Ферменты методы экстракции

Для выделения ацетилхолинэстеразы из эритроцитов используют метод экстракции фермента из стромы п е-лочным буфером в присутствии нейтрального детергента Твин-20 с последую- [c.53]

Эти методы служат для разрушения клеток и выделения ферментов в раствор. Если фермент локализован в органеллах, метод может быть использован только при условии, что органеллы также разрушаются. С другой стороны, может понадобиться предварительное выделение самих органелл, что позволит избавиться от загрязнения цитоплазматическими ферментами перед экстракцией фермента из органелл. Для этого требуется менее сильное воздействие. Предварительное растворение поверхностных коллагеновых и целлюлозных структур препаратами гидролитических ферментов позволяет в дальнейшем разрушать клетки более мягкими способами, сохраняя целостность органелл. Примером подобной методики служит получение препаратов митохондрий из таких тканей, как скелетная или сердечная мышцы, под действием протеолитических ферментов [6]. Однако эта методика применима только для получения препаратов в небольших масштабах и больше подходит для. метаболических исследований органелл, чем для очистки ферментов. Выход очищенных органелл может быть очень низким, поэтому во многих случаях лучше сначала разрушить всю ткань, а затем уже приступить к выделению нужного фермента из сложной смеси белков в экстракте. Таким образом, ферменты митохондрий и хлоропластов часто получают из тканевого гомогената, а не из выделенных органелл. [c.42]

Исчерпывающее обсуждение методов экстракции водорастворимых ферментов из мембран читатель найдет в другой работе [19]. Белки, связанные с мембранами, очевидно, отличаются по растворимости от типичных цитоплазматических ферментов, и для их очистки иногда применяются (и вполне успешно) некоторые необычные эмпирически найденные методы. [c.55]

Для выделения ферментов из материалов различного происхождения, их фракционирования и концентрирования разработано множество эффективных методов. К ним относятся кристаллизация [5—7], диализ, ультрафильтрация и концентрирование на полых волокнах (8—10], электрофорез [И—13, гл. 35], экстракция [14, 15], лиофилизация [16], преципитация и методы с использованием растворимых неионных полимеров [17, 18], зональное центрифугирование [19]. [c.9]

Смесь, состав которой хорошо известен, можно подвергнуть экстракции раствором, насыщенным по отношению ко всем растворенным компонентам, кроме одного. В этом случае в экстрагенте растворится только этот компонент и его можно количественно определить в экстракте. Экстрагирующий раствор можно также насытить только по отношению к главному компоненту исследуемого образца и тогда растворятся только примеси. Метод растворимости и различные его варианты применялись для исследования ряда аминокислот, сахаров, стероидов и ферментов [71]. Точность определения концентрации примеси может достигать 0,1%. [c.169]

Анализ продуктов жизнедеятельности организмов является одной из самых трудных задач биологии, химии и физики. В живом организме в процессе обмена веществ синтезируются и распадаются сложнейшие соединения (белки, углеводы, жиры, ферменты, витамины, гормоны и т. д.). Для очистки и разделения веществ в органической химии и биохимии широко применяются методы, основанные на различиях в упругости пара (обычная перегонка, перегонка с водяным паром, фракционная перегонка, перегонка в вакууме, сублимация и др.) и растворимости веществ (распределение между двумя несмешивающимися жидкостями, экстракция, осаждение специально подобранными веществами или изменением pH раствора и другие приемы). Бурное развитие химии в XX в. вызвало необходимость создания принципиально нового метода выделения и очистки природных веществ, применяемого в тех случаях, когда приведенные выше приемы вызывают глубокие изменения состава выделяемых веществ и когда последние находятся в природном материале в сложных смесях или в ничтожном количестве. Новый метод разделения веществ был открыт в 1903 г. выдающимся русским ученым М. С. Цветом и назван им хроматографическим методом. [c.5]

После разрушения клеток или тканей ферменты извлекают путем экстракции водой, буферными растворами или растворами нейтральных солей, а иногда и разбавленными растворами субстратов, стабилизирующих выделяемый фермент. В получаемом экстракте кроме ферментов содержится большое количество неактивных белков и ряд других соединений, для полного удаления которых требуется сочетание различных методов. Для удаления низкомолекулярных веществ экстракт диализуют против воды или разбавленных буферных растворов. Во многих случаях диализ заменяют гель-фильтрацией через сефадекс. [c.199]

Первым этапом анализа ДНК является экстракция ДНК из любой ткани, содержащей ядерные клетки с последующей ее очисткой. Далее геномную ДНК анализируют с помощью полимеразной цепной реакции (ПЦР) или подвергают расщеплению ферментами рестрикции — рестриктаза-ми, распознающими специфические последовательности нуклеотидов и гидролизующими ДНК на ряд фрагментов рестрикции . Последние могут быть разделены методом электрофореза или подвергнуты денатурации нагреванием до однонитевых фрагментов, которые затем переносят на нейлоновый фильтр или нитроцеллюлозную мембрану. Таким образом сохраняется пространственное расположение фрагментов ДНК относительно друг друга. Полученный материал анализируется с помощью ДНК-зонда, представляющего собой фрагмент одноцепочечной ДНК, как правило, помеченный радиоактивным изотопом Р и содержащий специфическую последовательность оснований, комплементарную участку ДНК, который необходимо обнаружить. В качестве зонда можно использовать как нативную ДНК, специфичную гену (геномные зонды), так и синтетическую ДНК, полученную на основе РНК гена (комплементарная ДНК). Если анализируемая последовательность присутствует во фрагментах рестрикции, то зонд гибридизуется с ними, что можно обнаружить с помощью авторадиографии. [c.528]

Обсуждая проблемы получения очищенных ферментов, правильнее рассмотреть отдельные технологические стадии, не связывая их в единую технологическую линию. В любом случае, однако, схема очистки сводится к 1) освобождению от нерастворимых веществ 2) освобождению от сопутствующих растворимых веществ 3) фракционированию, как правило, хроматографическими методами. В подавляющем большинстве случаев на первом этапе используют экстракцию фермента. [c.126]

Предполагается, что ядерные белки играют определенную роль в регуляции экспрессии генов и в поддержании структуры хроматина, а некоторые из них являются ферментами, участвующими в синтезе нуклеиновых кислот. По химическим свойствам ядерные белки подразделяются на две группы основные и кислые. Выделяют ядерные белки либо из интактных очищенных ядер, либо из хроматина путем кислотной экстракции. При этом основные белки растворяются, а кислые остаются в осадке, и их обычно переводят в раствор с помощью ДСН. Методы выделения и фракционирования ядерных белков описаны в ряде прекрасных обзоров [148, 187, 770] и специальных статей [118, 147, 482, 635, 1002, 1285]. [c.306]

Обычно ДНК фага % выделяют из препарата фага фенольной экстракцией, проводя затем экстракцию эфиром, чтобы удалить растворенный фенол. Нами обнаружено, что при использовании формамидного метода полученная ДНК содержит меньше одноцепочечных разрывов и обладает большей инфекционно-стью. Возможно, что при этом не удаляются фаговые белки, остающиеся в виде теней бактериофага. Мы не наблюдали, однако, чтобы при использовании таких препаратов ДНК каким-либо образом ингибировалась работа большинства ферментов. По-видимому, при обработке формамидом ДНК фага выпрыскивается через хвостовой отросток. [c.83]

Белки и липиды различаются по многим физическим и биохимическим свойствам, что дает возможность простыми методами определить принадлежность изучаемого антигена к тому или иному классу соединений. Белковые антигены быстро разрушаются при мягкой обработке проназой, в то время как липидные антигены не подвержены действию протеолитических ферментов. В отличие от большинства белковых антигенов антигены липидной природы устойчивы к фиксации формальдегидом с последующим нагреванием до 80 °С. Эту процедуру можно проводить как с суспензиями отдельных клеток, так и со срезами тканей. Экстракция нативных или фиксированных формальдегидом клеток кипящим метанолом в течение 1 мин приводит к растворению части клеточных липидов, и метанольный экстракт в ряде случаев можно использовать без дальнейшей очистки для твердофазного радиоиммунологического анализа (РИА). Использование РИА описано в разд. IV. [c.160]

Первые высокоочищенные препараты ацетилхолинэстеразы нервной ткани были получены Нахманзоном и Розенбергом [93]. Эти авторы использовали в качестве источника фермента наиболее богатую ацетилхолинэстеразой ткань электрического органа Е1е- trophorus ele tri us. Методом экстракции и фракционирования сульфатом аммония были получены препараты с выходом 15% и удельной активностью 2170 Е/мг. При ультрацентрифугировании раствора фермента удалось получить в три раза больший по активности препарат. [c.165]

Для выделения летучих компонентов чаще всего используют методы экстракции, вакуумной перегонки, перегонки с паром, продувки потоком воздуха или инертного газа или сочетание этих методов. Разделение можно проводить при низких или высоких температурах. В условиях низких температур термическое разложение лабильных соединений сведено к минимуму, но при этом создаются благоприятные условия для ферментативных реакций. При высоких же температурах ферменты дезактивируются, но усиливаются такие процессы, как гидролиз и другие самопроизвольно протекающие реакции. Основными компонентами при улавливании летучих компонентов при низких температурах явлйются вода и двуокись углерода. Они не представляют интереса при анализе и перегружают хроматографическую колонку. Поэтому при выборе методики разделения следует исходить из двух основных моментов необходимо избежать осложнений, возникающих из-за температурных эффектов, и найти методы избирательного концентрирования летучих органических веацеств. [c.226]

Аллиин не имеет запаха чеснока и не обладает антибиотическими свойствами. Превращение аллиина в аллицин происходит под влиянием специфического фермента аллииназы, содержащегося в соке чеснока. Из чеснока, охлажденного до -40 С, аллиин можно вьщелить методом экстракции 80-85%-м этиловым или метиловым спиртом, затем экстракт смешивают с твердой СО2. В этих условиях аллиин выпадает в осадок в виде игольчатых кристаллов. Под действием аллииназы аллиин превращается в аллицин с вьщелением пировиноградной кислоты и аммиака [c.390]

Более ранние биохимические исследования мембран касались главным образом их липидиой часги. Поэтому методы экстракции н анализа мембранных липидов были хорошо разработаны и основывались большей частью на примеиеиии органических растворителей. Липнды, составляюш ие обычно почти половину массы плазматической мембраны, ие только служат каркасом Для прикрепления белков, но и могут быть ответственными за активность ферментов, связанных с мембранами. Они имеют амфипатические свойства и обладают гидрофильными и гидрофобными концевыми участками. Большая часть липидов относится к фосфолипидам, а остальные — это гликолипиды и нейтральные липиды (в основном холестерин). Гликолипиды, по ВИдимому, располагаются лишь в наружной части двойного липидного слоя, что указывает иа его асимметрию. [c.41]

Тейхоевые кислоты являются одним из двух высокомолекулярных веществ, составляющих основу клеточных стенок грамположительных бактерий, где они соединены со вторым, биополимером — мукопептидом клеточной стенки. Тейхоевые кислоты — особый тип биополимера. Они содержат кроме углеводов и аланина многоатомные спирты — рибит или глицерин и остатки фосфорной кислоты. Тейхоевые кислоты выделяют из клеточной стенки, где их содержание составляет 20—50%, экстракцией 5%-ной водной трихлоруксусной кислотой . Полученные этим методом образцы тейхоевых кислот имеют молекулярный вес 4000— 5000 показано, что в этих условиях выделяется уже деградированный биополимер. Если предварительно выделенные стенки бактерий подвергнуть обработке ферментом, разрывающим связь тейхоевых кислот с другим ингредиентом стенки — мукопептидом, то с помощью электрофореза можно выделить тейхоевую кислоту с молекулярным весом около 2 ООО ООО,, которая, вероятно, является нативным биополимером. Из данных кислотного, ш,елочного и ферментативного гидролиза следует, что тейхоевые кислоты содержат остатки фосфорной кислоты, аланина, многоатомных спиртов — рибита или глицерина и одного из моносахаридов — глюко- [c.584]

Степень ФГ глюкоманнана, так же как и ксилана, зависит от способа подготовки препарата. Показано [13], что при хранении глюкоманнана, выделенного из холоцеллюлозы сосны щелочной экстракцией, его способность расщепляться под влиянием ферментов снижается. Несмотря на то, что метод выделения и химический состав этих препаратов были одинаковы, их растворимость и гидролизуемость различны. Осаждаемый спиртом иегидролизуе-мый ферментами остаток свежевыделенного препарата составляет 8,97о, а после выдержки при комнатной температуре в течение [c.230]

Если целевой продукт представляет собой растворимый Метаболит или он синтезируется внутри клетки и не секретируется вовне, то прибегают к другим методам выделения экстр)акцни, сорбции, осаждению, хроматографии, выделению с помощью мембран. Экстракцию проводят органическими растворителями из клеток (твердая фаза), например, антибиотика гризеофульвина ацетоном, или бензилпенициллина при pH 2,0—3,0 — бутил-ацетатом из культуральной жидкости после отделения клеток продуцента (система "жидкость-жидкость"), или, наконец, экстракция ферментов (в частности, пуллуланазы) в двуфазных водных системах, например, глюкана-декстрана и несовместимого с ним поли-этиленгликоля (ПЭГ-6000). [c.388]

Шведский ученый Пер-Оке Альбертсон предложил использовать для разделения бактерий, вирусов, фрагментов клеток, мембран, ядер, белков, нуклеиновых кислот и любых других частиц биологического происхождения двухфазные водные растворы полимеров — иолиэтиленгликоля, декстрана и их производных [2, 279, 280]. Фракционирование в двухфазной водной системе основывается на избирательном распределении частиц между этими фазами, аналогичном распределению растворимых веществ. Метод Альбертсона получил широкое распространение и используется во многих биохимических и микробиологических лабораториях, так как позволяет в мягких условиях, без нарушения структурной целостности и изменения нативных свойств осуществлять выделение и очистку лабильных биологических объектов, а также дать определенную информацию о их строении. Реализация этого метода в промышленном масштабе, например, для выделения вирусов или получения чистых ферментов, не встречает, по мнению автора, принципиальных трудностей, однако в очистке воды он не может быть использован. Очевидно, и любая другая модификация экстракции жидкость — жидкость неприменима при микробной очистке промышленных сточных вод и, конечно, такой метод совершенно непригоден для водоподготовки. [c.194]

Первые растворимые препараты ацетилхолинэстеразы из эритроцитов были получены в 1943 г. Менделем и Рэдни [86] экстракцией дистиллированной водой, адсорбцией на кизельгуре и элюцией 0,001 н. раствором NaOH. Растворы фермента обладали активностью, в 20—30 раз большей, чем исходный гемолизат, однако содержали гемоглобин и другие белки. Более совершенные методы [c.164]

Химический анализ природного соединения, как известно, включает в себя ряд общих процедур, таких, как экстракция, выделение, очистка и определение его химической структуры. Для извлечения неизвестных соединений обычно используют путь ступенчатой экстракции растворителями по мере возрастания их полярности петролейный эфир, бензол, серный эфир, этилацетат, спирты и вода. Преимуществом спиртовых экстракций перед водными является низкая точка кипения этих растворителей, однако в этом случае возможно расщепление эфирных связей, например эфиров фенолов с сахарами (Swain, 1965). Недостатки водной экстракции извлечение большого количества посторонних веществ, невозможность предотвращения действия всех ферментов, функцию которых не может устранить даже кипячение. Дифференцированный подход следует избирать и при выборе метода разделения веществ. Разделение на бумаге Ватман 3 ММ удобно применять в том случае, когда нужно получить до 0,5 г вещества, разделение на колонках — для выделения больших количеств вещества. Ниже приводится схема препаративного выделения, использовавшаяся для изолирования и идентификации природного ингибитора роста капусты (фенольное вещество, 12 мг из 500 г листьев), ивы (халконглюкозид, 75 мг из 1000 г листьев), гороха (кверцетин-гликозил-кумарат, 500 мг, п-кумаровая кислота, 10 мг) и кукурузы (л-кумаровая кислота, 4 мг из 250 г листьев). Из листьев гороха была выделена также кофейная кислота. [c.34]

Получают 3. обработкой дрожжей протеолитич. ферментом трипсином (по Пиллемеру) с последующей очисткой нерастворимого остатка 3. извлечением его водой и спиртом или фенол-водной экстракцией дрожжей. 3. используют для выделения пропердина из сыворотки или плазмы по методу Пиллемера и его модификациям, в основе к-рых лежит реакция образования пропердин-зимозанового комплекса и для определения титра пропердина в крови. [c.55]

Методы, используемые для экстракции рибонуклеиновых кислот, частично зависят от природы органа или организма. В одном из ранних методов, использованном Левиным 11], к густому тесту из дрожжей добавляли щелочь, смесь перемешивали с пикриновой кислотой, фильтровали и нуклеиновую кислоту осаждали из фильтрата добавлением соляной кислоты. Такая довольно жесткая обработка приводила к тому, что полученная нуклеиновая кислота значительно отличалась от нативной рибонуклеиновой кислоты. Для выделения рибонуклеиновых кислот, приближающихся по структуре к нуклеиновым кислотам живой клетки, необходимо избегать применения жестких условий (pH, тедтература) в то же время необходимо, насколько возможно, затормозить ферментативный распад. Широко применялась экстракция рибонуклеопротеидов изотоническим раствором хлористого натрия [2,3]. Белки от нуклеиновых кислот могут быть отщеплены различными методами, такими, как обработка смесями хлороформа с октиловым спиртом [4], додецилсульфатом натрия [5], нитратом стронция [6] или спиртом [7], а также расщепление белковой фракции трипсином [8]. И снова эффективность каждого метода определяется природой рибонуклеопротеида. Для инактивации ферментов в процессе экстракции полезно применение хлоргидрата гуанидина (денатурирующего агента) [9] для выделения рибонуклеиновых кислот и нативных рибонуклеопротеидов из дрожжей был применен метод. [c.364]

Экстракция растворимых белков из тканей может происходить только после разрушения клеточных оболочек, так как последние непроницаемы для больших белковых молекул. Разрушения клеток можно достичь механическим путем, растирая их с песком или с кизельгуром однако при этом наблюдается некоторая потеря белка за счет денатурации, вызываемой адсорбцией белка на силикате. По этой причине лучше разрушать клетки такими приборами, как мясорубка Латапи или гомогенизаторы. Структура клетки разрушается также при действии органических растворителей, например спирта, ацетона или глицерина. Если концентрация глицерина не превышает 85%, то в глицериновый экстракт переходит значительная часть растворимого белка. Этим способом можно экстрагировать гидролитические ферменты из поджелудочной железы и из других органов. Глицериновые экстракты при комнатной температуре относительно стабильны. Повидимому, рыхлая ассоциация белка с полярными гидроксильными группами глицерина уменьшает скорость его денатурации. Однако эти же полярные группы в молекуле глицерина обусловливают взаимное притяжение его молекул и высокую вязкость этого растворителя. Из глицериновых экстрактов очень трудно поэтому получить чистые препараты белков. В связи с этим глицерин в настоящее время редко применяется для разрушения клеточных оболочек. Вильштеттер и его сотрудники для разрушения клеток пользовались ацетоном. Этот метод основан на том, что многие белки при концентрации ацетона выше 80—90% денатурируются очень медленно. Для экстракции размельченный или пропущенный через мясорубку орган помещают в ацетон. Преимущество этой процедуры заключается в том, что ацетон не только разрушает клеточные оболочки, но одновременно экстрагирует из клеток и большинство липидов. Липиды можно затем удалить количественно при последующей обработке эфиром. Остаток после удаления липидов высушивается на листе фильтровальной бумаги и экстрагируется водой, разведенными растворами солей или буферов. Хотя большинство белков, в том числе много важных ферментов, можно получить из ацетоновых вытяжек в нативном состоянии, однако надо помнить, что некоторые лабильные белки при действии этого растворителя денатурируются. [c.10]

Биохимические реактивы в отличие от органических получают в основном микробиологическим синтезом в сочетании с методами биотехнологии, а также с экстракцией и тонким органическим синтезом. Основные биохимические реактивы и препараты - аминокислоты и их производные, пептиды и полипептиды, нуклеиновые кислоты, их компоненты и производные, ферменты, в том числе иммобилизованные. К ним относят также различные вспомогательные материалы и вещества для производства и использования препаратов - носители, активаторы, ингибиторы, субстраты, связуюище вещества, цеолиты, ионообменные смолы и т.п. Мировой ассортимент биохимических реактивов достигает по числу индивидуальных соединений 6-7 тыс. наименований, по числу товарных марок продукции - 10-14 тыс. и отличается большой изменчивостью. [c.63]

После экстракции ДНК подвергают иммобилизации на нитро-целлюлозном или нейлоновом фильтре, расплавлению и гибридизации с известными последовательностями генов, ответственными за синтез тех или иных специфических ферментов. Так, наличие в пробе тотальной ДНК генов, гибридизуемых с геном, кодирующим нитрогеназу, указывает на присутствие в анализируемом сообществе азотфиксаторов, генов метанмонооксигеназы — метанотрофов, генов РуБисКО — автотрофных микроорганизмов, фиксирующих углекислоту через цикл Кальвина. Расшифровано уже несколько десятков генов, кодирующих ключевые реакции тех или иных процессов, и, применяя метод гибридизации, можно делать выводы о наличии определенных микроорганизмов в анализируемой пробе. [c.256]

Применявшийся нами растворимый в воде без остатка препарат фермента был приготовлен ио методу Збарского и Михлина путем осаждения пахтанья ацетоном, обезжиривания, экстракции и осаждения раствором [c.527]

Углеводы экстрагируют из тканей водой или 80-процентным этанолом, как описано для аминокислот (см. раздел А,II). Исчерпывающая экстракция этанолом удовлетворительно извлекает моно-, ди- и некоторые полисахариды. Предельный молекулярный вес, при котором вещества еще извлекаются этим методом, пока неизвестен. Следует принять меры предосторожности, чтобы избежать химических изменений, вызываемых действием ферментов как перед, так и во время экстракции. Эти изменения можно свести к минимуму, проводя лиофилизацию пробы сразу после ее получения или проводя денатурацию свежей ткани кипящим 95-процентным этанолом. Последний процесс может привести к переводу некоторых редуцирующих сахаров в этилгликозиды. [c.550]

Технические жиры (ворвань) получают из подкожного сала, внутренностей, костей и мяса морских животных (китообразных, моржей, тюленей) нутом вытапливания с помощью пара под давлением. Для получения техпич, HiHpa из рыбьего сырья (маломерная рыба, рыба, механически поврежденная, отходы рыбоконсервного и филейного производства и т. п.) применяют сухое и мокрое жиротопление, а также прессование и экстракцию. Жиры из внутренностей рыб выделяют также ферментативным способом, при к-ром для расщепления соединительной ткани и освобождения жиров используются ферменты, содержащиеся в пищеварительном аппарате рыб. На механизированных предприятиях рыбное сырье перерабатывают в зависимости от содержания в нем жира на прессовых (при наличии в сырье не менее 6% Ж.) или на экстракционных установках. Экстракцию тощего рыбного сырья или муки, полученной с прессовых установок, производят бензином или трихлорэтиленом. Добыча китового жира обычно производится на китобойных базах, представляющих собой плавучие заводы сырье перерабатывается поточным методом. После разделки туши кита гладкое покровное сало перерабатывают при 100—110° и разряжении до 600 мм рт. ст. с целью получения медицинского жира. Полосовое сало и кости кита после предварительной распиловки перерабатывают в жи-)Отопочных котлах острым паром под давлением 4 ат. 1олученная разваренная масса поступает в жироотделители, где жир отделяется от воды и белковых веществ. После отстаивания в отстойниках жир очищается на жировых сепараторах и сливается в танки для хранения. Мясо и шквара перерабатываются па корм скоту. [c.35]

При выделении вирусов из таких тканевых экстрактов наилучшие результаты дают следующие методы а) дифференциальное центрифугирование б) осаждение сульфатом аммония в) центрифугирование в градиенте концентрации сахарозы г) центрифугирование в градиенте плотности СвС д) экстракция растворителями и нротиво-точное распределение между частицами растворенного полимера и е) обработка ферментами [469, 470]. [c.35]

Р, Березней и Д, Коффи (США) впервые обнаружили, что ДНК, метившаяся после пульсовой метки [ Н] -тимидином, в основном выявляется во фракции ядерного матрикса, В последующем эти результаты получили подтверждение в работах многих других авторов. Меченная в ходе короткого импульса ДНК остается связанной с ядерным скелетом и в том случае, если для выделения ядерного матрикса использовали метод электроэлюции в растворе с физиологической концентрацией солей. Следовательно, данный тип ассоциации ДНК с ядерным остовом не является артефактом, вызванным, скажем, экстракцией раствором с высокой ионной силой. Очевидно, репликативная мащина образует комплекс с ядерным скелетом и, таким образом, все участки ДНК при репликации временно ассоциируются с ядерным скелетом. Общий вклад репликативных вилок в ДНК ядерного матрикса, однако, очень невелик, составляя, как показывают простые расчеты, не более 1 % всех взаимодействий ДНК с ядерным скелетом. Детали этого взаимодействия изучены мало, хотя есть данные, согласно которым с ядерным матриксом связан ряд ферментов, участвующих в репликации, а именно ДНК-полимераза а и ДНК-праймаза, [c.128]