Молекулярный вес, определение ультрацентрифугирования метод

Средневзвешенная молекулярная масса может быть вычислена из данных, полученных при исследовании гидродинамических свойств разбавленных растворов полимеров (вискозиметрия, диффузия, ультрацентрифугирование), а также их оптических свойств (светорассеяние). Для молекулярных масс, определенных гидродинамическими методами, характерна существенная зависимость полученных значений Му, от степени полидисперсности высокомолекулярного соединения и от применяемого растворителя. Отсюда возникает возможность оценки полидисперсности по результатам изучения гидродинамических свойств в различных растворителях. Применение гидродинамических способов определения Му, требует предварительной калибровки по молекулярным массам. Метод светорассеяния является абсолютным. [c.31]

Возможно ли определение молекулярной массы целлюлозы методом ультрацентрифугирования [c.391]

Описанный выше способ разделения высокомолекулярных соединений и определения их молекулярных масс называется методом скорости седиментации, так как в его основе лежит различие скорости движения частиц, которая определяется массой частиц. Наряду с этим существует другой способ разделения с помощью ультрацентрифугирования, называемый методом седиментационного равновесия основанный на различии в распределении частиц с разной массой в поле тяжести или в центробежном поле в условиях равновесия. [c.335]

Итак, мы рассмотрели пример применения метода определения концевых групп для установления длины цепи. Поскольку метилирование дает 0,5% тетра-О-метил-о-глюкозы, то на каждую концевую группу (со свободной ОН-группой при С-4) должно приходиться около 200 звеньев, чему соответствует молекулярный вес 30 ООО—40 ООО. Это согласуется с молекулярным весом амилозы, определенным ультрацентрифугированием. [c.975]

Определение молекулярной массы белков методом ультрацентрифугирования требует много времени и сложной и дорогостоящей аппаратуры. Поэтому в последние годы разработаны два более простых метода (гель-хроматография и электрофорез). При использовании гель-хроматографии в первую очередь требуется откалибровать колонку. Для этого через колонку с сефадексом пропускают несколько белков с известными молекулярными массами и строят график, откладывая значения логарифмов молекулярной массы против их элюционных объемов, которые находят, как показано на рис. 1.9. [c.45]

Для определения молекулярной массы арабиногалактана используют различные методы светорассеяние, ультрацентрифугирование, чаще всего гель-хроматографию. Молекулярная масса арабиногалактанов, выделенных из различных растительных источников, варьирует в больших пределах 10-2000 кД [51]. Анализ литературных данных свидетельствует о том, что молекулярные массы арабиногалактанов, выделенных из одного вида древесины, но определенные различными методами, оказываются разными для арабиногалактана лиственницы сибирской определена масса 40 кД [22] и 18-22 кД [14]. Причиной этого может быть как биохимическая специфика растений, так и специфика методов определения. [c.336]

Существуют различные методы определения среднего молекулярного веса полимера. К ним относятся светорассеяние, вискозиметрия, ультрацентрифугирование и седиментация [6—8]. Молекулярные веса полимеров, определенные различными методами, как правило, не совпадают. Разница в средних молекулярных весах обусловлена тем, что зависимость определяемого свойства от размера молекулы непостоянна. Некоторые методы мало чувствительны к молекулам большого размера, тогда как другими методами плохо определяются небольшие молекулы. В результате полученный средний молекулярный вес не совсем верно отражает количество больших или малых молекул. Ниже рассмотрены наиболее важные средние молекулярные веса, определяемые существующими методами [c.28]

Высокополимерный характер высших полиоз получил отражение в пособии, в частности, довольно подробным изложением физических методов определения молекулярных масс (ультрацентрифугирование, светорассеяние и др.) — проблемы, которая всегда встречается при исследовании высших полиоз. [c.4]

Наиболее удобен для определения молекулярной массы гликогена метод ультрацентрифугирования, который дает также представление о степени полидисперсности удовлетворителен метод светорассеяния. [c.110]

Молекулярная масса целлюлозы, определенная различными методами (светорассеяние, сочетание ультрацентрифугирования и диффузии), достигает нескольких миллионов (для целлюлозы льна — 6-10 ). Молекулярно-массовое распределение целлюлозы сильно различается в зависимости от ее природы (хлопок, лен, древесина различных типов) и имеет различную модальность. [c.8]

Седиментация, ультрацентрифугирование. Метод определения скорости седиментации частиц в процессе центрифугирования применяют в основном для оценки молекулярных весов коллоидных веществ и полимеров /9 n So V з/2 Я-Т.з, [c.385]

Наиболее важной характеристикой линейной полимерной молекулы является ее молекулярный вес или число связей вдоль ее основной цепи. Единственно надежными методами определения молекулярных весов являются методы, применяемые для разбавленных растворов измерения осмотического давления, рассеяния света и ультрацентрифугирование. В принципе это те же самые методы, которые с начала нашего столетия использовались для измерений молекулярных весов неполимерных молекул. [c.18]

Метод седиментационного равновесия. Определение молекулярных весов этим методом проводится при сравнительно небольших скоростях вращения ротора, порядка 7 ООО—8 000 об-мин , чтобы молекулы с большим молекулярным весом не осаждались на дно. Ультрацентрифугирование проводят вплоть до достижения частицами равновесия, устанавливающегося под действием центробежных сил, с одной стороны, и диффузионных — с другой, т. е. до тех пор, пока частицы не перестанут перемещаться. Затем по образовавшемуся градиенту концентрации рассчитывают молекулярный вес вещества согласно формуле [c.62]

Исследуемый раствор белка помещают в небольшую прозрачную для световых лучей ячейку, которую вставляют в специальное гнездо ротора. Молекулы белка в этой ячейке под действием центробежной силы, развиваемой при вращении ротора, постепенно оседают на дно. Фотоприставка к ультрацентрифуге позволяет делать снимки содержимого ячейки через определенные промежутки времени и определять таким образом скорость оседания белковых частиц. Определение молекулярной массы белка методом ультрацентрифугирования ведут двумя способами по скорости седиментации белковых молекул и по седиментационному равновесию. [c.36]

Определение молекулярной массы асфальтенов и смол. Практически все исследователи, измерявшие молекулярные массы смолисто-асфальтеновых веществ получали различные значения при использовании различных методов измерения. Так, ультрацентрифугирование дало значение до 300000, метод молекулярной пленки— 80000—140000 [303, 304]. Способы, в которых используется перемешивание или подогрев, показывают более низкие значения. [c.151]

В табл. 42 приведены данные по определению частичной (молекулярной) массы некоторых белковых веществ, определенных с помощью метода ультрацентрифугирования. [c.309]

Из молекулярно-кинетических методов определений молекулярного веса наиболее проверенным и теоретически обоснованным является метод ультрацентрифугирования. [c.425]

Ультрацентрифугирование растворов полимеров. Ультрацентрифуги, в которых развиваются центробежные ускорения, превышающие ускорение силы тяжести в десятки тысяч раз, широко применяются для изучения свойств макромолекул в растворах. Впервые этот метод был использован Т. Сведбергом для определения молекулярных масс белков. [c.153]

Методы седиментации позволяют определить среднее значение молекулярного веса. В процессе ультрацентрифугирования происходит фракционное разделение веществ и появляется возможность определения молекулярного веса каждой фракции [741. [c.385]

Среднемассовая молекулярная масса измеряется тогда, когда вклад каждой группы молекул, обладающих определенной молекулярной массой, пропорционален массе молекул этой группы. Для определения используют гидродинамические методы (вискозиметрия, диффузионные методы, ультрацентрифугирование) и метод светорассеяния. [c.162]

Наиболее проверенным и теоретически обоснованным методом определения молекулярного веса ВМС, а также размеров частиц суспензий и золей является метод ультрацентрифугирования. Современная ультрацентрифуга — весьма сложный прибор, приводится во вращение с помощью масляных турбин или потоком воздуха. [c.386]

Для определения молекулярного веса белков почти не применимы обычные методы, основанные на измерении упругости пара, повышения температуры кипения и понижения температуры замерзания растворов. Чаще всего пользуются специальными методами, разработанными для исследования высокомолекулярных веществ определение скорости диффузии, вязкости растворов, ультрацентрифугирование и др. [c.389]

Молекулярный вес яичного альбумина ( белка ), определенный методом ультрацентрифугирования, составляет около 34 ООО гемоглобина (из крови)—около 68 500. Есть белки, имеющие еще больший молекулярный вес. [c.389]

Для определения молекулярной массы полимеров могут быть использованы различные физические и х мнческие методы. Среди физических наибольшее значение имеют методы, основанные на измерениях осмотического давления, вязкости, дифракции света, а также метод ультрацентрифугировання. Наиболее интересный химический способ определения молекулярной массы — это метод концевых групп. [c.306]

Амилоза и амилопектин являются а-/)-(1->4)-связанными глю-канами [см., например, (1)], однако в амилопектине, имеющем разветвленное строение, в точках ветвления (3) имеются дополнительно а-/)-(1->6)-связи. Это было известно уже много лет назад из результатов анализа методом метилирования и гидролиза. При кислотном гидролизе кукурузного и рисового крахмала, выделенных из зерен в стадии восковой спелости, обнаружено, что в их состав входит заметное количество /)-глюкозо-6-фосфата [84]. Последующий анализ показал, что в амилопектине в среднем один из шести остатков D-глюкозы фосфорилирован. При метилировании амилозы и последующем гидролизе в качестве основного продукта образуется 2,3,6-три-0-метил-0-глюкоза и менее 0,4 % 2,3,4,6-тетра-О-метил-О-глюкозы, происходящей из невосстанавливающего концевого остатка, т. е. молекула амилозы линейна и ее единичная цепь состоит из 200—350 остатков D-глюкозы. Определенная осмотическим методом молекулярная масса соответствует такой длине цепи [85]. Однако анализ неразветвленной структуры достаточно сложен из-за небольшого числа концевых остатков по сравнению с общим числом остатков, образующих цепь, а также из-за деградации разрушение одной связи может вдвое уменьшить длину цепи. Физические методы определения длины цени, при условии использования независимых методов для определения гомогенности препарата, дают большие значения длины молекул амилозы, чем значения, полученные химическими методами. Анализ методом светорассеяния и ультрацентрифугирования показывает, что длина цепи молекулы амилозы часто достигает 6000 моносахаридных звеньев. Обработка амилозы р-амилазой показала, что молекула линейна единственным продуктом расщепления была мальтоза. Изучение действия нуллуланазы и других амилолитических ферментов на различные амилозы показало, что их молекулы содержат некоторое количество разветвлений, присоединенных к основной цепи а-(1->б)-связями [63,64]. Гидродинамическое поведение фракций амилозы также свидетельствует о том, что амилоза в некоторой степени является разветвленной. [c.236]

В качестве критериев чистоты ферментов используют данные электрофореза, ультрацентрифугирования (седиментограмма), определения молекулярной массы различными методами, по растворимости (кривые растворения), оценки полидисперсности с определением специфической активности каждой фракции, хроматографирования на различных носителях и в нескольких системах, аминокислотного состава (особенно — при обнаружении белковых примесей), включая секвенирование (от англ sequen e — последовательность) на автоматизированных приборах - секвенаторах, ит д [c.56]

Помимо высокой ассоциирующей способности асфальтенов на величину молекулярного веса влияет и то обстоятельство, что они являются полидисперсной системой. Для таких веществ необходимо отличать среднечисловой молекулярный вес от средневесового. Первый определяется по коллигатив-ным свойствам раствора и зависит от числа растворенных в единице объема растворителя молекул (по давлению паров, криоскопическим, эбулиоскопическим, осмометрическим методами). Средневесовой определяется ультрацентрифугированием, диффузией, методом молекулярной пленки. Эти методы основаны на влиянии величины молекул на измеряемый параметр. Так в работе [51] было установлено, что для асфальтенов, выделенных из битума деасфальтвдации, значение Мп (в бензоле) равно 2200, а величина М , определенная по скорости диффузии в бензольном растворе, составляет 8540. Отношение М< /М =3,5 указывает на весьма высокую степень полидисперсности асфальтенов. [c.13]

Два других физических метода — метод дифракции света (Дебай) и м.етод ультрацентрифугирования (Сведберг и Грален) — также применялись для определения молекулярного веса целлюлозы. Значения молекулярного веса целлюлозы, полученные при применении метода ультрацентрифугирования, в несколько раз превышают значения молекулярного веса тех же препаратов целлюлозы, определенные вискозиметрическим методом. Причина этих расхождений пока еще не выяснена возможно, что В растворе, применяемом для определений в ультрацентрифуге, образуются молекулярные ассоциации, не возникающие в очень разбавленных растворах, применяемых в вискозиметрическом методе. [c.293]

Значительное содержание гетероатомов и высокая степень ароматичности (около 507о углерода в асфальтенах приходится на ароматические структуры) является причиной полярности молекул асфальтенов, которая обусловливает их высокую склонность к ассоциации [22]. Это обстоятельство приводит к значительным расхождениям при определении значений молекулярных масс асфальтенов различными методами, из которых следует отметить метод парофазной о смо-метрии [27, 28] и с использованием мебраны [29], криоско-пический метод с использованием различных растворителей [19, 30], ультрацентрифугирование [31]. На основании проведенных исследований Сергиенко рекомендует как наиболее надежный и воспроизводимый метод определения молекулярной массы асфальтенов — криоскопическое определение в нафталине при концентрациях асфальтенов, не превышающих 16% [19]. Для полимолекулярных веществ, какими являются нефтяные асфальтены, молекулярная масса, определенная любым методом, представляет собой среднюю вели- [c.9]

Описано определение молекулярного веса полиакрилонитрила методом ультрацентрифугирования Определена температурная зависимость теплот растворения полиакрилонитрила , теплота смачивания его водой и некоторые свойства растворов полиакрилонитрила з7з-з7б [c.715]

Из других методов определения полидисперсиости следует указать на хроматографирование (основанное на различной адсорбционной способности молекул в зависимости от их величины), ультрацентрифугирование, определение скорости диффузии, а также на изучение рассеяния света и сравнение молекулярных весов, определенных различными методами (стр. 59—60). [c.56]

Значительные успехи в описании свойств цепных молекул достигнуты в 1940—50-х гг. Появившиеся в те годы работы были посвящены исследованию разбавленных растворов полимеров, в которых молекулы удалены друг от друга, и следовательно, поведение их более или менее независимо [284 95, гл. 3]. Особое внимание было уделено определению молекулярных масс и молекулярно-массового распределения методами осмометрии, светорассеяния и реже — ультрацентрифугирования. Методом светорассеяния были оценены характеристические размеры полимерных молекул, определяемые как расстояние г между концами цепи (рис. 1.1). В соответствии со статистикой, величина г должна быть усреднена по всем имеющимся молекулярным массам и обычно выражается как среднеквадратичное расстояние между концами цепи. Кроме того, были получены важные для практических целей соотношения, связывающие молекулярную массу и характеристическую вязкость [т]]. Позднее, с введением в практику метода гель-проникающей хроматографии (ГПХ) задача определения молекулярных масс и характера их распределения еще более упростилась [105]. Основные выводы перечисленных работ будут обсуждены ниже, поскольку поведение тверд ях., полнм рйВ<, щл и [c.17]

Для фракционирования полигидроксиэфира используют элю-энтиый метод [521], метод Бейкера — Вильямса [522], гель-про-никающую хроматографию [523]. В случае элюэнтного метода в качестве носителя используют песок, обработанный триметилхлор-силаном, для того чтобы избежать необратимой сорбции полимера в процессе фракционирования. В качестве элюента используют смесь хлороформа с гексаном при 31 °С. По методу Бейкера — Вильямса фракционирование проводят при температурном градиенте 30—70 °С с использованием в качестве элюента смеси хлороформ— тетрагидрофуран (от 1 3 до 3 7). Средняя молекулярная масса промышленного полигидроксиэфира из дифенилолпро-папа и эпихлоргидрина составляет 15 000—45 000. По данным фракционирования, полидисперсность колеблется от 1,5 до 3,5 521]. Для определения средней молекулярной массы используют методы светорассеяния, ультрацентрифугирования и вискозиметрию. Светорассеяние проводят в хлороформе и тетрагидрофуране при 25 °С соответствующие инкременты показателя преломления [c.240]

Метод седиментации — диффузии не получил широкого распространения, так как его применение требует специальных экспериментов для определения коэффициента диффузии. Одно время казалось, что применение этого метода целесообразно в тех случаях, когда трудно очистить препарат настолько, насколько это необходимо для равновесного ультрацентрифугирования. Однако при работе с недостаточно чистым препаратом возникает неопределенность— не ясно, какого типа средняя молекулярная масса измеряется методом седиментации — диффузии. Юлландер [5] показал, что этот метод дает значение молекулярной массы, промежуточное между Мп и Ми, и обычно более близкое к Л1( . Относительное положение значения этой молекулярной массы на соответствующем графике зависит от характера молекулярно-весового распределения. Описанный метод по количеству анализируемого вещества не столь экономичен, как равновесные методы. Его, однако, часто применяют для дополнительной проверки значений молекулярной массы, полученных другими способами. [c.106]

Все имеющиеся в литературе экспериментальные данные об определении молекулярных характеристик поликарбонатов в растворе относятся к полимерам, полученным различными способами на основе бисфенола А. Так как эти полимеры полностью растворяются в метиленхлориде, тетрагидрофуране, хлороформе и диоксане, то их можно фракционировать и затем определять молекулярные характеристики обычными методами — вискози-метрическим, осмометрическим, ультрацентрифугированием, методами диффузии, светорассеяния и турбидиметри-ческого титрования. В этой главе описаны исследования поликарбоната на основе бисфенола А перечисленными методами. Используемые символы, термины, единицы и номенклатура даны в соответствии с Руководством по номенклатуре высокомолекулярных соединений [c.124]

В настоящей главе рассматриваются вопросы определения молекулярных весов среднечислового методом осмометрии и средневесового методом светорассеяния. Основное внимание уделяется вопросу модификации аппаратуры в связи с проведением измерений при повышенных температурах. Кратко изложены методика и результаты измерения вязкости разбавленных растворов полимеров. Методика определения молекулярного веса и распределения по молекулярным весам методом ультрацентрифугирования описана Хермансом и Энде в гл. XIII настоящей книги. [c.380]

Если использовать в качестве стандартной мутности данные Кратохвила и др., то молекулярный вес полиметилметакрилата, определенный методами ультрацентрифугирования и диффузии [62], будет соответствовать молекулярному весу, полученному методом светорассеяния. Подобно этому, значение средневесового молекулярного веса сывороточного альбумина, определенного методом светорассеяния [35], близко к значению среднечислового молекулярного веса, полученному при измерении осмотического давления [76], несмотря на то что распределение по молекулярным весам этого полимера могло быть не совсем узким. Различие между самым высоким и самым низким значениями мутности у стандартного раствора полистирола слишком велико, чтобы им можно было пренебречь, и в то же время слишком мало, чтобы экспериментально быть определенным без большой ошибки. В настоящее [c.391]

Теоретические основы. В законе Релея отражена зависимость рассеяния света коллоидных растворов плотных частиц от длины волны %, объема коллоидных частиц, нх числа N в одном б .из раствора и показателей преломления растворешюго вещества (/г) и растворителя ( о). После того как коллоидная химия, благодаря развитию осмометрии и методов ультрацентрифугирования, дала возможность точно определять молекулярные веса белков, Патцейс и Бросто [59—61] смогли установить справедливость закона Релея также и для этих важных биоколлоидов. Для высокомолекулярных углеводов с массивными шарообразными частицами можно также вычислить и молекулярный вес по данным рассеяния света, величина которого хоропло согласуется с определенным осмотическим методом [62, 63]. [c.362]

Большинство синтетических и некоторые из природных полимеров су-гцествуют только в виде смеси веш,еств с пепрерывно меняюш,имся молекулярным весом. Классические методы определения молекулярного веса дают средние значения молекулярного веса — среднечисловое, средневесовое и средневзвешенное по Z, получаемые измерением осмотического давления, рассеяния света и ультрацентрифугированием соответственно. [c.18]

Паркер и сотр. [72] в предварительных опытах показали, что восстановление и алкилирование дисульфидных связей в трансферрине по методу Крестфилда и сотр. [73] не вызывают диссоциации трансферрина на субъединицы. Это было доказано с помощью ультрацентрифугирования, методом седиментационного равновесия, с помощью гель-фильтрации на сефадексе Г-75, а также методом электрофореза на крахмальном геле в различных буферных системах (формиатный буфер pH 2,8, фосфатно-цитратный буфер pH 5,6 и боратный буфер pH 9,0) в присутствии мочевины. Кроме того, при определении N-концевых аминокислот в трансферрине динитрофениль-ным методом Сэнджера [74] и цианатным методом Старка и Смита [75] был обнаружен только один остаток валина при расчете на молекулярный вес 83 ООО, что согласуется с ранее опубликованной величиной молекулярного веса [76, 76а]. На основании описанных данных молекулу трансферрина можно представить в виде одной полипептидной цепи, содержащей примерно 750 аминокислот, и, следовательно, трансферрин является самым крупным из белков плазмы, который не был диссоциирован на субъединицы. [c.128]

Определение молекулярных масс осмотические методы - теория - среднечисловая молекулярная масса — экспериментальные методы — светорассеяние - средневесовая молекулярная масса — ультрацентрифугирование -кянстанты диффузии - седиментационное равновесие - характеристические вязкости - молекулярно-массовые характеристики - средневязкостная молекулярная масса и полидисперсность - ИК и ЯМР полимеров -гель-фильтрационная хроматография. [c.378]

Кроме того, в полиуретанах удлинение успешно осуществляется не только на стадии получения преполимеров, но и на стадии отверждения конечного продукта. Несоответствие абсолютных значений молекулярной массы, полученных различными авторами, обусловлено особенностями строения полимеров, а именно наличием устойчивых ассоциатов высокой энергии когезии. Использование таких методов, как светорассеяние, осмометрия, ультрацентрифугирование, химический анализ концевых групп оправдано только для молекулярной массы эластомеров не выше 2,5-10 . Так, молекулярная масса линейных полиуретанов, определенная виско-зиметрически, составила З-Ю" [42]. Для полиуретанов молекулярной массы 5-10 и более можно считать вполне надежными данные спектров ЯМР [43]. [c.537]

Ультрацентрифугированием растворов асфальтенов в бензоле, четыреххлористом углероде и н-бутиламине Виннифорду [9] удалось разделить асфальтены на фракции, склонные к образованию ассоциированных комплексов. Эти результаты показали, что перечисленные жидкости являются плохими растворителями для асфальтенов, I прежде чем рекомендовать подходящий метод определения молекулярного веса асфальтенов, необходимо специально исследовать их растворимость. [c.10]

Чем объяснить различия в значениях средних молекулярных масс, определенных методом ультрацентрифугирования по скорости седиментации и при установивщемся равновесии [c.72]

В современных мощных ультрацентрифугах оседают пе только кол.чоидные частицы гидрофобных коллоидов, но и молекулы белков и других высокомолекулярных соединений. Помимо очистки, метод ультрацентрифугирования широко применяется в настоящее время для определения среднего радиуса коллоидных частиц, а также для вычисления молекулярной массы высокомолекулярных соединений. Практически все выдающиеся достижения молекулярной биологии обязаны, этому методу. Следует отметить, что работа с ультрацентрифугой очень сложна и кропотлива, так как требует тщательного учета влияния многих побочных факторов. [c.294]