате чувствительность по 3,4-бензпирену составляет 4-10 г в пробе [15]. Этим методом анализируют растворы, полученные при поглощении ароматических углеводородов из газа, а также экстракты сточных вод. Время выхода веществ при использовании в качестве растворителя водного раствора ацетонитрила (при 60 °С и 5,5 МПа) составляет в мин антрацен — 4,8, пирен— 5,9, хризен — 7,3, [c.324]

Приготовляют разбавленный раствор ( ) <0,1) стандартного вещества в том же самом растворителе, определяют оптическую плотность его на длине волны возбуждения флуоресценции исследуемого вещества. [c.69]

При измерении флуоресценции очень разбавленных растворов существенный вклад в общее измеряемое испускание вносит флуоресценция кюветы и растворителя. Всегда следует проверять флуоресценцию чистого растворителя при тех же условиях, в которых измеряется и флуоресценция самого раствора. Если она значительна, получаемый спектр следует вычитать из спектра раствора до его исправления. Для веществ, имеющих относительно долгоживущую флуоресценцию, существенное значение может иметь тушение растворенным кислородом. Кислород обычно удаляют пропусканием через раствор тока азота или вакуумированием. [c.70]

Для выяснения тонкой структуры спектров флуоресценции их исследуют при низких температурах (например, при температуре жидкого азота 77 К), при этом подбирают растворители, в которых наиболее отчетливо проявляется структура спектров. Этот метод измерения квазилинейчатых спектров в твердой матрице при низких температурах был предложен Э. В. Шпольским. Особенно успешно он был применен к исследованию полициклических ароматических углеводородов. Получаемые квазилинейчатые спектры флуоресценции ароматических углеводородов в растворах алифатических углеводородов являются очень характерными и позволяют получать информацию о колебательной структуре основного электронного состояния ароматических углеводородов. Квазилинейчатые спектры флуоресценции обладают рядом важнейших свойств. Прежде всего квазилинейчатые спектры в каждом случае носят ярко выраженный индивидуальный характер (специфичность). В отличие от обычных размытых спектров поглощения и флуоресценции они существенно различаются даже у близких по строению молекул. Это отличие оказывается значительным и для изомерных молекул. Другая важная особенность квазилинейчатых спектров заключается в очень высокой селективности таких измерений. Благодаря малой ширине и высокой интенсивности линий квазилинейчатые спектры позволяют определять индивидуальные соединения в сложной смеси даже тогда, когда они входят в многокомпонентную смесь в ничтожно малых концентрациях. Третьей характерной особенностью квазилинейчатых спектров флуоресценции является чрезвычайно высокая чувствительность методов, основанных на их применении. Измерение квазилинейчатых спектров позволяет при прочих равных условиях увеличить чувствительность люминесцентных измерений примерно в 100 раз. [c.72]

Заполняют пробирку растворителем и измеряют интенсивность флуоресценции фона (Лол). Это показание вычитают из показаний, измеренных для стандартных растворов, и строят градуировочный график в координатах Д/ - с , где д/=/ -/хол Сет - концентрация определяемого вещества в стандартных растворах. [c.216]

Калибровочный график. В ряд пробирок емкостью 10 мл прибавляют 0,1 —1,0 мкг соединения 1п с интервалом 0,1 мкг, разбавляют до 10 мл 15 н. азотной кислотой, вводят 100 мг металлического желе,за (восстановленного водородом) и выдерживают 30 мин. Отбирают пипеткой аликвотную часть (5 мл) и через ватный тампон переводят раствор в делительную воронку емкостью 25 мл, добавляют 0,1 мл 0,25%-ного водного раствора родамина 6Ж, 6 мл бензола и 0,5 мл 40%-ного раствора бромида калия. Сразу же после добавления проводят экстракцию в течение 30 сск. Дают раствору отстояться, переводят слой органического растворителя в сухую пробирку и измеряют интенсивность флуоресценции на флуорометре. [c.388]

В настоящее время можно полностью разделять на бумаге сложные смеси катионов в различных растворителях и идентифицировать зоны при помощи реагентов, дающих цветные пятна или флуоресценцию. Коэффициенты пропорциональны коэффициентам распределения вещества. Они позволяют судить о возможности и эффективности разделения веществ. М. Ледерер [139] произвел систематическое измерение коэффициентов Rf, характеризующих относительную скорость движения ионов в процессе хроматографирования, для большинства катионов и для некоторых анионов. В качестве подвижного растворителя он использовал н-бутанол в смеси с соляной кислотой. [c.178]

Влияние иа кинетику флуоресценции диффузионных градиентов и релаксации растворителя. Даже в отсутствие каких-либо обратимых реакций возбужденных молекул может наблюдаться ие--экспопеициальность затухания флуоресценции в присутствии ту-Ш Ителя, вызываемая неустановивш-им ися диффузионными градиентами. Обычно кинетические уравнения основаны на предположении о стационарности диффузии в жидкой среде. При поглощении света возбужденные молекулы возникают в растворе в условиях статического распределения молекул тушителя. Учет неустаиовившей-ся диффузии дает выражение для закона затухания флуоресценции [c.97]

В присутствии тушителя становится существенным влияние температуры на вязкость растворителя, а следовательно, и на скорость встреч флуоресцирующих молекул с молекулами тушителя. В результате этого влияния эффективность флуоресценции уменьшается с ростом температуры с другой стороны, при понижении температуры увеличивается образование комплексов в основном состоянии, что ведет к тушению флуоресценции по статическому механизму. Все эти эффекты необходимо учитывать при изучении влияния температуры на флуоресценцию конкретной системы. [c.62]

При измерении квантовых выходов флуоресценции относительно стандартного вещества возможны ошибки за счет эффектов внутреннего фильтра (реабсорбция), немонохроматичности возбуждающего света, флуоресценции кювет, тушения кислородом и фоторазложения. Ошибку, обусловленную первым фактором, легко устранить, используя достаточно разбавленные растворы. Для предотвращения немонохроматичности следует проверять чистоту возбуждающего света. Во избежание ошибки при измерении оптической плотности следует по возможности измерять оптическую плотность раствора пучком света того же спектрального состава, что и при возбуждении флуоресценции. Необходимо проводить дополнительные измерения для учета флуоресценции растворителя, стенок кюветы. Для этого при исследовании растворов необходимо измерить в тех же условиях спектр флуоресценции растворителя. Спектр, полученный при измерении флуоресценции растворителя, вычитается из спектра, полученного при измерении раствора, до его исправления. [c.160]

Тущение включает и самотущение, т. е. процесс, в котором роль тущителя играет флуоресцирующее вещество. В умеренно разбавленных растворах (<10 М) переносом энергии и са-мотущением можно пренебречь. Константу скорости тущения посторонним веществом (йд) можно рассчитать, зная константу тушения Штерна — Фольмера [уравнение (75)] и время жизни флуоресценции в отсутствие данного тушителя (то). Способы определения остальных трех констант скорости будут рассмотрены в следующих разделах. Следует отметить, что константа скорости внутренней конверсии включает скорость тущения флуоресценции растворителем. Как мы увидим, это тушение может представлять собой фотохимическую реакцию или же такое взаимодействие, которое повышает скорость интеркомбинационной конверсии. [c.286]

Для оценки Оо ЭФЛМ устанавливают прибор (флуориметр) в нулевое положение при закрытой шторке, затем проводят 20—30 измерений флуоресценции растворителя, заполняя им по очереди все кюветы или пробирки, используемые в практической работе. Рассчитывают среднее значение /д и величину Оо. [c.82]

Флуоресценция комплекса гораздо сильнее зависит от температуры, чем флуоресценция самих кристаллов ЕпОа- Так, при понижении температуры до 90° К интенсивность флуоресценции комплекса возрастает в 150 раз, тогда как в кристаллах она увеличивается только вдвое. Причиной этого, несомненно, служит безизлучательное тушение флуоресценции, конкурирующее с процессом переноса энергии к иону. Результаты исследования различных комплексов при комнатной температуре и при температуре жидкого азота показали, что обычно процессы переноса в клешневидных комплексах (например, в комплексах с альдегидом салициловой кислоты и бензоилацетоном, о-оксиацетофеноном, ж-нитро-бензоилацетоном и т. д.) вполне эффективны даже при комнатной температуре, в то время как комплексы с монофункциональными группами—пикратом, о-, м- или п-нитрофенолатом и т. д. при комнатной температуре люминесцируют слабо (или вообще не люминесцируют), но при охлаждении их флуоресценция усиливается. Было бы очень соблазнительно связать эти данные с большим перекрыванием орбит иона и комплексообразующего агента в клешневидных соединениях, а также, быть может, с более эффективным тушением флуоресценции растворителем в болтающихся группах, удерживаемых только ординарной связью. [c.151]

Содержание масла на салфетках можно определит наблюдением флуоресценции салфеток при их облучент ультрафиолетовыми лучами с использованием аппарат для анализа витаминов в растворах [модель 833 (Л-80) или определением содержания масла в растворителе, ко торым обрабатывается салфетка. [c.209]

Время жизни Тр (или константа скорости Афс) является фундаментальной характеристикой вещества, не зависящей от температуры. В противоположность флуоресценции эффективность фосфоресценции уменьшается на несколько порядков в интервале от 77 К ДО комнатной температуры и чрезвычайно сильно зависит от вязкости растворителя. Причинами резкого падения эффективности и времени жизни фосфоресценции могут быть увеличение скорости безыз-лучательной конверсии йдт и тушения триплетного состояния примесей но пока не ясно, которая из этих причин является главной. [c.63]

Рамановское испускание растворителя (комбинационное рассеяние). При комбинационном рассеянии света длина волны отличается от длины волны возбуждающего света. Это происходит потому, что при рассеянии света часть энергии пучка может перейти в энергию колебаний или, если облучаемая молекула находится в колебательно-возбужденном состоянии, то она может отдать колебательную энергию фотону. Идентифицировать полосы комбинационного рассеяния нетрудно, поскольку при изменении длины волпы возбуждающего света они всегда сдвинуты на одно и то же расстояние (в щкале волновых чисел) от линии возбуждения. Для уменьпюния рамаиовского рассеяния используют отсекающие фильтры или иа пути пучка флуоресценции помещают поляризатор, что уменьшает интенсивность рамановских полос, поскольку рамановское испускание достаточно поляризовано. [c.73]

Люминесценция кюветы и окружаюш,его пространства. Часто наблюдается люминесценция кюветы, в которой находится исследуемое вещество. Флуоресценция кюветы рассеивается растворителем, что приводит к возникновению сильного фона. Трудности осо-бенио велики, когда для возбуждения используется свет коротких длин волн. Плавленый кварц сильно флуоресцирует, синтетический кварц флуоресцирует незначительно. При измерении образцов при температуре жидкого азота необходима особая осторожность, чтобы избежать люминесцентного фона. Если кювета помещена в сосуд Дьюара из плавленого кварца, люминесценция последнего может давать очень большой фон, состоящий из флуоресценции и фосфоресценции. Довольно серьезны помехи, вызванные фосфорес-ценцней кюветы при измерении замедленной флуоресценции. В этом случае фон имеет вид истинного сигнала — спектр идентичен быстрой флуоресценции исследуемого вещества. Однако это не истинная замедленная флуоресценция, а быстрая флуоресценция, возбужденная поглощением фосфоресценции кюветы. [c.73]

Чтобы использовать уравнение (IV.81) для определения ц, необходимо предварительно найтп величину параметра кфйЬ. Это можно сделать, проведя эксперимент по изучению кинетики флуоресценции в полностью идентичных условиях (геометрия системы, время накопления, ширина щелей монохроматора, концентрация, температура, растворитель и т. п.) с образцом, в котором отсутствует реагент Q. Тогда [c.110]

Определение констант тушения триплетных состояний. Изучение констант тушения триплетных состояний удобно проводить в вязких растворах. При температурах, близких к комнатной, могут быть использованы растворы 1-бромнафталина в глицерине или полнэтиленгликоле. При низких температурах выбор растворителя более и ирокий. В качестве тушителя применяют соединения с тяжелыми атомами, кислород, парамагнитные стабильные радикалы, доноры электронов или атомов водорода. Весьма удобным объектом исследования являются соли уранила, флуоресценция которых тушится аминами, спиртами, анионами галогенов и многими другими соединениями. Чтобы выяснить статический или динамический характер тушения, необходимо провести параллельное исследование кинетики и интенсивности фосфоресценции в одних и тех же растворах и определить константы тушения, представив данные в координатах Штерна — Фольмера фо/ф—[Q] и То/т—[Q]. [c.115]

Микросреда поверхностного слоя обнаруживает также сильно пониженную полярность по сравнению с водой. На это указывают, в частности, результаты сравнения УФ- и видимых спектров поглощения или спектров флуоресценции ароматических соединений в воде, в органическом растворителе и при солюбилизации их в поверхностном слое белковой глобулы [23, 24]. Полярность среды, окружающей молекулу Ы-арилсульфоната в комплексе с белком, близка й значению, характеризующему этанол (Z = 80 для воды Z = 95) (табл. 4). В тех участках ферментной глобулы, где непосредственно происходит гидрофобное взаимодействие аполярных аминокислотных остатков поли-пептидной цепи, полярность микросреды должна быть еще более низкой. С другой стороны, в рядом расположенных областях поверхност- ного слоя следует ожидать высокую локальную концентрацию диполей пептидных связей. Это (даже в отсутствие полярных и заряженных боковых групп) может привести к образованию участков высокополярной и поляризующей мик- 57 росреды (где напряженность поля достигает значений 10— [c.21]

Методом рентгеновской спектроскопии можно анализировать монолитные или порошкообразные твердые пробы, жидкие вещества и иногда газы. Твердые пробы можно анализировать непосредственно. Для проведения количественного анализа их разбавляют введением подходящих веществ (наполнителей) (разд. 5.2.2.4) или добавлением внутреннего стандарта. Можно также готовить таблетки сплавлением с В2О3. В таких таблетках частицы вещества пробы достаточно малы (-<50 мкм) и равномерно распределяются по их толщине. Металлы следует протравить и тщательно отполировать (максимальная глубина трещин 100 мкм). При более глубоких трещинах — особенно если они будут перпендикулярны падающему и испускаемому излучениям — интенсивность флуоресценции уменьшается. Неоднородные твердые пробы гомогенизируют растворением. В качестве растворителей используют кислоты, воду или органические растворители, такие, как ацетон, ксилол. Матричный эффект с разбавлением уменьшается. Руководствуясь аналогичными соображениями, готовят тонкие слои толщиной приблизительно 1000—2000 А. При этом взаимное влияние элементов выражено еще мало и калибровочный график — почти прямая линия. [c.207]