Концевые группы идентификация

В случае углеводов классическим методом идентификации концевых групп служит исчерпывающее метилирование. Многократная обработка метилирующим реагентом, например диметилсульфатом, превращает все свободные ОН-группы в ОСНз-группы. Полный кислотный гидролиз с последующим разделением метилированных сахаров и их количественным определением позволяет оценить число концевых звеньев (содержащих четыре метоксильные группы), число звеньев в неразветвленных участках цепи (содержащих по три метоксильные группы) и число точек ветвления (содержащих по две метоксильные группы). Кроме того. [c.176]

Метод ЯМР спектроскопии высокого разрешения позволяет быстро и относительно просто получить значение среднечисленной молекулярной массы полимера в пределах 1-20 тысяч, т.е. для олигомеров. Молекулярная масса определяется по отношению суммарной площади сигналов всех протонов всех элементарных звеньев макромолекулы к площади сигналов от протонов концевых групп. Идентификация концевых групп проводится либо ЯМР спектроскопическим, либо другим независимым методом анализа. [c.269]

Следующий шаг после идентификации концевых групп - расщепление белковой молекулы на фрагменты [c.25]

С помощью химических реакций белков решается ряд практических и теоретических задач. Так, одной из них является изучение порядка чередования аминокислот в полипептидных цепях и определение их концевых групп. Обработка белка различными селективными реагентами часто применяется для идентификации структуры групп, обусловливающих его биологическую активность, т. е. для выяснения взаимосвязи между химическим строением белка и его функцией. Наконец, этим же путем удается получить модифицированные белки, которые находят широкое применение в промышленности и медицине. [c.62]

Определение концевых групп заключается в идентификации аминокислотных остатков на концах пептидной цепи. Применяемая методика основана на том, что остатки на концах цепи отличаются по свойствам от всех остальных звеньев и друг от друга один (N-концевой остаток) содержит свободную аминогруппу, а другой (С-концевой остаток) — свободную карбоксильную группу в а-положении к пептидной связи. [c.1048]

При стабилизации полиамидов уксусной кислотой определение ацетильных концевых групп возможно при гидролизе полимера с последующим разделением и идентификацией уксусной кислоты, образующейся при гидролизе. [c.239]

Совершенно очевидно, что если разделить все полученные олигонуклеотиды и для каждого из них определить концевое звено, противоположное меченому, то после расположения всех фрагментов в порядке возрастания длины можно реконструировать последовательность исходного олигонуклеотида. Таким -образом, проблема заключается в разделении продуктов и идентификации их концевых групп. [c.318]

Полярографические методы открывают особые возможности для точного определения концевых групп, добавок или примесей в полимерах, например непрореагировавшего мономера, пластификаторов, катализаторов, ускорителей, ингибиторов, осушителей, следов металлов и т. д., а также для определения чистоты сырых материалов. Можно анализировать как неорганические, так и органические соединения. Полярограммы можно использовать для идентификации и одновременного определения нескольких веществ в смеси при концентрациях до 10" М. Потенциалы полуволн многих органических соединений перечислены в табл. 56. [c.366]

Полярографические методы открывают особые возможности для точного определения концевых групп, добавок или примесей, например, непрореагировавшего мономера, пластификаторов, катализаторов, ускорителей, ингибиторов и пр. Полярограммы можно использовать для идентификации и одновременного определения нескольких веществ в смеси при концентрациях до 10 моль. [c.511]

Применение частичного и полного гидролиза, метода анализа концевых групп и идентификации пептидных фрагментов для выяснения структуры полипептидов и даже белков низкого молекулярного веса лучше всего проиллюстрировать на некоторых примерах. Поскольку эти примеры включают антибиотики, гормоны, токсины и ферменты, рассмотрим каждую группу в отдельности. [c.407]

Анализ концевых групп является классическим методом химии белков, в котором К- и С-концевые аминокислоты каждой полипептидной цепи определяются с помощью специфических реагентов или ферментативным гидролизом. Во многих случаях бывает трудно рассчитать число полипептидных цепей на основе анализа концевых групп только потому, что выход концевой аминокислоты после ферментативного гидролиза или химической реакции иногда оказывается очень низким. Другая трудность при идентификации полипептидных цепей с помощью анализа концевых групп заключается в том, что аминогруппа Н-концевой аминокислоты может быть заблокирована ацетильной группой. [c.401]

Определение природы концевых групп полинуклеотида и идентификация концевого остатка нуклеозида — одна из первых задач, которые встают при установлении структуры нуклеиновых кислот и олигонуклеотидов. Эта задача может быть решена идентификацией характерных фрагментов в продуктах полного расщепления полинуклеотида или специфической меткой концевых остатков нуклеозида. [c.45]

Наложение полос поглощения метиленовых групп ограничивает возможность применения полосы поглощения 1460 см" для идентификации метильных групп в соединениях неизвестного строения. Однако поглощение в области 1380—1378 см свободно от наложения и поэтому может быть использовано для структурных и количественных исследований. Мольный коэффициент погашения полосы 1380—1378 СМ увеличивается при переходе от пентана к гексатриаконтану от 33 до 56 единиц. Интенсивность поглощения на каждую концевую группу практически постоянна и составляет 12—15 единиц. [c.10]

Из данных, приведенных в табл. 55, очевидно, что при молек -лярном весе полимера выше 50 ООО невозможно с достаточной точностью определить концевые группы обычным химическим путем. Точное определение молекулярного веса таких полимеров возможно при замещении концевых групп остатками, содержащими радиоактивные атомы. Методы бумажной хроматографии для идентификации концевых групп после полной деструкции макромолекулы также приводят к повышению точности определения и расширению интервала молекулярных весов, для которых применим метод концевых групп. [c.190]

По содержанию и природе концевых групп в некоторых случаях получают цепную информацию для идентификации полимера и о методе его получения. Идентификация полимеров описана в [32]. [c.211]

Идентификация полимеров — установление тождества полимера с известным соединением по достаточному числу признаков. Для идентификации полимера необходимо больше параметров, чем для идентификации низкомолекулярного соединения. Следует учитывать ряд факторов, которые значительно усложняют интерпретацию полученных данных полимеры содержат молекулы различной длины, которые могут иметь различные концевые группы, разветвления в цепи макромолекулы, различное стереохимическое строение цепей и т. п. Большинство полимеров плохо растворимы, причем растворимость неодинаковых по длине и разветвленности молекул одного полимера может быть различной. [c.76]

В тех же работах описано применение метода распределения красителя для раздельной идентификации сульфатных (ОЗОз ) и сульфонатных (50з ) концевых групп, а также для определения сульфатных, сульфонатных, карбоксильных и гидроксильных концевых групп. Применимость этого метода в случае карбоксильных концевых групп была проверена в ходе количественных определений, проведенных на большом числе сополимеров, [1669], в которых один из сомономеров имел в своем составе функциональную карбоксильную группу. Концевые гидроксильные группы обычно определяли после их перевода в карбоксильные группы с применением фталевого ангидрида и пиридина [1670, 1671]. Сульфатные концевые группы разрушают гидролизом, протекающим в условиях такой обработки, после чего под действием фталевого ангидрида они превращаются в карбоксильные группы. [c.338]

В спектрах соединений не очень высокой молекулярной массы появляются слабые дополнительные полосы, вызванные поглощением концевых групп. Обычно это не имеет никакого значения для идентификации полимера, однако в некоторых случаях по этим [c.164]

В последующих работах выделенные из нормального человеческого глобина и разделенные методом противоточного распределения а- и р- Цепи подвергались расщеплению трипсином, химотрипсином и пепсином. Идентификация полученных пептидов, определение их аминокислотного состава. С- и N-концевых групп полностью подтвердили предложенную ранее структуру а- и р-цепей. [c.129]

В первых трех главах части 3 приведены исчерпывающие сведения по идентификации полимеров с помощью систематического анализа, цветных реакций и исследований с помощью микроскопа. Две последние главы посвящены описанию важнейших достижений в применении радиохимического анализа и анализа концевых групп для расшифровки сложного состава макромолекул. Вопросы, рассматриваемые во всех главах, тесно связаны с опубликованной литературой, указанной в конце глав. Эти две части содержат широкий обзор последних достижений в современных методах анализа полимеров и дополняют приведенные в первой части книги сведения о методах контроля, применяемых в заводских аналитических лабораториях. [c.5]

При определении структуры высокополимеров необходимо уметь идентифицировать структурные звенья и функциональные группы. Идентификацию таких функциональных звеньев в настоящее время проводят чаще физическими, чем химическими методами. В частности, абсорбционная спектроскопия сделала возможной достаточно простую и быструю идентификацию функциональных групп. Несмотря на зто, старые химические методы все еще находят определенное применение, поскольку количественное определение может быть выполнено с помощью химических средств более точно. Концевые группы, рассматриваемые в этой главе, определяются как реакционноспособные функциональные группы, находящиеся на концах цепей полимерных молекул. Эти группы отличаются по своему составу от полимерной цепи и присутствуют лишь в незначительных количествах. Функциональные группы, являющиеся частью повторяющегося звена, в этой главе не рассматриваются. [c.365]

Автор Реагент Продукт реакции с пептидом Конечная идентификация концевой группы [c.470]

К наиболее важным результатам работ в этой области относятся экспериментальные доказательства [621 существования циклических групп на конце полимера. Кроме общих трудностей определения и идентификации концевых групп в высокомолекулярных соединениях, в рассматриваемых системах возникают дополнительные проблемы. В реакции отсутствует стадия обрыва цепей, которая способна разрушить концевую циклическую группу, ответственную за рост. Однако это не является прямым доказательством существования активированного мономера. Гудман [901 синтезировал NKA бензилового эфира а-аминоадипиновой кислоты. Полимеризация этого мономера в диоксане при инициировании процесса метилатом натрия приводит к побочному продукту [c.597]

С помощью методов идентификации концевых групп уже определены NH2- и СООН-концевые остатки А и Z соответственно. Кроме [c.177]

При ограничении цепи алюминийалкилами часть макромолекул содержит на конце цепи химически связанный алюминий [25]. При передаче цепи на мономер в полимере образуются различные концевые группы, соответствующие полимеризуемым мономерам метиль-ные, этильные, винильные, винилиденовые, транс-вшц-леновые. Идентификация этих групп в ИК-спектрах по интенсивности полос поглощения 909, 888, 965 см- проведена в работе [19]. Показано, что распределение ненасыщенных связей по типам различно у ПЭ и СЭП. С увеличением содержания пропилена в сополимере возрастает как общее количество С = С-связей, так и доля винилиденовых групп (рис. 5.2). Образование винилиденовых групп, по-видимому, связано с протеканием реакции 3-гидридного переноса от последнего пропиленового звена на координированную молекулу сомономера [c.157]

Качественное опредЕлеине химического строения полимера (повторяющегося звена, концевых групп, других аномальных. чвсньев) включает приготовление образцов, определение спектра и его идентификацию. [c.73]

Принципиальным успехом в развитии тонкослойной хроматографии явилось применение этого метода для анализа высокополимеров. В 1968 г. первые исследования по ТСХ статистических полимеров выполнены Б. Г. Беленьким и Э. С. Ганкиной [1] и Инагаки с сотр. [2]. С тех пор основным направлением исследований по ТСХ полимеров стало использование этого метода для изучения полидисперсности полимеров (композиционной неоднородности, ММР) и идентификации (диагностики) полимеров различной микроструктуры [3—51. Используя ТСХ, удалось разделить статистические сополимеры по составу, идентифицировать статистические, блок- и альтернирующие сополимеры, диагностировать и разделить двух- и трехблочные сополимеры, разделить блок- и привитые сополимеры и сопутствующие им гомополимеры, идентифицировать и разделить стереорегулярные ПММА и ПС различной микротактичности, разделить геометрические изомеры ПБД и ПИ, идентифицировать линейные и разветвленные ПС, а также ПС с различными концевыми группами и отделить их от монофункционального и бифункционального ПС. Многочисленные исследования по ТСХ полимеров посвящены определению ММР гомополимеров, оценке М статистических сополимеров, определению ММР и функциональности олигомеров. [c.278]

Изменения активности некоторых белков коррелируются, как правило, с изменениями ряда физических свойств. Так, изменение формы белковой молекулы можно установить по изменению некоторых гидродинамических характеристик (например, коэффициента трения, инкремента вязкости), по изменению светорассеяния, поверхностных свойств, диффузии через полупроницаемые мембраны и скорости седиментации [90]. Изменения термодинамических свойств (энтальпии и энтропии), объема, растворимости, оптического вращения, поглощения в инфракрасной области, дифракции электронов, а также некоторые другие характеристики, приведенные Каузманом [90], используются для Оцейки изменений формы белковых молекул. Большинство этих измерений было проведено па макромолекулах неизвестной структуры, для которых не была установлена последовательность аминокислотных остатков. В настоящее время благодаря усовершенствованию методов деградации белков, аналитического определения Концевых групп, методов разделения и идентификации отдельных фрагментов можно успешно изучать белки с молекулярным весом порядка 20 ООО. Хотя эта работа еще не достигла молекулярного уровня, тем не менее она дает возможность лучше использовать значения физических констант белковой молекулы известной структуры для объяснения механизма взаимодействия фермента с субстратом. Структура такого белка, как фиброин (белковое вещество натурального шелка), в настоящее время хорошо изучена благодаря сравнению рентгенограммы и ИК-спектров нативного волокна с рентгенограммами [35, 38, 108, 140] и ИК-спектрами [168] небольших фрагментов белка известной структуры, полученных при деградации, а также синтетитегаихпмшнептидо [c.386]

Определение концевых групп, а. Группы NHg. Первьш и до настоящего времени важнейший способ определения аминокислоты аминного конца полипептидной цеш1 состоит в конденсацих белка с 2,4-динитро-фторбензолом. При гидролизе модифицированного таким образом белка концевые аминокислоты получаются в виде производных, замещенных у азота динитрофенильной группой, что значительно облегчает их выделение и идентификацию (Ф. Зангер, 1949 г.) [c.431]

Идентификация реакций П. ц. основана па структурпо-химич. методах (анализ концевых групп, разветвленности, структуры сополимера и т. д.) II кинетич. [етодах (исследование средних люл. масс п молекулярно-массового распределения). Примером использования первой группы методов является измерение количества галогена в полимере при П. ц. па га-логопсодержащпе соединения или анализ двойных связей в полимере при отщеплении водорода с конца цепи. При этом используют обычные химические плп фи-зико-хилшческие методы анализа (ИК-спектроскония, ЯМР и др.). [c.289]

Определению в полиэтилентерефталате концевых групп посвящены работы Поля [1100], Гриля и Нейе [1101]. Описана качественная идентификация полиэтилентерефталатного волокна, а также его в смеси с другими волокнами [1102—1111]. [c.39]

Опубликованный В. Керном и Г. Кэммерером Метод идентификации концевых групп имеет для подобных определений особенное значение. [c.16]

Полисахариды могут быть охарактеризованы с помощью таких методов, как гидролиз с последующей идентификацией образовавшихся моносахаридов или кислотный гидролиз полностью метилированных полисахаридов с последующим анализом продуктов гидролиза, имеющим целью определить местоположение связей. Применяют также целый ряд других методов. Один из них — использование очищенных ферментов для обнаружения специфических гликозидных связей и получения низкомолекулярных олигосахаридов с целью дальнейшего анализа. Многочисленные методы окисления используются для выявления числа последовательных неразветвленных звеньев первичной цепи. Идентификацию восстанавливающей концевой группы осуществляют, получая химическим путем те или иные производные. Однако, вероятно, самый полезный метод — это фрагментационный анализ . В основе этого метода лежит кислотный гидролиз, который не доводят до конца в результате такого гидролиза образуется ряд олигосахаридов, идентификация которых дает информацию о типе гликозидных связей (наличие ветвления и т. д.) в исходном полисахариде [40]. [c.168]

Титрование карбоксилатных концевых групп метилатом натрия в пиридине Определение серы потенциометрическим титрованием перйодатом калия в ледяной уксусной кислоте Потенциометрическое титрование нитратом серебрав водном изопропанола, а также идентификация ИК-спектроскопией [c.328]

Обзор работ ИЮПАК по анализу полиуретановых смол содержится в работе [683], где описаны методы идентификации изоцианатов, полиолов, жирных кислот, а также количественного определения изоцианатов и дикарбоновых кислот в смолах. Концевые группы — производные гидразина и 4,4 -диами-нодифенилметана — в мочевино-уретановых полимерах определяли путем титрования в неводных средах хлорной кислотой (растворитель диоксан). Для получения более резкого скачка потенциала в точке эквивалентности вводили хлорид лития и уксусную кислоту [684]. [c.557]

В настоящее время промьшшенное значение имеют в основном алифаг тические полиамиды [26]. Для их идентификации, определения состава сополиамидов, природы концевых групп используется ПМР-спектроскопия [27-31]. В спектрах ПМР большинства алифатических полиамидов наблюдаются характерные сигналы трех типов СНг-групп триплетный сигнал протонов СНг-групп, находящихся в а-положении к -МН-С (О)-группе (в области 3,2-33 мд.) триплетный сигнал протонов СНг-групп в а-положении к —С(О)-группе (в области 2Д-23 мд.) и мультиплетный сигнал протонов остальных СНг-групп, удаленных от -Ш-С(О) - и -С(О)-групп (в области 13 М.Д.). Идентификация полиамидов может быть проведена по соотношению площадей этих трех сигналов и форме мультиплета при 13 мд. Для сополиамидов, у которых сомономеры содержат различное число СНг -групп (например, для сополиамидов е -капролактама и со-доде-калактама [28]), состав определяется по соотношению площадей сигналов трех типов СНг-групп. Для сополиамидов, у которых сомономеры юнеют одинаковое число СНг-групп разных типов, например для сополиамидов -6/6,6, предложен [27] способ определения состава, основанный на разхш-чиях в форме сигналов СНг-групп в спектрах сополимеров разного состава. Этот способ, однако, недостаточно надежен, так как зависит от уровня [c.143]

В дальнейших исследованиях Сенгер разработал, а впоследствии довел до полного совершенства, метод, позволивший определять последовательность аминокислотных остатков в полипетидных цепях. При этом он исходил из следующих, сформулированных им на симпозиуме по аминокислотам и белкам в Колд Спринг Харборе в 1949 г. положений Методом динитрофенилирования можно определить природу концевых групп путем идентификации ДНФ-аминокислот (динитрофенил-амино-кислот.—Л. Ш.), полученных при гидролизе ДНФ-белка. Однако, если гидролизовать ДНФ-белок лишь частично, можно получить ДНФ-пептиды, исследование строения которых дает указания относительно природы аминокислот, расположенных в пептидных цепях вблизи концевых групп. ДНФ-пептиды довольно хорошо поддаются отделению от незамещенных пептидов и аминокислот путем экстракции органическим растворителем из подкисленного раствора и хроматографическим фракционированием на силикагеле. Смеси ДНФ-пептидов, полученные этим способом, гораздо менее сложны, чем продукты частичного гидролиза необработанного белка, так как отделяются только пептиды, содержащие М-концевые группы исходного белка. Для дальнейшего упрощения анализа последовательности аминокислот вместо инсулина были взяты очищенные фракции А и В, образующиеся при его окислении и содержащие только по одной концевой группе [37]. [c.133]

Метилирование полисахаридов играет неоценимую роль при выяснении типов связей между различными остатками моносахаридов. Идентификация индивидуальных метилированных сахаров в гидролизате метилированного полисахарида позволяет определить положение всех неметилиро-ванных гидроксильных групп в моносахариде, на основании чего можно сделать вывод, что атомы углерода, несущие эти свободные гидроксильные группы, участвуют в образовании связей этого моносахарида в полисахариде. Кроме того, по результатам метилирования можно также определить число остатков в средней повторяющейся единице, природу концевых групп и мест разветвления. [c.458]

Химия синтетических веществ в дальнейшем будет рассмотрена та-тим образом, что после сопоставления низкомолекулярной и высокомолекулярной химии в первую очередь будут обсуждены синтез и очистка высокомолекулярных веществ. Полимолекуляриость приводит к понятию идеальных и реальных высокомолекулярных веществ. Химическая идентичность двух высокомолекулярных веществ должна быть определена иначе, чем в химии низкомолекулярных соединений. Химическая идентификация не может быть проведена методами, обычными для химии низкомолекулярных соединений. В дальнейшем будет исследовано строение макромолекул, в особенности расположение звеньев основной цепи, концевых групп, инородных групп и разветвлений, обсуждены полимергомологические ряды, а также рассмотрено, как закладываются основы химии полимеров в иизкомолекулярных членах этих рядов. Химические превращения в цепях макромолекул, в зависимости от места, где они начинаются, будут подразделены па полимераналогичные превращения, реакции деструкции и реакции сшивания. [c.12]

Метод последовательного расщепления вирусной РНК впервые был разработан для РНК ВТМ и успешно использован для идентификации пяти крайних нуклеотидов с правого конца этой молекулы (фиг. 20) [471, 472]. Видно, ничто не мешает усовершенствовать этот метод до такой степени, что будет возможно отщеплять последовательно 10—20 нуклеотидов и идентифицировать их. Сущность метода состоит в окислении концевой гликольной группы (две соседние ОН-группы в т ис-положении) до двух альдегидных групп. Наличие альдегидной группы в положении 3 приводит к ослаблению эфирной связи при -угле-родном атоме (5 ), вследствие чего окисленный концевой нуклеозид отщепляется при комнатной температуре и pH 5 в присутствии анилина в качестве катализатора. Оставшуюся полинуклеотидную цепь, теперь уже с фосфорили-рованным концом, обрабатывают фосфомоноэстеразой, которая специфически отщепляет моноэтерифицированный фосфат. В результате возникает новая гликольная группа, и вышеописанные циклы окисления, -элиминирования и дефосфорилирования можно повторять до тех пор, пока не произойдет случайных разрывов в цепи и не появятся дополнительные ложные концевые группы, которые приведут к искажению результатов. Отщепленные окислен- [c.96]