Тепловая денатурация также денатурация

Термолабильность ферментов. Скорость химических реакций зависит от температуры, поэтому катализируемые ферментами реакции также чувствительны к изменениям температуры. Установлено, что скорость большинства биохимических реакций повышается в 2 раза при повышении температуры на 10°С и, наоборот, снижается в 2 раза при понижении температуры на 10°С. Этот показатель получил название температурного коэффициента. Однако вследствие белковой природы фермента тепловая денатурация при повышении температуры будет снижать эффективную концентрацию фермента с соответствующим снижением скорости реакции. Так, при температуре, не превышающей 45—50°С, скорость реакции увеличивается согласно теории химической кинетики. При температуре выше 50° С на скорость реакции большое влияние начинает оказывать тепловая денатурация белка-фермента, приводящая к полному прекращению ферментативного процесса (рис. 4.16). [c.140]

Денатурация при повышении температуры. Это—наиболее обычный случай. Он более изучен, чем другие способы денатурации. Тепловая денатурация наиболее характерна для двух групп белков — альбуминов и глобулинов. Температура, при которой происходит денатурация, для различных белков различна. Для многих из их она лежит в пределах 55— 60°, для некоторых белков — выше. Указанная температура зависит также от присутствия в белковой системе электролитов и неэлектролитов. Из электролитов главное влияние оказывают анионы, которые по своему действию располагаются в лиотропный ряд. Прибавление к белковому раствору сахарозы в значительной степени предохраняет их от денатурации. [c.376]

Говоря о тепловой денатурации, важно обратить внимание на возможность протеолиза. Протеазы, как и другие ферменты, активируются при повышении температуры. Они обычно довольно стабильны, так что даже в том случае, когда нужный фермент сохраняет активность, вполне может произойти частичное расщепление белка или его небольшая модификация, что неблагоприятно скажется на качестве препарата. Именно по этой причине предпочтительно проводить нагревание в присутствии сульфата аммония (несмотря на то что под влиянием соли белки могут стабилизироваться настолько, что для их денатурации потребуется более высокая температура), поскольку высокие концентрации соли в значительной мере ингибируют протеолиз. Есть также примеры стабилизации фермента его субстратом, однако присутствие субстрата может также и дестабилизировать фермент. [c.86]

Ступенчатый характер тепловой денатурации лизоцима был также обнаружен в работе [72] при изучении оптической плотности растворов лизоцима в процессе его нагревания от 20 до 90° С наиболее выраженные изменения оптической плотности наблюдались около 50° и при 75—77° С [72, 73], что в целом согласуется с данными по ультразвуковой инактивации лизоцима (см. рис. 19). Тот факт, что в интервале температур 60—75° С наблюдается резкое уменьшение а-спиральности лизоцима (от 31 до 15%), также согласуется с наличием конформационного перехода лизоцима при 7ГС, обнаруженного с помощью ультразвуковой инактивации (см. рис. 19). Об этом же свидетельствуют и данные по изучению лизоцима, полученные методом дисперсии оптического вращения )[74, 75], по которым структурный переход фермента в нейтральной области pH происходит в температурном интервале 75—80° С. [c.162]

К необратимой денатурации относят также изменения (свертывание), вызываемые в белках нагреванием (тепловая денатурация). В отношении тепловой денатурации растительные белки отличаются большей устойчивостью по сравнению с белками животного происхождения. Кислоты и щелочи ускоряют денатурацию. [c.449]

Ферментативные реакции характеризуются также наличием колоколообразной зависимости скорости реакции от температуры в достаточно широком температурном интервале (что приводит к температурному оптимуму реакции). Эта особенность влияния температуры на кинетику ферментативных реакций объясняется наложением двух эффектов — возрастанием скорости реакции при увеличении температуры и ускорением тепловой денатурации белковой молекулы, приводящей к инактивации фермента при высоких температурах. Ясно, что при достаточно корректной постановке эксперимента оба эти явления можно изучать раздельно (см., например, 9 этой главы). [c.266]

В таблице 8 приведена температурная зависимость скоростей тепловой денатурации р-лактоглобулина [7]. Найти энергию активации денатурации, а также значения стандартных энтальпии и энтропии активации реакции. [c.71]

Для уплотнения макаронного теста его подвергают механической обработке. Наиболее распространены теплый замес на воде с температурой 55—56 С. При этом более равномерно идет набухание компонентов муки, образование клейковины и не происходит денатурации белков. Полученное тесто после вакуумной обработки подвергают прессованию. Прессование проводят через специальные матрицы, форм отверстий которых и определяет тип и вид макаронных изделий. Температурный режим прессования влияет на гидратацию клейковинных белков, повышение температуры может привести к их частичной коагуляции, а- также окислению пигментов. Сырые макаронные изделия подсушивают, обдувая воздухом, а затем, после резки и раскладки, направляют на сушку. При сушке происходит потеря белками и крахмалом влаги, тепловая денатурация белков, возможен их частичный гидролитический распад и клейстеризация крахмала. [c.111]

До сих пор мы говорили лишь о тепловой денатурации ДНК, обусловленной энтропийной выгодностью денатурированного клубкообразного состояния. Энергия молекул ДНК и других нуклеиновых кислот меньще в спиральном состоянии, которое поэтому является устойчивым при достаточно низких температурах. В энергетический баланс молекул нуклеиновых кислот вносят существенный вклад не только внутри- и межмолекулярные водородные связи и взаимодействие гидрофобных групп, но и электростатическое взаимодействие заряженных групп цепи. Поэтому температура денатурации нуклеиновых кислот зависит от степени ионизации макромолекул, определяемой концентрацией водородных ионов, а также от ионной силы раствора, т. е. от концентраций других низкомолекулярных ионов. [c.371]

Для глобулярных белков, таких, как яичный альбумин, необходимо было выяснить, не приводит ли солюбилизация углеводорода к денатурации. Для этого исследовали изменение вторичной структуры белка (методом оптического вращения) и третичной структуры (ро определению вязкости) до и после солюбилизации углеводорода в широком интервале pH. Опыты показали, что удельное оптическое вращение растворов яичного альбумина в интервале pH = 4,5— 10,5 оставалось постоянным и немного уменьшалось после введения бензола, вязкость после солюбилизации также уменьшалась вследствие понижения асимметрии молекул. Все это свидетельствует о том, что глобулы яичного альбумина после солюбилизации становятся более компактными и не происходит денатурация. Далее выяснялось Влияние солюбилизации на конформационную устойчивость яичного альбумина к тепловой и кислотно-щелочной денатурации. Оказалось, что глобулы яичного альбумина, солюбилизировавшие бензол, становятся более устойчивыми к тепловой денатурации 0,55%-ный водный раствор яичного альбумина денатурирует при 60°, а После солюбилизации углеводорода — при 70°. [c.395]

В работе [87] проведено также измерение кругового дихроизма для поли-А при нейтральном pH. Полученные термодинамические параметры тепловой денатурации приведены в. табл. 7. [c.194]

Различия в высшей структуре нуклеиновых кислот легко обнаруживаются по гиперхромному эффекту после тепловой или химической денатурации или после химического или ферментативного гидролиза. Важную информацию можно также получить при помощи других аналитических методов о гетерогенности по мол. массам, химическом составе и размерах молекул — методами ультрацентрифугирования [19, 35], о соответствии (комплементарности) первичной последовательности в двух полинуклеотидах— методами гибридизации [36, 37], о размерах и [c.68]

К заключению о правомерности использования модели двух состояний склоняют также данные прецизионных измерений П.Л. Привалова и H.H. Хечинашвили тепловых эффектов (ДН) тепловой денатурации метмиоглобина, а-химотрипсина, рибонуклеазы, лизоцима и цитохрома с [39]. Для этих белков отношение ДН /ДН (ДН — зависящая от принятой модели вант-гоффовская энтальпия) равно 1,05 0,03. Отклонение весьма незначительно, и поэтому денатурацию пяти белков можно рассматривать в первом приближении как кооперативный переход между двумя количественно разными макроскопическими состояниями, при котором промежуточные формы неустойчивы и присутствуют в незначительных количествах. Двухстадийный процесс денатурации, согласно П.Л. Привалову [40] и Т. Крейтону [18], обычно имеет место у однодоменных белков. [c.350]

На основании результатов исследования тепловой денатурации 7-глобулина по изменению удельного оптического вращения и оптической плотности при разных температурах [161] были определены изменения энтальпии конформационных переходов (АЯ). Полученные величины АН показывают, что связывание углеводородов белками приводит к увеличению теплоты денатурации или, что то же самое, к повышению устойчивости нативной глобулярной конформации белка по отношению к денатурации теплом. При этом связывание 7-глобулином гептана увеличивает теплоту денатурации на 10 ккал/моль (от 55 до 65 ккал1молъ), связывание декана и тетрадекана — от 55 до 57 ккал1моль. Этот факт очень хорошо объясняется особенностями заполнения глобул белка этими углеводородами, что будет рассмотрено ниже. Спектрофотометрическое исследование тепловой денатурации 7-глобулина также показало повышение устойчивости молекулы белка в ре- [c.31]

Денатурация может быть вызвана добавлением кислоты (в количестве более 1 вкв), что приводит к разрыву водородных связей и расталкиванию положительно заряженных оснований в гидрофобном ядре . Уменьшение ионной силы раствора до величин менее 10 М или добавление щелочных соединений, мочевины, солей гуанидиния, неводных растворителей или же нагревание также вызывают денатурацию. Факторы, вызывающие денатурацию, взаимосвязаны например, при возрастании концентрации мочевины тепловая денатурация происходит при более низких температурах. [c.320]

В поисках причин, ограничивающих жизненные процессы рамками определенных температур, исследователи сталкиваются с белками, которые являются основным строительным материалом протоплазмы, и ферментами, которые также обладают белковой природой. Известно, что белки весьма чувствительны к температуре и легко подвергаются необратимой тепловой денатурации. Границы этой температуры близки к верхним границам жизни (50—60Х). [c.89]

Если титрование ДНК от нейтральных значений pH до pH 2,6 и в обратном направлении при 25° приводит к необратимому разрушению двухспиральной структуры, связанной водородными связями, как это ясно из гистерезиса, то при титровании до промежуточных значений pH получается ряд обратных кривых, из которых могла быть рассчитана доля разорвавшихся водородных связей [206]. Если происходит разрыв водородных связей только на 10—15%, то они могут заново образоваться при возвращении к нейтральным значениям pH, но разрушение водородных связей на 75% или более приводит к возникновению нестабильной структуры, которая быстро разрушается до беспорядочной денатурированной формы. Тепловая денатурация может сопровождаться также прогрессирующим смещением кривых при титровании в прямом направлении от pH 7 до 3. Быстрый необратимый разрыв водородных связей происходит при температуре выше 75°, а смещение кривых титрования [c.563]

При охлаждении оптическое поглощение понижается до более низкого значения, причем окончательная величина ма с зависит от скорости охлаждения и ионной силы. При этом полной обратимости обычно не наблюдается, а величина оптического поглощения у ДНК, полностью денатурированной нагреванием, составляет 70—80% (а не 60%) от вычисленной величины, т. е. емакс приблизительно равна 7500—8500 [264, 266]. Вследствие того, что это увеличение оптической плотности происходит при тепловой денатурации, кривые для критических температур денатурации могут быть также получены путем нагревания растворов ДНК в течение 1 час с последующим охлаждением до комнатной температуры и определением оптического поглощения, хотя этот метод и менее изящен [264[. Тем не менее в ранних работах, в которых использовался этот метод, было показано, что дезоксирибонуклеиновые кислоты из различных источников (зобная железа теленка, лягушка и оболочка морской звезды) различаются по своей чувствительности к нагреванию и что увеличение концентрации соли (от 10"- М до 1 М хлористого натрия) оказывает защитное влияние против денатурации при 100°. С полной очевидностью было показано-также, что при температурах вплоть до температуры денатурации оптическая плотность ДНК остается постоянной [264[. [c.585]

Хотя при денатурации вследствие разрыва водородных связей и происходит разрушение спиральных структур до беспорядочно свернутых образований, при этом далеко не всегда наблюдается двукратное уменьшение молекулярного веса, которое соответствует разделению двух цепей. Однако необходимо помнить, что определение молекулярного веса часто проводится в условиях, в которых может происходить денатурация (высокая температура, предельные значения pH, концентрация ДНК и ионная сила ниже 10 М). и, по-видимому, причина отсутствия изменения в молекулярном весе кроется в том, что при быстром разрушении структуры в какой-то момент была достигнута критическая точка денатурации. В результате этого небольшие участки молекулы, связанные водородными связями, могли переплестись и образовать беспорядочно скрученную структуру, что препятствовало дальнейшему ее разрушению. Из свойств олигонуклеотидов, синтезированных химическим или ферментативным путем, ясно, что участки, состоящие из 3—6 пар оснований, связанных водородными связями, имеют достаточные размеры, чтобы препятствовать диссоциации двух цепей. В тех случаях, когда денатурированная ДНК сильно вытянута (низкая ионная сила), диссоциация возможна. Недавними работами показано, что в 0,2 М солевом растворе тепловая денатурация ДНК сопровождается внутримолекулярной ассоциацией, а также возникновением большого числа разнообразных конфор- [c.603]

Тепловая денатурация ДНК приводит также к весьма резкому уменьшению величины двойного лучепреломления и увеличению угла ориентации в ее растворах [115—119, 122], что указывает на переход к более свернутой конформации молекул и на уменьшение степени их внутренней упорядоченности при нарушении биспиральной структуры Уотсона — Крика. Количественные данные о динамооптических свойствах макромолекул ДНК в денатурированном состоянии практически отсутствуют. Несколько более полная (хотя далеко еще не достаточная) информация, имеющаяся для нативных образцов ДНК, будет рассмотрена позднее. [c.612]

Дилатометрические определения показали, однако, что тепловая денатурация белков не сопровождается заметными изменениями в объеме [131, 132]. Гидратация денатурированных белков во влажном воздухе также оказалась лишь немногим меньше, чем гидратация нативных белков. Это означает, что денатурированные и нативные белки обладают примерно одинаковой способностью связывать воду [28, 133]. [c.148]

В известной мере можно также объяснить и обратный процесс — процесс восстановления хромосомных поломок в условиях репарации клетки [9, 48, 50]. Если в механизме хромосомных поломок большое значение могут иметь денатурационные, физико-химические повреждения структуры ДНК, то легко представить и восстановление этих физико-химических повреждений. Процесс ренатурации ДНК в растворе после тепловой денатурации хорошо изучен [63]. Восстановление хромосомных поломок в облученной клетке, которая поставлена в специальные госпитальные условия, можно, по-видимому, рассматривать как процесс физиологического отжига . В условиях репарации необходимо направленное изменение метаболизма в клетке, чтобы поддержать в ней определенные физико-химические условня, при которых может происходить восстановление денатурационных изменений в структуре ДНК [4, 51]. С денатурационными повреждениями структуры ДНК могут быть связаны и потенциальные повреждения клетки [10]. [c.70]

Большая группа экспериментальных данных свидетельствует о том, что конформация молекулы лизоцима и ориентация функциональных групп его активного центра сходны, возможно идентичны, в кристалле и в растворе. К ним относятся, например, результаты сравнительного изучения денатурации растворимого и кристаллического (тетрагонального) лизоцима нод действием температуры и денатурируюпщх агентов с номон ью дифференциальной сканирующей калориметрии [35]. В этой работе было показано, что термодинамические параметры тепловой денатурации фермента и температура денатурацнп близки для фермента в кристалле и растворе. Далее, денатурирующее влияние алифатических спиртов также оказалось одинаковым по отношению к лизоциму в двух физических состояниях, и анализ данных показал, что конформация молекул лизоцима в растворе или кристалле одинаково зависит от гидрофобных взаимодействий с раствори- [c.155]

НОВЫХ остатков. Для остатков Фен и Тир не сделано индивидуального отнесения, но Коэн и Жардецкий [22] обнаружили слабопольное смещение пиков, относящихся к этим остаткам, при тепловой денатурации или денатурации под действием мочевины. Это свидетельствует о взаимном экранировании (см. разд 1.11) остатков Фен-3, Фен-34 и Фен-38, которые расположены близко друг к другу в свернутой молекуле, а также о взаимном экранировании Тир-20 и Твр-23. Тир-53 относительно удален от других ароматических остатков и для него можно ожидать значительно меньших эффектов. [c.358]

Белок может стать устойчивым к тепловой денатурации или денатурации новерхностноинактивным соединением, например мочевиной [1901. Возможна также стабилизация белка по отношению к различным факторам, вызывающим его осаждение например, в присутствии поверхностноактивных веществ многие используемые в иммунологии реакции осаждения не имеют места. [c.261]

Влияние температуры на активность ферментов. Согласно закону Ваит-Гоффа скорость химических реакций увеличивается примерно вдвараза при повышении температуры на (О С (коэффициент Q ,). Это прааило справедливо также и для ферментативных реакций, однако только а ограниченной области значений температуры. При повышении температуры свыше 40 — 50 происходит инактивация белкового катализатора из-за тепловой денатурации. Следовательно, ферментативные реакции отличаются от реакций, катализируемых соединениями небелковой природы, наличием температурного оптимума. Причиной быстрого падения активности является высокая величина коэффициента Qio для процесса тепловой денатурации белка. Следует отметить, что ферменты термофильных бактерий имеют весьма высокий температурный оптимум. [c.185]

Сравнение данных по измерению удельного оптического вращения и дисперсии оптического вращения глобулярных белков в водных растворах и растворах, насыщенных углеводородом, позволило сделать вывод, что солюбилизированный углеводород практически не изменяет содержания спиральных структур в глобулах белков. Влияние солюбилизации углеводорода на устойчивость глобулярных белков к тепловой денатурации изучалось на примере яичного альбумина при pH 7,2, химотрипсина при pH 4,25 и 7-глобулина при pH 9,2 — по изменению удельного оптического вращения. Тепловая денатурация у-глобулина при pH 9,2 оценивалась также спектрофотометрически, а тепловая денатурация трипсина при pH 3,75 — по снижению ферментативной активности. [c.30]

Влияние солюбилизации бензола на тепловую денатурацию химотрипсина изучалось также по изменению удельного оптического вращения во времени при 60° С (рис. 10, б). Скорость денатурации химотрипсина при 60° С в отсутствие бензола значительно больше скорости денатурации а-химотрипсипа, насыщенного бензолом. Скорость денатурации чистого а-химотрипсина, измеряемая по изменению удельного оптического вращения, составляет 0,05—0,07 град/ мин, тогда как с бензолом — 0,01 граЫмин. Эти результаты также показывают, что вследствие солюбилизации углеводорода глобулы белков приобретают дополнительную устойчивость к тепловой денатурации. [c.30]

В некоторых других видах РНК также обнаружено формирование спиральных структур. Сообщалось, например, что комплементарная РНК (стр. 237), получаемая ферментативным путем in vitro на ДНК (как на матрице), выделенной из бактериофага Т2, содержит при определенных условиях высокоупорядоченную двойную спиральную структуру, сходную с таковой ДНК [74]. Однако это, по-видимому, не относится к информационной РНК, присутствующей в полисомах (стр. 281). Форму двойной спирали имеют также РНК различных вирусов, в том числе РНК реовируса раневой опухоли и репликативных форм вируса полиомиелита [36, 74, 75], вируса Сендай [76] и вируса эпцефаломиокардита [77]. Об этом свидетельствуют результаты, полученные при определении относительного содержания комплементарных оснований и при изучении тепловой денатурации о том же говорят и устойчивость к панкреатической рибонуклеазе и отсутствие реакции с формальдегидом, а также данные рентгеноструктурного анализа 178, 95]. [c.59]

Образование формы I наблюдается также при денатурации циклических ковалентно-замкнутых ДНК в присутствии формальдегида Нагревание ДНК I вируса полиомы в присутствии формальдегида приводит к образованию молекулы, седиментирующей с той же скоростью, что и ДНК И, однако не имеющей разрывов. Формальдегид, присоединяясь по денатурированным за счет нагревания участкам, препятствует их последующей спирализации при охлаждении Электронная микрофотография обработанной таким образом ДНК вируса папиломы показывает, что после обработки образуется смесь сверхспирализованных и плоских циклических ДНК, причем относительное содержание последних в смеси растет с повышением температуры обработки. Максимальное число плоских молекул образуется при 42° С при этой температуре найдено всего лишь 8% сверхспирализованных молекул. Однако при повышении температуры их число снова увеличивается. ЭтЪ означает, что процесс тепловой денатурации происходит таким же способом, как и щелочная денатурация форма I превращается в плоскую форму Г, которая затем снова образует сверхспиральную структуру, но ул<е с противоположным направлением сверхспирали. [c.271]

Что касается низкой гетерогенности бактериальных ДНК по составу (но не обязательно по последовательности), то она очевидна также из данных по определению плотности ДНК методом ультрацентрифугирования в градиенте плотности [245, 246[. При изучении большого числа дезоксирибонуклеиновых кислот вновь была найдена линейная зависимость между плотностью ДНК и содержанием гуанина и цитозина. Экстраполирование этих результатов показало, что двойная спираль из аденин-тиминового полидезокси-нуклеотида должна иметь плотность 1,662, а плотность соответствующего гуанин-цитозинового полимера должна быть 1,764. Если известна плотность нативной ДНК и ее величина укладывается между этими крайними значениями, то это позволяет точно определять состав ДНК. Соответствующие денатурированные ДНК имеют плотность на 0,015 выше. Если гетерогенность двух препаратов ДНК из животных тканей удалось выявить по увеличению ширины полос, то бактериальные нуклеиновые кислоты характеризуются узким распределением по составу (половина ширины полосы соответствует 3—5 мол. % гуанина + цитозина по сравнению с 11 % для ДНК из зобной железы теленка), а распределение по составу ДНК бактериофага настолько узко, что его не удалось измерить. Избирательная тепловая денатурация ДНК из зобной железы теленка (с низким содержанием гуанин-цитозиновых пар) дает фракцию нативного препарата с более высокой плотностью, чем плотность исходного препарата, из которого она была выделена [245[. [c.577]

Как уже упоминалось ранее, повышение температуры растворов нативной ДНК приводит к плавлению участков, удерживаемых водородными связями между парами оснований. Тепловая денатурация есть кооперативное разрушение упорядочененной структуры в узком температурном интервале [264]. Для растворов большинства ДНК в нормальных условиях критическая температура плавления превышает 75° [240[. Ниже этой температуры оптическое поглощение фактически постоянно от 0° до температуры плавления , причем ультрафиолетовое поглощение измерялось иепосред-ственно при данной температуре [267[. Далее, во всей этой области температур оптическая плотность не зависит также от ионной силы (от 10 /М до I М хлористого натрия), хотя с понижением ионной силы критическая температура плавления также понижается. При этой и более высоких температурах происходит сильное увеличение [c.584]

Обычно денатурация ДНК отражает разрушение упорядоченной вторичной структуры, которое происходит в результате разрыва водородных связей. Этот разрыв может происходить при увеличении температуры, при обработке ДНК кислотой или щелочью, а также при уменьшении концентрации ионов (включая и цротивоионы) до величины, ниже критической. По-видимому, для начала денатурации ДНК необходим разрыв нескольких водородных связей, но далее этот процесс протекает кооперативно, т. е. разрушение более слабых участков двойной спирали (в случае тепловой денатурации эти участки могут состоять в основном из адениновых и тиминовых остатков) уменьшает стабильность соседних участков и ведет к быстро прогрессирующему разрушению структуры. Таким образом, различия в степени денатурации данного препарата отражают гетерогенность образцов ДНК по составу [c.602]

Описаны аналогичные опыты по иммунологическому изучению тепловой денатурации и ренатурации ДНК из бактериофага Т4 [317]. Глюкозилировапные оксиметилцитозииовые остатки, по крайней мере частично, отвечают за образование антител. Эти детерминирующие группы вполне доступны в денатурированной ДНК. но не в нативной или ренатурированной ДНК. Таким путем удалось показать, что процесс ренатурации ДНК является бимолекулярным, зависит от ионной силы и характеризуется оптимумом температуры при 55". Доказана также и гетерологическая ренатурация ДНК из фагов Т2 и Тб [317]. [c.608]

Посмотрим, например, на типичную кривую изменения оптической активности при необратимой денатурации яичного альбумина теплом (рис. 27). Еще интереснее явление обратимой тепловой денатурации трипсина. Известно, что этот фермент может подвергаться кипячению, однако после охлаждения он восстанавливает свою функциональную активность. Такая стойкость к денатурации связана с наличием в нем 6 днсульфидных связей. Оптическая активность трипсина также восстанавливается почти до первоначального значения (рис. 28). Однако мы не можем а priori утверждать, что упорядоченная правовращающая структура белка, которую мы разрушаем при нагревании, — обязательно а-снираль. [c.70]

Наши рассуждения по поводу значения метастабильного состояния структуры ДНК в радиационном эффекте на клетку основываются на фактах, устанавливающих эти состояния структуры ДНК как в клетке, так и в растворе. Дашкевич [7] показала, что в регенерирующей печени увеличивается фракция ДНК, переходящая в интерфазный слой после обработки хлороформом. Об этом свидетельствуют также данные Рольфа [69, который выделил из бактериальных клеток фракцию ДНК, обладающую высокой затравочной активностью. Тихоненко [30, 78], исследуя механизм тепловой денатурации ДНК в растворе, показал, что переход ДНК в интерфазный слой после обработки хлороформом связан с метастабильным состоянием структуры ДНК. [c.67]