Градиент скорости и эффективность колонки

Поскольку некоторый градиент скорости по колонке неизбежен, то ясно, что колонка для газо-жидкостной хроматографии, строго говоря, не может иметь по всей длине оптимальную эффективность. Несмотря на то, что общая эффективность зависит от распределения скоростей по колонке, она может иметь более или менее удовлетворительные значения и не при оптимальной величине и. [c.211]

Правда, на практике редко точно определяют оптимальную скорость газа-носителя (которая, кстати, неодинакова для различных смесей газовых компонентов и вследствие градиента давления в колонке не очень точно сохраняется по всей длине колонки). По большей части для ускорения анализа успешно работают с несколько более высокими скоростями газа, причем эффективность разделения при этом существенно не снижается. В связи с этим Скотт [47] ввел понятие оптимальная практическая скорость (ОПС). ОПС — это средняя скорость газа-носителя выше опт, для которой коэффициент С в 10 раз больше коэффициента В (рис. П.18). [c.94]

Применяемые в практическом анализе скорости газа-носителя находятся в области и> опт, где коэффициент С в уравнении ван Деемтера оказывает наибольшее влияние и преобладает над коэффициентом В. Вследствие этого не происходит заметного улучшения эффективности разделения, если, например, использовать в качестве газа-носителя азот с его относительно малым коэффициентом диффузии Од. Выбор газа-носителя следует проводить, исходя из других критериев. При детектировании в ячейке теплопроводности или при небольшом градиенте давления в колонке следует предпочесть водород. [c.96]

С. А. Волков и К. И. Сакодынский установили зависимость градиента температуры от скорости газа-носителя, скорости программирования, природы газа-носителя и насадки колонки и вывели соотношение, определяющее влияние температурного градиента на эффективность ко.тонки. [c.12]

Градиент скорости и эффективность колонки [c.210]

Показано, что эффективность колонки в ГХ может быть увеличена за счет снижения диффузии в газовой фазе и уменьшения градиента скорости газа вдоль колонки. (Перепад давления вдоль колонки должен быть снижен, а давление в колонке увеличено.) [c.53]

Система подачи растворителей должна обеспечивать возможность создания линейных градиентов при скоростях потока 0,1—2,75 мл/мин и при давлениях 0,3—35,0 МПа. Эффективность колонки повышается при уменьшении размера частиц при этом возрастает рабочее давление (при сохранении длины колонки) и поэтому разумно предусмотреть возможность работы при больших давлениях. Растворители, используемые для градиентного элюирования, можно предварительно смешивать и подавать на колонку с помощью одного насоса (как прави- [c.406]

Наряду с тщательной упаковкой колонки большую роль в повышении эффективности играет фракционирование сорбента с получением однородных по размерам частиц фракций. Для фракционирования сорбента с размером зерна бр >30 мкм можно применять систему промываемых водой сит. Для фракционирования более мелких частиц целесообразно использовать гидравлический метод, основанный на создании ламинарного тока растворителя в конической воронке с градиентом линейной скорости растворителя по ее высоте. Если внести в подобную воронку смесь частиц разного размера, то они распределятся по высоте конической воронки в соответствии со стоксовыми скоростями оседания фракционируемых частиц. На рис. И1.9 изображена установка гидравлического фракционирования [27], впервые предложенная Гамильтоном [28]. [c.88]

Проницаемость колонки оказывает влияние на величину градиента давления, необходимого для создания определенной скорости потока газа. Проницаемость колонки к) растет по мере увеличения диаметра частиц твердого носителя, которым она заполнена к пропорционально квадрату диаметра частиц. При изменении среднего диаметра от 0,163 до 0,715 мм проницаемость возрастает примерно в 18 раз. Чем выше проницаемость колонки, тем меньше перепад давления вдоль нее, а следовательно, тем выше и эффективность работы колонки. [c.196]

Возможен и второй способ создания градиента разбавленный раствор подают со скоростью 2 мл/час в смеситель с концентрированным раствором. Одновременно раствор из смесителя со скоростью 4 мл/мин подают на колонку. Здесь важно иметь эффективно работающий смеситель. [c.307]

По мнению ряда авторов, обеспечить равномерную упаковку колонки при малом сопротивлении потока газа и малом времени удерживания можно, используя фракции 0,05—0,8 мм, оптимальной фракцией следует принять фракцию 0,12—0,30 мм. Чтобы эффективность разделения была выше, рекомендуется использовать более узкие фракции 0,12—0,15, 0,15—0,18, 0,18— 0,25 и 0,25—0,30 мм. Все эти фракции дают хорошие результаты, а последнюю лучше всего использовать при больших скоростях потока газа (>100 мл/мин) [8]. Эти данные, полученные для аналитических колонок, хорошо согласуются с результатами исследований зависимости между максимальной эффективностью разделения и минимальным временем удерживания, проведенных с препаративными колонками. Бети [9] нашел, что наиболее короткое время удерживания, откорректированное с учетом градиента давления, наблюдается в том случае, если отношение диаметра колонки к размеру частицы близко к 25. Для колонок диаметром 6 мм это соответствует зернам размером 0,24 мм, а для колонок диаметром 4 мм — зернам разме-ро 0,16 м. [c.175]

Экспериментальная проверка влияния градиента температуры осуществлялась на установке, собранной на основе препаративного хроматографа Эталон-1 с катарометром. Колонка состояла из четырех секций длиной по 40 см каждая. Внутренний диаметр первых двух секций составлял 27,2 мм, третьей и четвертой— 16,8 мм. Каждая секция была снабжена индивидуальными электрическими обогревателями, позволившими плавно изменять температуру и контролировать ее с точностью 1°. Колонка заполнялась сорбентом хромосорбом Р (30/60 меш) с 20% диоктилфталата. Скорость газа-носителя (азота) равнялась 800 мл/мин. В качестве модельной смеси была взята смесь гексан-диэтиловый эфир. Сравнение эффективности, производительности и энергетических затрат проводили при следующих температурных режи- [c.31]

Обычный способ создания градиента такого типа заключается в добавлении растворителя в смеситель с той же скоростью, с какой жидкость подается из смесителя в колонку. Смеситель, оборудованный эффективной мешалкой, до начала фракционирования заполняется осадителем. Уравнения (4-1) — (4-5) (см. ниже) связывают между собой различные параметры смесителя и скорости потока. [c.89]

Однако здесь не учитывается наличие корреляции между скоростью газа и временем удерживания, в связи с чем дисперсия погрешности определения удерживаемого объема может быть существенно меньше правой части уравнения (1.177). Это же относится к погрешности определения приведенного, исправленного и эффективного удерживаемых объемов, причем в последних двух случаях следует учитывать влияние погрешности определения фактора градиента давления [см. (1.175)]. Как следует из данных [98], при использовании прецизионной аппаратуры стандартные отклонения для давления на входе в колонку Pi, равного 1,8360 атм, составляет 2,237-10- атм (0,17 мм рт. ст.), для Р , равного атмосферному (0,9917 атм),— 1,316-10" атм (0,10 мм рт. ст.), откуда следует стандартное отклонение для фактора / = 1,4-10" (при абсолютной величине 0,68119). Таким образом, фактор градиента давления следует рассчитывать с точностью до пятого знака после запятой, тем более, что между величинами давления на входе и выходе из колонки наблюдается стохастическая корреляция [99], поскольку система регулирования перепада давления в колонке чувствительна к давлению окружающей среды. [c.60]

Обсуждение проблемы влияния градиента давления на эффективность, рассмотренной Гиддингсом. Показано, что влияние отношения давлений на входе и выходе не может значительно влиять на ВТТ. Повышение средней величины давления в колонке должно улучшать эффективность, но это преимущество компенсируется снижением скорости анализа, т. к. число тарелок в единицу времени изменяется обратно пропорционально давлению. [c.60]

Измерено изменение т-ры по диаметру колонок и показано, что эти изменения могут сказываться на эффективности препаративного разделения смесей. Опыты проводились на колонках длиной 90 см и диаметром 25 мм, НФ SE-30 на хромосорбе при 80° и при программировании т-ры. Градиент т-ры пропорционален скорости программирования. [c.75]

Вводя небольшой зонд в различные участки насадки 2-дюймовой колонки (рис. XVI-5, б), Фрисон [12] экспериментально показал, что потеря эффективности разделения была обусловлена главным образом неровным профилем скоростей, подтвердив этим наблюдения, о которых говорилось выше. Он разработал интересный метод понижения осевого градиента скорости полосы в колонках с большим диаметром. Метод состоит в том, что в насадке по-меш аются на равном расстоянии друг от друга круглые диски из фильтровальной бумаги с отверстиями в центре, насыщенные жидкой фазой. Диски доходят до стенок колонки, а размер центральных отверстий равномерно уменьшается по направлению к выходу из колонки. Эти диски служат для удерживания быстро двигающейся полосы у периферии, как показано схематически на рис. XVI-5, в. [c.371]

Ионообменные смолы очень удобны для разделения сложных смесей мононуклеотидов и низших олигонуклеотидов. На НСОО -форме этих ионитов при элюировании муравьиной кислотой или раствором формиата аммония удается осуществить очень четкое препаративное разделение компонентов смеси. Кроме крутизны градиента, которую легко регулировать, для хорошего разделения требуется выполнение еще ряда условий. Во-первых, отношение высоты колонки к диаметру должно быть примерно равно 10. Во-вторых, важно, чтобы скорость потока элюента не превышала 0,6 мл-см -мин . Еще одно очевидное требование — исключение из подаваемого в колонку раствора нежелательных анионов (трихлоруксусной кислоты, или —после экстракции хлорной кислотой — иона IO4 ) с тем, чтобы не снизилась емкость колонки, а следовательно, и ее эффективность. Если элюирование ведут муравьиной кислотой, то удалять ее после хроматографического разделения следует выпариванием в мягких условиях (например, в роторном испарителе). Экспериментатору следует помнить о том, что в процессе выпаривания происходит концентрирование в образце муравьиной кислоты, поэтому выпаривание необходимо вести при пониженной температуре. Формиат аммония можно удалить возгонкой при слегка повышенной температуре (до40°С) под вакуумом (масляный насос). Нуклеотиды можно адсорбировать из соединенных фракций на активном угле, масса которого в 5—10 раз должна превышать массу нуклеотида. После [c.327]

Разделительная способность колонки зависит от ряда параметров. Одними из основных параметров, определяющих ее эффективность, являются природа и количество неподвижной фазы, величина поверхности частиц твердого носителя, равномерность набивки. Эффективность разделения зависит также от природы газа-носителя, его скорости, градиента давления газа в системе. Существенное влияние оказывают размеры колонки, температура, а также величина пробы, способ ее введения и свойства компонентов разделяемой смеси. Для полной реализации эффективности колонки проба должна занимать небольшой объем. Верхний предел объема пробы определяется емкостью адсорбента и, следовательно, размерами колонки. Обычно верхний предел в аналитических исследованиях составляет примерно 100 мг, в препаративных колонках он значительно выше. Нижний предел объема пробы определяется чувствительностью детектора и методом детектирования (интегральное или дифференциальное детектирование). Дифференциальные детекторы получили наиболее широкое распространение. Среди детекторов, применяемых в газовой хроматографии, особенно перспективны такие, как термокондуктометрические ячейки (ка-тарометры), основанные на измерении теплопроводности газов и позволяющие фиксировать отдельные компоненты в количестве 10 12 моль. Так как катарометры обладают линейной зависимостью величины сигнала от количества введенных веществ, их можно использовать для определения концентраций. [c.144]

Байер и сотр. [12] изучали те же эффекты в колонках большего диаметра и получили аналогичные результаты. Образование профилей скоростей они объяснили наличием градиента пористости насадки в плоскости поперечного сечения колонки. Для выравнивания профилей скоростей потока они устанавливали в колонке специальные шайбы. Фризоун [56] изучал профили скоростей в колонке диаметром около 5 см. Колонку насыщали гексаном, который затем испаряли в вакууме. После этого в колонке образовывался профиль скоростей параболической формы эффективность колонки у ее оси была гораздо выше эффективности у стенок. При введении в колонку химических шайб, пропитанных неподвижной фазой, эффективности в различных точках поперечного сечения колонки стали примерно одинаковыми. Остроумный эксперимент по количественному определению степени разделения частиц насадки осуществили Гиддингс и Фуллер [65]. Сначала они засыпали в колонку диаметром около 5 см насадку через трубочку, расположенную вдоль оси колонки. Затем в колонку заливали горячий раствор желатины и выжидали его затвердевания. Затвердевшую насадку вынимали из колонки, делали с нее кольцевые срезы и определяли зависимость среднего размера частиц от радиуса кольцевого среза. Соответствующие результаты для носителя хромосорб , измельченного до 80—100 меш, приведены в табл. 3.8. [c.141]

Происходит настолько быстро, что не возникает заметных изменений давления на входе в колонку, т. е. не появляется дополнительного градиента давления, который определялся бы только увеличением рвх на входе в колонку. Конечно, это упрощающее предположение в случае препаративных ГХ-колонок не соответствует действительности, особенно когда вследствие неудачной конструкции входных и выходных отверстий нескольких секций колонки они оказывают дополнительное сопротивление газовому потоку. На практике измеряемое значение времени удерживания больще значения, получаемого в результате вычислений. Больше и действительное значение исправленного времени удерживания, и поэтому действительная эффективность колонки оказывается меньше той, которая была вычислена в предположении быстро устанавливающегося равновесного давления. Однако возникающий дополнительный градиент давления, зависящий от скорости повышения давления,, оказывает гораздо менее вредное влияние на работу препаративной колонки, чем градиент температуры, возникающий при программировании ее температуры. [c.215]

Длина колонок, заполненных мелкозернистыми обменниками типа Aminex , и колонок высокого давлеиия не превышает 40 см, а обычные их размеры лежат в пределах 15 — 25 см. Как уже указывалось, объем колонкп определяется при изократической элюции объемом исходного препарата (соотношение объемов — от 1 100 до 1 20), а при градиентной — соотношением количества веш ества и эффективной емкости колонки (загрузка па 5 — 10%). По выбранным длине и объему колонки подсчитывают ее диаметр. Однако в интересах обеспечения хорошей формы хроматографических зон отношение диаметра колонки к ее длине не должно превышать определенного предела. Для непрерывного градиента оно не должно быть больше 1 5, для изократической элюции — 1 20, в аналитических опытах — порядка 1 50, а в особо тонких случаях разделения это отношение снижают до 1 100 и даже 1 200. Здесь уместно напомнить обоснованное в гл. 1 правило при перепесонии условий хроматографического процесса, отработанных на маленькой колонке, на большую по объему (препаративную) колонку длина ее должна остаться без изменений (как и скорость элюции в расчете на 1 см сечения). Плош адь колонки увеличивают пропорционально повышению количества препарата, а расход элюента (мл/г) — пропорционально площади. Эту ситуацию можно себе представить как слияние нескольких аналитических колонок, работающих параллельно. [c.294]

Использование ступенчатых градиентов. Как отмечено в разд. 1.2.3 и на рис. 1.3, препаративную ЖХ можно использовать как быстрое средство выделения или обогащения классов соединений в условиях ступенчатого градиента. Иногда для простых смесей на этом может быть закончена необходимая очистка (см. пример на рис. 1.27). В других случаях для разделения сложного образца с компонентами, сильно отличающимися по полярности, может быть необходимо использовать многоступенчатую последовательность. Если оставить в стороне вопросы, связанные с растворимостью образца (см. разд. 1.6.2.2.6), то в адсорбционной ЖХ с помощью комбинации только четырех растворителей можно создать последовательность восьми градиентных ступеней и быстро разделить образец на фракции, которые затем можно индивидуально очистить в изократическом режиме. В каждой фракции спектр компонентов будет перекрывать диапазон к примерно только на 5—10 единиц. При скорости 1 мертвый объем в минуту процесс разделения, показанный в табл. 1.8, потенциально может быть закончен менее чем за 20 мин. Размер колонки может быть выбран в соответствии с имеющимся в наличии образцом. Для быстрого фракционирования образца можно аналогичным образом достаточно эффективно использовать градиентные схемы и в других методах разделения (ионный обмен, аффинная хроматография, распределение и т.д.). Классическая колоночная хроматография на открытых колонках часто выполнялась с использованием ступенчатого градиента, создаваемого элюотроп-ным рядом, подходящим для используемой неподвижной фазы. Однако, поскольку приготовление хорошей препаративной ЖХ-колонки требовало искусства и длительного времени. [c.100]

При выборе газа-носителя в качестве подвижной фазы обращается внимание на его физические свойства, от которых во многом зависит эффективность работы колонки. От вязкости газа, например, зависит градиент давления в Iioлoнкe. Природа газа оказывает определенное влияние на диффузионные эффекты. Кроме того, от физических свойств газа-носителя во многом зависят показания детектирующих устройств. Замена азота на водород намного увеличивает чувствительность регистрирующего прибора (водород характеризуется меньшей плотностью и имеет большую теплопроводность, чем азот). При применении водорода для поддержания заданной скорости потока через колонку требуется меньшее давление. Однако в случае водорода большее значение приобретает диффузионный эффект, влияющий на качество разделения. Кроме того, водород гиожет взаимодействовать с некоторыми компонентами анализируемой смеси, например, гидрировать непредельные углеводороды. [c.196]

В работе Олсона и др. [1] при разделении ферментов и антигенов аффинной хроматографией. применялись методы высокоэффективной жидкостной хроматографии, которую отличают использование небольших колонок, высоких скоростей разделения, связанных с этим высоких давлений в системе и, что наиболее существенно, относительно небольших количеств анализируемых веществ. Носителем для иммобилизации аффинных лигандов служил силикагель, поскольку получаемые аффинные сорбенты на этом носителе могут работать в условиях высокого давления. Наиболее ярким примером эффективности такого метода служит разделение в течение 5 мин Н4 и М4 изозимов лактатдегидрогеназы на колонке с №-(6-аминогексил)-АМР—силикагелем в градиенте NADH. [c.452]

Хубер с сотр. [60], напротив, ориентировались на сравнительно короткие колонки ( =1,5 м) с внутренним диаметром 1 мм, наполненные хромосорбом О AW-DM. S или сферосилом ХОС-005, пропитанные скваланом, в которых за счет применения ультразвука и протока газа-носителя при набивке колонки обеспечивается очень плотное заполнение. На примере разделения криптона, пентана и гексана был исследован ход кривой ван Деемтера для различных размеров частиц 0,063—0,071, 0,12—0,14 и 0,20—0,25 мм. На основе экспериментов, проводившихся как при нормальном давлении на выходе 0,1 МПа, так и при давлении 1 МПа при одинаковой средней скорости газа-носителя и, было установлено влияние давления и градиента давления на высоту, эквивалентную теоретической тарелке. В отдельных случаях кт1п оказалась меньше 0,2 мм. Это согласуется также с данными для колонок длиной 6 м и давлением на входе до 6 МПа [49]. Ввиду высокой эффективности разделения эти авторы рекомендовали такую хроматографию при высоком давлении на колонках с внутренним диаметром до 1 мм и диаметром частиц 0,055 мм для решения особенно сложных задач разделения. Вследствие значительной допустимой нагрузки пробой этот метод они рекомендовали также для анализа следовых количеств и хроматографического анализа, комбинируемого с масс-спектрометрией. Примеры анализа природного газа и бензина, а также смесей низших спиртов, кетонов, эфиров и углеводородов приведены на рис. И.25 и П.26. При уменьшении размера частиц достигается эффективность разделения (выраженная через /г), сравнимая с капиллярными колонками. Кроме того, коэффициент С в уравнении ван Деемтера становится очень малым, и повышение скорости газа-носителя вызывает лишь незначительное понижение эффективности разделения. [c.107]

Дополнительные данные о том, что градиент температуры не оказывает влияния на разрешение, приводят Воган и Грин [9]. Эти авторы утверждают, что механизм фракционирования заключается в растворении полимера в смеси осадитель — растворитель, а осаждения больше не происходит. Предполагают, что только те молекулы, которые могут оставаться в растворе, перемещаются в менее нагретые участки колонки. Следовательно, метод сводится по существу к экстрагированию. Если описанный механизм действительно имеет место, то высота колонки и величина температурного градиента не играли бы заметной роли, а факторами, определяющими эффективность фракционирования, оказались бы скорость изменения градиента концентрации растворителя, скорость потока элюирующей жидкости и температура выходной части колонки. В дискуссии по работе Вогана и Грина [9] Хартли приводит примеры использования колонок без температурного градиента для успешного фракционирования весьма различных типов полимеров (виниловые полимеры, полиэфиры). [c.106]

В этом методе применяют хроматографическую колонку и коаксиальный нагреватель, который короче колонки и имеет равномерный температурный градиент по своей длине. В процессе элюирования нагреватель движется более холодным концом вперед вдоль колонки от ее входа к выходу. Когда полоса растворенного вещества в нагретой зоне движется быстрее нагревателя, она продвигается в область более низкой температуры. Коэффициент распределения увеличивается, и поэтому скорость движения полосы должна снизиться. Когда процесс стабилизируется, каждая полоса движется вдоль колонки стой же скоростью, что и нагреватель, в области характеристической температурной зоны. Расположение растворенных веществ в зоне нагревания соответствует порядку возрастания коэф4пшнентов распределения. Таким образом, растворенные вещества с высокой летучестью стремятся стабилизироваться ближе к переднему более холодному концу нагревателя, а вещества с низкой летучестью — в его конце, имеющем более высокую температуру. Порция растворенного вещества, которая продвинулась слишком далеко вперед, будет стремиться переходить медленнее в более холодную часть, к которой она двигалась, а порция, которая отставала, будет двигаться быстрее. Таким образом, полоса каждого растворенного вещества по мере продвижения в колонке не только стремится быть более узкой, но и имеет тенденцию к непрерывному сужению. При этом способе конечная ширина полосы определяется действием двух противодействующих факторов обычным расширением полосы, вызванным диффузией и массопередачей, и сужением полосы под влиянием температурного градиента колонки. Эффективная хроматография требует равномерной набивки колонки и приемов, которые сводят к минимуму факторы, обусловливающие размывание полосы. Сужающее полосу влияние температуры приводит к тому, что окончательная ширина полосы лишь в незначительной степени зависит от первоначальной ширины полосы при вводе. Следовательно, таким путем можно исправить влияние большого разбавления при вводе пробы. [c.37]

Ионообменную хроматографию белков [20] выполняют на ионообменниках, имеющих гидрофильную матрицу, например на целлюлозе и декстране. Анионообменники, особенно ОЕАЕ-целлюлозу и ОЕАЕ-сефадекс, используют чаще, чем катионооб-менники типа СМ-целлюлозы. Ионообменники на основе целлюлозы имеют открытую сетчатую структуру с ионизованными центрами, легкодоступными для белков. Число ионных связей, образующихся между обменником и белком, зависит не только от используемого материала, но также в большой степени от pH и ионной силы буфера. Эти ионные пары постоянно диссоциируют и образуются вновь, так как ионы элюента конкурируют за центры обмена. Обменники, пригодные для фракционирования белков, имеют низкую плотность зарядов, поэтому число ионных связей между ионитом и отдельными молекулами белка не столь велико, чтобы вообще воспрепятствовать продвижению последних вдоль колонки. Хотя ионные связи постоянно диссоциируют и образуются вновь, в начале хроматографирования белок связывается с ионообменником и не элюируется с колонки. Однако когда концентрация небольших конкурирующих ионов буфера возрастает до такого уровня, что все связи одновременно разрываются, белок начинает двигаться вниз по колонке. Если в процессе разделения используют градиент ионной силы, белок, перемещающийся в стартовой зоне медленнее, чем буфер, элюируется им при увеличении концентрации ионов. Таким образом, элюирующая способность буферного раствора постоянно увеличивается и макромолекула перемещается все быстрее и быстрее. Скорость ее перемещения становится сравнимой со скоростью движения жидкости, когда в элюенте достигается такая концентрация соли, которая эффективно препятствует взаимодействию молекулы белка с обменником. Важное значение в каждом отдельном случае имеет профиль градиента чтобы увеличить разрешение пиков в определенных участках хроматограммы, используемый градиент должен быть сравнительно пологим, но в то же время достаточно крутым в других участках, чтобы избежать уширения пиков. [c.108]

Устойчивость комплексов, образуемых борат-ионами с сахарами и полиолами, зависит от различных структурных факторов, которые обусловлены числом соседних ис-гидроксиль-ных групп, а также от экспериментальных условий, в частности от pH и ионной силы среды и концентрации в ней борат-ионов. Первые сообщения о разработке метода разделения смесей сахаров на сильноосновной анионообменной смоле дауэкс 1 в боратной форме в ступенчатом градиенте pH (от 8 до 9) и концентрации боратного буфера появились около 30 лет назад [70, 71]. В дальнейшем этот метод нашел применение для фракционирования полиолов [72]. Однако предложенные первоначальные условия не обеспечивали удовлетворительного разделения, а время анализа составляло примерно 60 ч. Данный метод обычно не находил применения в качестве аналитической методики до тех пор, пока интенсивные исследования влияния различных факторов, в частности температуры, ионной силы буфера и размера частиц смолы, на эффективность и скорость хроматографии не привели к значительному улучшению характеристик разделения. Использование смолы со средним размером частиц 20 мкм и подогрева колонки до температуры 50°С при градиентном элюировании буферами с увеличивающейся концентрацией бората (0,1—>-0,2 М) и хлорида (О—>-0,2 М), [c.21]