Высаливание белков из растворов

Высаливание белков. Осаждение белков из растворов солями называется высаливанием. Принцип высаливания заключается в следующем. Молекула белка удерживается в растворе вследствие действия на нее стабилизирующих факторов электрического заряда и водной оболочки (гидросферы). Ионы щелочных и щелочноземельных металлов несут заряд, противоположный заряду белковой мицеллы, и обладают большей гидрофильностью, чем белок. Поэтому при добавлении соответствующего количества солей в раствор белка он осаждается. При уменьшении количества солей в растворе, что достигается диализом или разбавлением водой, белки могут вновь перейти в раствор. [c.39]

Некоторые белковые вещества могут быть высолены из их растворов, другие — нет. Высаливание является важным средством для открытия и разделения отдельных белковых веществ. Производится оно по большей части поваренной солью или же сернокислым магнием весьма замечательно, что все белковые вещества сполна высаливаются прн насыщении сернокислым аммонием их нейтральных или кислых растворов. Природные белковые тела могут быть разделены дробным осаждением из их водных растворов при постепенном увеличении концентрации раствора сернокислого аммония. Концентрация, при которой данная соль осаждает белок, является для него столь же характерной, как растворимость для кристаллического вещества. Если высаливание происходит при обыкновенной температуре, то белковые вещества при этом не изме [c.322]

Ход работы. Яичный белок смешать с пятикратным объемом воды и выпавший яичный глобулин отфильтровать. В полученном фильтрате определить наличие альбумина осаждением путем нагревания и применением алкалоидных реактивов, а затем для подтверждения альбуминового характера обнаруженного белка- определить границы высаливания. Для этого в девять пробирок налить (в каждую ) по 1 мл раствора белка. После этого долить различное количество воды так, как это указано в приведенной форме, а затем в первые восемь пробирок добавить возрастающий объем насыщенного раствора сернокислого аммония, а в девятую твердой соли (МН4)2304 до полного насыщения. [c.178]

Удобен следующий прием медленного добавления сульфата аммония при изоэлектрическом высаливании белков в забуференный рас твор белка опускают целлофановый мешочек с твердым сульфатом аммония, электролит диффундирует через мембрану и вызывает осаждение белка. Осадок белка, содержащий неорганическую соль, диали-зуют (дистиллированная вода) сульфат аммония удаляется и белок переходит в раствор. Для переосаждения используют описанный выше прием. Кристаллизации белка можно достичь после подходящего числа повторений этого процесса. Другой удобный метод переосаждения и иногда кристаллизации — добавление этилового спирта к раствору белка в изоэлектрической точке и охлаждение. [c.689]

Высаливание различных белков происходит, если концентрация электролита достигает определенной величины (порог коагуляции). Это дает возможность отделять одни белки от других. Например, если к раствору куриного белка прибавлять сернокислый аммоний с таким расчетом, чтобы степень его насыщения достигла 50% (то есть чтобы концентрация сернокислого аммония равнялась половине концентрации его насыщенного раствора), из раствора выпадает белок, называемый глобулином (в данном случае яичным глобулином, так как глобулины — это целая группа белковых веществ), а в растворе остается другой белок, который начинает выпадать, когда степень насыщения сернокислого аммония достигнет 70%—это яичный альбумин. [c.325]

Высаливание из водных растворов можно проводить не только электролитами, но и органическими веществами (этанолом, ацетоном), способными взаимодействовать с водой (гидратироваться) и понижать растворимость высокомолекулярного вещества. Например, для фракционирования белков, т. е. разделения их на фракции с относительно одинаковой молекулярной массой, в исследуемый водный раствор добавляют спирт для уменьшения растворимости белков. Растворимость белков, как и других полимеров, зависит от молекулярной массы чем она больше, тем растворимость хуже. Поэтому при введении в водный раствор белка небольшого количества спирта из раствора выделяется фракция с наибольшей молекулярной массой. Последовательно добавляя к раствору белка все новые порции спирта, можно разделить белок па любое число фракций. Каждая последующая фракция белка будет иметь меньшую среднюю молекулярную массу. [c.259]

Растворимость белков зависит также от наличия других растворенных веществ. Например, некоторые белки не растворяются в дистиллированной воде, но растворяются в присутствии небольших концентраций нейтральных солей. При высоких концентрациях нейтральных солей белки выпадают в осадок, причем для осаждения (высаливания) разных белков требуются разные концентрации соли. Следовательно, этим способом можно фракционировать белки. Чаще всего для разделения белков методом высаливания используют сульфат аммония. После удаления соли (например, путем диализа) осажденный белок вновь растворяется при этом сохраняются его нативные свойства. [c.47]

При реакциях осаждения белок выпадает в осадок или необратимо (свертывание) или обратимо (высаливание). Так, например, из водных растворов белки высаливаются солями легких металлов — сернокислым магнием, хлористым натрием, сернокислым аммонием здесь процесс обратим при разбавлении водой белок снова переходит в раствор. При действии же солей тяжелых металлов (железа, свинца, меди, ртути) белки осаждаются необратимо и достаточно полно. Также необратимо осаждают белки таннин, пикриновая кислота, фосфорномолибденовая и фосфорновольфрамовая кислоты, азотная кислота. Большинство белков свертывается при нагревании с водой (например, белок куриного яйца), а также при действии спирта. Температура свертывания для разных белков различна и характерна, что служит иногда их отличительным признаком. Свертываются белки и при действии ферментов так, например, белок молока [c.339]

Обратимое осаждение белков из раствора концентрированными растворами электролитов — высаливание — обусловлено высокой склонностью ионов электролита к гидратации, причем необходимая для этого вода отдается белком, который, не располагая достаточным количеством растворителя, оседает однако осажденный белок вновь растворяется при удалении электролита (нанример, диализом). [c.434]

Высаливание. При добавлении растворов солей щелочных и щелочноземельных металлов происходит осаждение белков из раствора. Обычно белок не теряет способности растворяться вновь в воде после удаления солей методами диализа или гельхроматографии. Высаливанием белков обычно пользуются в клинической практике при анализе белков сыворотки крови и других биологических жидкостей, а также в препаративной энзимологии для предварительного осаждения и удаления балластных белков или выделения исследуемого фермента. Различные белки высаливаются из растворов при разных концентрациях нейтральных растворов сульфата аммония. Поэтому метод нашел широкое применение в клинике для разделения глобулинов (выпадают в осадок при 50% насыщении) и альбуминов (выпадают при 100% насыщении). [c.26]

Осаждение белков из водных растворов может быть достигнуто прибавлением солей тяжелых металлов (солей ртути, серебра, меди и др.). Действие этих солей резко отличается от высаливания концентрированными растворами солей щелочных металлов. Соли тяжелых металлов уже в весьма малых концентрациях вызывают выпадение в осадок белка или, как часто говорят, свертывание белка. Свернувшийся и притом денатурированный белок связывает и увлекает с собой в осадок значительную часть осаждающего реактива (например, ионы тяжелого металла). Это обстоятельство используется, между прочим, и в медицинской практике при отравлениях солями тяжелых металлов, например сулемой, больному дают в качестве противоядия большое количество яичного белка или молока. Белки образуют в желудке с солями тяжелых металлов нерастворимые осадки, в результате чего прекращается всасывание ядовитых ионов металла. [c.19]

Для растворенных веществ несложной структуры можно ожидать изменений в проявляемой ими тенденции удаляться из раствора или изменений коэффициентов активности под действием одновременно присутствующих в растворе веществ, влияющих на их растворимость летучесть и реакционную способность. Взаимодействия между макромолекулами в растворе, напротив, часто обратимо (и необратимо) влияют на структуру, что проявляется, например, в утрате активности при денатурации ферментов и изменениях точек плавления гелей. В равновесии кроме твердой фазы могут участвовать следующие типы частиц в растворе нативные макромолекулы, олигомерные или полимерные агрегаты, денатурированные макромолекулы. На рис. 1. 19 показаны структурные соотношения между этими типами частиц. К, е-т к пониманию наблюдаемого влияния солей и других растворенных веществ па эти равновесия состоит в том, что в каждом из состояний, изображенных на рис. 1.19, для растворителя доступны в различной степени те или иные группы молекул [253, 287, 351]. Хорошо известно, что конформации, которые макромолекулы,принимают в растворе, определяются стремлением к сближению всех гидрофобных групп между собой и к обеспечению доступа растворителя к гидрофильным группам [338]. В целом степень доступности молекулы для растворителя возрастает в ряду твердый белок < агрегированный или полимерный белок < нативный мономерный белок < денатурированный белок [287]. Однако, по-видимому, в каждом из этих случаев для растворителя оказываются доступными различные совокупности полярных и неполярных групп, причем степень доступности и состав групп зависят от природы макромолекулы. Влияние растворенных веществ на денатурацию, высаливание, деполимеризацию и т.д. можно объяснить, если учесть взаимодействия разных индивидуальных групп (заряженных, неполярных, полярных) [2871. [c.138]

Белок, 10%-ный раствор (для высаливания). В мерную колбу или цилиндр на 500 мл переносят 50 мл яичного белка и доводят до 500 мл 10%-ным раствором хлористого натрия. Перемешивают и фильтруют через марлю. [c.280]

При высаливании структура белка не повреждается. После удаления соли белок вновь приобретает гидратную оболочку и растворяется. Денатурация белка — практически необратимый процесс. Белок, осажденный кипячением при изоэлектрической точке, после остывания смеси обычно не растворяется. [c.32]

Препараты природных макромолекулярных нуклеиновых кислот получают обычно из нуклеопротеидов, экстрагируемых из тканей солевыми растворами или водой. Если эти нуклеопротеиды осторожно диализовать или подвергнуть встряхиванию с хлороформом [259], то они расщепляются на белок и полимерную нуклеиновую кислоту. Белок может быть удален путем его денатурации или при помощи высаливания хлористым натрием [260]. Молекулярный вес макромолекулы нативной тимо-нуклеиновой кислоты, по данным различных исследователей [261—264], варьирует от 820 000 до 3 700 000. Длина нитевидной [c.260]

Из имеющихся в настоящее время данных, однако, можно заключить, что воздействие на заряженные группы в общем мало существенно при рассмотрении влияния концентрированных солей на денатурацию и осаждение белков в нейтральной области pH. Абсолютная растворимость белка, такого, как карбоксигемоглобин, зависит от pH, поскольку белок имеет минимальную растворимость, когда его общий заряд близок к нулю. Однако влияние концентрированных растворов солей на его растворимость, мерой которой является величина /с.,, характеризующая высаливание, по-видимому, не зависит от pH и заряда белка [26]. Это показано на рис. 8, где приведены данные по влиянию фосфата на растворимость карбоксигемоглобина. [c.293]

Избыток детергента может мешать фракционированию. Например, высаливание сульфатом аммония приводит к появлению на поверхности раствора слоя тритона Х-100, в котором часто содержатся нужные белки. Однако эффективного разделения при этом не происходит. Можно провести колоночную хроматографию или отделить белки с помощью гель-фильтрации (разд. 5.1), но не исключено, что мицеллы детергента будут двигаться в той же зоне, что и белок, и, следовательно, окажутся в одной фракции. Ионообменная хроматография успешно осуществляется в присутствии неионных детергентов (разд. 4.2 и 4.3). Действительно, тритон Х-100 в концентрации до 1% оказывает незначительное влияние на ионообменные свойства нормальных водорастворимых белков. Но солюбилизированные белки мембран могут находиться только в составе детергентных мицелл, что существенно влияет на процесс ионного обмена. Если исследуемый белок удается адсорбировать на ионообменнике, то избыток детергента свободно проходит через колонку. Это позволяет элюировать свободный (относительно) от детергента белок. С другой стороны, если полное удаление детергента приводит к денатурации белка, то, чтобы предотвратить это, в буфер вносят небольшое количество детергента (<0,1 7о). Собранная фракция будет, конечно, тоже содержать некоторое количество детергента. Тем не менее, так как обычно из смеси белков выделяют какой-то определенный фермент, присутствие в конечном препарате незначительной концентрации чистого детергента, не загрязненного жирами, не принесет большого вреда. Методы удаления избытка детергентов были недавно суммированы в обзоре [23]. [c.55]

При реакциях осаждения белок вьшадает в осадок или необратимо (свертывание), или обратимо высаливание). Так, нйпример, из водных растворов белки высаливаются солями легких металлов — сернокислым магнием, хлористым натрием, сернокислым аммонием здесь процесс обратим при разбавлении водой белок снова переходит в раствор. При действии же солей тяжелых металлов (железа, свинца, меди, ртути) белки осаждаются необратимо и достаточно полно. Также необратимо осаждают белки таннин, пикриновая кислота, фосфорномолибденовая и фосфорновольфрамовая кислоты, азотная кислота. Большинство белков свертывается при нагревании с водой (например, белок куриного яйца), а также при действии спирта. Температура свертывания для разных белков различна и характерна, что служит иногда их отличительным признаком. Свертываются белки и при действии ферментов так, например, белок молока — казеин — свертывается при прибавлении сычужного фермента (добываемого из телячьего желудка) кровь, выпущенная из сосудов, свертывается под влиянием фермеН тов, появляющихся Б самой крови, и т. п. [c.337]

В водных растворах молекулы белка гидратированы. Такая связанная вода составляет иногда до 30—50% собственной массы белковой молекулы. При добавлении солей пли органических растворителей, смешивающихся с водой, степень гидратации снижается, белковые молекулы ассоциируют и выпадают из раствора в осадок вместе со значительным количеством связанной воды. В дистиллированной воде растворяется ограниченное количество белков. Большинство белков переходит в раствор при добавлении солей, реже — кислот или оснований. С ростом концентрации соли может, однако, проявиться эффект высаливания, и белок снова переходит в осадок. [c.23]

Высаливание, или осаждение, при котором белковые вещества выпадают из раствора под влиянием дегидратирующих веществ. Это изменение обратимо при удалении осаждающего реактива белок вновь растворяетя. [c.235]

Метод фракционирования белков солевыми растворами основан на том, что каждый индивидуальный белок разделяемой смеси осаждается из нее при определенной концентрации той или иной соли, в то время как другие белки при данной концентрации соли остаются в растворе. Процесс осаждения белка из раствора под действием соли называется высаливанием. При дальнейшем насыщении солью выпадает следующий индивидуальный белок [c.27]

Высаливанием называется реакция осаждения белков из их растворов солями щелочных металлов Na l, (NH4)2S04 и др. Реакция высаливания обусловлена дегидратацией коллоидных частиц белка с одновременной нейтрализацией заряда. При высаливании белок обычно почти не теряет присущих ему физико-химических и биологических свойств. Он вновь растворяется в воде, и обычно при этом не меняются ферментативные, антигенные, иммунные и другие биологические свойства, т. е. остается нативным. [c.37]

Групповое разделение белков. Высаливание — разделение белков на фракции по их растворимости. Принцип метода заключается в дегидратации белков (обычно с помощью сернокислого аммония) при pH, близком к Р1. Различные белки выпадают в осадок при разных концентрациях соли. Это грубый метод разделения на группы. Например, глобулины выпадают в осадок при полунасыщении, а альбумины — при полном насыщении (НН4)2804. Избирательная денатурация — это выпадение в осадок при нагревании раствора до 50 °С или при подкислении среды до pH 5,0. Если выделяемый белок устойчив к нагреванию и изменению pH, то часть ненужных белков можно удалить таким простым способом. Органические растворители при низких температурах используются для щадящего группового разделения белков. По методу Кона белки плазмы крови фракционируют спиртом при температуре 3—5 °С альбумины — спирт 40%, pH 4,8, при 1-5 °С р, у-глобулины — спирт 25%, pH 6,9, при 1-5 °С а-глобулины — спирт 18%, pH 5,2, при 1-5 °С фибриноген — спирт 8%, pH 7,2, при 1-3 °С а2-глобулин — спирт 40 , pH 5,8, при 1—3 °С. Диализ — освобождение белковых растворов от низкомолекулярных соединений (например, от сернокислого аммония (NH4)2S04). Белки не проходят через полупроницаемую мембрану, а низкомолекулярные вещества проходят, что и позволяет очистить раствор белков от низкомолекулярных примесей. Получаем группу (смесь) белков, обладающих близкими физико-химически-ми свойствами. [c.50]

Белок, осажденный высаливанием, можно отделить от белков, оставшихся в растворе, центрифугированием или фильтрованием и вновь растворить, добавив воду или буферный раствор. Этим методом можно концентрировать растворы (после осаждения раст1ворить белок в меньшем объеме растворителя). Метод высаливания белков широко используется в научно-исследовательских лабораториях при выделении и очистке различных белков (ферменты, гормоны и др.) и в производственных условиях для получения белковых препаратов (лечебные сыворотки, кристалличеекиёОелки и др.). [c.24]

Выделение белка из раствора после прибавления различных солей носит название высаливания. Процесс высаливания белка во многих случаях не связан с потерей белком способности вновь растворяться в воде после удаления водоотнимающего средства. Так, осажденный сернокислым аммонием или сернокислым натрием белок сыворотки крови после удаления основной массы соли (например, диализом) легко вновь растворяется в воде с образованием раствора, во всех отнош еннях тождественного исходному. [c.17]

Далее, на колонке аналогичной смолы, но уже с низкой степенью сшивки, адсорбируют фермент. Для этого лучше всего применять Какен С-1 (SP-3) , но можно и дуолит С-10 или S-30. Ферментный белок затем очищают вытеснительной хроматографией, высаливанием сульфатом аммония и осаждением ацетоном, после чего, в случае надобности, кристаллизуют. Выход фермента по активности 5—15%. Он расщепляет в казеине — 75% пептидных связей, в клейковине пшеницы —80%, а в яичном альбумине— 87%. Большое значение для стабильности протеазы имеет присутствие в растворах иона Са, обычно прибавляемого в виде Са-ацетата. [c.208]

Белок одного яйца растворяют в 60 мл дестиллированной воды. Раствор отстаивают в течение 2 час. и отфильтровывают от выпавших волокнистых примесей. Фильтрование проводят через бумажный фильтр в вакуумной воронке, соединенной с водоструйным насосом. От фильтрата отбирают две части по 25 мл в каждой. В первую часть раствора добавляют небольшими порциями порошок сернокислого аммония и раствор тщательно взбалтывают до полного растворения каждой порции. После того как концентрация солн достигнет определенной значительной величины, из раствора начнет выделяться альбумин в виде хлопьев или сгустков. Сопоставить количество соли, необходимое для высаливания альбумина и коагуляции коллоидов. [c.173]

Выше было уже упомянуто об образовании слабо растворимых солей (например, хлоридов и сульфатов) белковых катионов з кислой по отношению к изоэлектрической точке области [195, 202] и об использовании этого явления, например, для выделёнйя кристаллического сульфата альбумина плазмы [106]. Было получено также несколько кристаллических солей лизоцима [204]. Белковые соли, содержащие тяжелые комплексные анионы, например воль-фрамат-, фосфовольфрамат-, трихлорацетат- или метафосфатионы, а также соли, содержащие катионы тяжелых металлов — цинка, меди или ртути, — известны уже давно и применялись для освобождения раствора от белков перед некоторыми анализами [10, 78]. Предполагалось, что эти реагенты при их применений действуют на белки сильно денатурирующим образом. Вслед з-а кристаллизацией цинковой соли инсулина [205, 206] и метафос-фата яичного альбумина [207] недавно последовало приготовление серии кристаллических производных инсулина [208] и сывороточных альбуминов человека [209, 210]. Последние были получены в присутствии ионов, концентрация которых была недостаточна для высаливания (если не добавлять в количестве 5—30% органического растворителя и во избежание денатурации не вести процесс при низких температурах). В этих условиях многие из указанных солей менее растворимы, чем свободный белок или соли с такими катионами, как натрий или калий, и, следовательно, могут найти применение при выделении белков [51] (4). Были получены также кристаллические додецилсульфатпроизводные Р-лактоглобулина [211]. [c.51]

Примером обратимой коагуляции может служить высаливание — коагуляция белков под влиянием электролитов. Например, если к водному раствору белка прибавить раствор сернокислого аммония достаточной концентрации, белок выпадает из раствора в форме хлопьев, то есть коагулирует. Но по устранении причины, вызвавшей коагуляцию, в данном случае по удалении раствора, содержащего сернокислый аммоний, промытый осадок снова растворяется в дестиллированной воде — белок возвращается в свое первоначальное состояние здесь коагуляция не. сопровождается денат> рацией. Следовательно, денатурация представляет собой процесс необратимой коагуляции обратимую же коагуляцию можно рассматривать, как чисто коллоидохимический процесс. [c.325]

Высаливание. Растворы нейтральных солей широко используются не только для повышения растворимости белка, но и для избирательного осаждения разных белков, т. е. их фракционирования. Процесс осаждения белков нейтральными солями называется высаливанием. Характерной особенностью белков, осажденных в процессе высаливания, является то, что после удаления соли они сохраняют свои нативные биологические свойства. Сушность процесса высаливания заключается в том, что ионы забирают на себя гидратную оболочку белка, одновременно нейтрализуя заряд белковой молекулы. Способность к высаливанию наиболее ярко выражена у многозарядных анионов, в частности у сульфатов. На практике для высаливания чаше всего применяют сульфаты натрия и аммония. Помимо солей для осаждения белков могут быть использованы органические водоотнимаюшие (гидрофильные) растворители — этанол, ацетон, метанол и др. Высаливание достаточно широко применяется для разделения и очистки белков. Для каждого белка существует своя зона высаливания, т. е. диапазон концентраций соли, позволяющий дегидратировать и осадить белок. После удаления высаливающего агента белок сохраняет все свои природные свойства и функции. [c.72]

В природном продукте иногда содержатся несколько различных белков, которые первоначально рассматривали как один компонент. Если, например, величина pH исследуемого раствора белка выше изо-злектрической точки одного белка, но ниже изоэлектрической точки другого белка, то первый белок существует в виде отрицательного, а второй — положительного иона, так что заряды обоих белков взаимно нейтрализуются и оба белка воспринимаются как один. Лишь при изме-1 ении значения pH обнаруживается, что в действительности имеются два компонента, для которых при соответствующем значении pH можно с помощью ультрацентрифуги, прибора для электрофореза или высаливания, определить для каждого из них молекулярный вес, электрофо-]5етическую подвижность и индивидуальную растворимость. [c.345]

Осаждение путем высаливаипя. Большая часть белков нерастворима в насыш,енном растворе соли, например сульфата аммония. Если необходимо выделить белок из раствора без заметного изменения его хими-ческох природы или свойств, то белковый раствор насыщают (NH4)2S04, и тогда белок осаждается. После фильтрования избыток (N114)2804 обычно удаляют из раствора диализом. Такой процесс высаливания находит широкое ирименение прх выделении биологически активных белков. [c.324]

Несостоятельность этой классификации видна из того, что некоторые белки, например мышечный белок актин, могут находиться и в глобулярной и в фибриллярной форме. Молекулярный вес белков колеблется в широких пределах, от 10 до нескольких миллионов. Однако большинство растворимых белков имеет молекулярный вес порядка 10 они, как правило, имеют форму шара или эллипсоида размером от 15 до 60 А. Белки с молекулярным весом порядка 10 содержат около 800 аминокислотных остатков, причем длина каладого аминокислотного остатка развернутой пептидной цепи составляет примерно 3,6 А. Следовательно, в соответствии с указанными выше размерами пептидная цепь в глобулярных белках должна быть каким-то образом свернута или скручена. В таком виде белки сохраняют какую-то внутреннюю структуру и имеют ярко выраженную видовую, специфичность, которая сохраняется и после их растворения в водно-солевых растворах, а также после высаливания их из растворов сульфатом натрия или сульфатом аммония. Способность белков сохранять пространственную структуру имеет чрезвычайно важное биологическое значение, так как она лежит в основе их ферментных, гормональных и иммунохимических свойств. [c.38]

Физико-химические основы явления высаливания белков в Koti-центрированных растворах солеи достаточно сложны [163]. Одна из причин высаливания связывается со снижением активности ассоциированных с белком молекул воды, с их более слабым взаимодействием с полярными группами белка. К существенным факторам, определяющим растворимость белка, относят также поверхностное натяжение на границе между белковыми молекулами и на поверхности раздела белок — вода, причем лиотропный эффект объясняют влиянием посторонних ионов на величину поверхностного натяжения [27]. Растворимость 5 многих белков (при высокой солевой концентрации) уменьшается по мере увеличения ко1щентрации соли по логарифмической зависимости [c.48]

В настоящее время доказано, что любой белок может существовать в кристаллической форме. В основе различных приемов кристаллизации белка лежит принцип очень медленного приближения к той критической точке, в которой белок из растворенного состояния переходит в осадок. В этом случае белковые молекулы успевают закономерным путем объединиться в надмолекулярные агрегаты и дают кристаллические структуры. Практически такое медленное осаждение белков достигается путем введения соли через полупроницаемую мембрану или при медленном испарении воды из содержащего соль белкового раствора вплоть до точки высаливания. В последнее время получила распространеме кристаллизация белков с использованием органических соединений 2-метил- [c.33]