Фракционирование методом элюирования из колонки

Осуществление фракционирования методами последовательного растворения предполагает перевод полимера в соответствующее физическое состояние с последующим экстрагированием фракций с возрастающими молекулярными весами с помощью ряда элюирующих жидкостей, растворяющая способность которых увеличивается. В отличие от методов последовательного осаждения нри фракционировании методами последовательного растворения первой выделяется фракция с минимальным молекулярным весом, а последней — фракция с максимальным молекулярным весом. На практике используются весьма разнообразные экспериментальные приемы. Можно экстрагировать тщательно измельченный полимер или наносить его в виде пленки на тонкую алюминиевую фольгу или на носитель (например, песок) нри экстрагировании в колонке. Можно также проводить избирательное экстрагирование концентрированного раствора (коацерват), содерн ащего значительное количество полимера. Общим для всех этих способов является подготовка полимера в такой форме, которая позволяет осуществить быстрое экстрагирование элюентом. Необходимо удерживать полимер в процессе фракционирования неподвижным, так чтобы экстрагирование осуществлялось при минимальных механических воздействиях на образец. Ниже будут подробно рассмотрены различные методы экстрагирования. Следует отметить, что в литературе проводится различие между методами экстрагирования полимера из колонки. Если полимер экстрагируется при постоянной температуре, то процесс называют последовательным растворением или фракционированием методом элюирования. Если же нри фракционировании применяется градиент температуры как один, так и совместно с градиентом концентрации растворителя, то процесс называют хроматографическим фракционированием. В этой главе будет рассмотрен метод последовательного растворения и одновременно проведено сравнение с методом хроматографического фракционирования, поскольку различия между этими методами заключаются не столько в их природе, сколько в названиях. [c.62]

Г. Фракционирование методом элюирования из колонки [c.72]

Рис. 3-5. Прибор для фракционирования методом элюирования из колонки [4].

Как видно из проведенного выше обсуждения, существует ряд факторов, которые необходимо учитывать при проведении фракционирования полимера методом элюирования из колонки. Здесь эти факторы рассматриваются в рамках метода фракционирования на колонке, однако большинство их играет важную роль и в других способах фракционирования методом последовательного растворения. Все же основное внимание уделяется методам элюирования из колонки, что, видимо, оправдано широкой областью их применения] и уровнем исследования теоретических основ этих методов. [c.74]

При фракционировании полимеров методом элюирования из колонки нередко происходит обращение молекулярных весов с номером фракции, особенно в области больших молекулярных весов. Существует ряд приемов, позволяющих избежать такого обращения. Френсис с сотр. [37], фракционируя линейный полиэтилен, показал, что в некоторых случаях подобное обращение обусловлено слишком высокой температурой фракционирования и недостаточной защитой против окисления образцов. Причиной возникновения обращения молекулярных весов оказывается также образование каналов в колонке, которое усиливается в результате высокой вязкости растворов фракций с наибольшими молекулярными весами. В общем случае рекомендуется тщательно набивать колонку, скорости потока поддерживать такими, чтобы концентрация полимера в растворе была небольшой [41], и применять колонки с обратным потоком [4]. [c.80]

Данные фракционирования полиэтилена высокой плотности методом элюирования на колонке, заполненной песком [c.356]

Сравнения результатов, полученных при фракционировании двумя независимыми методами, показали, что селективность как в области низких, так и в области высоких молекулярных весов несколько выше для метода дробного растворения. Разрешающая способность предлагаемого метода выше для высокомолекулярных фракций полиэтилена по сравнению с методом элюирования на колонке при приведенных рабочих размерах прибора. [c.111]

Фракционирование поли-3,3-бис(хлорметил) оксациклобутана прн 116—117° С методом элюирования в колонке показало, что распределение по молекулярному весу является узким, отношение Ми,/М находится в пределах 1,1—1,6. На основе осмометрических измерений зависимость характеристической вязкости от молекулярного веса в растворе циклоге -санона при 40° С выражается уравнением [190] [c.752]

Ранние хроматографические методы фракционирования и анализа полимеров, такие, как осадительная хроматография Бейкера — Вильямса и элюирование в колонке без температурного градиента, в настоящее время развиваются мало. Они хорошо и достаточно полно описаны в ранее вышедших руководствах по фракционированию полимеров и поэтому в данной книге не рассматриваются. [c.9]

При определении ММР полиэтилена методом ГПХ получено хорошее соответствие с результатами обычного ступенчатого элюирования [59]. В этих экспериментах насадкой служил коммерческий стирогель, а фракционирование вели в ТХБ при 135 °С. Для анализа полиэтилена необходима колонка с высокой разрешающей способностью в диапазоне молекулярных масс более 10 , поскольку кривая распределения этого полимера сильно асимметрична и простирается в область чрезвычайно [c.288]

В отличие от гель-хроматографии полимеров при фракционировании олигомеров очень важно работать с колонкой, обладающей высокой эффективностью и хорошим разрешением, так, чтобы минимумы между отдельными пиками достигали базовой линии. Это позволяет выделять и идентифицировать отдельные олигомеры независимыми методами. Экспериментально было показано, что при элюировании олигомерных соединений влияние концевых и боковых групп проявляется сильнее, нежели при элюировании полимеров. По сравнению с высокомолекулярными соединениями в образовании усредненной конфигурации молекул олигомеров значительно более важную роль [c.298]

Ири фракционировании веществ методом ШХ загрузка сефадекса раствором пробы достигает 1—4% от объема набивки в колонке. Элюирование всех компонентов смеси обычно заканчивается при прохождении через колонку объема элюента, равного полному объему набивки. Ожидаемое разбавление вещества в элюате — 5—20-кратное. ГПХ на сефадексах — исключительно мягкий метод разделения веществ, очень редко приводящий к денатурации лабильных соединений. Выход вещества, если нет специфической адсорбции, приближается к 100%. [c.56]

При таком методе получения триэфиров в реакционной смеси всегда остается небольшое количество непрореагировавших исходных диэфиров, от которых обычной фракционированной разгонной в вакууме освободиться невозможно. Триэфиры очищали пропусканием через хроматографическую колонку с окисью алюминия, элюирование проводили петролейным эфиром. Контроль за разделением веществ осуществляли тонкослойной хроматографией на пластинках с закрепленной АГ Оз. Полученные триэфиры оказались [c.51]

При некоторой модификации и учете того, что образцы обычно приготовляют в виде плоских кружков, эти методы могут быть использованы для испытаний при другого рода опытах. Например, они могут быть применены при фракционированном элюировании из хроматографической колонки, при анализе ила [c.244]

По мнению автора настояш ей главы, градиентное элюирование из колонки является самым гибким и эффективным способом фракционирования по молекулярным весам, основанным на последовательном растворении. Прямое экстрагирование наиболее ценно для предварительного разделения полимеров по составу или строению, но этот способ фракционирования в последние годы мало используют для разделения образцов на фракции по молекулярным весам. Метод Фукса (экстрагирование полимерной пленки) весьма эффективен при фракционировании низкомолекулярных образцов полимеров, но при фракционировании высокомолекулярных образцов возникают значительные сложности (рис. 3-2 и [14]). [c.81]

Метод градиентного элюирования, по-видимому, не является строго одностадийным процессом. Порция свежего элюента, перемещаясь вдоль колонки, вытесняет находившийся уже в колонке более плохой растворитель из самого гелеобразного слоя (стационарного слоя на поверхности насадки) и из промежутков между частицами, заполняющими колонку. Эти эффекты могли бы привести к осаждению части полимера и последующему повторному растворению фракции при прохождении ее через колонку. Напротив, метод хроматографического фракционирования может и не иметь значительного числа стадий, которого следовало бы ожидать. Длительность эксперимента может оказаться недостаточной для осуществления нескольких стадий растворение — осаждение. Кроме того, было показано, что температурный градиент способствует возникновению обратной диффузии уже элюированного полимера [53] и тем самым может резко снизить число эффективных стадий фракционирования. Решить эти проблемы мон но будет лишь после дальнейших исследований. [c.82]

При препаративном фракционировании на колонках современное оборудование позволяет получить фракции с узким распределением по молекулярным весам в количестве 5—10 г каждая. Эти количества выделяемых фракций составляют верхний предел как при градиентном элюировании [33], так и при хроматографическом разделении [35]. При необходимости широких исследований физических свойств, механических характеристик или химической природы выделенных фракций часто приходится разрабатывать специальные методы исследований, которые возможно применять на малых количествах образцов, с тем чтобы сохранить ценные фракции полимеров. На практике возможность получения больших количеств фракций с узкими распределениями по молекулярным весам могла бы в значительной мере упростить многие исследования. Одна группа исследователей полагает, что для препаративного фракционирования можно применить соответствующим образом модифицированные методы химической технологии и успешное решение этой проблемы оказало бы значительное влияние на развитие исследований в области полимеров. [c.83]

Два других экспериментальных факта оказываются полезными при оценке корректности кривой элюирования. Несоответствие полярностей молекул образца и геля, т. е. их несовместимость, проявляется в том, что начало пика на кривых элюирования серии уменьшающихся количеств образца появляется в каждом случае все позже. При нормальном фракционировании, если колонка не перегружена, уменьшение количества образца в два раза должно обусловить незначительное сужение пика по месту пересечения кривой с нулевой линией и не должно заметным образом изменить форму пика. Другой способ проверки заключается в повторном фракционировании отобранных фракций. Такой способ будет рассмотрен в разделе, посвященном методам обработки данных фракционирования. [c.147]

Относительно нетрудно создать гелевую колонку, которая при разделении чистых образцов небольшого молекулярного веса обладала бы эффективностью в пределах 10 ООО—20 ООО теоретических тарелок. С помощью таких колонок можно получить кривые элюирования, которые используются вместе с кривыми калибровки по элюирующим объемам непосредственно для построения кривых распределения по молекулярным весам. С помощью линейного детектора, например дифференциального рефрактометра непрерывного действия, регистрируемую кривую элюирования можно непрерывно интегрировать на самопишущей приставке. Такое интегрирование не учитывает того, что элюирование любого образца из заполненной носителем колонки сопровождается некоторой продольной диффузией. С другой стороны, может оказаться, чГо даже неисправленные данные фракционирования на колонке с гелем более точны, чем полученные доступными ранее методами результаты, и этих данных будет достаточно для сравнительных исследований. [c.153]

Весслау [24] сравнил фракционирование полиэтилена высокой плотности посредством ступенчатого элюирования из песочно колонки с обычным методом осаждения и получил сравнимые результаты, хотя метод элюирования требует значительно меньшего времени. Весслау нанес также данные Танга [27], Тремонтоцци [28], Духа и Кюхлера [11] на общий график и получил соотношение [c.90]

Ямагучи с сотр. [21г] экстрагировал по,липропилеп в обогреваемом приборе Сокслета последовательно этиловым эфиром, н-пентаном, к-гекса-ном, и-гептаном, толуолом и и-октаном, а затем сравнили результаты с данными фракционирования на колонке при 166° в смеси декагидронафталин — бутилкарбитол. При этом оказалось, что постадийное фракционирование методом экстрагирования осуществлялось в первую очередь по степени микротактичности молекул и слабо зависело от молекулярного веса. В то же время элюирование из колонки проходило в соответствии с молекулярными весами фракций и степень микротактичности всех полученных на колонке фракций изменялась в довольно узком диапазоне. Данные этой работы свидетельствуют также о том, что при высоких степенях упорядоченности показатель степени микротактичности, предложенный Луонго [17], в известной мере зависит от молекулярного веса. [c.69]

Опубликованные около 15 лет назад теоретические и экспериментальные работы Деро и сотр. [11—13] в значительной степени создали основу для современных возможностей исследования высокомолекулярных соединений. До применения методов Деро фракционирование полимеров представляло собой необычайно длительную и дорогостоящую процедуру и могло использоваться для исследований лишь крайне важных и интересных типов полимеров. Метод последовательного растворения, развитый Деро, заключается в элюировании нанесенного на поверхность насадки в колонке полимера и позволяет проводить фракционирование полимера относительно быстро. Метод допускает автоматизацию процесса фракционирования и с успехом применяется [33] для фракциовирования образцов весом до 50 г на отдельные фракции в количествах по 2—3 г кан дая с довольно узкими распределениями по молекулярным весам. Из всех методов последовательного растворения элюирование полимера из колонки является наиболее универсальным и широко применяемым методом. Элюирование из колонки с успехом использовали для всех типов полимеров (см. таблицы в гл. 15). Ниже в качестве примера будет рассмотрено только фракционирование изотактического полипропилена, проведенное Шилаком [4], поскольку в указанной работе подробно исследованы условия, необходимые для успешного фракционирования. [c.72]

Скорость элюирования полимера из фракционирующей колонки — важный фактор, обусловливающий высокое разрешение при фракционировании. Однако и в этом случае, как и для многих других аспектов фракционирования полимеров, можно сформулировать лишь общие положения, а не абсолютные правила. Концентрация полимера в выходящем из колонки растворе долн на быть далека от точки насыщения. Сделанное Флори [1] предположение о том, что максимальная концентрация должна быть пропорциональна степени полимеризации в степени — /2, нашло качественное подтверждение [3]. Гиллет с сотр. [38], используя метод хроматографии, нашел оптимальную скорость потока, причем, оказалось, что те же предположения Флори справедливы и для градиентного элюирования. При слишком высокой скорости потока фракционирование проходит недостаточно полно, вероятно, в результате низкой скорости диффузии. При слишком низкой скорости потока процесс фракционировапия может осложняться обратной диффузией. Оптимальную скорость потока следует определять для каждой системы полимер — растворитель, и в процессе фракционирования мончет оказаться, что для улучшения разделения следует изменять скорость потока через колонку. В колонках с обратным направлением потока легче осуществлять контроль за скоростью потока, чем в колонках, где поток жидкости обусловлен силой тяжести [4]. Гернерт с сотр. [39] описали регулятор скорости потока, который может изменять скорость в широком диапазоне и способен компенсировать через каждые 3 мин случайные изменения скорости потока, достигающие 10%. В принципе при аналитическом фракционировании (1—2 г) полимеров удовлетворительные результаты можно получить при скоростях элюирования 2—6 мл/мин [4, 37, 38, 41, 42]. Такие скорости элюирования можно, вероятно, принять в качестве исходных при работе с новой системой полимер — растворитель. При препаративном фракционировании скорости элюирования, очевидно, следует соответственно изменить. [c.79]

Число опубликованных работ, в которых проводится сравнение различных методов фракционирования, невелико. Назини и Мусса [26] показали, что при фракционировании полиэтилена метод экстрагирования коацервата позволяет получить гораздо более удовлетворительные результаты, чем метод Деро или последовательное осаждение. Затруднения при фракционировании методом Деро могут, однако, быть обусловлены присутствием некоторой доли кристаллического полимера. С другой стороны, Вийджа с сотр. [52] показал, что метод элюирования из колонки дает весьма удовлетворительные результаты при фракционировании кристаллического полипропилена. Дэвис и Тобиас [29] сравнили методы последовательного осаждения, экстрагирования коацервата и элюирования из колонки применительно к этому же полимеру. Авторы показали, что метод элюирования из колонки приводит к гораздо меньшей степени деструкции образцов и позволяет получить хорошо воспроизводимые данные. [c.81]

Шнайдер [41[ провел критическое рассмотрение различных параметров, играющих важную роль как в методе градиентного элюирования, так и в методе хроматографии. Данные, получаемые обоими методами, весьма сходны между собой, за исключением того факта (обнаруженного при последующих сравнительных исследованиях на полистироле), что метод Бейкера — 13ильям-са позволяет получить более высокомолекулярную фракцию в конце фракционирования. Отмеченное сходство результатов фракционирования методами хроматографии и градиентного элюирования весьма удивительно, если исходить из положения, что градиентное элюирование представляет собой одностадийный процесс, а хроматографическое фракционирование — многостадийный процесс, так как в этом случае при перемещении через колонку фракция подвергается многократным последовательным осаждениям и растворениям под влиянием градиента температуры и градиента концентрации растворителя. Очевидно, избирательное осаждение, обычно применяемое при фракционировании методом градиентного элюирования, но, как правило, не используемое при хроматографическом фракционировании, играет значительную роль и может оказаться одной из причин близости результатов, полученных обоими методами. [c.82]

Другой способ нанесения полимера на насадку заключается в медленном охлаждении раствора полимера в присутствии стеклянных шариков до тех пор, пока весь полимер не перейдет в осадок [23]. По-видимому, подобное нанесение полимера могло бы привести к более высокому разрешению при фракционировании, ибо полимер при этом должен откладываться на шариках в порядке уменьшения молекулярного веса. Такое нанесение полимера, как было показано, является весьма важным для получения удовлетворительных результатов при фракционировании путем элюирования [25]. Эффективность фракционирования на колонке должна возрастать, поскольку указанный порядок нанесения полимера должен облегчить фракционирование. Аналогичный способ охлаждения раствора полимера, но непосредственно в колонке, описали Гиллет с сотр. [26]. Эти авторы, очевидно, все-таки заполняли всю колонку раствором полимера. В таком случае процесс фракционирования более сходен с комбинированием хроматографического фракционирования и элюирования, а не с каждым из этих методов фракционирования по отдельности. [c.96]

В этом примере используются данные фракционирования образца полиэтилена высокой плотности, полученные Лепсли и Паско [13], с тем чтобы продемонстрировать графическое построение интегральной кривой распределения методом Шульца. Кроме того, будет рассмотрено получение дифференциальной кривой распределения с помощью уравнения (13-11). Данные Лепсли и Паско были получены методом элюирования на колонке, в которой в качестве носителя использовали песок (см. гл. 3), и представлены в табл. 13-2. [c.356]

В работе [112] изучены возможности определения молекулярно-массового распределения целлюлозы при помощи перевода в трикарбанилат и фракционирования. Целлюлозы (молекулярная масса 2,97-10 и 1,25-10 ) превращали в карбанилаты, которые фракционировали элюированием водно-ацетоновой смесью постоянного состава с постепенным повышением температуры колонки от —30 до 30 °С, а также с помощью гель-проникающей хроматографии в ацетоне и тетрагидрофуране. Тетрагидрофуран оказался более удобным растворителем. Молекулярные массы фракций, полученных при элюировании, были определены методом светорассеяния в тетрагидрофуране. Ширину фракций определяли методом гель-проникающей хроматографии (среднее Л1о../М = 1,37) определены величины К и константа Марка — Хоувинка а (/С=5,3-10 а = 0,84) в тетрагидрофуране при 25 °С. В работе [112] была показана также возможность использования универсальной градуировочной кривой Бенуа, а также то, что молекулярно-массовое распределение целлюлозы можно определить при помощи перевода в трикар-банилаты после фракционирования на колонке (для препаративных целей) или фракционирования методом гель-проникающей хроматографии (для аналитических целей). [c.475]

Термическую деструкцию полимера на основе полиоксипро-пиленгликоля и толуолдиизоцианата изучали [702] фракционированием путем элюирования на колонке. Как было показано в работе [703], в процессе термической деструкции полиуретанов протекает деполимеризация. Для определения газообразных продуктов термодеструкции полиуретанов применяли [704] прибор Сетчкина для сжигания в сочетании с масс-спектрометром. В работе [705] изучали фотодеструкцию полиуретанов, а в работе [706] исследовали механизм термолиза модельных уретанов. Изучено [707, 708] выделение цианистого водорода из линейных полиуретанов. Описаны устройство и методика работы системы, включающей термовесы, непосредственно связанные с квадрупольным масс-спектрометром. Возможности применения этого метода для анализа полиуретанов иллюстрируются рядом примеров [709]. Для идентификации полиуретанов использовали [710] дифференциальный термический анализ. [c.560]

Фракционирование белков сыворотки крови на КМ-целлюлозе осуществляют с помощью ступенчатого элюирования, подавая на колонку последовательно следующие растворы 0,02 М натрий-ацетатный буфер, pH 4,6 ( стартовый буфер), затем 0,05 М натрий-ацетатный буфер, pH 5,2 0,08 М натрий-ацетатный буфер, pH 6,0 0,1 М фосфатный буфер, pH 7,0 и, наконец, 0,1 М фосфатный буфер, содержащий 0,5 М Na l, pH 8,3. Каждый новый раствор подают на колонку только после того, как полностью элюируется пик, вымываемый предыдущим раствором. Скорость тока приблизительно составляет 50 мл/ч. Элюат собирают порциями по 2—3 мл. Обработку результатов см. на с. 108. Идентификацию белков осуществляют методом электрофореза на бумаге или в полиакриламидном геле (с. 112). Регенерацию КМ-целлюлозы проводят вне колонки. [c.113]

Для препаративного фракционирования лигнинов использовали электродиализ, ступенчатое извлечение из древесины, ступенчатое осаждение из растворов, элюирование из хроматографических колонок, а для аналитического фракционирования - ультрацентрифугирование, турбиди-метрическое титрование и эксклюзионную жидкостную хроматографию. При изучении молекулярно-массовых характеристик препаратов лигнина привлекались практически все методы определения молекулярной массы полимеров. [c.413]

Разновидностью метода фракционирования на колонке является гель-хроматография [86]. В качестве разделительного вещества применяют органические или неорганические вещества (например, силикагель) пористой структуры с размером пор, зависящим от плотности сшивок и условий получения. Для фракционирования полимеров, растворимых в воде, чаще всего применяют набухший в воде декстран с различной степенью сшивания (сефадекс). Для растворов полимеров в органических растворителях применяют сшитые полистиролы или сополимеры метилметакрилата с этилен-гликольдиметакрилатом. Образец полимера растворяют, заливают в колонку и элюируют, используя тот же самый растворитель. Небольшие молекулы полимера свободно диффундируют внутрь геля. Размеры некоторых молекул оказываются настолько большими, что им не удается проникнуть внутрь пор, в результате чего они первыми выходят из колонки при элюировании. Продолжительность элюирования фракций возрастает с уменьшением размера макромолекул. Существует критическое значение молекулярной массы, ниже которого макромолекулы полимера могут проникать в поры сетки и поэтому могут быть разделены. Молекулы большего размера уже не могут быть разделены, так как они не могут диффундировать в гель. Частота сетки геля и критическое значение молекулярной массы связаны между собой простой зависимостью чем чаще сетка, тем меньше критическое значение молекулярной массы. [c.83]

Фриш и Е Си-лун [94] применили хроматографический метод для фракционирования искусственной смеси двух образцов полистирола путем высаживания полимера на носитель (сажа, осажденная на целите) и последующего элюирования фракций при помощи различных растворителей метилэтилкетона (плохой растворитель), толуола (удовлетворительный) и тетралина (хороший растворитель). Разделение проводили при комнатной температуре на колонке обычного типа с термостатированными стенками. Концентрацию полимера в элюате контролировали рефрактометрически молекулярные веса контролировали вискозиметрически, пользуясь известными константами. Было установлено, что меньшие молекулы десорбируются в первую очередь. Чгм лучше растворитель, тем полнее извлечение, включая и самую высокомолекулярную часть. Однако авторам не удалось вернуть более 80% осажденного полимера, поэтому они пришли к заключению, что этот метод может дать лишь весьма приближенную картину МВР. [c.52]

Было показано [59], что результат фракционирования полипропилена методом экстракции в колонках зависит от примененной методики. Элюирование при постоянной температуре (150° С) с постепенным изменением соотношения растворителя (керосин, ксилолы) и осадителя (бутилкар-битол) позволяет выделить узкие фракции, отличающиеся по молекулярным весам. Фракционирование в колонке с последовательным повышением темцературы дает возможность произвести разделение по степени кристалличности. Комбинация обеих методик дает наиболее полную характеристику полимера. [c.55]

Разработан метод фракционирования ДНК бактерий и животных, основанный на взаимодействии с фиксированными на кизельгуре синтетическими или природными полинуклеотидами в виде соли с гексамминкобальт(П) [95]. Для этих целей используют денатурированную ДНК, поли-А, поли-1, поли-С, поли-U. Взаимодействие между компонентами смеси и иммобилизованным полинуклеотидом не связано с их комплементарно-стью и зависит от присутствия диоксана. Элюирование проводят в линейном градиенте концентрации диоксана в буферном растворе. В этих условиях на колонке с поли-1 удалось разделить комплементарные нити денатурированной ДНК Е. соИ, а на колонке с ДНК из клеток животных было проведено частичное фракционирование тРНК и рРНК [95]. [c.77]

Данная глава посвящена выделению хроматографическими методами интактных клеток и субклеточных частиц. Многие исследователи выделяют вирусы и субклеточные частицы хроматографированием на пористых стеклах, гелях, ионитах для фракционирования клеток чаще всего пользуются пористыми стеклами. Очевидно, наиболее перспективным в этом отношении методом следует считать аффинную хроматографию. Действительно, фракционирование клеток на хроматографических носителях, так называемая хроматография сцепления (adheren e), имеет много общего с аффинной хроматографией. Клетки определенного типа вначале более или менее избирательно сорбируют на носителе, а затем после удаления сопутствующих примесей элюируют подходящим элюентом. Однако на практике вторую стадию часто опускают и проводят элюирование путем экстракции в статических условиях. И наоборот, многие операции, проводимые в статических условиях, можно выполнять на хроматографических колонках. Именно по этой причине чрезвычайно трудно провести четкую границу между строго хроматографическими методами и элюированием в статических условиях. [c.309]

Разделение в ЭХ основано на различии в дайне пути, который проходят в колонке молекулы разного размера. Заполнитель колонки (гель) имеет поры определенного размера. Если в разделяемом образце есть молекулы, размеры которых не позволяют им проникать в поры геля, эти молекулы проходят с потоком элюента только между частицами геля и выходят из колонки. Молекулы небольшого размера могут прошкать во все поры геля, путь их удлиняется, и они задерживаются в колонке большее время. И наконец, молекулы средних размеров проникают только в некоторые поры, иугь их оказьшается средним по длине, и они выходят из колонки между крупными молекулами, полностью исключающимися из пор геля, и молек лами, полностью проникающими в них. Область между исключением и . лолньш проницанием составляет область фракционирования геля, т. е. определяет те границы размеров молекул, которые могут подвергаться разделению на данном геле. Таким образом, одна из отличительных особенностей ЭХ - большие молекулы элюируются из колонки раньше, чем молекулы меньшего размера. Основным параметром, характеризующим разделение в ЭХ, является обьем элюирования или объем удерживания. В других методах ЖХ компоненты образца задерживаются в колонке и элюируются после неудерживаемого пика растворителя, т. е. объем элюирования компонентов образца больше объема подвижной фазы в колонке. В ЭХ компоненты образца частично (или полностью) исключаются из геля (заполнение колонки) и элюируются перед пиком растворителя, т, е. объем элюирования образца меньше объема подвижной фазы в колонке в этом другая особенность ЭХ. [c.72]

Те же идеи — использование принципа молекулярных сит, но уже на пористых материалах, обладающих весьма малым сорбционным сродством по отношению к сорбатам, и не в одноактном, а в многоактном колоночном процессе — послужили основой для создания нового хроматографического метода — гельфильтрации. Первая работа по гельфильтрации была выполнена на крахмале [20]. Однако настоящий успех этого метода связан с получением и использованием гелей сшитого декстрана — сефадексов [21]. Фракционированный порошок сефадекса после его набухания в воде или в растворе помещается в колонку, заполненную той же жидкостью, в которой он набухал. Обычный хроматографический процесс в такой колонке протекает при элюировании предварительно введенной в верхнюю часть колонки смеси веществ с помощью воды или раствора электролита, чаще всего [c.201]

Как указано в ранних обзорах ЦО], примерно до 1946 г. фракционирование полимеров последовательным растворением проводили методом прямого экстрагирования. После опубликования работ Деро и сотр. [11—13], в которых впервые был предложен метод градиентного элюирования в колонке, прямое экстрагирование лишь иногда применяют для фракционирования по мо.текулярным весам. Трудность метода прямого экстрагирования заключалась в том, что полимерные частицы сильно набухают в процессе экстрагирования и приблизиться к равновесным условиям чрезвычайно трудно [9, 14]. Позже, однако, открытие методов стереоспецифического синтеза полимеров Натта и его сотрудниками вновь резко увеличило значение метода прямого экстрагирования как мощного средства предварительного фракционирования таких образцов по строению для последующего разделения уже однородного но строению образца на фракции в соответствии с их молекулярными весами. Методика проведения фракционирования рассматриваемым методом проста и состоит в экстрагировании тщательно измельченного полимера в колбе или экстракторе/ при соответствующей температуре. Кригбаум с сотр. [15] осуществил выделение атактической фракции полибутена-1 путем экстрагирования исходного образца кипящим этиловым эфиром (изотактическая часть образца не растворялась в таких условиях). Обе полученные таким способом фракции фракционировали затем уже по молекулярным весам. Ваншутен и сотр. [16] провели фракционирование большого количества полипропилена (1000 г), разделив образец на фракцию, растворимую в кипящем эфире, и фракцию, растворимую в кипящем гептане. Последняя фракция вместе с нерастворимым в гептане остатком разделялась затем для последующих исследований физических и механических свойств полимера. Для исследования полипропилена методом инфракрасной спектроскопии Луонго [17] получил атактический полимер путем экстрагирования ацетоном образца, синтезированного в присутствии [c.67]

Количество образца, загружаемого в гелевую колонку, влияет на степень разрешения компонентов этого образца тремя взаимосвязанными способами, как и при других методах фракционирования на колонке. Объем самого образца прибавляется к элюирующему объему колонки, характерному для каждого комнонента образца. Далее концентрация каждого компонента влияет на ширину пика элюирования этого компонента. Это влияние становится более выраженным при увеличении размера молекул. Другое ограничение на концентрацию образца накладывает вязкость полимерного раствора,— это так называемое вязкое контактирование . Чем более резко меняется вязкость на задней границе зоны образца, тем менее устойчивой становится эта граница. Разрежение, создаваемое вязким течением образца, вынуждает далее растворитель просачиваться через некоторые слабые точки в колонке, при этом распределение скоростей в потоке жидкости становится весьма неоднородным до тех нор, нока не произойдет значительного уширения границы. В работе, посвященной фракционированию гемоглобина и соли на высокомолекулярных декстранах, Флодин [1] показал, что удовлетворительное разделение происходит при вязкостях ниже 4 сантипуаз. Если вязкости превышали указанный предел, разделение нарушалось, и при вязкости 11,8 сантипуаз профиль зоны сильно искажался и зона расширялась. [c.146]