Методы элюирования и скорость элюирования

Преимуществом колоночной хроматографии является возможность количественного фракционирования больших количеств веществ без превращения их в какие-либо производные. Однако хорошее разделение часто возможно лишь при малых скоростях элюирования, поэтому были разработаны новые виды колоночной хроматографии. Методы аффинной и адсорбционной хроматографии основаны на избирательной адсорбции молекул на нерастворимом адсорбенте, который содержит группы (молекулы), специфически взаимодействующие с молекулами подлежащих очистке соединений, например ингибиторы (для очистки ферментов) или антитела (для очистки антигенов) в настоящее время эти методы нашли широкое применение и для разделения углеводов. Невзаимодействующие с адсорбентом примеси удаляются, а связанный с адсорбентом сахар затем десорбируют способом, не приводящим к его разрушению. Десорбцию можно осуществить, изменяя pH, ионную силу среды или применяя соответствующий ингибитор взаимодействия, удерживающего вещество на адсорбенте. Для разделения ряда полисахаридов были использованы иммобилизованные формы (см. разд. 26.3.7.6) конканавалина А [40], являющегося фитогемагглютинином (лектином), который специфически взаимодействует с разветвленными полисахаридами определенного строения в настоящее время применяют и другие иммобилизованные фитогемагглютинины. Колоночная хроматография на носителях, покрытых полиароматическими соединениями [41], также находит применение для разделения полисахаридов. Благодаря достижениям в производстве носителей для жидкостной хроматографии под высоким давлением можно осуществить хроматографическое разделение быстро и избирательно описаны методы фракционирования небольших олигосахаридов, продолжающегося менее 1 ч [42]. [c.224]

Разделение разнообразных смесей неорганических ионов трудностей не вызывает и осуществимо в самых разных системах ионообменной хроматографии. Методы эти известны давно, однако до последнего времени они имели довольно ограниченное аналитическое применение. Это объясняется относительно невысокой скоростью элюирования, значительным размыванием хроматографических зон на ионообменных сорбентах. Трудности вызывает также детектирование ряда ионов. В последние годы значительное развитие получила ионная хроматография. Хотя этот термин стал общепринятым, мы считаем, что он не вполне удачен, так как характеризует объект анализа и поэтому не согласуется с принятой классификацией хроматографических методов. С точки зрения этой классификации все разделения, которые происходят в ионном хроматографе есть ионообменная хроматография в несколько новых условиях реализации процесса. Рассмотрим некоторые типичные варианты анализа ионов [86, 87]. [c.326]

Методы разделения при регулировании кислотности раствора можно применять для отделения магния почти от всех металлов и особенно от щелочных и щелочноземельных, так как в этом случае неприменимы методы, основанные па комплексообразовании (см. табл. 13). Для успешного разделения необходимо строгое соблюдение рекомендуемых в методиках условий (кислотности, количества элюента, размеров колонки и скорости элюирования). В некоторых случаях введение органического растворителя повышает сорбцию магния катионитом [158]. О разделении Mg, Са, Sr и Ва па микрокристаллической целлюлозе см. в [714]. [c.53]

Однако бумага как носитель не лишена некоторых недостатков. Она имеет низкую емкость по отношению к экстрагентам, что вынуждает работать с. очень небольшими количествами элементов и осложняет последующее детектирование элементов. Скорость элюирования меняется в зависимости от количества нанесенного экстрагента или ионной силы элюента она также меняется по мере движения фронта элюента. Величина скорости элюирования имеет большое значение, так как часто кинетические эффекты влияют на механизм удерживания. Кроме того, вдоль хроматограммы может меняться отношение объемов фаз, а также концентрация компонентов в элюирующем растворе. Несмотря на это, в большинстве случаев результаты, полученные на бумаге, сравнимы с результатами, полученными методами, которые свободны от этих недостатков. Это справедливо не только по отношению к зависимости м =lg(l/iг/—1)] от разных параметров, но и по отношению к факторам разделения, полученным для двух заданных элементов. [c.463]

Шенкер и Риман [48] использовали этот метод, т. е. элюирование боратным буфером из колонки с дауэксом, для разделения яблочной, винной и лимонной кислот, находящихся во фруктах. Разделение длилось около 8 ч кислоты определяли с точностью 1 мг. В этих опытах использовали колонку, наполненную дауэксом 1 (100—200 меш) размером 25 см X 3,8 см , скорость подвижной фазы составляла 0,8 мл/мин см . В качестве элюентов применяли А) 0,08 М раствор нитрата натрия, 0,0013 М раствор тетрабората натрия и 0,3 М раствор борной кислоты Б) 0,16 М [c.174]

ЭТОМ оказалось, что оптимальная скорость элюирования основных аминокислот достигается лишь при использовании более концентрированных буферных растворов. Однако при значительном изменении концентрации и pH буфера наблюдалось увеличение объема набухшего ионита и возрастание гидродинамического сопротивления колонки. Одновременно повышался уровень базовой линии. Кроме того, в этих условиях после каждого опыта приходилось извлекать иониты из колонки, а затем, после их регенерации, вновь набивать колонку. В итоге оказалось удобнее проводить анализ образца на двух колонках. На первой осуществляли анализ кислых и нейтральных аминокислот, а сумму основных аминокислот вытесняли в конце анализа гидроокисью натрия. На второй, более короткой колонке вначале в виде суммарного пика элюировали смесь кислых и нейтральных аминокислот, а затем осуществляли разделение основных аминокислот. После получения более качественных ионитов и усовершенствования метода детектирования был разработан современный одноколоночный аминокислотный анализ. [c.306]

При разделении белков методом ГПХ компоненты смеси могут иметь очень близкие константы распределения / av Для разделения подобных смесей можно, конечно, воспользоваться более длинной колонкой. Однако при увеличении столбика геля возрастает гидродинамическое сопротивление, а следовательно, падает скорость элюирования. В то же время нельзя допускать большого перепада давления, в особенности при работе на легко деформирующихся крупнопористых гелях, пригодных для разделения белков. [c.426]

Хроматографией. Поскольку показано, что скорость элюирования полимеров пропорциональна их молекулярному весу, можно решить обратную задачу — на основании объема выхода оценить молекулярный вес. Этот аналитический вариант гель-хроматографии нашел столь широкое применение, что его следует рассматривать отдельно под названием определение молекулярного веса. Наконец, существует еще один вариант метода, в котором различия в молекулярном весе имеют гораздо меньшее значение, чем взаимодействие разделяемых веществ с гелем он рассматривается в специальном разделе под названием разделение веществ с одинаковым молекулярным весом. [c.135]

Разделение веществ методом ГПХ не связано с сорбцией в буквальном смысле (хотя в более широком смысле основной процесс на гелях можно рассматривать как абсорбцию). Скорость движения компонентов смеси по колонке зависит от того, насколько проницаем внутренний объем гранул для разделяемых молекул. Не разделяются (в пределах своей группы) вещества смоле-кулами крупнее так называемого предела эксклюзии (порога проницаемости) и вещества с очень мелкими молекулами, которые беспрепятственно проникают в гель. Первые проходят через колонку быстрее всех (их удерживаемый объем равен свободному, или транспортному, объему колонки Vm), вторые задерживаются в колонке и выходят из нее последними, так как проходят наибольший путь, включая путь во внутреннем объеме зерен. Для каждого из гелей имеется область ограниченной проницаемости, в пределах которой скорость элюирования зависит от размера молекул (для однотипных молекул объем удерживания обратно пропорционален логарифму молекулярной массы). Вещества, молекулярные массы которых различаются на 10—25%, могут быть разделены методом ГПХ. [c.56]

Элюирование поглощенных ионов из анионитов может производиться щелочными, нейтральными или кислыми растворами, например, едким натром, карбонатом натрия, хлоридом натрия или со.ляной кислотой. Если не преследуется цель хроматографического разделения ионов во время элюирования, то обычно применяют концентрированные (1М И.ЛИ выше) растворы. Чем мельче зерна анионита, тем быстрее протекает регенерация. Нормальная скорость протекания при регенерации 2—5 мл1 см мин). В тех случаях, когда происходит выделение газа, регенерацию ионита лучше производить статическим методом, так как пузырьки газа приводят к каналообразованию в колонке. Это относится к анионитам, содержащим, например, карбонаты, сульфиды и сульфиты [11 ]. [c.171]

Одноколоночный метод, смола иЯ-ЗО. Повышение температуры колонки с 52 до 55,6 °С при постоянных значениях pH буфера, его концентрации и скорости приводит в общем к увеличению скорости элюирования аминокислот. Подвижность орнитина и лизина мало меняется с температурой. Аргинин элюируется быстрее, и, кроме того, улучшается разделение пар треонин — серин и тирозин — фенилаланин. [c.46]

В рассмотренных выше многоступенчатых приборах колонки как при последовательном, так и при параллельном соединении располагаются одна за другой. При параллельном соединении колонки работают одновременно, но независимо друг от друга, иначе говоря, параллельное соединение двух колонок при определенных условиях допускает раздельное исследование фракций смеси. Однако в принципе можно провести хроматографирование всей пробы одновременно и в одинаковых условиях с этой целью введенную дозатором пробу пропускают через специальный тройник, откуда она поступает одновременно в обе колонки. Обнаружение разделенных компонентов проводят одним детектором (рис. 1У.53) [256]. Недостаток такого соединения колонок состоит в том, что вследствие различной скорости элюирования каждого компонента в различных колонках они часто регистрируются детектором дважды, что вызывает перекрывание пиков. Поэтому метод одновременного разделения проб в двух колонках с одним детектором применим только для проб с относительно небольшим числом компонентов. [c.286]

Параллельно с увеличением разделительной способности газохроматографических колонок расширялись также возможности идентификации компонентов смеси. Вследствие низкой загрузки колонки и относительно большой скорости элюирования хроматографические методы можно совместить только с двумя информативными спектроскопическими методами, поскольку только ими и располагает аналитик, а именно с масс-спектро-скопией и ИК-спектроскопией Фурье, однако и эти методы часто оказываются недостаточными для однозначной идентификации изомерных соединений. В таких случаях хроматографические методы идентификации имеют особенно важное значение. [c.364]

Внедрение ионообменных методов позволило добиться существенного прогресса в выделении америция и других трансплутониевых элементов. Работа с высокоактивными препаратами осложняется радио-литическими эффектами. Разложение воды под действием излучения с образованием газообразных продуктов в слое смолы сильно затрудняет процесс разделения. Однако подбором аппаратуры, регулированием скорости элюирования и температуры можно избежать разрывов слоя смолы. [c.354]

Надо отметить, что механизм гелевой хроматографии представляет собой ряд сложных явлений, часть которых недостаточно исследована и находится в процессе изучения. Недавно выяснилось, что вопреки первоначальным наблюдениям удерживаемые объемы макромолекул зависят не только от их размеров и пористости геля, но и от скорости элюирования, температуры колонок и величины образца Результаты этих исследований пока не учитываются ни в одной из теоретических работ по гелевой хроматографии, которые используют распределение пор в геле или различия в коэффициентах диффузии макромолекул. Очевидно, только сочетание этих подходов с учетом зависимости скорости диффузии макромолекул от пористости геля позволит выяснить физическую картину, лежащую в основе процесса гелевой хроматографии, а это в свою очередь дает возможность превратить гелевую хроматографию в абсолютный метод, не требующий калибровки. Тем не менее необходимо отметить полезность работ феноменологического характера, которые позволяют производить коррекцию гелевых хроматограмм с учетом диффузионных факторов размывания и использовать для этих целей вычислительную технику. [c.111]

При фракционировании полимеров методом элюирования из колонки нередко происходит обращение молекулярных весов с номером фракции, особенно в области больших молекулярных весов. Существует ряд приемов, позволяющих избежать такого обращения. Френсис с сотр. [37], фракционируя линейный полиэтилен, показал, что в некоторых случаях подобное обращение обусловлено слишком высокой температурой фракционирования и недостаточной защитой против окисления образцов. Причиной возникновения обращения молекулярных весов оказывается также образование каналов в колонке, которое усиливается в результате высокой вязкости растворов фракций с наибольшими молекулярными весами. В общем случае рекомендуется тщательно набивать колонку, скорости потока поддерживать такими, чтобы концентрация полимера в растворе была небольшой [41], и применять колонки с обратным потоком [4]. [c.80]

Начинать хроматографирование следует наименее полярным растворителем, обычно петролейным эфиром. Скорость отбора фракций зависит от типа и масштаба хроматографического процесса. Обычно скорость течения, измеренная в мл/ч, должна быть численно равна массе (г) использованного адсорбента. Большинство адсорбентов не затрудняет течение элюента по колонке. При применении некоторых особо тонкодисперсных адсорбентов, например оксида магния, может потребоваться введение вспомогательного фильтра, например кизельгурового. Для отбора элюата пригодны сборники фракций любого типа (см. гл. 8). Объем одной фракции устанавливают в соответствии с характером задачи и регулируют или с помощью переключателя с часовым механизмом при сборнике фракций, или путем изменения (притом только уменьшения) скорости потока элюента. Отобранные в течение определенных интервалов фракции анализируют методами ТСХ или ГЖХ, разработанными для данной методики разделения, и объединяют идентичные по составу фракции. Из объединенных фракций отгоняют растворитель посредством обычной или вакуумной перегонки в роторном испарителе при низкой температуре. Элюирование продолжают до тех пор, пока не перестанет элюироваться хроматографируемая проба. После этого элюирующую способность смеси увеличивают, повышая содержание более полярного компонента системы, который подают или в несколько порций, или постепенно (градиентное элюирование описание аппаратуры для градиентного элюирования см. в разд. 8.4 или в работе [45а]). Основное преимущество градиентного элюирования — это подавление образования хвостов сильно адсорбируемых [c.196]

МЕТОДЫ ЭЛЮИРОВАНИЯ И СКОРОСТЬ ЭЛЮИРОВАНИЯ [c.278]

ДЛЯ определения значений В12 различных смесей [201, 202]. Метод основан на измерении объемов, удерживаемых газом-носителем при различных давлениях газа-носителя, с последующей экстраполяцией на нулевое давление газа. Для такой экстраполяции предложены два метода приближенного описания процесса элюирования [201, 203], которые, к сожалению, дают различные значения В12 при обработке одних и тех же экспериментальных данных. Недавно Крюикшанк, Виндзор и Янг [202] сформулировали задачу по-новому с использованием местного давления и скорости на выходе газа-носителя. Это позволило более успешно производить экстраполяцию на нулевое давление. [c.117]

Извлечение висмута методами ионного обмена предложено использовать для переработки хлоридных или сульфатно-хлоридных растворов выщелачивания висмутсодержащих концентратов [144—153]. Для извлечения висмута из хлоридсодержащих растворов, образующихся при выщелачивании оловянных концентратов, в [ 144] исследовались аниониты различной степени основности АВ-17-6, АВ-17-16, АВ-27-16, АН-20-16, АН-22, ЭДЭ-ЮП, и показано, что увеличение содержания дивинилбензо-ла приводит к уменьшению обменной емкости смолы по висмуту. В результате исследования элюентов различной природы (растворы нейтральных солей, азотной, серной или соляной кислот, гидроксида натрия) установлено, что элюирование висмута протекает наиболее эффективно с анионита ЭДЭ-ЮП растворами 2 моль/л H2SO4 и скорости элюирования 0,5 мл/(см мин). Из проведенного сравнения следует, что наилучшие технологические параметры получены при использовании анионита ЭДЭ-ЮП, и, как видно из рис. 3.17, в области концентрации 1— [c.85]

После окончания элюирования колонки разъединяют. На вторую колонку подают 150 мл бензола (та нее скорость элюирования) для вымывания углеводородной части при комнатной температуре и элюат собирают в колбу со шлифом. Адсорбированные анионитом жирные кислоты и (или) оксикислоты вымывают 1 н. раствором уксусной кислоты в этаноле и отбирают во вторую колбу со шлифом. Первую колонку с дгатионообмбнником промывают 150 мл 10 . соляной кислоты для извлечения связанных катионов. От элюатов отгоняют растворители (бензол, этанол) на водяной бане, остатки выдерживают в вакуум-сушильном шкафу до постоянной массы и взвешивают. Водный раствор хлоридов упаривают до сухого остатка. Полученные фракции углеводородов, жирных кислот и (или) оксикислот и хлориды щелочных металлов анализируют другими методами. В частности, жирные кислоты в виде метиловых эфиров разделяют методом газо-жидкостной хроматографии (см. разд. 1.6.4). В случае присутствия оксикислот проводят дополнительную этерификацию гидроксильных групп, например уксусным ангидридом (см. разд. 1.3.1.2.3). [c.336]

Товарно-технические качества битума и выбор рациональных способов переработки определяются составляющими его компонентами. Малая изученность тяжелых нефтяных остатков не позволяет предсказывать поведение битумов в условиях практического их использования. Из вакуумных остатков 490—540 и >540°С сборной занадно-сибирской нефти выделены насыщенные углеводороды методом жидкостной адсорбционной хроматографии на силикагеле марки АСК. Элюирование проводили пет-ролейным эфиром (70—100 °С) с отбором проб по 10 мл через каждые 15 мин. Пробы объединялись но показателю преломления (ид до 1,49). Выделенный концентрат насыщенных углеводородов разделяли следующим образом. Нормальные алканы отделены клатратообразованием с карбамидом но ГОСТ 15095— 69. Изопарафино-пафтеновый концентрат разделяли методом гельфильтрационной хроматографии на Sephadex аН-20 [1]. Гель, набухший в течение суток в тетрагидрофуране, переносили в стеклянную колонну диаметром 10 мм и высотой 600 мм. Навеску пробы (0,3—0,5 г) растворяли в 2 мл тетрагидрофурана и вносили в колонну. Устанавливали скорость элюирования [c.135]

О первом успешном разделении уроновых кислот на ионообменниках сообщается в работе Кима и Догерти [152]. Они разделили галактуроновую и глюкуроновую кислоты на дауэксе-1 (СНзСОО -форма) с применением в качестве подвижной фазы 0,15 М уксусной кислоты. Свободные сахариды (арабиноза и галактоза), которые не адсорбировались на смоле, отбирали в виде первой фракции. В другой работе [153] описывается отделение глюкуроновой и маннуроновой кислот друг от друга и от не полностью разделенной смеси глюкуроновой и галакту-роновой кислот на колонке (45x2 см) с дауэксом 1-Х8 (СНзСОО -форма) методом линейного градиентного элюирования уксусной кислотой (0,5—2,0 М.) при скорости подвижной фазы 0,3—0,5 мл/мин. [c.115]

НОВ в соответствующие ртутные аддукты. Хроматография аддуктов оказалась возможной или на кремневой кислоте [38], или на дезактивированном флорисиле [39]. Последний метод был особенно пригоден для определения тринасыщенных ацилглицери-нов. В работе [40] описано разделение насыщенных триацилглицеринов на колонке 48,8x9,5 мм, заполненной стирагелем, сшитым полистиролом. В качестве подвижной фазы использовали тетрагидрофуран со скоростью элюирования 0,4 мл/мин. Несмотря на чрезвычайную эффективность колонки, ширина пика была того же порядка, что и разница между временами удерживания триацилглицеринов, отличающихся шестью атомами углерода. На этом примере можно видеть, насколько трудно разделять триацилглицерины природных эфиров. Гель-хроматография, по-видимому, является перспективным методом для анализов смешанных триацилглицеринов [41]. [c.203]

С использованием двух подвижных фаз, а именно циклогексан— изопропанол (49 1) и циклогексан—хлористый метилен—изопропанол (21 3 1). Производные диметиламинонафталинсуль-фохлорида растворяли в 50 мкм хлористого метилена и 5—10 мкм раствора вводили в колонку. Пробы элюировали изократным способом первым растворителем в течение 5 мин, затем методом программированного градиентного элюирования, используя вогнутый градиент . Градиент изменялся от 100% первого растворителя до 100% второго растворителя в течение 15 мин при скорости подачи [c.279]

Новый метод анализа аминокислот быстро развивался. Появилась возможность с его помощью приступить к решению ряда сложных, казавшихся неразрешимыми проблем, и прежде всего проблёмы определения первичной структуры белков. Вскоре стало очевидным, что анализ аминокислот в его первоначальном варианте слишком трудоемок и недостаточно эффективен. Ввиду этого был поставлен ряд исследований по механизации трудоемких операций и совершенствованию организации эксперимента. Основной вклад в решение этих задач вновь внесла группа исследователей под руководством Мура и Стайна [4]. Благодаря проведению реакции аминокислот с нингидрином в проточном капиллярном реакторе и измерению интенсивности окраски на регистрирующем проточном фотометре трудоемкая обработка фракции была преобразована в непрерывный процесс. Таким образом, на основе аналитического метода был создан новый прибор — аминокислотный анализатор. Выпуск и дальнейшее усовершенствование этого прибора были предприняты промышленными фирмами. Последующие усилия были направлены на повышение эффективности и чувствительности анализа. Первое время причиной низкой эффективности прибора служила длительность элюирования. Основой для дальнейшей оптимизации процесса послужила теоретическая работа Гамильтона [5], в которой было показано, что повышения эффективности можно достигнуть путем увеличения скорости подачи элюента и уменьшения размеров зерен ионита. В результате многочисленных модификаций ионитов (а эта работа все еще продолжается) удалось более чем в 10 раз сократить время элюирования без снижения разрешения. Сокращение продолжительности анализа [c.306]

Наиболее быстрым методом разделения ДНФ-аминокислот является хроматография на смеси кремневой кислоты с цели-гом. По данным авторов этой работы, полный анализ может занять не более 2 ч [9]. Большинство коммерческих препаратов кремневой кислоты пригодны для работы без специальной обработки. Для получения удовлетворительной скорости элюирования сорбент смешивают с целитом в весовом соотношении 2 1, а затем отбирают фракцию менее 60 меш. Рекомендуется колонка размером 1—1,4x17 см. [c.365]

Влияние таких факторов, как размер зерен ионита, состав элюента, температура и скорость элюирования, ун е рассматривалось в главе 10. Поэтому здесь достаточно привести несколько примеров, иллюстрирующих применение этого метода разделения в аналитической химии. Наряду с анализом продуктов ядерного расщепления, метод был использован для определения малых содержаний примесей в различных смесях. Кетелле и Бойд [41 ] этим методом определяли трудноаиализируемые примеси в спектрально чистой окиси эрбия. Навеску пробы (5 мг), подвергнутую облучению нейтронами в ядерном реакторе, поглощали в верхней части катионообменной колонки. Элюирование проводили 5%-ным цитратным буферным раствором при pH 3,2 и 100° С. В элюате можно было легко определить лютеций, иттербий, тулий и натрий [c.321]

Краевой эффект, проблема частичной ассоциации со смешанным растворителем должны быть устранены путем насыщения камеры парами растворителя. Краевой эффект вызывается различным испарением по ширине пластинки, причем скорость испарения больше у краев пластинки, чем в середине. Это обусловлено большим объемом камеры относительно объема пластинки и иенасыщенностью атмосферы позади пластинки. Поэтому значение Rf растворенного вещества выше вблизи краев пластинки, и линия, на которой расположены пятна растворенного вещества, нанесенного поперек пластинки, будет иметь впадины. Поскольку метод элюирования включает удаление ряда пятен или полоски сорбента по ширине пластинки, желательно, чтобы этот ряд был прямолинейным. Поэтому камера должна быть выложена фильтровальной бумагой, насыщенной смесью растворителей, и на соответствующее время оставлена для [c.55]

Одноколоночный метод, смола 11Я-40. Повышение температуры колонки с 48,0 До 50,0 °С при постоянных значениях pH буфера, его концентрации и скорости течения приводит в основном к увеличению скорости элюирования аминокислот. Разделение треонина и серина уменьшается приблизительно до 0,01 (соотношение высот впадины и пика), а серина и глутаминовой кислоты— до 0,17. Подвижность цистина мало меняется с температурой, однако разделение пар глицин — аланин и тирозин — фенилаланин улучшается соответственно до 0,14 и 0,08. Из основных аминокислот только аргинин элюируется быстрее при повышении температуры. [c.46]

Заключительная часть этой главы посвящена методам деления пептидов. В соответствии с традиционными методами смесь пептидов, особенно больших, разделяют на смолах с низкой сшивкой. Пье [154] на колонке со смолой дауэкс 1-Х2 при низкой скорости элюирования разделил пептиды, содержащие более 100 аминокислотных остатков. Мур и Стейн [5] при изучении разделения пептидов на суль-фированных катионообменных смолах пришли к выводу, что для больших пептидов предпочтительнее смола с 2% сшивки, чем смолы с 4 и 8% сшивки. При использовании низкосшитых смол пептиды элюируются относительно узкими зонами. Однако такие смолы имеют недостаток они сжимаются при изменении концентрации буферов. Усадка смолы сопровождается обычно повышением давления на колонке. В таких случаях перед проведением следующего анализа приходится, как правило, заполнять колонку смолой заново. [c.77]

Разделение различных смесей неорганических ионов с помощью ИОХ давно уже стало традиционным методом в практической аналитике. Тем не менее подобные методики до последнего времени имели ограниченное применение. Это объясняется невысокой скоростью элюирования (длительный анализ) и значительным размыванием хроматографических зон (широкие пики на хроматограммах) на ионообменных сорбентах. Трудности были связаны и с детектированием ряда ионов. Все это не позволяло быстро и эффективно проводить анализ, как, например, в ВЭЖХ. [c.168]

Сочетание хроматографического разделения соединений и их спектральной идентификации в он-лайновом режиме особенно удобно в связи с переносом очень малых количеств разделенных образцов из хроматографа в измерительную систему спектрометра, тем более, если учесть, что промежуточные манипуляции без потери компонентов, количества которых измеряются несколькими микрограммами, всегда вызывают трудности. Для успешной реализации обоих методов в он-лайновом режиме требуется оптимальное соответствие между концентрацией элюируемого образца и скоростью элюирования хроматографических пиков, с одной стороны, и чувствительностью и скоростью регистрации сигналов спектрометром— с другой. На практике для обеспечения надежной и быстрой [c.246]

Методика очистки неэлектролитов с помощью смеси ионитов типа змея в клетке заключается в том, что определенный объем исходного водно-органического раствора вводят в колонку с ионитом ретардион-ИА8, из которого предварительно удаляют промывную воду до уровня верхнего слоя ионита. Одновременно с введением очищаемой жидкости дают возможность воде медленно вытекать из колонки. Во время этой операции происходит пропитка ионита исходным раствором. Элюирование во всех случаях осуществляют дистиллированной водой, осторожно подаваемой в колонку для предотвращения взмучивания верхнего слоя ионита. На выходе из колонки отбирают фракции определенных объемов анализ проводят обычными методами. Проведя ряд экспериментов при изменяющихся рабочих условиях (разные объемы очищаемого раствора, различные скорости элюирования, изменение температуры и т. д.), путем сравнения полученных выходных кривых находят оптимальный режим очистки. Степень очистки в данной колонке, как правило, тем выше, чем меньше взято исходного раствора и чем меньше скорость потока элюирующей воды. Удельное количество очищаемого исходного раствора может колебаться от 0,1 до нескольких объемов от взятого объема полиэлектролита аналогично может изменяться и расход воды на элюирование. [c.156]

Скорость элюирования полимера из фракционирующей колонки — важный фактор, обусловливающий высокое разрешение при фракционировании. Однако и в этом случае, как и для многих других аспектов фракционирования полимеров, можно сформулировать лишь общие положения, а не абсолютные правила. Концентрация полимера в выходящем из колонки растворе долн на быть далека от точки насыщения. Сделанное Флори [1] предположение о том, что максимальная концентрация должна быть пропорциональна степени полимеризации в степени — /2, нашло качественное подтверждение [3]. Гиллет с сотр. [38], используя метод хроматографии, нашел оптимальную скорость потока, причем, оказалось, что те же предположения Флори справедливы и для градиентного элюирования. При слишком высокой скорости потока фракционирование проходит недостаточно полно, вероятно, в результате низкой скорости диффузии. При слишком низкой скорости потока процесс фракционировапия может осложняться обратной диффузией. Оптимальную скорость потока следует определять для каждой системы полимер — растворитель, и в процессе фракционирования мончет оказаться, что для улучшения разделения следует изменять скорость потока через колонку. В колонках с обратным направлением потока легче осуществлять контроль за скоростью потока, чем в колонках, где поток жидкости обусловлен силой тяжести [4]. Гернерт с сотр. [39] описали регулятор скорости потока, который может изменять скорость в широком диапазоне и способен компенсировать через каждые 3 мин случайные изменения скорости потока, достигающие 10%. В принципе при аналитическом фракционировании (1—2 г) полимеров удовлетворительные результаты можно получить при скоростях элюирования 2—6 мл/мин [4, 37, 38, 41, 42]. Такие скорости элюирования можно, вероятно, принять в качестве исходных при работе с новой системой полимер — растворитель. При препаративном фракционировании скорости элюирования, очевидно, следует соответственно изменить. [c.79]

В старом варианте ЖХ стеклянную колонку размером, как правило, 1x30 см заполняли гранулированным твердым материалом и пропускали через нее элюент — жидкость-носитель, содержащий пробу. Основное неудобство такого метода разделения — его малая скорость. Если для достижения хорошего разделения колонку заполняли насадкой с зернами малого размера, то под действием только силы тяжести скорость элюирования (прохождения элюата через колонку) могла снизиться до нескольких капель в минуту. Очевидный способ увеличения пропускной способности колонки состоит в использовании нагнетательного насоса или давления газа. Жидкостные хроматографы старой конструкции не способны выдерживать необходимое высокое давление, поэтому для принципиального совершенствования метода необходима была полная реконструкция системы. [c.427]