Подвижная фаза влияние на разделение

В отличие от газовой хроматографии, в которой подвижной фазой служит газ-носитель, выполняющий лишь функцию переносчика вешества и влияющего только на эффективность колонки, в жидкостной хроматографии в функцию подвижной фазы входит еще и влияние на селективность колонки. Это свойство подвижной жидкой фазы имеет первостепенное значение для ЖАХ, так как оно позволяет достигать оптимальных условий разделения не только выбором соответствующего селективно действующего адсорбента, что не всегда просто, но и подбором системы растворителей, действующих селективно. [c.79]

Оптимизация режима хроматографии [113] на силикагеле Методика определения в плазме крови [157 Влияние 15 различных аминов — доба- [257 вок к подвижной фазе на величины удерживания и симметрию пиков Роль состава неподвижной и подвиж- [380] ной фаз в симметрии хроматографических пиков Влияние добавок амина в элюент при [210] обращенно-фазовой хроматографии Механизм удерживания Выбор подвижных фаз для разделения [414] на силикагеле, способ экстракции нз плазмы [c.298]

Если число теоретических тарелок велико, кинетическая теория и теория тарелок дают почти одинаковые результаты. Однако кинетическая теория обладает преимуществом она позволяет объяснить влияние, скорости движения подвижной фазы на разделение и понять причины расширения полос. [c.517]

Выбор подвижной фазы для таких сорбентов довольно сложен, поскольку полимер не должен набухать в этой среде, так как деформация пустот приводит к снижению селективности. Очень полезным элюентом оказалась смесь ацетонитрила с 4—6% воды и 2—8% концентрированного аммиака. Сильное влияние на результаты разделения оказывает скорость подачи элюента, и обычно скорости потока должны быть очень низки. [c.131]

В отношении скорости потока следует пойти на компромисс, так как увеличение скорости хотя и уменьшает влияние диффузии (происходящей по длине разделительного слоя сорбента), но затрудняет установление равновесия между фазами. Уменьшение размеров частиц сорбента, обусловленное членом А, должно также иметь границы, так как в противном случае слишком большим станет сопротивление потоку в колонне, т. е. скорость движения потока недопустимо уменьшится. Величина члена С зависит от значения коэффициента распределения. Его определяют как отношение количества вещества в стационарной фазе к количеству вещества, находящегося а подвижной фазе. Он связан с соотношением стационарной и подвижной фазы на участке разделения. Более подробное рассмотрение вопросов теории хроматографии можно найти в специальной литературе [19, 28]. [c.348]

Хроматографическое разделение проводят на колонках с нисходящим потоком подвижной фазы (рис. 13, а) или с восходящим потоком (рис. 13, б). Более четкое разделение вследствие меньшего влияния стеночного эффекта(проникновения анализируемой смеси вдоль стенки колонки без разделения) достигается на колонках второго типа. Однако более простая конструкция колонок с нисходящим потоком обусловила их большую распространенность. [c.42]

Роль подвижной фазы (растворителя) в жидкостной хроматографии весьма многообразна. Наряду с чисто транспортной функцией растворитель активно участвует в самом процессе разделения и оказывает существенное влияние на возможности [c.126]

Прежде чем обсудить возможности разделения веществ в газовой фазе, рассмотрим факторы, определяющие удерживание в газовой хроматографии. Чтобы учесть влияние давления и температуры, вместо времени удерживания используют объем удерживания. Общий объем удерживания и объем подвижной фазы Ум получают умножением соответствующих времен удерживания на объемную скорость потока газа-носителя Р (в мл газа-носителя в минуту) [c.246]

Если растворенное вещество вступает во взаимодействие с твердой стационарной фазой, то основной эффект разделения определяется адсорбционным равновесием. В этом случае говорят об адсорбционной хроматографии в противоположность распределительной хроматографии, при которой разделение компонентов происходит соответственно их распределению по акону Нернста. В случае жидкостной хроматографии на процесс разделения могут оказывать влияние физико-химические свойства подвижной фазы. Если состав подвижной фазы в ходе процесса разделения ступенчато или непрерывно меняется, то говорят о градиентной хромотографии. Современная высокоэффективная хроматография основана на ис- [c.55]

Совместное влияние структуры полиядерных ароматических углеводородов, температуры разделения и состава подвижной фазы на величины удерживания рассмотрено в работе [247] и положено в основу прогнозирования удерживания веществ этого класса с помощью ЭВМ. Погрешность априорного расчета к почти для всех изученных веществ оказалась меньше Ш%. [c.126]

Выбор оптимальных условий разделения [22] Выделение в режиме ионообменной и 229] обращенно-фазовой хроматографии Повыщение чувствительности анализа [93 [ Межлабораторная воспроизводимость [149] величин удерживания. Способы представления данных Сравнительное исследование индексов [364] удерживания и коэффициентов емкости как параметров для качественного анализа. Влияние подвижной фазы [c.298]

Важно помнить, что коэффициент разделения а является мерой относительного разделения пиков и при заданных условиях разделения (неподвижная и подвижная фазы, температура и т. д.) остается постоянным. Он не зависит от параметров, не влияющих на константу равновесия системы, таких как скорость потока, размер колонки, размер частиц и т. д. Однако эти параметры оказывают решающее влияние на эффективность колонки N [см. уравнение (4.1)]. [c.49]

Как и при разделении на ранее описанных полимерных ХНФ, механизм хирального распознавания в данной системе является сложным и до конца не выяснен. Однако основные причины удерживания сорбата были выявлены в ходе систематических исследований влияния его структуры и состава подвижной фазы на коэффициент емкости. Во многих отношениях альбумин-силикагелевый сорбент ведет себя подобно обращенно-фазовым материалам на основе алкилированного силикагеля. Спирты, преимущественно пропанол-1, помогают регулировать время удерживания, поскольку вызывают его быстрое уменьшение вследствие ослабления гидрофобных взаимодействий с сорбентом. Оптимизировать состав подвижной фазы можно, варьируя тремя основными параметрами, а именно pH, ионной силой и органическим растворителем-модификатором [90]. Вероятно, в любой хроматографической системе одновременно наблюдается влияние диполь-ионных и гидрофобных взаимодействий. Кроме того, возможно образование водородных связей и комплексов с переносом заряда. Большое влияние свойств подвижной фазы на значения к разделяемых энантиомеров можно объяснить зависимостью свойств белков от распределения заряда и его конформации. БСА состоит как минимум из 581 остатка аминокислот, связанных в единую цепь (мол. масса 6,6-10 ), и его надмолекулярная структура в значительной мере определяется присутствием в молекуле 17 дисульфидных мостиков. При рН7,0 полный заряд молекулы равен - 18, а изоэлектрическая точка равна 4,7. Как это хорошо известно из химии ферментов, смена растворителя способна вызывать изменения в структуре связывающего центра белка в результате изменения его заряда и конформации. [c.133]

В то время как амины и аминокислоты, несущие положительный заряд, более прочно удерживаются при более высоких значениях pH, для отрицательно заряженных сорбатов справедливо обратное. Систематические исследования, проведенные на серии N-бензоил-о, L-аминокислот, позволили глубже понять механизм взаимодействия сорбата с белком. Влияние изменения свойств подвижной фазы на величины к VI а демонстрирует рис. 7.10. Во-первых, удерживание в значительной степени возрастает с усилением гидрофобного характера аминокислоты (Ser > А1а> Phe). Во-вторых, увеличение суммарного отрицательного заряда белка с увеличением pH вызывает уменьшение к для всех шести соединений (вследствие ионного взаимодействия). Далее, влияние концентрации буфера можно объяснить усилением адсорбции вследствие ионных взаимодействий при низкой ионной силе. Небольшое, но вполне заметное возрастание к для наиболее сильно удерживаемых сорбатов при высоких концентрациях буфера вероятнее всего является результатом усиления гидрофобных взаимодействий. Поскольку ионные (кулоновские) и гидрофобные взаимодействия по-разному подвержены влиянию ионной силы, то оба эффекта приводят к возникновению минимума в адсорбции сорбата (к ) в определенной точке. И наконец, совершенно очевидно влияние органического растворителя-модификатора он всегда приводит к понижению удерживания сорбата и тем сильнее, чем более гидрофобен сорбат. Влияние pH и ионной силы на удерживание незаряженных соединений невелико, но выражено вполне отчетливо. Оно связано исключительно с изменениями в связывающем центре ХНФ. Добавление пропанола-1 вызывает уменьшение удерживания по сравнению с наблюдаемым у заряженных сорбатов, что свидетельствует о преимущественном вкладе в удерживание гидрофобных взаимодействий. Это подтверждает также наблюдаемое очень большое влияние на удерживание длины цепи алканола-1. Высшие спирты являются значительно более эффективными конкурентами за связывающий центр, а потому вызывают более быстрое элюирование сорбата. Возможность регулирования удерживания путем изменения подвижной фазы, которую демонстрирует схема 7.6, говорит о том, что эту особенность данных хроматографических систем можно использовать в целях оптимизации разделения. [c.135]

Содержание воды в подвижной фазе. Этот параметр также является исключительно важным вследствие сильного влияния на удерживание и разделение. Рекомендуемое содержание воды в подвижной фазе (80—90)-10 % [222]. При более высоком содержании воды разделение не происходит. В то же время небольшие коли- [c.165]

Важность образования водородных связей для процессов удерживания и разделения энантиомеров следует из того факта, что добавление 6% метанола в подвижную фазу отрицательно сказывается и на а, и на/с и что аналогичное влияние оказывает замещение водорода в сульфонамидной группе на метильную группу. Значения/ на фазе 16 [c.192]

Попытки скорректировать влияние градиентов на Кг обречены на провал, если наблюдается расслоение многокомпонентной подвижной фазы на слое во время элюирования (в ТСХ известно лишь несколько систем, при употреблении которых та1 ого расслоения не случается). При этом уже не обеспечивается простое и легко прогнозируемое соответствие между (Кг)набл и местной величиной Кг, определяемой согласно уравнениям (39а) и (396). Однако сделанное здесь утверждение не следует расценивать как извиняющее обстоятельство или ка призыв расслабиться и прекратить попытки достижения воспроизводимых значений Кг и результатов разделения. [c.159]

Влияние Кг на член с оказывается противоположным воздействию на член Ь чем выше Кг, тем меньше будет 1- Кг и тем меньшей окажется разрешающая способность. Причиной этого удивительного влияния является то, что растворенные вешества (подлежащие разделению) при увеличении Кг остаются все больше и больше в подвижной фазе (а при Кг = 1 полностью находятся в подвижной фазе) все меньше и меньше [c.208]

Подробно рассмотрены методики эксперимента (нанесение проб, насыщение камер для элюирования парами подвижной фазы и т. д.), влияние параметров эксперимента на результаты разделения и особенности аппаратуры. [c.7]

Закрытые (адсорбционные) хроматографические колонки необходимо кондиционировать для стабилизации адсорбционной активности поверхности. Состояние равновесия требуется и для тонкослойной хроматографической системы. Когда течение подвижной жидкой фазы прекращается хотя бы на короткое время, возникает резкое изменение химического состояния слоя сорбента, находящегося в равновесии с окружающей газовой средой. Подвижная фаза состоит из растворителей различной летучести и полярности. Именно поэтому даже в момент нанесения пробы в ТСХ очень важно, чтобы объемная скорость потока элюента была постоянной. В ТСХ это условие необходимо выполнять более строго по сравнению с колоночной жидкостной хроматографией, где поток через кондиционированную колонку может быть приостановлен на несколько минут без существенного влияния на результаты разделения. Соответствующий экспериментальный подход описан ниже. [c.19]

Движение газовой фазы можно контролировать с помощью электронного устройства, направляя навстречу или параллельно подвижной фазе. Это позволяет исключить влияние газовой фазы, являющееся одним из главных препятствий для получения воспроизводимых результатов в линейной ТСХ, и таким образом стабилизировать Rf. Отпадает необходимость в стандартном образце, который все еще необходим при проведении анализа линейной ВЭТСХ. При использовании стандарта время разделения увеличивается на 50%, а количество ироб, разделяемых на одной пластинке, уменьшается вдвое. [c.93]

Подвижные фазы. Хроматографические разделения с использованием ионообменников чаще всего проводят в водных растворах, так как вода обладает прекрасными растворяющими и ионизирующшш свойствами. Под действием воды молекулы пробы мгновенно диссоцшфуют на ионы, ионо-генные группы ионообменников гидратируются и также переходят в полностью или частично диссоциированную форму. Эго обеспечивает быстрый обмен противоионов. На элюирующую силу подвижной фазы основное влияние оказывают pH, ионная сипа, природа буферного раствора, содержание органического растворителя или поверхностно-активного вещества (ион-парная хромато1рафия). [c.317]

Рис. 7.11. Влияние подвижной фазы на разделение хрома огра.мма о.[.-кинуретп(а при pH подвижной фазы 7,1 (а) и 7,6 (б) [54].

Как выяснилось, уменьшение длины алкильной цепи обычно приводит к увеличению селективности. Причина этого не вполне ясна, поскольку количество хиральной добавки, сорбированной на носителе, определено не было. Влияние состава подвижной фазы на разделение в целом выглядит следующим образом а) возрастание [c.158]

Разделение лекарственных средств этой группы на энантиомеры можно также проводить методом обрашенно-фазовой ЖХ на силикагелевых сорбентах, покрытых альбумином. Как показали Алленмарк и Андерсон [53, 54], для этой серии соединений величина селективности разделения может достигать 7. Разделение в значительной степени зависит от природы заместителя в положении 3, и подвижную фазу выбирают таким образом, чтобы получить приемлемые значения к . Суммированные в табл. 8.5 данные отражают основные особенности влияния заместителя и состава подвижной фазы на разделение энантиомеров этих соединений. [c.196]

Классическим примером влияния полярности подвижной фазы на разделение являются эксперименты Си и Рийндерса [4, 8, 13] по разделению замеш,енных нафталинов и фталатов при использовании в качестве элюентов к-пентана и изопропанола. [c.134]

Целью хроматографического процесса является разделение компонентов пробы. В соответствии с уравнением (1.26) разрешение можно определить как расстояние между центрам.и зон, отнесенное к ширине зон 7 =АУ/ш. Как следует из уравнения (1.44), разделение является функцией величин К, У , Н и Ь. Одновременно описываемое уравнение позволяет сформулировать основныё требования к условиям хроматографического разделения. Первостепенным условием разделения является выбор таких подвижной и неподвижной фаз, которые характеризовались бы разными коэффициентами распределения относительно разных веществ. Различие в коэффициентах К делает разделение возможным. Другие члены в уравнении (1.44) определяют разрешение. Член Ув демонстрирует, что разрешение улучшается при увеличении количества неподвижной фазы этого можно достигнуть, увеличивая количество неподвижной фазы на единицу длины системы или увеличивая длину системы. В последнем случае разрешение возрастает в у/- раз, поскольку числитель в уравнении (1.26) пропорционален I, а знаменатель пропорционален У1. Увеличение количества неподвижной фазы на единицу объема ухудшает разделение вследствие влияния диффузии на величину Я [уравнение (1.42)]. Член Я в уравнении 0-44) стараются получить минимальным, подбирая мелкодисперсную и однородную неподвижную фазу и оптимальную скорость подвижной фазы. Наконец, разделение улучшается с уменьшением температуры, хотя при этом возрастает время анализа. [c.37]

Рис. 210. Влияние содержания кислоты в подвижной фазе на разделение алкалоидов (Мюнье).

Большое влияние при анализе микропримесей оказывает изменение селективности системы и повышение коэффициента разделения а, что достигается изменением состава подвижной фазы и выбором оптимального хроматографического режима. Кроме того, как видно из уравнения [c.85]

ФПП является элюентным методом, как и хроматография, однако, строго говоря, не является хроматографией. Если в хроматографии разделение является результатом различного распределения компонентов пробы между подвижной и неподвижной фазами, то разделение в ФПП достигается за счет различия в ск<фостях компонентов в потоке под влиянием приложенного поля. Эго поле удерживает частицы более мягко, и его тегче контролировать по сравнению с межмолекулярными силами, используемыми для разделення в хроматографии. Методы ФПП поэтому особенно полезны для изучения макромолекул и коллоидных частиц, поскольку такие объекты анализа на активной границе раздела фаз часто подвергаются неблагоприятным илн необратимым превращениям или разлагаются при прохождении через нг1бивные хроматографические колонки. [c.309]

За двадцать пять лет. прошедшие с тех пор, варианты тонкослойной хроматографии усовершенствовались, приобрели еще большую популярность, а подходы к теории метода оказались более осмысленными. В частности, такое совершенствование сказалось в возникновении понятия "высокоэффективная жидкостная хроматография" (ВЭЖХ), подразумевающего улучшение возможностей количественного анализа, ускорение разделения и повышение воспроизводимости. Повысился интерес к этому методу как к заменяющему (или дополняющему) метод высокоэффективной жидкостной хроматографии. Важными представляются и успехи в теории тонкослойной хроматографии. Начав с простого пользования тонкослойными пластинками, мы так усовершенствовали этот способ разделения, что вправе называть этот подход количественным и научным. Своими практическими работами сам доктор Гейсс сделал достаточно большой вклад в совершенствование методов и в более полное понимание теории. Давно проводившиеся им исследования предварительного насыщения тонкослойных пластинок привели к появлению важнейших новых приемов и к улучшению результатов, достигаемых традиционными методами ТСХ (поскольку удается избежать влияния расслоения подвижной фазы и [c.15]

Подвижные фазы. Как уже отмечалось, в ЖХ важен выбор подвижной фазы, поскольку она оказывает большее влияние на селективность разделения, эффективность колонки и скорость движения фоматографической полосы. Подвижная фаза должна растворять анализируемую пробу, обладать малой вязкостью (коэффициенты диффузии компонентов анализируемой пробы должны быть достаточно большими), из нее должно быть возможным выделение разделенных компонентов. Подвижная фаза должна быть инертной по отношению к материалам всех частей хроматографа, безопасной, дешевой, подходящей для данного детектора. [c.309]

В работе [74] показано, что влияние газа-носителя (СО2, SFe, Н2О) на удерживание и энергию адсорбции компонентов проявляется тем больше, чем сильнее газ-носитель способен адсорбироваться на пористом полимерном сорбенте. Наиболее сильное уменьшение удерживаемых объемов наблюдалось при использовании в качестве подвижной фазы водяного пара, а в качестве неподвижной — хромосор-ба 104. Использование в качестве газа-носителя водяного пара, вызывающего снижение энергии адсорбции компонентов, расширяет возможности применения пористых полимерных сорбентов в хроматографии для разделения веществ с числом атомов углерода более десяти [74]. [c.16]

С "целью сокращения продолжительности разделения на практике чаще всего используются линейные скорости потока, превращающие значения опт- В этой области кривой Ван-Деемтера полоШ1тельпое влияние на эффективность оказывает увеличение коэффициента диффузии в подвижной фазе. Поэтому, если позволяют чисто химические соображения, следует предпочитать подвижные фазы, обладающие меньшей вязкостью. [c.25]

С целью повышения селективности разделения часто используют подвижные фазы более сложного состава, чем бинарные смеси А + Б например, А + Б1 + Б2 или даже А + Б1 + Б2 + Б3. Во многих случаях это приводит к улучшению разделения, хотя, судя по опубликованным в литературе методикам разделения, применение трех- или четырехкомпонентных подвижных фаз не всегда оправдано, особенно если разделяемая смесь не слишком сложна. При оценке перспектив применения сложных элюентов полезно соблюдать следующее правило. Разделение смеси из п компонентов, сорбирующихся по сходному механизму (если оно вообще возможно), осуществляется наилучшим образом с помощью п-компонентного элюента, состоящего из растворителя А и п—1 различных растворителей типа Б. Увеличение числа растворителей Б свыше п—1 положительного влияния на разделение не оказывает. Необходимость использования, например, трехкомпонентного элюента может возникнуть лишь при анализе трехкомпонентных и более сложных смесей. [c.43]

Неводные ионогенные растворители также могут быть применены при хроматографии на силикагеле. В работе [134] изучено влияние ионной силы, pH элюента и основности сорбатов на величины удерживания. Роль этих факторов указывает на то, что основным процессом, определяющим сорбцию, является катионный обмен с силанольными группами поверхности. Подвижные фазы состояли из метанола с добавками хлорной кислоты, перхлората аммония, гидроксида калия. Сопоставление хроматограмм, полученных на различных силикагелях (Пар-тисил-5. Гиперсил, Силоид, Сферисорб), свидетельствует о том, что абсолютные величины удерживания на последних трех сорбентах воспроизводятся хорощо. Партисил удерживает изученные лекарственные соединения слабее, хотя селективность сорбента по отнощению к ним примерно такая же, как у других материалов. В отличие от нормально-фазовой и обращенно-фазовой хроматографии, селективность разделения несколько улучшается при малом удерживании. На рис. 4.35 представлена [c.159]

Общая конструктивная схема колонки включает в себя корпус, фильтры и наконечники (рис. 5.11). Корпус представляет собой цилиндрическую трубку из нерл<авеющей стали, стекла или полимерных материалов он служит емкостью для слоя сорбента. Верхний и нижний концы корпуса закрывают фильтры. Чаще всего это диски нз пористой нержавеющей стали, по диаметру соответствующие наружному диаметру колонки. Диаметр пор фильтров 0,5—2 мкм, их назначение — удерживать слой сорбента в колонке. Кроме того, фильтр на входе в колонку задерживает механические примеси из подвижной фазы и образцов. Наконечники герметизируют всю колонку и служат для подключения капиллярных трубок, соединяющих колонку с дозатором и детектором. Конструкция наконечников должна быть такой, чтобы свести к минимуму внеколоночное размывание пробы и разделенных компонентов. Наконечник хорошей конструкции так формирует поток на входе в колонку, что поперечное размывание и отрицательное влияние стеночного эффекта сводятся к минимуму. Фактически в колонке работает при этом только центральная часть сорбента. Такие колонки характеризуются высокой эффективностью. Однако при указанной конструкции колонки сорбент будет легко перегружаться по мере увеличения массы вводимой пробы, и поэтому наконечники препаративных колонок призваны решать прямо противоположную задачу — распределять пробу по возможно большей части поперечного сечения. В настоящее время чаще всего применяются колонки трех типов цельнометаллические, разборные со сменными разделительными патронами, полимерные для работы в режиме радиального сжатия. [c.197]

ВЭЖХ на полимерных сорбентах, пре- [326 имущества этого варианта при количественном анализе Использование силикагеля и окиси алю- [281] миния в качестве катионообменников Влияние состава подвижной фазы на [313] величины удерживания. Обсуждение механизма удерживания Исследование селективности разделения [48] в зависимости от состава подвижной фазы [c.297]

Влияние состава подвижной фазы на [407] удерживание и селективность разделения на метилсиликагеле. Условия анализа в плазме крови и моче [c.298]

Механизм удерживания сорбата этой ХНФ очень сложен и до конца не выяснен. На разделение, как было показано, сильное влияние оказывают очень многие факторы, например средняя молекулярная масса полимера, молекулярно-массовое распределение, природа растворителя, использованного для нанесения полимера на подложку, и природа самой подложки [51]. Тем не менее вполне очевидно значительное улучшение разделения вследствие применения жесткой матрицы и широкого выбора подвижных фаз. Это, в частности, демонстрирует рис. 7.5, на котором приведены хроматограммы разделения рацемического оксида мрснс-стильбена, полученные в четырех различных условиях. Влияние силикагелевой подложки на эффективность колонки, а так-же влияние подвижной фазы на (X достаточно очевидно. Степень кристалличности МТАЦ, [c.116]

Три варианта камер с принудительным потоком растворителя, используемые в 1985 г., представляют собой ненасыщенные сэндвич-камеры, в которых неизбежно расслоение подвижной фазы в слое во время элюирования. Единственным способом устранения этого вредного эффекта является продувка слоя потоком газа, содержащего пары многокомпонентной подвижной фазы, непосредственно перед началом элюирования (когда пластинка уже установлена в камеру и подготовлена к работе). Кроме того, влияния разложения подвижной фазы можно избежать, если вводить образец уже после начала элюирования (когда все образующиеся фронты уже прошли ми.мо стартовой линии). Центробежный плоскостной хроматограф с вращающейся пластинкой (Rota hrom, фирма Petazon Ltd, Цюрих, Швейцария) начал выпускаться в 1987 г. Прибор пригоден для обеспечения аналитических и препаративных разделений обеспечивает постоянство скорости потока через разделяющий участок длиной 10 см может использоваться в круговом режиме и (за счет прорезания соответствующих борозд в слое) в "антикруговом" или линейном режимах [298]. Метод плоскостной жидкостной хроматографии с принудительным потоком растворителя еще является новшеством. Разрабатываются удобные детекторы, дающие возможность регистрации разделения в реальном масштабе времени. Однако даже на данно.м этапе развития этот метод дает возможность сочетать (при сопоставимой продолжительности анализа) высокую разрешающую способность, свойственную для колоночной [c.273]

Таким образом, влияние условий разделения в ненасыщенной N-камере (или камере без крышки) на вид тонкослойной хроматограммы аналогично эффекту, наблюдаемому при непрерывном элюировании (см. рис. 179). В том и в другом случаях увеличение пропускаемого объема растворителя приводит к приблизительно пропорциональному увеличению пути, проходимого пятнами. Только если испарение происходит с поверхности всей пластинки, более низкие значения Rf и разрешающая способность на нижних участках будут улучшены с идеальным соблюдением пропорциональности [69]. Такое повышение разрешающей способности обусловлено удлинением пути, проходимого пятнами, в то время как величина (l-Rf) остается неизменной (такой случай несколько более подробно обсуждался в разд. III, В, 2). Наблюдавшееся обычно улучшение разделения при работе с многокомпонентными подвижными фазами обусловливалось этой же причиной, но во МН0П1Х конкретных случаях сказывалось и благоприятное соотношение локальных концентраций растворителей (подобные ситуации пояснялись в разд. IV, В, 3). [c.101]

Реальные хроматограммы, показывающие влияние предварительного насыщения слоя при употреблении смесей растворителей в качестве подвижной фазы, приведены на рис. 191, 193. Из рис. 191,а видно, каким образом характерные для смеси значения Ег первоначально увеличиваются при повышении концентрации метанола (дезактивирующее воздействие преобладает над последствиями предварительного насыщения), проходят через максимум и, наконец, начинают снижаться (поскольку воздействие предварительного насыщения, приводящего к снижению Ег, начинает сказываться сильнее дезактивации слоя). Этот же эффект показан и на рис. 193 при работе с другим типом силикагеля и с другой подвижной фазой, но при большем периоде предварительного насыщения (60 мин) в результате действительный фронт занимает довольно низкий уровень (Яг.= 0.6), что подтверждено маркером (краситель с Кг случай б). Хроматограмма на рис. 193, в получена при употреблении чистого ацетонитрила (как и в случае а, но при элюировании в насыщенной обычной камере, в которой смесь еще не удается разделить, хотя степень предварительного насыщения меньше (К ж 0.75 вместо 0.6). В том и в другом случаях элюирование только одним сильным компонентом подвижной фазы (ацетонитрилом) приводит к перемещению образца (без разделения) до действительного фронта (с К, = 1) разделение оказывается невозможным из-за низкого уровня этого фронта. Когда степень предварительного насыщения достигает характерной для сорбционного насыщения, ни одно из веществ не может иметь Ег свыше 0.5-0.6 при любой элюируюшей способности растворителя. [c.134]

Теоретические исследования в области оптимизации условий хроматографического разделения в бинарных подвижных фазах позволили получить линейное уравнение, связывающее значение Ят двух хроматографируемых веществ ири изменении количественных соотношений одних и тех же растворителей, и выяснить области и границы при.мене-ния этого уравнения. Был сформулирован критерий выбора растворителей для трехкомпонентных фаз и введено ионятие "функция устойчивости", которое отражает влияние изменения состава подвижной фазы на воспроизводимость параметров удерживания. Выводы теоретических исследований подтвердились многочисленными экспериментальными данными (20). [c.22]