Белки, определение аммиака

Минерализация биологического материала. Пробу, содержащую 10—20 мг белка, помещают в колбу Кьельдаля, добавляют 0,5 мл концентрированной серной кислоты и проводят минерализацию (с. 44). Для учета количества аммиака в реактивах и воде параллельно опытным пробам ставят контрольные, в которых минерализации подвергается дистиллированная вода. После этого пробы количественно переносят в мерные колбы на 25—50 мл, осторожно нейтрализуют до слабокислой реакции на метиловый красный (индикатор добавляют в пробу, следя за тем, чтобы реакция не стала щелочной) и доводят водой до метки Из раствора берут пробы для определения аммиака. [c.86]

Определение общего азота методом дистилляции. Общий азот в таких сложных веществах, как белки, можно определить нагреванием с серной кислотой в присутствии сульфата ртути в качестве катализатора, последующей дистилляцией с паром и определением аммиака реактивом Несслера. Ион двухвалентной ртути восстанавливают до ртути добавлением цинковой пыли перед дистилляцией при этом разрушается ртутно-аммонийный комплекс и освобождается весь аммиак. [c.109]

Анализ белка ткани производят нагреванием с серной кислотой в присутствии сульфата ртути с последующим прямым определением аммиака реактивом Несслера после обработки цинковой пылью. Ошибка определения составляет 2%. [c.111]

В литературе описаны отдельные детали анализа различных материалов для определения аммиака, например сталей [30], белков [38], вод [39—43], порошка металлического вольфрама [44], титановой губки [45], металлического бериллия [46], атмосферных осадков [47], воздуха [43], бензгидроксамовой кислоты и ее производных [48], а также для определения гидроксиламина реактивом Несслера [49]. [c.21]

Анализируемый раствор может с самого начала не содержать белка или должен быть освобожден от белка с помощью специальных методов, описанных в гл. IV, и, наконец, может быть подвергнут анализу в присутствии белка, как это делают, например, при анализе цельной крови. С помощью капиллярной пипетки вводят точно отмеренное количество анализируемого раствора во внешнюю камеру микрокюветы Конвея. Рядом с анализируемым раствором добавляют приблизительно 50 X раствора уреазы. С противоположной стороны внешней камеры помещают 0,1 мл насыщенного раствора карбоната калия. Необходимо очень внимательно следить за тем, чтобы все три раствора, введенные во внешнюю камеру диффузионной кюветы, не соединялись. Во внутреннюю камеру вводят точно отмеренное количество (25—50 X) 0,02 н. титрованного раствора серной кислоты, содержащей метиловый красный. Кювету не совсем плотно закрывают, нагревают в сушильном шкафу до 30— 40°, герметично закрывают с помощью приема, используемого при определении аммиака, и легким ударом кольца соединяют капли анализируемого раствора и уреазы. После этого кювету выдерживают в сушильном шкафу при +37° в течение приблизительно 45—60 мин., после чего, не открывая кюветы, смешивают раствор, содержащий продукты разложения мочевины, с раствором карбоната калия. Дальнейший ход анализа точно соответствует методике определения аммиака, описанной на стр. 193. Количество мочевины, которое может быть определено с помощью описанного метода, а также его точность, определяются возможностями описанного выше метода определения аммиака. Контрольные анализы проводят так же, как основные определения, используя одинаковые количества уреазы, приго- [c.197]

Трудности в определении азота по Кьельдалю главным образом связаны с проблемой разложения. Различные факторы, влияющие на полноту (и скорость) превращения азота белка в аммиак при разложении серной кислотой, содержат следующие источники ошибок [c.18]

Оптимальные условия накопления биомассы ограничиваются прежде всего определенной температурой, значением pH среды, количеством и скоростью поступления питательных веществ, кислорода воздуха и др. Нормальные алканы используются микроорганизмами в качестве питания. Они вместе с аммиаком и минеральными солями превращаются в продукты обмена, представляющие биомассу, состоящую в основном из протеинов. В промышленном процессе производства белка важной ступенью является выделение продуктов ферментации и заключительная обработка полученных клеток микроорганизмов. Чистота углеводородного сырья оказывает существенное влияние на экономику процесса. [c.206]

Небольшое количество образца помещают на шпатель и подносят к краю пламени газовой горелки. Отмечают воспламеняемость образца, поведение при медленном нагревании (чернеет ли, плавится ли с разложением или без него, обугливается или сгорает). Затем исследуют цвет пламени при введении в него полимера, запах выделяющихся газов, кислотный или основный характер образующихся паров. Так, полимеры на основе ароматических углеводородов горят желтым коптящим пламенем, при выделении алифатических углеводородов пламя менее коптящее. Чем больше кислорода в продуктах разложения, тем все более голубым становится пламя. Запах определяется выделением определенных газов хлора, сероводорода, аммиака и др. Производные целлюлозы при горении имеют запах горящего дерева, белки — жженого волоса или подгорелого молока, полиамидные волокна (найлон)—свежего сельдерея или горелых растений и т. д. [c.220]

Образование продуктов, обладающих флуоресценцией (сами реагенты не флуоресцируют), позволило значительно увеличить чувствительность метода. С флуорескамином открывается 10 —10 " молей аминокислот. В отличие от нингидрина реакции не мешает присутствие аммиака. Реакция протекает при комнатной температуре при pH 7,0— 9,0. Поскольку флуорескамин в водной среде разрушается (в течение нескольких секунд), для приготовления раствора используют безводные жидкости (ацетон, ацетонитрил, диметилсульфоксид и др.). Продукт реакции стабилен в течение нескольких часов. Пептиды и белки, проявленные флуорескамином, могут использоваться для определения аминокислотного состава и аминокислотной последовательности. [c.130]

Ферментативные каталитические реакции не только высокочувствительны, но и чрезвычайно селективны. Ферменты представляют собой белки-катализаторы, которые воздействуют только на определенные субстраты. Например, среди всех биохимических реакций, протекающих в человеческом организме, гидролиз мочевины является единственным процессом, на скорость которого оказывает влияние присутствие фермента, называемого уреазой. Уре-аза проявляет каталитический эффект на превращение мочевины в аммиак и карбона,т-ионы [c.346]

Развитие пространственной структуры геля яичного альбумина (pH > 10) представлено на рис. 44. Прочность возникает сразу же, достигая максимального значения в течение малого промежутка времени, а затем происходит самопроизвольное плавление геля, которое сопровождается выделением аммиака. Из рис. 45 видно, что в щелочной области процесс гелеобразования также сопровождается конформационными превращениями молекул яичного альбумина — удельное оптическое вращение увеличивается до определенного значения и далее не изменяется. Плавление геля не сопровождается дальнейшим изменением удельного оптического вращения. Исследование концентрационной зависимости максимальной прочности структур в растворах яичного альбумина показало, что минимальная концентрация белка, способная образовать пространственную структуру, при pH < 3 больше 2 г/100 а при pH > 10 больше 3,5 г/100 мл. Результаты представлены на рис. 46, из которого видно, что кривая зависимости Р/ от концентрации имеет параболический вид. [c.127]

Моча [15]. Определение кремния в моче затрудняется в связи с высоким содержанием в ней фосфата и, часто, белка. Эти затруднения устраняют удалением большей части фосфата солью кальция, аммиака — нитритом и белка — трихлоруксусной кислотой. [c.66]

После отгонки свободного аммиачного азота часто можно выделить еще некоторое количество аммиака добавлением к пробе анализируемой воды раствора перманганата калия в концентрированной щелочи. Это дополнительное количество аммиака представляет так называемый белковый азот и образуется в основном при действии кипящего щелочного раствора перманганата калия на аминогруппы многих аминокислот, полипептидов и белков. Эти последние азотсодержащие вещества являются важными компонентами органического распада в водах и часто требуют значительного расхода хлора на водоочистительных станциях. Извлечение азота незамещенных аминных групп при определении белкового азота составляет приблизительно 80% [170]. [c.98]

Р-Аминокислоты, в отличие от а-аминокислот, при нагревании разлагаются с отщеплением аммиака и образованием а,Р-ненасы-щенных кислот [182]. Для определения функциональных групп в белках и обнаружения различных аминокислот разработаны многочисленные методы [74, 198, 270, 387]. [c.43]

Белки из сыворотки удаляют обычным методом затем в аликвотной части фильтрата осаждают сульфаты определенным избытком соли бария. После отделения выпавшего сульфата бария фильтрованием определяют остаточную концентрацию ионов бария методом фотометрии пламени и по ее уменьшению— содержание сульфата. После осаждения сульфата бария и фильтрования осадок можно растворить в растворе этилендиаминтетрауксусной кислоты, содержащей аммиак = 2 или едкий натр и фотометрировать полученный раствор. Сульфат можно также осадить солью стронция в присутствии спирта [c.305]

Определение аммиака методом титрования. Во внутренний цилиндр чашки добавляют 1—2 капли индикатора Ташира и титруют раствором щелочи до появления зеленого окрашивания. При правильном приготовлении индикатора переход окраски от фиолетовой к зеленой происходит от одной капли щелочи. По разности в количестве щелочи, пошедшей на титрование контрольной и опытной проб, рассчитывают количество аммиака в исследуемом растворе, учитывая, что 1 мл 0,01 н. раствора H2SO4 связывает 0,14 мг азота. По количеству найденного азота рассчитывают количество белка в опытной пробе. [c.87]

Азот, содержащийся в аминокислотах, пептидах, белках и других естественных и синтетических органических соединениях, определяют суммарно одним определением. В поверхностных водах органически связанный азот появляется как продукт биологических процессов или попадает в них со сбрасываемыми бытовыми и некоторыми промышленными сточными водами. Количественное содержание азота указывает на степень загрязненности водоема. При сопоставлении с результатами определения аммиака, нитритов и нитратов результат определения органического азота указывает на самоочи-щающую способность водоема. При биологической очистке сточных вод и по содержанию азота следят за технологическим процессом и 108 [c.108]

Прямые методы. 1. Сырую биомассу определяют после осаждения клеток центрифугированием. После центрифугирования отмытых клеток можно определить сухую массу. Оба метода не свободны от довольно больших систематических ошибок. 2. Гораздо большую точность обеспечивает определение общего азота (метод микро-Кьельдаля и микродиффузионный метод определения аммиака), а также определение общего содержания углерода (по ван Слай-ку-Фолчу). 3. В повседневной практике часто определяют содержание бактериального белка. Хорошие результаты дают модификации биуретового метода и другж колориметрические методы. Микрометоды основаны на измерении количества характерных компонентов белка тирозина, триптофана (по Лоури или Фолину). [c.192]

Ход определения. 2 мл сыворотки крови переносят пинеткой в сосуд для центрифугирования, прибавляют 2 мл насыщенного раствора оксалата натрия и 6—8 мл дважды дистиллированной воды. После основательного перемешивания стеклянной палочкой оставляют на 6—12 час. Затем вынимают палочку, ополаскивают ее дважды дистиллированной водой и центрифугируют в течение 10 мин. при 3000 об/мин. Сливают жидкость с осадка и внутренние стенки сосуда высушиваю г фильтровальной бумагой. Осадок оксалата кальция растворяют прибавлением 1 мл 1 н. раствора соляной кислоты, тщательно перемешивают стеклянной палочкой и ополаскивают стенки сосуда. Выделившиеся хлопья белка определению не мешают. Затем прибавляют 2—3 мг комплексоната магния, 2 мл Ъ -а. раствора аммиака, эриохром черный Т и титруют 0,001 М раствором комплексона Ш до перехода виннокрасной окраски в чисто-синюю. [c.461]

Определение остаточного азота слагается из следующих операций удаление из исследуемого материала белков, минерализация небелковых веществ при нагревании с серной кислотой и определение аммиака в полученном минера-лизате. Для определения аммиака можно воспользоваться уже знакомыми нам методами Кьельдаля или Конвея или же провести фотометрическое определение. Фотометрический метод определения остаточного азота был предложен Асселем и получил название метода Асселя. Он основан на колориметрировании желтой окраски, возникающей при добавлении реактива Несслера к содержащему аммиак ми-нерализату. Напомним, что в состав реактива Несслера входит иодистая ртуть, образующая с аммиаком комплексное соединение, окрашенное в желтый цвет. [c.235]

Для решения вопроса о современной оценке синтеза Велера автор привлек химический эксперимент, который дал возможность более четко выявить природу самой мочевины. В опытах хроматометрического окисления с целью определения теплотворной способности органических веществ (метод, предложенный и разработанный в 1942—1950 гг. [181) было показано, что мочевина является веществом, которое по совокупности свойств стоит значительно ближе к минеральной природе. Оказалось, что мочевина не окисляется хромовой смесью и не обугливается. Углерод в ней имеет такую же степень окисленности как и в углекислом газе и карбонатах в водном растворе мочевина и цианат аммония самопроизвольно изомеризируются друг в друга, образуя равновесную систему процесс образования мочевины из аммиака и двуокиси углерода экзотермичен, вопреки утверждениям многих биохимиков [20] энергия белков в организме при их распаде до мочевипы используется полней, чем это происходит при распаде белков до аммиака и т. д. Поэтому синтез Велера ныне должен быть отнесен не к органическим синтезам в современном понимании, а к процессам термической изомеризации сравнительно несложной природы веществ, ближе стоящих к неорганическим соединениям. [c.18]

Задача определения азота, входящего в состав амидов, содержащихся в физиологических жидкостях (и тканях), отличается от задачи определения содержания амидного азота в молекуле белка. В физиологических жидкостях, вследствие присутствия мочевины, а также других соединений, содержащих азот, метод полного гидролиза исследуемых соединений использован быть не может. Поэтому анализируемый образец подвергают гидролизу в мягких условиях, в результате которого только амиды, входящие в состав образца, превращаются в аммиак. При анализе некоторых жидкостей, например мочи, серьезной помехой является аммиак, поскольку он присутствует в количествах, значительно превосходящих количество амидов, и определяется с помощью любого метода, который может быть использован для определения аммиака, образующегося в результате гидролиза амидов. Борсук и Дубноф [5] в общих чертах описали ультрамикрометод определения амидов. Однако они не привели никаких данных относительно пределов применения этого метода, его надежности, а также воспроизводимости получаемых с его помощью результатов. Исследования этого метода в лаборатории автора показали, что при анализе таких веществ, как аспарагин, глутамин и ацетамид, он дает несколько заниженные и плохо воспроизводимые результаты. [c.209]

Определение аммиака после обычного или измененного разложения по Кьельдалю представляет менее серьезную проблему, чем это считалось. Преимущества микрокьель-далевской перегонки [69, 80—83] при сравнении с макрометодом или даже с полумикрометодами ныне общеизвестны. Сравнительное изучение макро- и микроопределений при анализе муки, пшена и кукурузы на содержание в них белков произведено Робинсоном и Шеллен-бергером [27], которые применяли микрометод Кьельдаля для систематического анализа белков плазмы [84, 85], слюны [86], молока [87] и спинномозговой жидкости [88]. [c.24]

С нингидрином реагируют не только а-, но и р- и у-аминокислоты, а также аминосахара, пептиды, белки, амины, аммиак, мочевина, креатин и другие ампносоединення. Кроме того, разные аминокислоты дают окрашивание различной интенсивности. Поэтому колориметрический нин-гидринный метод применим для количественного определения только индивидуальных аминокислот и не пригоден для суммарного определения смеси аминокислот, а также в случае сложных биологических смесей, где могут присутствовать аммиак и другие аминосоединештя. В помет,епии, где проводится определение, не должно быть следов аммиака. [c.44]

В биологических опытах обязательным условием проведения дихлоризоциануратной реакции является изотермическая отгонка аммиака. Определению аммиака прямым способом (т. е. без отгонки в чашках Конвея) в присутствии дихлоризоциануратного реактива мешает наличие в пробах небольших количеств белка и некоторых азотсодержащих соединений (5се1у е. а., 1967). [c.19]

В кювету объемом 20 мл вносят 2 мл взвеси митохондрий, 3,9 мл 0,45 М раствора КС1 и 0,1 мл 60 мМ раствора АМФ. Смесь быстро перемешивают и начинают измерения и запись pH. Учитывая измене ние pH среды,-время реакции и буферную емкость инкубационной смеси, рассчитывают скорость реакции и удельную активность фермента. На рис. 3 приведен пример записи реакции дезаминирования адениловой кислоты (АМФ) митохондриями печени крысы. 1 ельная активность аденилатдезаминазы. рассчитанная по кривой за первые 15 мин реакции, равна 1,8 нмоля NHg на мг белка в 1 мин. Активность, измеренная в этой же пробе путем определения аммиака методом Конвея, составила 1,6 нмоля NHs на мг белка в I мин. При сравнении результатов потенциометрического метода со спектрографическим (Kalkar, 1947) было получено полное совпадение. [c.41]

Первой задачей при определении строения природных полипептидов и белков является установление их аминокислотного состава. Основным методом для этого и сейчас служит гидролиз. Его можно проводить тремя способами обработкой белка 1или полипептида кислотой, щелочью или ферментами. Из этих трех возможных методов самым распространенным является кислотный гидролиз Выбор последнего обусловлен тем, что кислоты по сравнению со щелочами вызывают меньшее число побочных процессов, а в сравнении с ферментами проводят гидролиз более полно. Чаще всего пользуются 8N серной кислотой или 20%-ной соляной кислотой. В процессе кислотного гидролиза ряд аминокислот подвергается вторичным реакциям. Так, некоторые из аминокислот дезаминируются, распадаясь до оксикислоты и аммиака (гидролитическое дезаминирование) [c.477]

Гидролиз белков ЗМ /г-толуолсульфокислотой или АМ метан-сульфокислотой [7,8], содержащей 0,2% триптамина, в вакууме при 110°С, в течение 3 суток с хорощим выходом приводит к аминокислотам, включая триптофан, однако углеводы могут мешать. Триптофан можно определять также после щелочного гидролиза, но при этом разрушаются полностью аргинин, цист(е)ин, серин и треонин. Общее содержание амидов, обусловленное наличием аспарагина и глутамина, можно определить после гидролиза 10 М НС1 при 37°С в течение 10 суток и последующего анализа на аммиак с помощью микродиффузионной техники. Раздельное определение аспарагина и глутамина можно провести с помощью предварительной этерификации (метанол-уксусный ангидрид) свободных карбоксильных групп, последующего восстановления (борогидрид лития) образовавшихся сложноэфирных групп и определения аспарагиновой и глутаминовой кислоты после кислотного гидролиза соответственно в виде v-гидрокси-а-аминомасляной кислоты и б-гидрокси-а-аминовалериановой кислоты. Содержание аспарагина и глутамина получают путем вычитания этих величин из содержания аспарагиновой и глутаминовой кислот после полного гидролиза немодифицированного белка. Полный ферментативный гидролиз белков без деструкции аминокислот можно осуществить, используя смешанные конъюгаты Сефарозы с трипсином, химотрипсином, пролидазой и аминопептидазой М [9] [c.260]

Хлорирование ненасыщенных жирных кислот окисление до As , Т1 до иодида до иода Непрерывный контроль за содержанием H2S и SO2 в газах и воздухе бромирование олефинов, фенолов и ароматических аминов определение горЛгичного газа Определение белка в сыворотке окисление аммиака до азота [c.436]

В анализируемые растворы, склонные к пенообразова-нию, добавляют 1 каплю или, в случае необходимости, больше каприлового спирта, однако спирт нужно прибавлять в минимальных количествах, так как он может мешать определению реактивом Несслера вследствие образования белого осадка. Нужно следить за тем, чтобы спирт позднее был полностью окислен перекисью водорода при нагревании. Такое же количество каприлового спирта добавляют и в стандартные растворы. Добавляют 0,3 мл серной кислоты 1 1 и выпаривают воду на электрической нлитке. Продолжают нагревание 5 мин после появления белых паров. Снимают колбу и дают остыть 30 сек. Добавляют 0,1 мл 30%-ной перекиси водорода по стенке колбы, которую держат почти горизонтально. Нагревают еще 2 мин. Повторяют обработку перекисью водорода один, четыре или шесть раз, в зависимости от анализируемого объекта. При обычном определении азота в биологических жидкостях и экстрактах обработку перекисью водорода повторяют один раз, при анализе выделенных белков — четыре раза, а нри анализе таких стойких веществ, как рибофлавин, тиамин, фолиевая кислота, холин и никотиновая кислота,— не менее семи раз. Определения выполняют параллельно на двух пробах при обычной работе и на трех, если необходима большая точность. Охлаждают анализируемый раствор до комнатной температуры. Добавляют 20 мл дистиллированной воды, не содержащей аммиака, смывая ею стенки колбы. Помещают колбу на 5 сек в аппарат для перемешивания. Добавляют при перемешивании 5 мл [c.114]

В химии аминокислот используется много других аналитических способов. Определение азота по Къелъдалю дает содержание всего азота в белке или белковом гидролизате. При. этом определении органическое соединение разлагается путем, нагревания со смесью концентрированной серной кислоты и катализаторов, таких, как двуокись селена. Образующиеся аммонийные соли превращаются в аммиак, который отгоняют и титруют. Общее содержание азота заметно меняется в зависимости от характера аминокислот в белке. Количество азота, присутствующего в виде первичных аминогрупп, определяется по методу Ван-Слайка. Неизвестное вещество обрабатывают азотистой кислотой и измеряют объем выделяющегося азота. [c.539]

Глутамин выполняет аналогичную функцию в организме животного. Как уже отмечалось выше, организм животного синтезирует определенные аминокислоты ( заменимые ), используя для этой цели аммиак, образующийся при дезаминировании или пероаминировании пищевых белков или собственных белков организма. Однако аммиак токсичен для организма животного и образуется в крови лишь в крайне малых концентрациях. Установлено (Кребс), что почечная ткань содержит фермент, катализирующий образование глутамина из глутаминовой кислоты. Эта эндэргонная реакция происходит с участием аденозинтрифосфорной кислоты [c.396]

Второй метод определения азота разработан в 1883 г. Кьельдалем-, Навеску вещества нагревают с концентрированной серной кислотоГ , обычно с добавкой какого-либо окислителя (КМПО4, НСЮ4), в результате чего вещество разлагается, а содержащийся в нем азот превращается в аммиак и образует сульфат аммония. Раствор разбавляют п после прибавления избытка ш,елочи аммиак отгоняют с водяным паром, пропуская его в титрованный раствор серной кислоты. Титрованием непрореагировавшей кислоты можно определить количество образовавшегося аммиака. Метод Кьельдаля, будучи менее общим, чем метод Дюма, применяется для быстрого анализа веществ с низким содержанием азота, например белков. [c.22]

Было предположено компенсировать тормозящее действие аммиака и других веществ вычерчиванием кривой кажущегося содержания аргинина во взятом для анализа количестве белка [127]. Полагают, что при экстраполяции кривой до нулевой концентрации белка можно получить истинное значение аргинина. Такой общий метод был применен ранее Краусом и Ра-гинсом для триптофана и Бёшиллом, Лемпитом и Бекером для определения цистина. [c.53]

Основы метода. Тот факт, что тирозин только слабо растворим в нейтральных или слабокислых водных растворах, послужил основанием для определения и идентификации этой аминокислоты. Это было использовано первыми исследователями-ана-литиками белка для выделения минимальных количеств тирозина из белкового гидролизата. После гидролиза избыток кислоты удалялся и раствор аминокислоты доводился до нейтральной реакции аммиаком. Фильтрат концентрировался, и выпавший осадок сырого тирозина отфильтровывался. Маточный раствор концентрировался при этом получалась вторая порция кристаллов. Предполагалось, что эта операция будет повторяться до тех пор, пока маточник не будет давать отрицательную Миллонову реакцию. Однако этого редко удавалось достигнуть. Сырой тирозин очищался перекристаллизацией. [c.111]

При действии гипохлорита или гипобромита натрия а-нафтол конденсируется с метилгуанидином, агматином, гликоцнамином, аркаином и аргинином с образованием красноокрашенных пигментов. В белках аргинин — единственная аминокислота, дающая эту реакцию, и поэтому она может применяться для качественного и количественного определения аргинина в белках. Аммиак, гистидин, тирозин и триптофан могут мешать определению. [c.163]

Промежуточный метаболизм складывается из двух фаз-катаболизма и анаболизма. Катаболизм-это фаза, в которой происходит расщепление сложных органических молекул до более простых конечных продуктов. Углеводы, жиры и белки, поступившие извне с пищей или присутствующие в самой клетке в качестве запасных веществ, распадаются в серии последовательных реакций до таких соединений, как молочная кислота, СО 2 и аммиак. Катаболические процессы сопровождаются высвобождением свободной энергии, заключенной в сложной структуре больших органических молекул. На определенных этапах соответствующих катаболических путей значительная часть свободной энергии запасается благодаря сопряженным ферментативным реакциям в форме высокоэнергетического соединения - аденозинтрифосфата (АТР). Часть ее запасается также в богатых энергией водородных атомах кофермента никотинамид адениндинуклеотидфосфата, находящегося в [c.379]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология